Lizozomi Peroxizomi Text
-
Upload
catana-andreea -
Category
Documents
-
view
89 -
download
2
description
Transcript of Lizozomi Peroxizomi Text
Dr. Sanda Maria Crețoiu
1
LIZOZOMII
Definiţie şi caracteristici. Etimologic denumirea de lizozomi deriva de la grecescul: lysis -
a liza şi soma - corp, adică corpi litici (sinonime: sistem vacuolar, sistem lizozomal). Din punct de
vedere filogenetic lizozomii îşi au originea in vacuolele protozoarelor (Amoeba). Au fost
descoperiţi de Christian de Duve.
Lizozomii sunt organite ale digestiei intracelulare, prezenţi în toate celulele, cu excepţia
hematiei adulte. Se găsesc în număr foarte mare în hepatocite şi macrofage. Într-o singură celulă pot
exista câteva sute de lizozomi, ocupând aproximativ 0,5 – 5% din volumul celular. Cea mai mare
parte a lizozomilor este dispusă în regiunea juxtanucleară în strânsă vecinătate cu aparatul Golgi,
centrul organizator al microtubulilor şi endozomii secundari în fază avansată de evoluţie.
Lizozomii sunt delimitaţi de o membrană de natură fosfolipidică şi conţin enzime hidrolitice
(peste 50) implicate in degradarea tuturor tipurilor de polimeri biologici: proteine - proteaze, lipide -
lipaze, carbohidraţi - glicozidaze şi acizi nucleici- nucleaze, toate active în mediu acid. Enzimele au
şi funcţia de a îndepărta de pe anumite molecule grupările fosfat, sulfat şi glicozil. Principala
caracteristică a lizozomilor este lumenul cu pH acid asigurat de o pompă protonică membranară
ATP-dependentă care schimbă Na+ cu H+ asigurând astfel un mediu optim pentru acţiunea
hidrolazelor – pH 5 (pH-ul citoplasmei este 7,2).
Membrana lizozomilor deţine componenţi unici care asigură rezistenţa la acţiunea
hidrolazelor. Proteinele membranare au greutăţi moleculare variate între 20 şi 150 kDa, mai
importante fiind 2 proteine integrale unipass de tip I : lgp A şi lgp B (100 – 120 kDa), cu cea mai
mare parte a domeniului orientată către lumen şi extensiv glicozilate (cu cât este mai mare
procentul de carbohidraţi al unei proteine, cu atât este mai greu digerată). De aceea, cele mai multe
Dr. Sanda Maria Crețoiu
2
proteine lizozomale membranare implicate în asigurarea funcţiei lizozomilor (transportul
moleculelor digerate în afara lizozomilor) sunt înalt glicozilate.
Originea şi formarea lizozomilor. Formarea lizozomilor reprezintă o intersecţie între calea
secretorie şi endocitoză.
Lizozomii se formează în aparatul Golgi. Proteinele membranei lizozomale sunt sintetizate
în RE şi transportate apoi la aparatul Golgi pentru o glicozilare extensivă. Enzimele intralizozomale
sunt sintetizate şi ajung în lizozomi în urma unor procese elucidate de curând. Proteina pe cale de a
fi sintetizată este co-translatată şi transportată vectorial prin membrana RE, peptidul semnal de la
capătul N- terminal este clivat şi apare N-glicozilarea în lumenul RE. Complexul Golgi sortează în
regiunea trans enzimele primite de la reticulul endoplasmic rugos prin regiunea cis. În această
regiune precursorului hidrolazelor lizozomale i se ataşează (sub acţiunea unor glicotransferaze) un
radical fosfat la reziduul de manoză. Gruparea manozo-6 fosfat formeză semnalul de sortare,
enzima fiind transportată prin cisternele aparatului Golgi spre regiunea trans unde se leagă la unul
sau doi receptori de manozo 6-fosfat distincţi care direcţionează enzimele spre lizozomi. După
legare începe formarea unei vezicule care se acoperă cu clatrină, se desprinde şi va fuziona cu
lizozomul în formare. Lizozomul are pe suprafaţă o pompă protonică cu rol de acidifiere a
interiorului, ducând la îndepărtarea grupării fosfat şi la disocierea hidrolazei de pe receptor.
Receptorul va fi reciclat înapoi în complexul Golgi. Dintre acesti doi receptori cel mai bine studiat
este receptorul cation independent (M= 215.000 - 300.000 Da) care leagă liganzi fosforilaţi la
manoză la pH usor acid care apare în lumenul aparatului Golgi şi îi elibereaza la pH<5,5. Acest
receptor este o proteina transmembranara de tip I. Receptorul sortează enzimele lizozomale
(fosforilate la manoză) din reţeaua trans-Golgi în vezicule acoperite care conţin clatrina si adaptina.
Studii de imunoelectronomicroscopie au aratat ca receptorul manozo-6-P cation-independent
nu este prezent în lizozomi, ci este concentrat într-un compartiment delimitat de membrane şi
denumit compartiment pre-lizozomal care este un compartiment endozomal târziu. Enzimele
Dr. Sanda Maria Crețoiu
3
lizozomale sunt găsite la concentraţii reduse faţă de lizozomi în compartimentul pre-lizozomal,
sugerând că acesta ar fi un compartiment intermediar între regiunea trans a aparatului Golgi şi
lizozomi, cei care primesc noile enzime lizozomale sintetizate şi asociate cu receptorii manozo-6-P
derivaţi din veziculele acoperite ale trans-Golgi. Reciclarea membranelor apare atât între lizozomi
şi compartimentul pre-lizozomal, cât şi între acesta şi trans-Golgi. Al doilea receptor are
specificitate de legare similară, dar legarea oligozaharidelor fosforilate este cation dependentă. De
aceea se neumeste receptor de manozo-P cation dependent (M = 46.000Da) şi este o proteină
transmembranară tip I glicozilată, cu o distributie celulară mai bogată în compartimentul pre-
lizozomal.
Tipuri de lizozomi. Studii recente sugerează existenţa a 2 tipuri de lizozomi: secretori şi
convenţionali.
Lizozomii secretori sunt găsiţi, deşi nu singuri, în diferite celule ale sistemului imun derivate
din linia hematopoietică (ex. limfocitele T).
Lizozomii secretori sunt o combinaţie între lizozomii convenţionali şi granulele secretorii.
Ei diferă de lizozomii convenţionali deoarece conţin produsul de secreţie specific tipului celular în
care se află. Spre exemplu limfocitele T conţin produşi de secreţie cum ar fi perforina şi granzimele
care atacă atât celulele tumorale cât şi celulele infectate viral. Lizozomii secretori conţin şi
hidrolaze, proteine membranare, şi au aceleaşi facilităţi în menţinerea pH-ului ca şi lizozomii
convenţionali. În acest mediu acid produşii de secreţie sunt menţinuţi într-o formă inactivă.
Lizozomii secretori maturi se deplasează până în vecinătatea membranei plasmatice unde
rămân în stand by cu secreţiile pregătite şi gata de atac. Când limfocitul T este perfect orientat către
celula ţintă secreţiile sunt eliberate, iar factorii de mediu, modificarile chimice locale, inclusiv cele
de pH activează secreţiile înainte ca acestea sa actioneze. Totul se face cu o precizie maximă în ceea
ce priveşte locaţia şi timpul pentru a avea un efect maxim asupra ţintei şi minim asupra celulelor
înconjurătoare nepatologice.
Dr. Sanda Maria Crețoiu
4
Lizozomii convenţionali
Lizozomii sunt consideraţi ca organite refolosibile şi când celula se divide fiecare celulă
fiică primeşte un număr de lizozomi. Mecanismul prin care numărul acestora creşte intracelular nu
este elucidat.
În ultimii ani cercetătorii au emis ipoteze noi privitoare la modul de interacţiune şi acţiune al
lizozomilor urmărind traseul substanţelor endocitate şi eventual, şi degradarea acestora. Cea mai
mare parte a activităţii acestora a fost centrată pe studiul endozomilor primari şi secundari. Cu
anumite rezerve, se pot considera fagozomii, autofagozomii şi endozomii secundari ca fiind toţi
endozomi secundari în scopul de a înţelege noţiunea de sistem endolizozomal. Există dovezi care
arată că:
1. sediul proteolizei nu este în lizozomi ci într-un organit care seamănă mai degrabă cu
un endozom secundar şi conţine 20% din hidrolaze.
2. lizozomii conţin aproximativ 80% din enzimele necesare digestiei intracelulare.
3. lizozomii sunt probabil organite care stochează hidrolaze pe care le ţin într-o formă
inactivă la un pH aprox. 5.0.
4. lizozomii nu acţionează ca organite de sine stătătoare ci se intâlnesc cu endozomii
secundari şi acţionează ca un system endolizozomal.
Aceste dovezi au condus la dezvoltarea unor modele bazate pe tipurile de interacţiuni dintre
endozomi şi lizozomi. Unul din aceste modele se numeşte sărută şi fugi ('kiss and run') iar celălalt
fuziune 'fusion'.
Modelul “Kiss and Run”. Acest model după cum sugerează şi numele este bazat pe un scurt
contact între endozomul secundar şi lizozom, pentru a schimba între ei conţinutul chimic. După
separate lizozomul este dsponibil pentru a săruta un alt endozom.secundar.
Fuziunea. Este ipoteza bazată pe fuziunea completă dintre un endozom secundar şi un
lizozom în urma căreia rezultă un organit hibrid. În tipul fuziunii are loc dezasamblarea moleculară
Dr. Sanda Maria Crețoiu
5
a conţinutului endocitat. Aminoacizii şi alte molecule rezultate sun preluati de transportori şi trec
din organitul hibrid în citoplasmă. După aceste procese de dezasamblare şi reciclare, conţinutul
organitului hibrid se condensează, lizozomul se reformează şi este disponibil pentru o nouă fuziune
cu alt endozom secundar. Uneori rămâne un mic reziduu care este eliminat din celulă prin exocitoză
sau este sigilat intr-o granulă pigmentară pe toată durata vieţii organismlui.
Modele ale sistemelor de maturare
Modelele bazate pe principiul unor structuri care se maturează pentru a forma lizozomi nu
sunt populare în prezent, dar două ar tebui menţionate.
Modelul maturării – un endozom primar este format din vezicule cu originea în membrana
plasmatică care fuzionează între ele. Alte vezicule aduc şi preiau substanţe chimice pănă când se
transformă în endozom secundar şi apoi atinge stadiul de lizozom.
Modelul transportului vesicular – endozomii primari şi secundari sunt organite separate şi
stabile legate prin vezicule care transportă substanţe de la endozomii primari spre cei secundari care
se matureză pentru a deveni lizozomi.
Digestia lizozomală. Materialele cu care intră în contact lizozomii necesită procese de
dezasamblare şi reciclare şi provin din 3 surse : 2 extracelulare şi 1 intracelulară.
1. Sursele extracelulare. Includ procesele de endocitoză, inclusiv pinocitoza, prin care
sun introduse lichide şi mici particule datorită formării unor mici invaginări membranare acoperite
de proteine. Acestea vor forma in final vezicule acoperite de proteine (clatrină, coatomer şi
caveolină). Fiecare veziculă se dezvoltă formînd un endozom primar 'early endosome' şi apoi un
endozom secundar 'late endosome'.
2. Tot din surse extracelulare, prin fagocitoza se introduc particule mari , în general
>250 nm inclusiv bacterii şi detritusuri celulare. Fagocituza poate avea loc în orice celulă, dar este
specifică macrofagelor care conţin peste 1000 de lizozomi. Structura rezultată în urma fagocitozei
se numeşte fagozom.
Dr. Sanda Maria Crețoiu
6
3. Sursele intracelulare sunt reprezentate de autofagozomi responsabili de îndepărtarea
unor organite degradate cum ar fi mitocondriile sau ribozomii. Fiecare organit a cărui viaţă a expirat
este înconjurat de o structura membranară formând un autofagozom care fuzionează cu lizozomul
pentru a forma un organit hibrid.
Acţiunea digestivă a lizozomilor poate fi sistematizată în următoarele direcţii:
1. Autofagia – materialul are origine intracelulară.
a. Macroautofagia este procesul normal de turn over al organitelor. Organitul este
înconjurat de o membrană REN formând o vacuolă autofagică ce va fuziona cu lizozomul primar
pentru a forma autofagozomul în care are loc digestia.
b. Microautofagia este procesul care implică pinocitoza unor proteine citoplasmatice.
2. Autoliza este distrugerea internă a întegii celule.
a. Este o parte a apoptozei (moarte celulară programată).
b. celulele bolnave pot fi îndepărtate prin acest proces. Este prevalentă în ţesuturile care
necesită resorbţie (viaţa embrionară).
3. Heterofagia implică endocitoza (fagocitoza şi pinocitoza) de materiale extracelulare.
a. Fagocitoza este procesul prin care sunt încorporate particule străine formându-se
fagozomi ce vor fuziona cu lizozomii primari dând naştere lizozomilor secundari.
b. Pinocitoza este procesul prin care sunt înglobate macromolecule în soluţie formându-se
pinozomi.Aceştia vor fuziona şi ei cu lizozomii primari.
c. După digestie lizozomii ajung într-un stadiu în care materialul conţinut nu mai poate fi
degradat în continuare datorită epuizării echipamentului enzimatic. Astfel apar corpii reziduali sau
lizozomii terţiari.
4. Crinofagia – digestia produşilor e secreţie în celulele endocrine, prin care celula îşi
controlează calitatea şi cantitatea substanţelor secretate.
Dr. Sanda Maria Crețoiu
7
PEROXIZOMII
Definiţie. Peroxizomii sunt organite mici (0,5-1,5 µm), sferice, delimitate de endomembrane,
găsite în majoritatea celulelor eucariote. Au fost iniţial caracterizaţi morfologic de J. Rhodin în
1954, în celule renele de şoarece, primind denumirea de microcorpi. În 1965, Christian De Duve a
propus denumirea de peroxizomi pentru a sublinia implicarea lor în metabolismul peroxidului de
oxigen. Sunt sediul princpal al utilizării oxigenului. Numele de peroxizomi provine de la conţinutul
crescut în oxidaze care produc peroxidul de hidrogen, toxic pentru celule. Această reacţie este:
RH2+ O2 R+H2O2.
Catalaza, enzima marker a peroxizomilor degradează peroxidul de hidrogen în oxigen şi apă.
Peroxizomii conţin aproximativ 50 de enzime implicate în diferite căi metabolice: D-
aminoacid oxidaza, urat oxidaza, HMG-CoA reductaza, ţinta principală a medicamentelor numite
statine, responsabile de scăderea colesterolului.
Examinaţi la microscopul electronic de transmisie, peroxizomii sunt delimitaţi la exterior
de o membrană simplă, de circa 6 nm grosime, iar în interior conţin o matrice granulară, amorfă sau
fibrilară. În matrice, se observă uneori, una sau mai multe structuri cristaline înconjurate de material
amorf mediu electronodens. Aceste structuri denumite cristaloizi (miez de urat oxidază) se observă
în special la regnul animal, dar sunt absente în peroxizomii umani.
Biogeneza peroxizomilor. Procesul prin care se formează membrana peroxizomilor este
puţin cunoscut. Acesta implică formarea bistratului lipidic şi apoi importul proteinelor specifice în
bistrat. Există 3 proteine implicate în procesul de formare a membranei peroxizomilor, numite
peroxine PEX3, PEX 16, PEX 19
Modelul biogenezei membranei peroxizomale implică:
1. Formarea bistratului lipidic. Desi numeroase organite se formează în reticulul
endoplasmic, rolul acestuia în formarea peroxizomilor este incert. Se presupune că aici ar avea loc
Dr. Sanda Maria Crețoiu
8
formarea bistratului lipidic înainte de importul PEX3, 16, 19, proces dependent de proteine
necunoscute încă.
2. Importul PEX16 şi PEX3. Aceste 2 proteine necesare formării membranei peroxizomale
sunt importate în funcţie de prezenţa PEX 19 singura peroxină despre care se ştie că intervine
direct în legarea proteinelor din membrana peroxizomilor, fiind absolut necesară în geneza acestora.
Importul proteinelor matricei peroxizomale
Proteinele matricei peroxizomale sunt codificate de gene aflate în nucleu şi sintetizate pe
ribozomii liberi apoi importate post-translaţional în citoplasmă. Proteinele specifice peroxizomilor
au 2 peptide semnal care direcţionează aceste proteine spre matricea peroxizomală, numite PTS1 şi
PTS2 (peroxisomal targeting signal)
Importul proteinelor matricei peroxizomale are 5 etape:
1. Legarea ligandului la receptor PEX5 recunoaşte PTS-1, iar PEX7 recunoaşte PTS-2. Se
presupune că în acest proces intervin şi proteine chaperone.
2. Transportul spre peroxizom este foarte puţin cunoscut.
3. Andocarea receptorilor. PEX5 şi PEX7 se asociază cu PEX13,PEX14 şi PEX17
constituenţi ai complexului de andocare.
4. Disocierea şi translocarea. PEX10 şiPEX12 sunt proteine integrale din membrana
peroxizomilor care interacţionează direct cu PEX5. Procesul de import al proteinelor în matricea
peroxizomilor este ATP-dependent.
5.Reciclarea receptorului . PEX5 este un receptor care efectuează cicluri, fiind reciclat de
peroxine cu rol de ATP-aze: PEX1 şi PEX6.
Funcţii. Peroxizomii sunt esenţiali pentru ca o celulă să funcţioneze nomal, deoarece:
- intervin în oxidarea excesului de acizi graşi cu lanţ lung de atomi de carbon
rezultând fragmente cu 2 atomi de carbon care, fie sunt convertite la acetilcoenzima A, fie sunt
exportate din peroxizomi şi folosite la noi sinteze de compuşi celulari;
Dr. Sanda Maria Crețoiu
9
- descompun purinele AMP şi GMP la acidul uric şi aminoacizi;
- produc şi exportă în citoplasmă colesterol;
- conţin primele 2 enzime necesare sintezei plasmalogenilor (un grup important de
fosfolipide) care reprezintă 19% din fosfolipidele organismului (se găsec concentrate în creier şi
cord);
La plante există peroxizomi specializaţi denumiţi glioxizomi, care convertesc acizii graşi şi
lipidele în glucide. La insecte (licurici) intervin în atragerea partenerului prin enzima numită
luciferază.
Organit semiautonom. Organitele celulare semiautonome sunt definite ca organitele aflate
în relaţie de simbioză cu celula, capabile de autoreplicare prin fisiune binară. In această categorie
sunt incluse mitocondriile, cloroplastele şi mai nou peroxizomii, care spre deosebire de primele nu
posedă material genetic propiu, dar sunt capabili de autoreplicare şi se află în interrelaţie cu
reticulul endoplasmic neted şi cu mitocondriile.
Peroxizomii sunt capabili de a se divide deşi nu posedă material genetic.
Proliferarea peroxizomilor este o adaptarea la stimulii de mediu care semnalizează
necesitatea unor enzime lizozomale. Inducerea proliferării se face în 2 faze:
1. Proliferarea prin înmugurire din peroxizomii preexistenţi
2. Creşterea organitului prin importatrea de proteine ale matricei peroxizomale
Biogeneza peroxizomilor şi formarea membranei peroxizomilor
Proliferarea peroxizomilor este un proces dependent de o altă peroxină, PEX11. PEX11α
este exprimată în mod normal şi responsabilă de menţinerea numărului de peroxizomi, iar PEX11β
poate fi indusă ca răspuns la stimuli externi, determinând proliferarea peroxizomilor.
Boli peroxizomale. La om există o varietate rară de boli peroxizomale moştenite, care
implică existenţa unor variante mutante a uneia sau a mai multor enzime peroxizomale.
Dr. Sanda Maria Crețoiu
10
Adrenoleukodistrofia X-linkată (X-ALD) este o boală în care acizii graşi nu sunt
metabolizaţi corespunzător, consecinţa fiind o deteriorare a tecii de mielină a neuronilor. Boala
apare la băieţi, deoarece gena este x-linkată.
Alte boli sunt urmarea producerii unor peroxizomi nefuncţionali. Sindromul Zellweger este
consecinţa moştenirii a 2 gene mutante, pentru receptorii care sunt responsabili de importarea
proteinelor în matricea peroxizomului.