Cercetari-3

3
c)retroconjuga rea p ar asexu at�,?rin a�est ec d e spori,aparţin! nd tulpi nii TAI pi tulpin ii IC CF,ai c arei p rot o?la�ti au fost fuzionaţ i cu ce i tulp in i i IA I. REZiJL'AT E ŞI DISCUri! Urmarind amel iora rea pot enţialu lui de b ios inteza a produc atorul ui de p eni- cil ina , s- a aplic at me toda presiun i i sel ectiv e dir ec j ionate .I n cazul t ulpini i lndustria le(IA I) s-au p arcurs 8 etap e d e s el ecţi e(tab elu l 1) .Porni ndu-se d e la o vari anta cu un poten tial de bios inteza d e 12 .0 00 u .i . /m l , p r in perpetuare a + vari antelor,s- a ajuns l a un virf de 14 .7 15 u .i ./ml .Pe parcu rs a fost con stata- ta o res tringe re a v ari abil ita y i i tulpinii ,ma terializa ta in cre�t erea fr ecv en- ţei � i ponder ii + vari antelor . La ind iv iz ii rezultaţ i d in fuzi unea de protopl asti(tabelu l 2) ,dinam ica ac- tiv ita ti i b ios intet ice a fost an aliz at a in ţ etap e� e r emarc a o uniform itate a materi alului b iolog ic,!nca_ d i� . prima et ap a .Se constatâ, to todata,o creşt er e a potenţialu lui de b is inteza,d e la 12 .5 10 u .i ./ml, p!na la 15. 5 50 u .i . /ml , maxi- ma obţinută in cea d e a p atra etap a de s elecţi e. Modif ic!ndu-se pH-ul şi vo lum ul medi ul ui de cultura s- a ob } inut o spor ire evid enta a medie i act iv ita� i i de b ios intezâ,faţa de marto r,cu pest e 1 .000 u .i . l .Sup liment! nd me diul de f erm entayi e cu p eptona ,in co ncentraţie d e 0,62 �1m e- dia activ ita� i i a cres cut c u 3000 u .i ./ml . AplicÎnd meto da retroconjugari i,pr in amestec de spori a par ţ inÎ nd tulpin i i industr iale �i cel ei a IC CF(obtinuta pr in fuz iune d e proto plaşti) ,s- a observat o scader e a activ ita ti i b ios inte tice in prima gen eraţi e .S egregare� po pulaţion a- la puternic a a recombina n ţ ilor a avut ca ef ect etal are a unei activ ita ti med i i de numai 10 .930 u .i .l - infer ioar a cel ei a v ari antelor de st art . CONCLUZI I Restring erea v ari abil itaţ i i,concomitent cu mar1re a num arul ui s i valor i i + vari antelor , p e parcurs ul ce lor 8 etape de s elecţi e , in cazui tulpin i i IA I ,a dus la creşt er ea m edie i potenţ ialu lui de b iosinteza cu 2518 u .i . /m l . Deşi r etroc onjugare a a avut ca ef ect mi c�orarea m edi ei act iv ităţ i i in I-a gen era�i e,s e sc nteazâ pe o creşt er e a acest eia in generaţ i ile urmato are . Prin mod if icare a condiţ i ilor de m ediu a fost posib ila inte nsif icare a acti- vita tii b ios inte tice,duc!n d !n final la o crest er e de 1 .OJ0-3 .0 0 0 u .i .l BI BLIOGRAE ºLL C.,AZEVEDO J .L . , 1 9 74 .Ge etic Instabil i ty in Parasexu al ?ungi .Ge netics of Industrial M icroorgan isms ,2-nd Internatio nal Symposiu m ( 2 6- 30 August) .Pu- blished for the Society of C hemical Industry by Academi c Pres s,Lond on New York , San �rancis co : 18- 19 ÊLAM ; , DAGLISH L .B .,HcCANN E .P .,1974.Penic il in :tac tics in strain improve ment Gen etics of Industr ial H icro organism s .Second Interna tional Symp osium(26 - 30 August) .P ublished for th e Soci ety of Chemical Indus try by Academi c Pres s,Lond on,New York ,San Fr ancisco : 20- 21 STANBY P .F .,HITAKER A.,1986 .Princ iple of �'erm enta tion Techn ology . Pergamon Press,Oxfo rd�New York,B eij ing , �rankfurt,Sao P aulo,Sydney,Tokyo, . Tor onto . http://www.cimec.ro / http://www.neamt.ro/cmj

description

Stiinta

Transcript of Cercetari-3

  • c ) re tro con j ugar ea para s exua t , ?r in a e s t e c d e spor i , apar in!nd tulp in i i TA I

    p i tulp in i i ICCF , a i car e i p r o t o ? l a t i a u fo st fu z i ona i cu c e i tul p in i i IA I . R E ZiJL'l' A T E I D I S CUr i !

    Urmar ind ame l i o rarea p o t e n ia l u l u i d e b i o s in te za a produca torului de p en i

    c i l ina , s-a ap l i ca t m e to da p r e s i un i i s e l e c tiv e d i r e cji on a t e .In ca zul tu lp in i i lndustr ia l e ( IA I ) s-au parcurs 8 e tap e de s e l ec i e ( tab e l u l 1 ) .Porn indu- s e d e la

    o varian ta cu un p o t en t i a l de b i o s in t e za de 12 .000 u .i . /m l , p r in p erp e tuar ea + var ian t e l or , s-a a j un s l a un virf de 1 4 .71 5 u .i . /ml .Pe parcu r s a f o s t c o n s ta ta

    ta o r e s tring e r e a var iab i l i ta y i i tulp in i i , ma t er i a l i zata in cr e terea frecv enei i ponder i i + variant e l o r .

    La indiv i z i i r e zu l ta i d in f u z iunea de pro top las t i (tabelul 2 ) , d inami ca ac

    tiv i ta t i i b i o s in t e t i c e a fo s t ana l i zata in e tap e e r emar ca o un i formi ta te a ma ter ia l u lu i b i o logi c , !n ca _ di. pr ima e tapa .Se con s tat , totodata , o cr e t er e a

    po t enia l u l u i d e b i c:> s i n t e za , d e la 1 2 . 5 1 0 u . i . /ml , p!na la 1 5 .550 u . i . /m l , maxi

    ma o b inut in c ea de a p a tra e tapa de s e l e c i e .

    Mo d i f i c !ndu- s e pH- u l i v o l umul med i u l u i de cul tura s-a o b } inut o spo r ire

    ev identa a med i ei a c t iv i ta i i de b i o s in te z , fa a d e mar to r , c u peste 1 .000 u . i . hn l .Sup l imen t!nd med iul d e f ermen ta yie cu p ep tona , in concen tra i e de 0 , 62 1 me

    dia a c t iv i ta i i a crescut cu 3000 u .i . /m l . Ap l i c nd me toda re tro conj uga r i i , p r in ame s te c de sp o r i apar innd tulpin i i

    industr ia l e i c e l e i a I C C F( o b t inuta p r i n fu z i un e de pro top l a t i ) , s- a o b s erva t o scadere a a c t iv i ta t i i b i o s in te t i c e in prima g en era i e .S egr egare-- p op u l a .iona la putern i ca a recomb inan i l or a avut ca e f e c t e ta l area un e i ac tiv i t a t i medi i de numa i 1 0 .930 u . i . /m l - in f e r ioara c e l e i a var ian t e l o r d e s ta r t .

    CON CLUZII

    R e s tring er ea variab i l i t a i i , c o n c o m i t en t cu mar 1 r ea numaru l u i s i va l o r i i +

    var ian t e l o r , p e parcursu l c e l or 8 e tap e d e s e l e c i e , in ca zui tu lp in i i IA I , a dus la creterea med i e i p o t en ia l u l u i de b i o s in t e za c u 2 51 8 u .i . /ml .

    D e i retr o c on j ugar ea a avut ca e f e c t m i c orarea m ed i e i a c t iv i t i i in I-a gen erai e , se s cntea z p e o c r e t ere a a c e s te i a in gen era i i l e urma toare .

    Prin mo d i f i carea condi i i lor d e m ed i u a fo s t p o s i b i l a in ten s i f i carea a cti

    vita t i i b i o s i n te t i c e , du c !nd !n final l a o c r e stere d e 1 .O J0- 3 .000 u . i . /m l

    B I BL IOGRA io'IE BALL C . , A ZEVEDO J .L . , 1 974 .Geri e t i c In stab i l i ty in Para s exua l ?ungi .Gen e ti c s o f

    Indu s tr i a l Mi croorgan i sms , 2-nd In terna t i ona l Sy mp o s i um ( 2 6- 30 A ugu s t ) .Pub l i sh ed for th e S o c i ety o f Chemical Indu stry by A cadem i c Pre ss , London N ew York , San ran c i sco : 1 8- 1 9

    CALAM c; ; , DAGL ISH L .B . , Hc CANN E .P . , 1 974 .P en i c i l in : tac t i c s i n s train imp rov emen t Gen e t i c s o f Industr i a l Hi cro organ i sms .S e cond In terna t i ona l Sympo s i um ( 2 6 -30 Augus t ) .Pub l i sh ed fo r th e S o c i e ty o f Chemical Indus try by A cademic Pres s , Lo ndon , N ew York , San Franc i s co : 2 0-2 1

    STANBURY P .F . , HITAKER A . , 1 98 6 .Pr in c ip l e o f 'ermen tat i on T e chno l ogy . P ergamon Pres s , Oxford New York , Be i j ing , ran kfur t , Sao Pau l o , Sy dn ey , T o ky o , . Toron to .

    http://www.cimec.ro / http://www.neamt.ro/cmj

  • Var i an ta de s tart I

    1 1 .486 1 0 . 5 30 1 2 .L 97 1 0 . 5 39 .

    1 2 .ooo 1 0 .0 96 9 . 544

    1 0 .686 7 .8 1 1 . 9 .400

    Min ima 7 .8 1 1 . Hedia 1 0 .2 5 5 Maxima 12 . 1 97

    1 2 .0 7 5 1 3 .0 75 1 2 .8 60

    12 .51 0 12 .2 5 5 1 2 . 3 9 5 1 2 . 38 5 1 2 .2 50 1 2 .1 1 7 1 3 . 5 7 5 1 3 .068

    Minima 1 2 .0 75 Med ia 1 2 . 70 6 Maxima 1 3 . 575

    12

    Act ivi ta tea p e I I I I I IV

    1 4 .6 56 8 .?1 5 1 2 .0 5 5 1 1 .310 1 0 . 78 5 1 2 .46 3 1 3 .42 0 1 2 .600 1 1 . 568 12 .58 5 1 2 .480 1 1 . 52 5 1 3 . 500 12 .49 5 1 1 . 900 1 3 .0 50 1 2 .'l-2 0 1 1 .36 5 1 3 .72 5 1 1 .82 0 1 3 . 568 1 3 .2 30 1 1 .8 6 5 1 2 .8S8

    1 2 . 6 1 5 12 .ooo 1 1 . 31 0 8 .71 5 1 1 .ooo

    1 3 .1 7 3 1 2 .000 12 . 1 0 0 1 4 . 56 5 1 3 .440 1 3 .568

    TA BEL

    etape de se l ec _i e V VI

    1 0 .345 1 3 .1 5 5 1 3 . 1 75 n 3 . 7 1 0 1 2 .0 60 1 11- . 62 5 1 1 . 700 1 3 .62 0 1 2 .0 50 1 2 .495 LL .800 12 . 82 5 1 2 .ooo 1 0 .2 50 1 1 .000 1 2 .2 1 0

    1 2 .ooo 1 1 .ooo 1 0 . 345 1 0 .2 50 1 2 .ooo 1 2 . 5 5 4 1 3 . 1 75 1 4 . 62 5

    1

    ( u .i . /ml ) VII V I

    1 0 .41 0 1 3 . 72 9 .662 L4 . 1 8 . L 60 1 3 . 51

    1 0 . 1 '+0 1 4 . 7 1 9 . 6 90 i 4 . 1 8 9 .8 40 1 4 . 3

    1 0 . 78 5 1 3 .o 9 . 88 5 1 3 . 4 8 . 94 3 1 2 . 1 6 8 .1 60 1 2 . 1 6 9 . 78 4 1 3 . 7 1 .

    LO . 78 5 1 4 . 7 1 Dinamica act iv i tl i i b i osintet i c e p e p ar c ur s u l a op t : etape d e s e l ec i e,succesive , 1n cadru l ind ivizi l o r

    proven ind d in tulp ina indu s tr i a l a ( IA I )

    TA B EL 2 1 2 . 8 7 5 1 3 . 6 70 1 4 . 500 1 3 .080 3 .750 1 4 .090 1 3 .02 0 1 4 .000 1 3 .. 9 75 1 2 .ooo 1 4 .2 80 1 3 .820 1 3 .400 1 3 .960 1 4 . 700 1 1 .800 1 4 . 1 2 0 1 4 . 9 70 1 3 .400 1 4 . 58 5 1 4 . 1 2 0 1 3 .380 1 3 .900 1 3 . 9 70 1 3 . 62 0 1 4 .8 7 5 1 5 . 550 1 3 .400 1 4 .2 00 1 4 . 8 8 0 1 1 .800 1 3 .6 70 1 3 .82 0 1 2 . 9& 8 1 4 .1 3' 1 4 .458 1 3 .62 0 1 4 .8 75 1 5 . 5 50

    D inamica act iv i ta i i b i osin t e tice p e p arcur sul a patru e tap e de s e l e c i e , succe siv e , tn cadrul ind iv i z i lor p roven ind d i n fuzionarea pro top l a t i l o r tul p i n i lor !A I si ICCF

    http://www.cimec.ro / http://www.neamt.ro/cmj

  • I S T RUCTUR I I O RG A : : _ ." "oGri "lfE G E TA T i n DE L A BRAD I IVIO L I D OJ

    CON S 'rA N' T I }i TO:iA , ;.Ji iiA ELA N IA , OV I D I U TOHA ?a c u l ta t ea d e B i o l o g i e , B-d u l C O ? O U 2 0 A , G6oo IA I

    Y wo r d s : p o l l u t i o n , c on i f e r s , mo rp ho-ana to m i c a l mod i f i c a t i o n s 1 1 tra c t : I n th e p r e s a n t w o r k t h e a u th o r s empha s i z e th e morpho-an a t o m i ca l modiL c a t io n s o f the v e g e ta t iv e o rgan s o f f i r and spru c e d u e t o the n o xi ous c omp l e-

    1 g iv en o ff by the indu s try .The m o d i f i c a t i o n s tha t o f ten hav e an i rr ev e r s ib l e - P!a ra c t e r , a r e a b o u t the s am e i r1 e sp e c t iv e o f th e n o xi s , r ep r e s en t ing th e pheno' 1P i fy ing o f some ul tra s tr u c tura l d i s turban c e s , w i th n ega t iv e c o n s eq uen c e s in

    'lo d ev e l opmen t o f p hy s i o l og i c a l p ro c e s s e s . Th e s e s truc-tura l mod i f i c a t i on s and ,y s i o l o g i ca l d i s turban c e s a r e in c l a s e c o rr e l a t i o n w i th the c o n c en tra t i o n o f ' "' ' n ox e s on t r e e s , w i th t h e m e t e o ro l og i c a ! c on d i t i o n s i n wh i c h th ey a c t a n d w i h 1 , , d i s tan c e a t wh i c h t h e f o r e s t s are f r o m th e p l an t s .

    De o r d in c h i m i c sau f i z i c , p o l uan i i s e f a c s im i i !n a tmo s f era , so l , ap e , t c e l e d in urma l n a l i m en t e l e p e c a r e l e c o n sumam . In mod d e o s eb i t r e in a t enj 1 n p o l ua n i i c h i m i c i , d e o ar e c e e i p er turba i n ten s me tabo l i smul p l an t e l o r . ctnd , , a i adauga 9i p e s t i c id e l e , ma i c u s eama e rb i c i d e l e , ta b l o u l p o l uar i i dev in e i 1 a l arman t - s e p r e f igurea za d e z e c h i l ibre e c o l o g i c a d e amp l o a e .

    Pro b l ema u s c ar i i padur i l o r d e s t e j a r , fag , brad , mo l i d i ulm ( ! n m o d d e o s eb i t re o cupa d e ma i mul t a v r e m e p e sp e c i a l i t i , f a r a s a s e f i a j un s l a un ra sp un s sa l s faca t o r p r iv ind c a u z e l e c a r e d e t erm ina a l arma n tul feno m en .In c e ea ce p r ivea mo d i f i c ar i l e c i to-h i s to-an a t o m i c e , a l e d i f er i t e l o r o r ga n e , sub infl uen a p o l u' r i i , a c e s t ea s ! n t ! n e a f o a r t e p u in c un o s c u t e . A s up ra l o r s e fa c doar un e l e c o n L ti e ra i i d e o ;rd i n g en e ra l , c ar e ,

    p r iv e s c ma i c u,

    s eama frun za .Cun o s. tnd r ea l i ta - l l e enun ta te , ln c el e c e urm e a z a , n e propun em sa subl i n i em , p e ba za un o r inv e s tica t i i de amp l o a r e , a supra un o r ma ter i a l e de proven i en a fo a r t e d i f er i ta , c t teva t l n t e mo d i f i car i l e !n t ! l n i t e la brad i mo l id , urmlnd ca u l t e r i o r sa f i e c erc e. a t e a c e l e a i a sp e c t e l a s t e j a r , g o r un , u l m i fag .

    MAT ERIALUL DE STUDIU Ha t e r ia l u l s up u s i nv e s t iga i i l o r p r o v i n e d i n d i f e r i t e . zone a l e ar i i": bra-

    4 u l - d in 1 4 un i ta i d e p ro d u c i e , apar t i n !nd l a 9 o co a l e s i l v i c e d in j ud . N eam 1uc eava pi Vranc ea ; mo l id u l - din 1 1 un i ta i de produ c i e , aparin!nd la 5 o c o aL e s i lv i c e d in j ud . N eam , S i b i u , A l b a 9 i Haramur e s ; Pr i n c ip a l e l e c en tr e : indust r i a l e , d in j ud e e l e men t i o na t e , c a r e emani p o l uan i , s!n t : Suc eava , B i ca z , P i a tra eam , Sav in e ;s t !";t-iara !j e t i ,C a p a t-ii c a , Zla tna i Ba i a Mar e .

    FAC'rORII POLUAN I S ! n t c e i c uno s c u i 7 i m en t i ona i ! n d i f e r i t e _ l u c ra r i r e f er i toar e l a i n f l u

    ena n o x e l o r a s upra v eg e ta i e i d i n d i f er i t e r eg i un i a l e a r i i : l ucra r i c u tenta cen era l a ( D ihoru s i c o l a b . , 1 9 73 ; Ian c u l e s c u , 1 9 7 3 , 1 976 , 1 97 9 ; I o n e s c u , 1 97 3 ; La zar e s c u 1 98 3 ; Para s can , 1 96 5 ; P op e s c u i Sanda , 1 982 ) ; l u cra r i p r iv i to a r e l a anum i te zone ( in care prov in e ma t er i a l u l n o s tr u d e s tudiu : Ba ia Har e ( Butn aru , 1 98 3 ; Crac i un i lo l o s zva r i , 1 96 9 ) , Cop a M i c a ( Ian c u l e s c u , 1 98 6 ; I on e s c u s i c o l a b . , 1 97 1 , 1 972 ; S ta n e sc a i Gava , 1 9 7 9 ) , Z l a tna ( Ba r t o k , 1 980 ; B8. l a u ta , 1 972 ; t-1a i o r e s c u i c o l ab . , 1 964 ; Smej 1 , 1 97 7 ) . , B i c a z ( Iancul e s c u , 1 978 ) , Bu c ov ina ( G eamba su i Barbu , 1 98 7 ) .

    M ETO DA D E S T U D I U FOLOS IT Frun z e l e i ramur i l e de 1 -2 an i , ! n s e c i un i tran sv ersa l e , a u fo s t ana l i za t e

    l a i cro s c o p u l op t i c , dupa p r o c ede e u t i l i za t e !n mo d c ur en t tn c e r c e ta r i l e de aaa to m i e s i h i s t o l o g i e v g e ta l a .P en tru cara c t e r i zarea s truc tur i i frun z e l or de c o l i fere s e a u !n vedere urma toa r e l e tra sa tur i h i s to-ana to m i c e : c o n tur u l s e c t iun i i tran sv ersa l e . s tr uc ura ep i d erm e i ' i a h ip oderme i , l o ca l i zarea i fr e c v enja

    http://www.cimec.ro / http://www.neamt.ro/cmj