Laborator Microbiologie generala

LUCRARI LABORATOR MICROBIOLOGIE GENERALA

L.1. Reguli de protecie a muncii n laboratorul de microbiologie; Microscopul. Utilizarea microscopului

L.2. Studiul microbiologic al bacteriilor - Studiul bacteriilor prin colorare simpla

L.3. Studiul microbiologic al bacteriilor - Studiul bacteriilor prin colorare difereniala

L.4. Studiul microbiologic al drojdiilor (Saccharomyces, Pichia, Torulopsis)

L.5. Studiul microbiologic al drojdiilor (Candida, Rhodotorula, Kloeckera)

L.6. Studiul microbiologic al mucegaiurilor (Mucor, Rhizopus)

L.7. Studiul microbiologic al mucegaiurilor (Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Aspergillus glaucus, Penicillium expansum)

L.8. Studiul microbiologic al mucegaiurilor (Botrytis, Geotrichum, Alternaria, Fusarium, Cladosporium)

L.9. Tehnici de izolare a culturilor pure

L.10. Tehnici indirecte (culturale) de evaluare a numrului de microorganisme - Tehnica clasic de numrare prin cultivare pe medii dense

L.11. Metoda direct de numrare a bacteriilor n preparate fixate i colorate - Metoda Breed

L.12. Metode directe de numrare - Numrarea cu citometre

L.13. Influena factorilor de mediu asupra dezvoltrii microorganismelor

Facultatea tiina i Ingineria Alimentelor

Laborator Microbiologie general|

1

REGULI DE PROTECIE A MUNCII N LABORATORUL DE MICROBIOLOGIE

ntr-un laborator de microbiologie trebuie respectate anumite reguli de ordine interioar, dup cum urmeaz:

Este strict interzis accesul persoanelor strine n laborator;

Intrarea n laborator i participarea la lucrrile practice se va face numai dup audierea i nsuirea regulilor de protecie a muncii (dovedit prin semntur pe un proces verbal);

Intrarea n laboratorul de microbiologie necesit purtarea obligatorie a echipamentului de protecie (halat cu mneci lungi, mnui sterile, etc.). Se recomand ca echipamentul de protecie s fie pstrat separat de hainele utilizate n exterior;

Nu se mnnc i nu se fumeaz n laborator.

Manipulrile trebuiesc efectuate cu multa atenie, chiar dac nu se lucreaz cu microorganisme patogene. Culturile, preparatele microscopice umede, toate materialele care conin sau s-au aflat n contact cu microorganisme vii trebuie mnuite cu grija.

n laboratorul de microbiologie, poate exista i pericolul generat de utilizarea tensiunii nalte, a radiaiilor ultraviolete i a altor radiaii. Radiaiile ultraviolete (=250-270 nm) sunt folosite pentru sterilizarea aerului i suprafeelor de lucru. iradierea se face timp de 15 min - 2 ore, n funcie de dimensiunea ncperii i gradul presupus de contaminare a aerului. n timpul funcionarii lmpii, nu este permis accesul personalului n ncpere dect cu ochelari de protecie i pentru scurta durata, deoarece razele ultraviolete ataca retina, iar in doze mari pot produce arsuri ale epidermei;

Rnile i zgrieturile de pe mini trebuie s fie complet protejate de pansamente rezistente la apa i de mnui chirurgicale;

S se evite pe ct posibil atingerea prului, innd cent ca nivelul de contaminare a acestuia este de aproximativ 1 milion/cm2. Persoanele cu pr lung este necesar s-l strng, pentru a evita accidentele, innd seama ca de obicei se lucreaz n. apropierea becului de gaz;

Cnd o cultura este pipetat din greeala pe bancul de lucru sau pe podea, nu va grbii s tergei locul respectiv, ci aplicai peste suspensia respectiva o soluie dezinfectanta, ateptai aproximativ 20 minute i abia apoi curai;



2

Evacuarea rapid a coninutului pipetelor poate produce aerosoli. Aerosolii pot fi generai i la mnuirea firului sau ansei, i la ndeprtarea dopului de vata sau de cauciuc din eprubetele cu culturi i la deurubarea capacelor sticlelor cu culturi. n general, n munca din laboratorul de microbiologie se prefera micrile lente, negrbite;

Utilizarea firului sau ansei necesit bune deprinderi la mnuirea acestora, pentru a se evita contaminarea aerului i a zonei de lucru. Firul i ansa trebuie s fie sterilizate nainte i dup utilizare, prin flambare la rou, n flacra unui bec Bunsen pe toata lungimea firului metalic. mprtierea materialului aderent se evita prin introducerea firului metalic n flacra, n mod gradat;

Eprubetele cu culturi vor fi inute ntotdeauna n stativele pentru eprubete. Nu lsai niciodat eprubete sau pipete utilizate pe bancul de lucru. Placa Petri n care se numra microorganismele nu va fi privit ca fiind lipsita de risc, chiar dac inocularea ei s-a fcut dintr-un aliment bun pentru consum;

Dopul de vat de la captul pipetei se afl acolo pentru a preveni contaminarea lichidului care trebuie pipetat i pentru a preveni infectarea utilizatorului. Pipetele folosite nu se vor lsa nici o data pe bancul de lucru. Ele se vor introduce ntr-un recipient coninnd soluie dezinfectant (bicromat de potasiu 5%). Lamele i lamelele se vor aeza dup utilizare n vase coninnd soluii dezinfectante, dup ce n prealabil lamelele au fost separate de lame cu ajutorul unei pensete;

S se eticheteze corect culturile nainte de depozitarea lor la termostate sau n alte zone;

Dup terminarea lucrului se va cura zona de lucru. Aceasta se va terge cu o soluie dezinfectanta (cloramina 6.5-3%, formol sau fenol 3-5%, HgCI2 0.1%). Minile se igienizeaz prin introducerea lor ntr-o substan antiseptic pentru cteva minute, apoi se spal cu ap cald si spun.



1

MICROSCOPUL. UTILIZAREA MICROSCOPULUI

Microscopul este instrumentul cel mai utilizat i cel mai important n laboratorul de microbiologie. Cu ajutorul microscopului optic se realizeaz studiul morfologic al microorganismelor (bacterii, drojdii i mucegaiuri) i numrarea direct a acestora. Studiul virusurilor i a ultrastructurilor celulare necesita utilizarea microscopului electronic.

Reguli de utilizare a microscopului

ntotdeauna microscopul se transport cu dou mini, o mn se aeaz la baza, iar cu cealalt se prinde coloana sau stlpul microscopului;

Se aeaz cu atenie microscopul pe masa de lucru. n cazul unei micri violente sau dup un oc acesta se poate deregla;

Nu se nclin niciodat microscopul, chiar dac exist aceast posibilitate. Cnd se utilizeaz obiectivul de imersie, prin inclinare, uleiul de cedru se rspndete pe msua microscopului;

Pentru curare, ntotdeauna se folosete hrtie special pentru curarea lentilelor. Dac rezultatele nu sunt corespunztoare prin utilizarea hrtiei, se poate folosi o cantitate mic de benzen. Nu se va utiliza alcoolul sau alt produs care-poate determina desprinderea lentilelor;

S se observe permanent diferenele dintre obiectivele folosite pentru studiul preparatelor microscopice umede i obiectivele de imersie (pentru studiul preparatelor microscopice colorate). Obiectivul de imersie este fragil, el trebuie utilizat cu foarte mult atenie;

De fiecare data cnd se utilizeaz microscopul este necesar s se curee toate lentilele: ale obiectivului, ocularului i condensatorului;

Se aeaz ntotdeauna n centrul optic al microscopului obiectivul cel mai mic i se coboar tubul ct este posibil;

Se acoper microscopul dup utilizare cu un sistem de protecie; Nu se vor ntreprinde niciodat reparaii. Acest lucru se realizeaz de ctre echipele specializate.



2

Elementele microscopului

Microscopul se compune dintr-un stativ portant, un sistem optic, o msu port-obiect i un sistem de iluminare. Sistemul optic i msua sunt mobile.

1 Oculare 7 urub pentru deplasarea pe axa y 2 Dispozitiv port-obiective 8 urub micrometric pentru clarificarea imaginii 3 Obiective 9 urub pentru deplasarea pe axa x 4 Clema pentru fixarea preparatului 10 Buton de pornire oprire 5 Msu 11 urub de ajustare a luminozitii 6 urub macrometric pentru prinderea imaginii 12 Lampa



3

Ocularele

Curent se utilizeaz oculare care au puterea de mrire de x8, x10, x12.

Obiectivele

Dispozitivul port-obiectiv permite selecionarea obiectivului dorit prin simpla rotaie. Obiectivele utilizate n microbiologie sunt n general obiective acromatice i dac este posibil plan-acromatice. Gama obiectivelor necesare au puterea de mrire de x10, x20, x40, iar obiectivele de imersie au puterea de mrire de x90, x100.

Msua port-obiect

Msua port-obiect reprezint un suport pentru lam. Deplasarea pe cele doua axe orizontale perpendiculare se realizeaz cu ajutorul unui urub situat lateral.

Sistemul de iluminare

Se compune dintr-o sursa de lumina i un condensator. Condensatoarele curente sunt dotate cu o diafragma. Sistemul de iluminare este independent sau ncorporat n microscop.

Sistemul de deplasare a obiectivelor

Se realizeaz cu un urub pentru micrile rapide i un alt urub pentru reglare micrometric. Distanta frontal, adic distanta ntre preparat i obiectiv, depinde de puterea de mrire a obiectivului.

Puterea de mrire

Puterea de rezoluie este capacitatea de separare a doua obiecte foarte apropiate.

Puterea de mrire variaz de la 100-1200 corespunztor sistemului oculare obiectiv utilizat. Se calculeaz prin produsul dintre puterea de mrire a ocularului i a obiectivului.

Utilizarea microscopului

Curarea cu ajutorul unei hrtii speciale a elementelor optice ale microscopului; Reglarea luminozitii; Fixarea preparatului pe msu cu ajutorul unei cleme. Partea preparatului care intereseaz se aeaz n centrul port-obiectului;

Obiectivul este selecionat: iniial se fixeaz obiectivul cu puterea de mrire cea mai mic (x10) pentru prinderea imaginii;

Se coboar obiectivul la o distan de 0.5-1 cm de preparat cu ajutorul urubului



4

macrometric;

Pentru studiu se schimba obiectivul cu un altul cu putere de mrire superioar prin rotirea dispozitivului port obiective;

Dup obinerea imaginii, se realizeaz clarificarea acesteia cu ajutorul urubului micrometric;

n cazul utilizrii obiectivului de imersie, se depune o pictur de ulei de imersie n zona care intereseaz i se imerseaz obiectivul n aceasta zon;

Dup utilizare, obiectivele de imersie trebuie sa fie curate cu benzen; Lamele examinate vor fi imediat ndeprtate pentru a se evita contaminarea.

Cauzele care duc la obinerea unor imagini necorespunztoare sunt:

Executarea unor preparate necorespunztoare; Preparate care nu sunt centrate corespunztor; Elemente optice murdare; Obiective i oculare dereglate; Luminozitate reglat necorespunztor.



1

STUDIUL BACTERIILOR

Definiie Bacteriile sunt microorganisme monocelulare de tip procariot cu un cromozom unic, care se nmulesc asexuat prin sciziune binar. Rspndire

n sol - concentraia de celule poate ajunge la valori de 107-109/g att n straturile superficiale (bacterii aerobe), ct i n straturile de profunzime (bacterii anaerobe).

din sol, bacteriile s-au adaptat s triasc n ape, unde concentraia de celule poate fi ntre 10/cm3 n apa de izvor, pn la valori de 1012/cm3, de exemplu, n ape fecalo-menajere.

existena n aer a bacteriilor este temporar i prin intermediul curenilor de aer sunt rspndite la distane foarte mari. Din aer, sunt antrenate din nou n sol prin intermediul precipitaiilor atmosferice.

fac parte din microbiota naturala a plantelor i animalelor Rol

rol important n natur: n transformarea compuilor macromoleculari n compui simpli, prin

mineralizarea materiei organice nevii, contribuind astfel la realizarea natural a circuitului unor elemente de importan vital: carbon, azot, sulf, fosfor, fier .a.

n industria alimentar - culturi starter al proceselor fermentative bacteriile lactice sunt folosite la fabricarea produselor lactate, a

brnzeturilor, n industria panificaiei, la conservarea legumelor, mslinelor, furajelor verzi etc.

bacteriile propionice sunt utilizate la fabricarea brnzeturilor tip schwaitzer bacteriile acetice la fermentaia alcoolului etilic obinerea industrial a

oetului. n biotehnologie se pot obine:

enzime, proteine, aminoacizi, acid lactic, acid acetic, solveni (aceton, alcool izopropilic, alcool butilic);

hormoni insulina produs de un mutant de Escherichia coli; ngrminte biologice Azotobacter; insecticide biologice Bacillus thuringiensis; antibiotice Streptomyces sp. vitamine de ex. vitamina B12 Propionibacterium shermani

Aspecte negative:

n industria alimentar bacterii ageni de alterare a produselor alimentare (acrirea berii, vinului, putrefacia crnii .a.);



2

bacterii patogene ingerare alimente contaminate toxiinfecii alimentare;

bacterii patogene pot s paraziteze organismele vii dnd mbolnviri grave (tuberculoza, febra tifoid, dizenteria, sifilis, bruceloza, antrax, .a.), bacterioze la plante.

Caractere morfologice Bacteriile prezint forme celulare foarte diversificate, dintre care forme de baz, monocelulare, precum i forme derivate ale acestora ce rezult n urma asocierii celulelor rezultate prin reproducere.

Dintre formele de baz fac parte urmtoarele (Anexa 2): - forma sferic coccus sfera este perfect (micrococi), ovalar (enterococi),

lanceolat (pneumococi) i reniform (gonococi); - forma bacilar cilindric drepte cu capete rotunjite (g. Enterobacter), cu

capete retezate (g. Bacillus), fusiforme, mciucate (g. Corynebacterium), cu diametru variabil (g. Mycobacterium);

- formele spiralate-elicoidale specifice bacteriilor patogene forma vibrio forma spirillum filamente rigide cu spire largi forma spirocheta filamente flexibile cu mai multe spire;

- formele filamentoase specifice bacteriilor miceliene (actinomicete, chlamydobacterii etc.).

Mediul de baz pentru cultivarea bacteriilor bulionul de carne lichid sau solidificat cu agar (BCA). Prin reproducere pe mediu nutritiv solidificat ia natere o colonie alctuit din biomasa de celule rezultate prin sciziune din celula unic:

- colonii de tip S (smooth neted lucios) - colonii de tip R (rough rugos, aspru, zbrcit) - colonii de tip M la bacterii productoare de capsule, cu consisten gelatinoas,

mucoid Coloniile de bacterii:

pe medii solide 9 culori de alb, alb-crem, galben-auriu, oranj-rou, albastru 9 fluorescen

pe medii nutritive lichide 9 pot da tulburare i sediment bacteriile anaerobe 9 formeaz voal caracteristic, fragil, cutat, gelatinos bacteriile aerobe.

Caractere fiziologice generale

bacteriile se dezvolt ntr-un domeniu larg de temperatura 10C i 90C; n raport cu oxigenul majoritatea bacteriilor sunt aerobe (ex. bacterii acetice), care

cresc n semiaerobioz (ex. bacterii lactice), dar un grup restrns de bacterii sunt adaptate s creasc n strict anaerobioz (ex. genul Clostridium).

pH=1-11 optim la valori acide pentru bacterii acidotolerante (bacterii acetice, lactice) sau la valori neutre pentru bacterii de putrefacie.

1

Facultatea

S

Prepara

Coloran(colorar

Colorare

1. O2. C

Etapele

a tiina i Ing

STUDIU

atele micros

A.

B.

ii utilizai re simpl)

ea simpl p

Obinerea frColorarea s

prelevrii

gineria Alimen

L BACT

scopice su

Preparate

Frotiuri (p

n studiul bsau n sco

prezint do

rotiurilor; impl prop

probelor pe

Figu

ntelor

TERIILOR

nt de dou

e umede

preparate-u

bacteriilor aopul identifi

ou etape:

priu-zis.

entru realiz

ura 1. Etap

R PRIN

tipuri:

pentru stu

uscate) pe

au ca scop crii (color

zarea frotiu

ele prelev

La

COLOR

udiul drojdii

entru studiu

accentuarerrile difer

urilor sunt p

rii probelo

aborator Micro

RARE SIM

ilor si a mu

ul bacteriilo

ea contrastreniale).

prezentate

or

obiologie gen

MPL

ucegaiurilor

or.

tul prepara

n figura 1

neral|

r;

atelor

.

2

Facultatea

Obinerefixare i

FROTIU

Etalareautilizat

Picturaobin o

Uscareaviolent

Fixarea se realiz

Frotiul p

a tiina i Ing

ea frotiurilo de colorar

a este reapentru pre

a de suspeo distribuie

a se efectu.

se realizeazeaz rcir

poate fi ana

gineria Alimen

or presupure (Fig. 2)

2. A

5. P

Fig

alizat porneparatele um

ensie se ete foarte fin

eaz deas

az trecnrea.

alizat n con

ntelor

une etalare

1. Sterilizare lam

Adugare ap di

3. Sterilizare an

4. Prelevare pro

Plasare prob pe

6. Etalare prob

7. Uscare

8. Fixare

9. Rcire

ura 2. Etap

nind de lamede n sta

aleaz cu , omogen

upra flcr

d lama de

ntinuare su

ea celulelo

m

istilat

sa

ob

e lam

b

pele realiz

a prelevareare proasp

ajutorul fir.

rii unui bec

2-3 ori pri

ub aceasta

La

r de studia

rii frotiului

ea probelet.

rului metali

c de gaz pe

n flacra b

form sau

aborator Micro

at, urmat

i

e, etap id

ic steril ast

entru a se e

becului de g

colorat.

obiologie gen

de uscare

dentic cu

tfel nct s

evita o nc

gaz, dup

neral|

e, de

cea

s se

lzire

care

3

Facultatea

Se realizsec 2

Examen

Coloran

Etapele

a tiina i Ing

zeaz prin min (A), du

nul microsc

ii utilizai f

realizrii c

gineria Alimen

acoperireaup care se

opic se efe

frecvent sun

colorrii sim

COLORARE

SIMPL

Figu

A

ntelor

a frotiurilor e realizeaz

ectueaz cu

nt: albastru

mple sunt pr

ura. 3 Etap

fixate cu c splarea

u obiective

u de metilen

rezentate n

2. A

3.

6.

pele realiz

La

teva pict(B) i zvn

ele de imer

n sau fucsi

n figura 3.

1. Obinere

Adugare colo

Meninere col

4. Splare c

5. Zvntare

. Adugare ule

rii colorrii

B

aborator Micro

turi de colontarea prep

rsie (x90, x

ina.

e frotiu

orant (fucsin

lorant 1 min.

colorant

preparat

ei de cedru

simple

obiologie gen

orant timp dparatelor (C

x100).

)

neral|

de 30 C).

C

Iaurturiltermofile

9 9

Exist ucealalt doua).

e sunt fabe:

Lacto

Strep

un sinergism(activitate

B

bricate cu

obacillus bu

ptococcus th

m ntre celpeptidazic

acteri

ajutorul la

ulgaricus, a

hermophilus

e dou bac de ctre

iidinIA

aptelui pas

agent de ac

s, formeaz

cterii; acesprima bact

1. L

Sunt nesporutermofil

Fermencteodalactic.

2. SSunt cimobili, lanuri.

Fermenuneori gtempera

AURT

Labo

steurizat, in

cidifiere i a

aroma.

stea producterie, acid f

Lactobacil

bacili aulai, imoli (temperat

nteaz glucat galacto

Streptococcoci, Gra

grupai n

nteaz lactogalactoza catura maxi

orator Microb

noculat cu

arom;

c compui formic prod

llus bulgar

alungii, Gobili, hotura de dez

coza, lactooza cu prod

ccus thermam pozitivn perechi

oza, zaharcu formarema de cre

biologie gene

u dou bac

utili una pedus de cea

ricus

Gram pozmoferment

zvoltare 45

oza, fructozducere de

mophilus vi, nespori cteodat

oza, glucoze de acid latere 50-52

eral|

cterii

entru de a

zitivi, tativi, C).

za i acid

rulai, t n

za i actic, 2C.

S

Spunct dtempera

F

Smntna a

Sunt coci (lde vedere atura de 45

Fermenteaz

Bact

S

acid este fe

lanuri de nutriiona

C.

lactoza i

teriidi

Streptoc

ermentat d

coci), G+, l, cresc la

i maltoza.

inSM

occus cr

de Streptoc

nesporulaa tempera

NTN

Labo

remoris

coccus crem

ai, micro-aatura de +

N

orator Microb

moris.

erofili, foar+10C, da

biologie gene

rte exigenr nu cres

eral|

i din sc la

Sunt ba(tempera

Lactoba

acili alungatura de de

acillus delbr

B

L

gii, Gram ezvoltare 45

rueckii ferm

Bacteri

Lactobac

pozitivi, ne5C).

menteaz la

iidinB

cillus delb

esporulai,

actoza.

BOR

Labo

brueckii

imobili, h

orator Microb

omofermen

biologie gene

ntativi, term

eral|

mofili

Cadrul didactic

Tema: STUDIUL BACTERIILOR PRIN COLORARE SIMPL

Scopul: Formarea deprinderilor de manipulare a ustensilelor i aparaturii de laborator; Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare identificrii bacteriilor

NUME/PRENUME STUDENT

GRUPA

Data

Bacterii din IAURT

Bacterii din SMNTN

Bacterii din BOR

1

Facultatea

STU

Prepara

Coloran(colorar

ColorareGRAM compozstabilite

Colorare

1. O2. C

Obinerefixare i

Frotiul uviolet, titimp dejoaca ro

Frotiul eap (E)celulele

a tiina i Ing

UDIUL BA

atele micros

A. Prepa

B. Frotiu

ii utilizai re simpl)

ea Gram peNEGATIVE

ziiei peretede bacteri

ea GRAM p

Obinerea frColorarea G

ea frotiurilo de colorar

uscat i fixmp de 1 m

e cteva seol de morda

A este supus, acesta se

e bacteriilor

gineria Alimen

ACTERI

scopice su

arate umed

uri (prepara

n studiul bsau n sco

ermite divizE (G-). A

elui celular ologul dan

prezint do

rotiurilor; GRAM prop

or presupure

xat se acopminut (A), aecunde (30

ant (C);

s aciunii ae acoper r Gram neg

ntelor

ILOR PR(G

nt de dou

de pentru

ate-uscate)

bacteriilor aopul identifi

zarea bacteceasta mela cele do

ez Hans C

ou etape:

priu-zis.

une etalare

per cu capoi se cl0 sec) cu

lcoolului ecu al doile

gative (F).

RIN COLGRAM)

tipuri:

u studiul dr

pentru st

au ca scop crii (color

eriilor n doetoda se ou grupe hristian Gr

ea celulelo

teva pictutete cu ap

soluie Lu

B tilic - 96 (

ea colorant

Labo

LORARE

rojdiilor si a

tudiul bacte

accentuarerrile difer

ou grupe:bazeaz pde bacterii

ram, n anu

r de studia

uri de violep (B). Se gol (iod n

(D). Dup t (fucsina

orator Microb

E DIFER

a mucegaiu

eriilor.

ea contrastreniale).

GRAM POpe difereni. Bazele m

ul 1884.

at, urmat

et de geniacoper a

n iodura de

C splarea pbazic) ca

biologie gene

RENIAL

urilor;

tul prepara

OZITIVE (Ga structur

metodei au

de uscare

an sau capoi prepae potasiu)

preparatuluare recolore

eral|

L

atelor

G+) i rii i fost

e, de

ristal ratul care

ui cu eaz

2

Facultatea

Dup sstudiere

n urmabacteriiPrezent

a tiina i Ing

splarea pea acestuia

a acestei mle G+ se vtarea sche

gineria Alimen

D preparatulua cu obiect

Gmetode de or colora matic a c

COLORARE

DIFERENIAL

Figu

ntelor

ui cu aptiv de 90x

G colorare b

n violet. colorrii Gr

2

ura. 1 Etap

E (G) se rimersat n

bacteriile G

ram se reg

1.

2. Adugare colo

Menin

3. AMe

4. S

6. AdugMenin

7. S

8. Zv

9. Adu

5.

pele realiz

Labo

realizeazulei de ce

H G- vor ave

sete n f

Obinere frotiu

orant (violet decristal violet)

nere colorant 1

Adugare Lugoeninere 30 sec

Splare cu alcoo

gare colorant (funere colorant 1

Splare cu ap

vntare preparat

ugare ulei de ce

Splare cu ap

rii colorrii

orator Microb

F zvntaredru.

ea culoarea

figura 1.

u

e genian sau

min.

lc.

ol

ucsin)min.

t

dru

GRAM

biologie gene

a (H) i

a roz-roie

eral|

apoi

e; iar

3

Facultatea

Reactivi/Prat Frotiu necolorat

Cristal viol

Soluie Lug

Alcool etili

Fucsin, colorant contrast

a tiina i Ing

Prepa Durataplica

fixat, -

let 1, cltire

gol 1, cltire

c 96 10-15cltire

de 1, cltireap, zvntaaer studiuobiect90x n ucedru

gineria Alimen

Et

ta de are

Rea

-

apoi e cu ap

Colreagrunegmem

apoi e cu ap

Iodmorata

, apoi e cu ap

SolcoloceludifubacpozdecGradatochimper

apoi e cu

are n cald,

u cu tiv de imersat

ulei de

ColfixencambceluGranslibecomGrasun

ntelor

Atapele c

acii

oranii bcioneaz pe ncr

gativ din pembran i cito

ul are erdant i mrarea

venii sorantul i ioduule. Colorauzeaz din ccteriilor Gzitive mult maict n cazul cam negaorit compomice i groetelui celularorantul bazic

eaz de grurcate negativbele tipuri ule. La bactam pozitive puine g

ere de cristal vmparativ cu am negative nt complet liber

ANEXA colorrii

Aspec

Celule culoarede vizu

bazici cu

rcate erete sol

Att Gram i cenegativcoloratnchis.

efect rete

Ambelebactericoloratnchis.

spal ul din antul elula

Gram lent celor ative, oziiei osimii

Bacterpozitivcoloratnchis bacterinegativincolorde obs

c se upele v din

de eriile sunt

grupe violet cele care re

Celulepozitivcoloratnchis coloranprimarceluleldevin roz (culoarcolorancontras

Labo

GRAM

ct celule

fr e i dificil ualizat

bacteriile pozitive ct ele Gram ve sunt te n violet e grupe de ii rmn te n violet

riile Gram e rmn te n violet n timp ce

iile Gram ve devin re i dificil servat.

le Gram e rmn te n violet

(culoarea ntului ) n timp ce e Gram colorate n sau rou rea ntului de st)

orator Microb

Gram pozitiv(G+)

biologie gene

ve Gram negative

eral|

(G-)

1. C

fo

2. C

bca

3. R

s

Caractere m

ormeaz pei neuniforme

Caractere m

acterii cu faracterizai

Rspndire

unt foarte r

macroscop

e Plate Coune.

microscop

forma de bprin aptitud

e i rol

spndite n

Bacillu

pice (colon

nt Agar, dup

pice

bastonae, inea de spo

n natur, n s

ussub

niale).

p 48h de c

G+, aeroborulare.

special n so

btilis

La

cultivare la 3

be, mezofile

ol i pe prod

aborator Micro

37C, coloni

e n gener

dusele vege

obiologie gen

ii alb-crem,

ral mobile.

etale.

neral|

plate

Sunt

S

Setanolul

C

P

S

n

Sunt bacili,

Sunt ageniui.

Caracteristic

Prin colorare

Sunt bacteri

n industrie

B

G-, nespo

de fermen

ca principa

ea Gram e

ii de contam

sunt utiliza

Bacteri

Aceto

rulai, n ge

ntare aceti

al este pro

le apar de

minare a pr

ate pentru o

riidinO

obacter a

eneral mob

c, care e

oducerea de

culoare ro

roduselor a

obinerea o

OET

Labo

aceti

bili, aerobi.

este de fap

e acid acet

ie.

alcoolizate

oetului.

orator Microb

pt o oxidare

tic pornind

pe care le

biologie gene

e incomple

de la etano

acidific.

eral|

et a

ol.

Cadrul didactic

Tema: STUDIUL MORFOLOGIC AL UNOR SPECII DE BACTERII PRIN COLORARE GRAM

Scopul: Formarea deprinderilor de manipulare a ustensilelor i aparaturii de laborator; Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare identificrii bacteriilor


GRUPA

Data

Bacillus subtilis

Bacterii din OET



1

Fermentareanaerobaazahrului

STUDIUL DROJDIILOR

Definiie Drojdiile reprezint un grup taxonomic complex i eterogen de microorganisme monocelulare de tip eucariot, care se nmulesc prin nmugurire, ca form general de reproducere i n mod particular prin ascospori formai pe cale asexuat i sexuat.

Importan/rol produc fermentarea glucidelor simple n anaerobioz cu formare de alcool etilic i dioxid de carbon fabricarea alcoolului, a vinului, berii i pinii.

sunt utilizate ca surs de proteine n alimentaia uman, cu denumirea de SCP (single cell protein) sau n alimentaia animalelor.

din biomasa de drojdie se obin: - extracte folosite ca aditivi alimentari; - vitamine hidrosolubile: B1, B2, PP, ergosterol; - enzime: - fructofuranozidaza i - galactozidaza; - prin hibridizri i inginerie genetic, din mutani ai speciei Saccharomyces cerevisiae s-a obinut interferonul.

Rspndire n sol, celulele de drojdie se ntlnesc n straturile superficiale pn la adncimi

de aproximativ 30 cm, n concentraii de 102- 2105/g. din sol, prin aciunea unor factori (fizici, mecanici, biologici), microorganismele se

pot afla temporar n aer i s se rspndeasc la distane mari; din sol i aer drojdiile pot ajunge n ape i unele specii pot fi ntlnite chiar la

adncimi de 4000 m. in microbiota epifita a plantelor.

Caractere morfologice generale

Cultivarea celulelor de drojdie pe medii nutritive lichide:

Exemple de genuri cu importan in industria alimentar: forma oval (elipsoidal) g. Saccharomyces; forma sferic g. Torulopsis; forma apiculat (de lmie) g. Kloeckera; forma cilindric g. Candida; forma de sticl g. Saccharomycodes.



2

succesiv

[1]. Tulburare mediu [2]. Producere spum [3]. Depunere sediment [4]. Limpezirea supernatantului

Cultivarea celulelor de drojdie pe medii nutritive solide sau solidificate (de exemplu: must de mal cu agar)

Coloniile de drojdii

au aspect cremos lucioase sau mate alb-crem drojdii din g. Rhodotorula colonii rou-pastelat

Colonia n seciune poate avea:

un profil lenticular, semicircular sau triunghiular perimetrul circular, umbonat, cu margini ondulate

Caractere fiziologice generale ale drojdiilor O proprietate important a unor drojdii cu utilizri n industria alimentar este aceea de a fermenta n condiii de anaerobioz glucide (hexoze, diglucie, triglucide) cu formare de alcool etilic i dioxid de carbon i produse secundare care dau aroma caracteristic produselor fermentate. n condiii de aerobioz, drojdiile asimileaz glucidele transformndu-le prin respiraie la CO2 i H2O, iar energia eliberat favorizeaz creterea i nmulirea celulelor.

Celulele de drojdie, n funcie de condiiile de cultivare i vrst pot prezenta activitate metabolic difereniat concretizat prin trei stri n care se pot afla celulele i anume:

starea de metabioz (activ), n care celulele au activitate metabolic maxim. n condiii favorabile de cultur, celulele cresc, se reproduc i acumuleaz intracelular substane de rezerv glicogen i trehaloz; starea de anabioz (latent), celulele i menin caracteristicile vitale, dar nu se pot nmuli. Aceast stare apare cnd substanele nutritive ale mediului sunt epuizate, iar celulele consum din substanele de rezerv intracelulare; starea de autoliz (moartea fiziologic). Se produce o solubilizare a compuilor intracelulari sub aciunea enzimelor proprii celulei.

nmugurire

1. C

coav

2. C

dis

3. R

ag

Caractere m Dup

olonii de cuvnd diamet

Caractere m celule

spuse singu se rep

Rspndire

microgrie); este u

Sacch

macroscop 3 zile de loare alb-crtrul de 1 - 2

microscopele au formular, in pereproduc prin

e i rol

oflora epifit

utilizat la: 9 fab9 la o9 n 9 la f

harom

pice (coloncultivare la

rem, convemm.

pice ma elipsoidechi sau lann nmugurire

a fructelor

bricarea spirobinerea dpanificaie;fabricarea u

mycesc

niale). a 25C, forexe, cu per

dal, globoanuri; e, iar mugu

dulci (strug

rtului; rojdiei comp

unor sortime

cerevis

La

rmeaz pe rimetrul circ

as sau el

rele poate f

guri, mere, p

primate;

ente de bere

siae

aborator Micro

MEA (Malcular i sup

lipsoidal al

fi alipit de c

pere, prune,

e.

obiologie gen

t Extract Aprafaa lucio

ungit i p

celula mam

, gutui, coac

neral|

Agar), oas,

pot fi

.

cze,

1. C

chiar ne

2. C

n lanuPoate fo

3. R

a alcool

pstrate

Caractere m forme

eregulat, cu

Caractere m prezin

uri sau asoorma 1- 4 a

Rspndire micro se de

lului etilic; este

e in vase cu

Pichia

macroscopeaz, pe mu aspect ma

microscopnt celule aociaii, formascospori.

e i rol oflora produsezvolta pe lic

agent de au gol de aer.

amem

pice (colonmust de maat, rugos, de

pice alungite, cilinmnd pseu

selor vegetachide slab a

alterare a .

mbrana

niale). l cu agar, e culoare a

ndrice, cu cudomicelii

ale conservaalcoolice ( 7-

buturilor s

aefacie

La

colonii cu alb sau alb

capetele ascrezultate p

ate prin mur- 9 alcool)

slab alcooliz

ens

aborator Micro

perimetrul b-cenuie.

cuite sau rorin nmugu

rare; ), producnd

zate (vin d

obiologie gen

slab lobat

otunjite disprire multipo

d oxidarea t

de masa, b

neral|

t sau

puse olar.

total

bere),

1. C

albe, ci

2. C

netezi.

3. R

murtur

Caractere m forme

rculate, con

Caractere m celule se rep forme

Rspndire drojdi

rilor; a fost

T

macroscopeaz pe munvexe, aplat

microscopele sunt micproduc prineaz 1-4 a

e i rol ia este pre

t izolat din

Torulop

pice (colonust de mal tizate, cu su

pice ci, elipsoida nmugurire

ascospori, c

ezent n s

buturi rc

psisho

niale). cu agar, duuprafaa luc

le; e i apar izocu form s

saramura

coritoare, de

olmii

La

up 3 zile dcioas.

olate sau assferic pn

n fazele in

e pe mslin

aborator Micro

de cultivate

sociate; n la elips

ncipiente d

ne verzi i fr

obiologie gen

la 25C, co

oidal i p

e fermenta

ructe citrice

neral|

olonii

perei

are a

.

Cadrul didactic

Tema: STUDIUL MICROBIOLOGIC AL DROJDIILOR

Scopul: Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare identificrii drojdiilor


GRUPA

Data

Saccharomyces cerevisiae

Pichia membranaefaciens

Torulopsis holmii

1. C

culoare

2. C

sau slab

rmn a

3. R

cerealie

defectu

murare

Candi

Caractere m colon

alb-cenuie

Caractere m celule

b ascuite. pot fo

alipite.

Rspndire face p n ca

ere; este

l numit floa produ

.

idava

macroscopiile dezvoltae sau uneor

microscopele sunt de f

orma pseu

e i rol parte din miazuri rare,

agent de area vinului"uce alterri

alida(C

pice (colonate pe medri alb-crem.

pice form elipso

udomiceliu,

crobiota epse ntlne

alterare a ";

ale butur

Candid

niale). diu solidific

oidal - alung

deoarece

pifit a fructeete n m

vinurilor sl

rilor rcorito

damyc

La

cat prezint

git, cilindric

prin nmug

elor i a unomicrobiota s

lab alcoolic

oare i a p

coderm

aborator Micro

un aspect

c, cu extre

gurire multi

or legume; seminelor

ce, slab su

produselor

ma)

obiologie gen

t mat, cuta

emitile rotu

ipolar, cel

oleaginoas

ulfitate, pro

conservate

neral|

at, de

unjite

lulele

se i

oduce

e prin

1. C

convexepastela

2. C

nmugur

alungite.

3. R

cereale,

cpuni.

Caractere m forme

e, cu perimt.

Caractere m celule

rire pe ntrea celule

.

Rspndire este l se n

a mslinelo poate poate

Rh

macroscopeaz pe Metrul circula

microscopele au formaga suprafae pot fi izo

e i rol larg rspntlnete n or ; e produce rae produce

hodoto

pice (colonEA (Malt E

ar, cu supra

pice elipsoidala; olate sau a

ndit pe supmicrobiota

ar alterri alalterri ale

orulag

niale). Extract Agaafaa lucioas

l i dimen

asociate pe

prafaa fructa epifit a

e fructelor se sucurilor

glutinis

La

ar), dup 3s sau aspe

siuni medii;

rechi. Unel

telor i legufrunzelor

si legumelorinsuficient

s

aborator Micro

3 zile de cect mucos,

; reproduce

le tulpini p

umelor proasi tulpinilor,

r; pasteuriza

obiologie gen

cultivare, code culoare

erea are loc

pot forma c

spt recoltaa boabelo

ate de me

neral|

olonii rou

c prin

celule

ate; or de

re i

1. C

de culoa

2. C

mono sa

3. R

i siropu

Caractere m forme

are alb-crem

Caractere m celule

au bipolari, c

Rspndire a fost

ri de fructe produ produ

Klo

macroscopeaz pe MEm, aproape

microscopele au fie focare se gse

e i rol t izolat de

uce fermentauce alterarea

oecker

pice (colonEA (Malt Ext

semisferice

pice forma elipsoesc singuri s

pe cpuni

aia alcoolica smochine

raapic

niale). tract Agar) de, cu margin

oidal, fie asau perech

; afine, stru

c a mustululor, tomatelo

culata

La

dup 3 zile ni circulare

apiculat, di.

guri, must d

ui de struguor i cireel

a

aborator Micro

de cultivarei suprafaa

datorit mug

de struguri,

ri; or.

obiologie gen

e la 25C, colucioas.

gurilor term

sucuri de c

neral|

olonii

minali,

citrice

Cadrul didactic

Tema: STUDIUL MICROBIOLOGIC AL DROJDIILOR Scopul: Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare identificrii drojdiilor

NUME/PRENUME STUDENT GRUPA Data

Candida mycoderma

Rhodotorula glutinis

Kloeckera apiculata



1

STUDIUL MUCEGAIURILOR Definiie Mucegaiurile sunt microorganisme de tip eucariot, monocelulare sau pluricelulare, difereniate din punct de vedere morfologic i care se reproduc prin spori formai numai pe cale asexuat sau pe cale mixt (asexuat i sexuat).

Rspndire n sol, n special n stratul superficial al solului care le asigur condiii de

cretere i supravieuire. din sol, sporii de mucegai sunt antrenai pe calea aerului la distane

foarte mari. n aer, mucegaiurile sub form de spori sau hife vegetative pot supravieui un timp ndelungat.

n ap prezena mucegaiurilor este ocazional sporii de mucegai se ntlnesc frecvent la suprafaa plantelor, n tractul

digestiv, n special la ierbivore. n microbiota plantelor, pe suprafaa fructelor i legumelor. la om i animale mucegaiurile patogene produc un numr mai redus de

mbolnviri, se dezvolt pe piele, unghii, pr. Rol

rol important n natur: Prin activitatea lor de degradare a materiei organice vii, mucegaiurile

particip la transformarea unor compui organici (celuloza, hemiceluloze, substane pectice, amidon, lipide) la compui mai simpli i sunt considerai ageni de putrezire.

Mucegaiurile particip astfel la circuitul carbonului n natur i mbogesc solul n substane cu molecule mici care pot fi folosite de alte microorganisme sau de ctre plante.

n industria alimentar, culturi fungice selecionate se pot folosi la fabricarea brnzeturilor tip Roqueforti, Camemberti sau la maturarea salamurilor crude.

n biotehnologie se pot obine compui deosebit de valoroi: antibiotice: peniciline Penicillium chrysogenum, etc.; acizi organici (citric, lactic, gluconic, kojic, malic, fumaric); vitamine (B2, ergosterol provitamina D2); enzime (amilaze, proteaze, lipaze, celulaze etc.).

mbogirea n proteine a finurilor vegetale ageni de depoluare a apelor reziduale obinere SCP



2

Caractere morfologice Mucegaiurile se rspndesc n natur sub form de spori rezisteni la

uscciune, form n care se menin n stare viabil ani de zile. Dac un astfel de spor ajunge pe suprafaa unui mediu favorabil pentru cretere,

cu o cantitate suficient de ap liber care s-i permit absorbia substanelor nutritive, n primul stadiu care poate s dureze 3-4 ore, are loc absorbia apei i activizarea sistemelor enzimatice, apoi are loc germinarea celulei sporale i formarea tuburilor vegetative numite hife (lat. hypha) sau thal (thallus).

Hifele cresc numai prin vrf i deci au o cretere apical dup care se ramific rezultnd miceliul.

Hifele se extind pe suprafaa mediului, se diversific i ndeplinesc anumite funcii specializate.

Hifele de extindere se pot dezvolta i n profunzimea mediului realiznd absorbia nutrienilor i au rol de susinere;

Hifele de rspndire se pot dezvolta de-a lungul mediului sau aerian. La un anumit grad de dezvoltare a acestor hife vegetative se formeaz hifele reproductoare, generatoare de spori, difereniate n funcie de gen i specie.

Dezvoltarea mucegaiurilor are loc destul de rapid n condiii favorabile; astfel n interval de 2-3 zile pe mediu nutritiv se formeaz colonii vizibile, difereniate.

n cazul mucegaiurilor inferioare coloniile se dezvolt rapid, sunt extinse, cu tendina de a ocupa tot spaiul disponibil, au aspect pslos i culori, alb, bej, cenuiu, brun. Mucegaiurile superioare caracterizate formeaz colonii cu o cretere radial limitat i culori ce difer de la alb la galben, brun, verde, portocaliu, albastru, cu diferite nuane specifice n funcie de gen i specie.

Caractere fiziologice generale sunt microorganisme aerobe deci necesit pentru cretere prezena oxigenului din aer sau a oxigenului dizolvat n mediul lichid. Un numr limitat de specii sunt microaerofile i pot produce mucegirea intern a untului i a oulor.

se dezvolta n limite largi de pH (15-9), valoare optim n domeniu acid 5.5-6. microorganisme mezofile cu temperaturi optime de cretere la 25C, un numr restrns sunt termofile - cele patogene au temperatura optim la 37C, iar altele sunt adaptate la temperaturi sczute (0-3C). Majoritatea sunt inactivate la temperaturi de 80C; cei mai rezisteni spori sunt distrui la 88C/10 minute.

Totalitatea hifelor vegetative i reproductoare alctuiete miceliul.

1. C

glbui;

2. C

vegetat

i eliber

3. R

prepara

Caractere m colon

Caractere m Spora

iv; Spora Colum Colar

rarea sporilo Spora

Rspndire se nt produ

atelor de car

macroscopii dense, p

microscopangioforii

angii sfericimela formrul se obor; angiospori

e i rol tlnete pe uce mucegrne.

Muco

pice (colonsloase i o

pice lungi

i; ma cilindricbserv prin

i oval-cil

resturi vegeirea cereal

ormuc

niale) culoare ce

i neramifica

, piriform ruperea sau

indrici, nete

etale i dejecelor, pinii,

cedo

Labo

e variaz de

ai, de obi

sau oval; u solubilizar

ezi i hialini.

cii. a produsel

orator Microb

e la cenuiu

cei perpen

rea membra

lor lactate a

biologie gene

-argintiu p

ndiculari pe

anei sporan

acide, a cr

eral|

n la

hifa

ngelui

rnii i

1. C

2. C

brun - n

3. R

Caractere m colon

Caractere m Stilos Colum Spora

nchis.

Rspndire n nat altera produ

Rh

macroscopii extinse, cu

microscopsporangelemela seangiospori

e i rol tur, n sol area fructelouce muceg

hizopu

pice (colonu un miceliu

pice e sferic, demisferic, ci elibera

i pe produsor i legumeirea produs

usstolo

niale) u dens, psl

de culoare bcu apofiza laai prin sparg

se vegetale;lor depozita

selor alimen

onifer

La

los i culoar

brun - neaarg; gerea spora

; ate; tare i poate

r

aborator Micro

re cenuie

gr la matu

angelui sunt

e elabora m

obiologie gen

ritate;

t de form o

micotoxine.

neral|

oval,

Cadrul didactic

Tema: STUDIUL MICROBIOLOGIC AL MUCEGAIURILOR Scopul: Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare identificrii mucegaiurilor


Mucor mucedo

Rhizopus stolonifer

1. C

glbuiedevine

rmn a

2. C

dispuse

form s

3. R

(tubercusli de f

acid glu

Caractere m colon

. Odat cu brun nchis revers

albe sau sla

Caractere m Conid Vezic Fialid

e n dou rI. II.

Fialossferic sau g

Rspndire se nt

uli, rdcini,fabricaie. tulpin

uconic, galic

A

macroscopia se dezvoformarea co- negru; sul coloniei ab glbui.

microscopdioforii se dcula este madele se deznduri:

Fialidele pFialidele

sporii se degloboas.

e i rol tlnete n , semine, fr

i selecionac, citric, fuma

Asperg

pice (colonolt rapid, conidiosporil

poate fi inc

pice dezvolta de are, sferic

zvolta radial

primare susecundareezvolta bas

sol, materiructe, cerea

ate se folosaric, oxalic.

gillusn

niale) cu un miceor, colonia

color sau co

obicei direcsau globoape ntreaga

nt mai lungie sunt mult mipetal, n lan

i vegetale ale) i produ

sesc industr

niger

Labo

eliu catifelatcapt un a

olorat n gal

ct din substras; a suprafaa

i dect cele mai scurte.nuri lungi, d

n descompsele lor de

rial pentru o

orator Microb

t, de culoaraspect gran

ben-pal; ma

rat;

a lateral a

secundare

din fialidele

punere, micprelucrare,d

obinerea d

biologie gene

re alb saunular i culo

arginile colo

veziculei i

;

secundare;

croflora vegdepozite, piv

e acizi orga

eral|

u alb-oarea

oniilor

sunt

au o

getal vnie,

anici:

1. C

2. C

3. R

oryzae

Caractere m colon revers

Caractere m Conid Capu Vezic Fialid Conid

Rspndire se po

- orez), mal

A

macroscopia are culoasul coloniei

microscopdioforii sun

ul conidial ecula este sfedele sunt undiosporii su

e i rol oate izola di fructe, pro

spergi

pice (colonare glbuie seste incolor

pice nt nali cu peeste sferic. eric i prezniseriate. Ununt elipsoida

n sol, de peoduse alimen

illusor

niale) spre galbenr.

erei subiri

zint pe 2/3 neori pot fi pali, piriformi

e resturi vegntare.

ryzae

Labo

n-orange, br

i aspect ru

din suprafaprezente i f, sau globo

getale, sem

orator Microb

run-oliv;

ugos, sub ve

aa fialide secuni la maturita

mine, n spe

biologie gene

ezicul.

ndare. ate

ecial de orez

eral|

z (lat.

1. C

margini

2. C

vezicul

vezicul

3. R

conservzahr (s


.

Caractere m Conid

, de form Capu Fialid

se pot form Fialos

Rspndire este r Asper

vate prin ussucuri, sirop a fost

As

macroscopia are culoasul coloniei

microscopdioforii sunoval.

ul conidial edele se formma noi conidsporii au fo

e i rol rspndit n rgillus glauscare (cerepuri, fructe ct izolat de pe

spergi

pice (colonare verde g

este slab

pice nt netezi, in

este mare, smeaz direcdiofori scurorma elipsoi

natura, fiinducus este eale, seminconfiate). e pine, lap

illusgl

niale) lbui sau vecolorat n n

ncolori, cu d

sferic sau ovct pe vezicui. dal sau pir

d frecvent nagent de e oleaginoa

te concentra

laucus

Labo

rde cenuienuane galb

diametrul ca

val. ul, la parte

riform.

ntlnit n solmucegire ase, fructe

rat, unt.

s

orator Microb

e; ben-verzui,

are se lrge

ea superioa

l. al prodususcate) sa

biologie gene

brun - roc

ete treptat

ar. Adeseo

selor alimeau cu adao

eral|

cat la

spre

ori pe

ntare os de

1. C

2. C

3. R

viguros 35C.

brun.


Caractere m Conid Prezin Forme

Rspndire Penic

la 0C). Se

Este

A fost Foarte Produ

Pen

macroscopia are culoasul este colo

microscopdioforii au pnt fialide feaz conid

e i rol cillium expane dezvolt

prezentat n

t izolat i dee rspndit uce micotox

nicilliu

pice (colonare verde-alborat n brun-

pice perei netezfie cu formdii elipsoidal

nsum este optim la 28

n mod frecv

e pe cpunpe alimente

xine de tipul

umexp

niale) bstrui, cu a-nchis sau

zi. de fiol, fie e, cu perei

un mucega8C. Tempe

vent pe me

i i tomate. e cum sunt cpatulinei i

pansum

Labo

aspect catifeportocaliu-b

cu form c netezi.

ai psihrofil (peratura max

ere i pere

carnea i prcitrininei.

m

orator Microb

elat; brun.

ilindric.

poate cretexim de dez

la care pro

rodusele din

biologie gene

e la -6C; czvoltare est

oduce putre

n carne.

eral|

crete te de

ezirea

Cadrul didactic



Aspergillus niger

Aspergillus oryzae

Penicillium expansum

Aspergillus glaucus

1. C

nchis p

2. C

purtnd

3. R

maxime

(strugur

calitate

Caractere m forme

pe msura fo revers

Caractere m Conid

d terminal un Conid

Rspndire Botryt

e de 28-35C este

ri, mere, per poate n toa

superioara

B

macroscopeaz colonii ormarii conisul este de

microscopdioforii se n mnunchi diile formate

e i rol ytis cinerea sC i optime un mucegare, cpuni

e s producamnele nsodin boabele

Botryt

pice (colonextinse, flodiilor. culoare gri.

pice formeaz

de ramuri se pe aceste

se dezvoltala 22-25C,

ai ntlnit n). putrezireaorite produce stafidite.

tiscine

niale) conoase. M

din hifele scurte, avne ramuri scu

a n domeni, i ntr-un inn zonele te

a fructelor i ce "botritiza

erea

Labo

Miceliul este

aeriene, and capetele urte sunt elip

i de tempernterval de pemperate, p

legumelor area nobila"

orator Microb

iniial alb, d

au diferite rotunjite.

psoidale, ne

raturi minimpH de 2-8. pe legume

i n condiii" cu obiner

biologie gene

dar devine g

lungimi, fie

etede i lung

me de -2 - .-

(roii) i f

i de refrigerarea de vinu

eral|

gri-gri

ecare

gi.

-5C,

fructe

are. uri de

1. C

cea a d

2. C

perpend

formnd

sferici.

3. R

slab la t

drojdiei grapefrualiment

a fost d

Caractere m micel

rojdiilor. Pe revers

Caractere m Prezi

dicular hife Hifele

d arthrospo Arthr

Rspndire se de

temperaturi este a

comprimauit), n timpare. este c

enumit "mu

Geo

macroscopiul are culo

e MEA colons necolorat

microscopnt hife vreproduc

e reproducori hialini, crosporii au

e i rol ezvolt la tei sub 10C. agentul de

ate. Producpul depozita

contaminanucegaiul utila

otrichu

pice (colonoare alb-creniile sunt ext

pice vegetative, toare, carectoare se fcilindrici sauu tendina

mperaturi o

contaminatce putrezirearii acestor

nt frecvent aajelor".

umcan

niale) em, nlimxtinse, au cu

ramificate e nu se difefragmentea

u elipsoidali,de aranjare

optime de 2

te al produea acr, ra. Produce

al utilajelor d

ndidum

Labo

i reduse iuloare alb

dichotomireniaz de

az la matur, cu capete e n zig-za

5-30C i m

uselor lactatn special e rncezirea

din industria

m

orator Microb

textura as, aspect pu

ic, pe care hifele vegeritate aproarotunjite.

ag, iar la m

maxime de 3

te, al zemiia fructelor

a untului i

a laptelui, m

biologie gene

semntoarulverulent.

re se dezetative. ape n ntreg

maturitate d

35-38C. C

de murtur citrice (l a altor gr

motiv pentru

eral|

re cu

zvolta

gime,

devin

rete

uri, al mi, simi

care

1. C

cenuie

2. A

unor colongitud

3. R

recoltat

Caractere c micel

e. revers

Aspect mic prezin forme

onidiofori fodinale, sunt

Rspndire se n

te cnd prez

Alt

coloniale iul este puf

sul coloniei

croscopic nt hife subeaz lanuri oarte scurpiriforme i

e i rol ntlnete nzena lor po

ternar

fos, are ini

are culoare

biri, septatede conidiii care nu i dispuse cu

n microfloraoate fi consi

riaalte

ial culoare

e brun pn

e. (cca., 10 cse pot dis

u partea asc

a cerealeloderat drep

ernata

Labo

alb murda

la negru.

conidii), ramstinge. Concuita elong

or, seminept indice de

a

orator Microb

ar-gri, iar ap

mificate nerenidiile prezigata, spre co

elor oleaginprospeime

biologie gene

poi devine b

egulat, la caint 2-3 seonidiofor.

noase proae ale acesto

eral|

brun-

aptul epturi

aspt ora.

1. C

este roz

margine

2. A

3. R

coroana

Caractere c Micel

z-cenuiu s Reve

e.

Aspect mic n pre

; ram

; fornet

Rspndire Se de Este

a la plante Se po Poate

Fusa

coloniale iul are aspspre auriu-brsul este c

croscopic eparat micrmacroco

mificai, de o

clamidosmai intercatezi sau rug

e i rol ezvolta optirspndit de gru, po

oate ntlni e elabora m

arium

pect pslosbrun colorat n

roscopic se onidii, carobicei n m

spori, carealar, de-a lugoi, hialini

im la 24-26n natura orumb). si pe plant

micotoxine d

grami

, dens, i

portocaliu-

pot observre se fornunchi, fu

e-sunt monoungul hifelosau de cul

6C, la pH 6i este fitop

te (mazre,de tipul scir

inearu

Labo

se extinde

brun cu n

va: rmeaz peusiformi, cu

o sau plurior sau la nioare brun p

6,7-7,2. patogen al g

, cartofi, barpene (zear

um

orator Microb

e rapid n p

uane mai

e conidiofo5 septuri.

celulari, develul macropal.

gramineelo

anane). ralenone).

biologie gene

placa. Culo

deschise

ori simpli

e obicei glooconidiilor;

or (putrezire

eral|

oarea

spre

sau

boi, sunt

ea n

1. C

2. A

dendriti

neregulpot prez

3. R

cuprins

i produ

Caractere c colon revers

Aspect mic prezin Conid

c. forme

late datoritazenta 1-2 se

Rspndire se po

ntre -1-0C este u

use din carn produ

Clad

coloniale ii catifelate,s de culoare

croscopic nt hife subdioforii su

eaz conida cicatricilorepturi trans

e i rol oate dezvoltC i 32C. un contaminne, oua, leguce pete ne

dospori

netede uoe brun oliv p

biri, septateunt ramifica

dii elipsoidr mugurale. versale.

ta pn la u

nant frecveume proaspgre pe carn

iumhe

or ridate, depn la neg

e. ai neregula

dale pn Conidiile s

un aw de 0.

nt al produspete, alune

nea pstrat

erbaru

Labo

e culoare olgru-bleumar

at, ceea c

la cilindricunt de obic

.88 i ntr-u

selor alimen, cereale. , n condiii

um

orator Microb

iv. rin (ca o pat

ce le conf

ce, cu excei neseptat

n domeniu

ntare, este

i de refriger

biologie gene

t de cerne

fer un as

xtremiti ute, dar cele

de tempera

ntlnit pe c

rare.

eral|

eal).

spect

neori mari

atura

came

Cadrul didactic



Botrytis cinerea

Geotrichum candidum

Fusarium graminearum

Alternaria alternata

Cladosporium herbarum



1

TEHNICI DE IZOLARE A CULTURILOR PURE

Tehnicile de izolare a microorganismelor, indiferent de natura lor, presupun operaii de prelevare a probelor biologice din medii naturale, inoculare n medii de cultur specifice i, dup cultivare n condiii optime, izolarea i studiul coloniilor izolate, repicare pentru obinerea de culturi pure.

Prin cultur pur se nelege biomasa de celule rezultate prin reproducere dintr-o singur celul aflat ntr-un mediu nutritiv steril cu volum limitat. Astfel, o cultur pur este format din celule aparinnd unei singure specii sau unei singure tulpini. In funcie de principiul realizrii lor, metodele de izolare a culturilor pure pot fi clasificate n dou grupe mari, i anume:

; metode bazate pe principiul separrii fizico-mecanice a celulelor; ; metode biologice.

La rndul lor, fiecare din aceste dou grupe cuprinde metode generale, care se preteaz a fi utilizate pentru izolarea majoritii microorganismelor, sau metode de izolare specifice pentru un anumit grup sau un microorganism individual.

Procedee fizice de izolare a culturilor pure

Metoda Koch

Se bazeaz pe rspndirea microorganismelor recoltate din medii naturale ntr-un mediu nutritiv i fixarea distanat a celulelor n urma solidificm mediului cu formare prin multiplicare de colonii izolate ntre ele.

Metoda este folosit n special pentru izolarea culturilor pure de drojdii. Mediul de rspndire este mustul de mal cu gelatin, repartizat cte 20cm3 n 3 eprubete, fluidificat i meninut la 35-40C. Din proba aleas pentru izolare se recolteaz celulele cu ajutorul unei anse, care apoi este trecut succesiv n cele 3 eprubete. Dup inoculare i uniformizare, coninutul fiecrei eprubete se repartizeaz n cte o plac Petri, iar prin solidificarea mediului celulele care rmn fixate n gel vor forma prin multiplicare colonii izolate.

n funcie de densitatea celulelor recoltate iniial, n placa a 2 a sau a 3 a pot exista colonii izolate (la o distan de cca. 2 cm), iar dup studiul caracterelor microscopice ale coloniilor reprezentative se face repicarea n eprubete cu Malt Extract Agar, obinndu-se culturi pure (fig. 1).

2

Facultatea

Metoda

n plci P

Cu ajuto(fig. 3), solidificacelulele formeze

a tiina i Ing

scarificat

Petri sterile

orul firului mapoi cu firu

at, astfel ncs rmncolonii izola

gineria Alimen

Fig

e se repartiz

Fig.

metalic se ul ncrcat ct prin drum ataate deate.

ntelor

g. 1. Tehnic

zeaz medi

2 Repartiz

recolteaz cu celule s

mul ct maie mediu i

ca de izolare

ul de cultur

zare mediu d

celule din se traseazi sinuos parprin termo

La

e a culturilo

r adecvat (

de cultur a

mediul nat striuri difercurs de fir

ostatare 48-

aborator Micro

or pure

(BCA sau M

adecvat

tural sau dferite pe su

(Fig.4), ntr-72 h s se

obiologie gen

MMA) (fig. 2

din culturi mprafaa medr-o zon a e dezvolte

neral|

2).

mixte diului plcii i s

3

Facultatea

Se realizsunt rep

a tiina i Ing

zeaz apoi sicate n epru

Fi

gineria Alimen

Fig

studiul morfubete cu me

ig. 4 Trasar

ntelor

g. 3 Recoltar

fologic al coediu steril, o

re striuri pe

Fig. 5 Obin

rea celulelo

oloniilor reprobinndu-s

e suprafaa

nere de cult

La

or din cultur

rezentative se astfel cult

unui mediu

turi pure

aborator Micro

ri mixte

i culturile cturi pure (fig

solidificat

obiologie gen

care interesg. 5).

neral|

seaz



1

TEHNICI INDIRECTE (CULTURALE) DE EVALUARE A

NUMRULUI DE MICROORGANISME

Tehnica clasic de numrare prin cultivare pe medii dense

Metoda culturala Koch

Metodologia de analiz presupune inoculare n masa mediului solidificat, cnd 1 cm3 din

fiecare diluie se transfer cu cte o pipet steril n plci Petri sterile. Peste suspensia din

fiecare plac se repartizeaz cte o eprubet de mediu de cultur specific, cu agar (10-15

cm3), fluidificat i temperat. Mediul se omogenizeaz cu suspensia din plac prin micri

orizontale, circulare ale plcii. Dup solidificarea mediului, prin termostatare n condiii

optime, se vor forma colonii att la suprafaa mediului ct i n profunzimea acestuia.

Acest mod de cultivare este cel mai favorabil pentru microorganismele facultativ

anaerobe, dar i microorganismele aerobe le tolereaz destul de bine. n cazul

microorganismelor anaerobe se recomand cultivarea n dublu strat, adic dup

nglobarea celulelor n mediu i solidificare, primul strat de mediu se acoper cu nc un

strat de mediu steril.



2

Citirea i interpretarea rezultatelor

Dup termostatarea n condiii optime, apariia vizibil a coloniilor va depinde de

particularitile fiziologice ale microorganismelor cultivate i de condiiile de cultivare,

de obicei dup 48-72 h de cultivare.

n funcie de numrul de colonii evideniate n plcile din care s-a fcut numrarea n,

se va calcula numrul de microorganisme pe gram sau cm3 prob de analiz, cu

formula:

N numrul de celule/cm3(g) prob;

n suma numrului coloniilor din plcile din care se face numrarea;

x1 numrul plcilor din prima diluie aleasa pentru numrare;

x2 - numrul plcilor din a doua diluie aleasa pentru numrare;

k coeficientul de diluie corespunztor primei diluii aleas pentru numrare;

0,1 coeficient care egaleaz diluiile.

Atenie!!! Numrarea se realizeaz din plcile Petri n care s-au dezvoltat ntre 25 250 de colonii

n cazul n care numrul de colonii pe plac este mare, n imposibilitatea repetrii

analizei, pentru a nlesni numrarea fie se mparte placa n mai multe sectoare, se

numr coloniile pe un sector i, n final, se nsumeaz coloniile pe ntreaga plac, fie

se delimiteaz pe reversul mediului o suprafa de 1 cm2, care conine un numr mediu

de microorganisme, se numr coloniile de pe aceast suprafa i, n final, se

raporteaz la total suprafa mediul din plac.

Cadrul didactic

Tema: TEHNICI INDIRECTE (CULTURALE) DE EVALUARE A NUMRULUI DE MICROORGANISME

Scopul: Cunoaterea i utilizarea adecvat a noiunilor necesare evalurii numrului de microorganisme

1. Completai schema de lucru pentru realizarea diluiilor si inocularea probelor

2. nregistrai in tabelul de mai jos numrul de colonii/plac (in plcile selectate pentru numrare)

Proba Diluia

Nr. colonii/plac

1 2

3. Stabilii gradul de contaminare exprimat in uniti formatoare de colonii (ufc) per gram sau ml produs:

Proba 1 _______________ Proba 2 _______________




1

METODA DIRECT DE NUMRARE A BACTERIILOR N

PREPARATE FIXATE I COLORATE

METODA BREED

Celulele de bacterii aflate ntr-un volum cunoscut de lichid se repartizeaz pe o suprafa limitat de frotiu, iar dup fixare i colorare simpl se stabilete numrul de celule prin examen microscopic direct.

Pe o lam de sticl degresat se contureaz cu markerul o suprafa Sd de 2-6 cm2 (a).

Se inverseaz lama i, central, cu ajutorul unei micropipete sterile, se plaseaz o pictur din suspensia de analizat cu un volum cunoscut Vp, egal cu 0.02-0.05 cm3 (b). Imediat cu ajutorul firului se repartizeaz cantitatea de prob ct mai uniform, pe ntreaga suprafa conturat.

Se realizeaz uscarea n curent de aer cald (c, d), fixarea (de preferat cu soluie de alcool 96%, timp de 20 min) (e), colorarea simpl (f), splarea (g) i uscarea.

Preparatul se studiaz apoi la microscop, cu obiectiv de imersie, avnd grij ca pictura de ulei de cedru s fie pus n momentul n care se face numrarea.

Se numr celulele de bacterii din mai multe cmpuri microscopice (minimum 25; n=600-1000) aflate n diferite zone ale frotiului. Dup numrare; se

a

b c d

e f g



2

calculeaz numrul mediu de celule pe cmp microscopic (x = numrul de cmpuri cercetate):

Pentru determinarea numrului de celule prezente ntr-un gram sau cm3

produs analizat este necesar s se cunoasc: gradul de diluie, volumul de suspensie folosit la obinerea frotiului, mrimea suprafeei delimitate pe care s-a realizat frotiul i suprafaa cmpului microscopic.

Suprafaa cmpului microscopic Sc se determin cu ajutorul micrometrului obiectiv. Se nlocuiete preparatul analizat cu lama micrometrului obiectiv i, cu acelai obiectiv cu care s-a fcut numrarea, se msoar diametrul cmpului dc cu ajutorul scrii gradate (1 mm:100 diviziuni):

unde: nd este numrul de diviziuni de pe scara micrometrului obiectiv care se cuprind exact n cmpul microscopic:

Numrul de cmpuri microscopice posibil de studiat pe suprafaa de frotiu delimitat - Nc se calculeaz cu formula:

Numrul de bacterii prezente ntr-un cm3 sau un g produs analizat se determin cu formula:

n care: k este coeficientul de diluie.

Cadrul didactic

Tema: METODA DIRECT DE NUMRARE A BACTERIILOR N PREPARATE FIXATE I COLORATE - METODA BREED


1. nregistrai datele obinute n tabelul de mai jos:

Suprafaa delimitat, cm2 Sd =

Volumul suspensiei de analizat, cm3 Vp =

Numrul mediu de celule pe cmp microscopic: x (numrul de cmpuri cercetate)

n (nr. celulele de bacterii)

x (numrul de cmpuri cercetate)

n (nr. celulele de bacterii)

1 13 2 14 3 15 4 16 5 17 6 18 7 19 8 20 9 21 10 22 11 23 12 24

25

Diametrul cmpului microscopic, mm

dc =

Suprafaa cmpului microscopic, cm2

Sc =

Numrul de cmpuri microscopice pe suprafaa de frotiu delimitat

Nc =

Numrul de bacterii prezente ntr-un ml sau un g

N =




1

METODE DIRECTE DE NUMRARE

NUMRAREA CU CITOMETRE

Celulele de drojdii i sporii de mucegai se pot numra, prin examen microscopic

direct, cu ajutorul citometrelor (camerelor de numrat) .

Se cunosc mai multe tipuri de citometre: Thoma, Trk, Brker, Rosenthal,

Goreaev .a., construite pe acelai principiu.

Un citometru este o lam de sticl groas, prevzut cu trei platforme separate

ntre ele prin rigole n sticl. Platforma central este denivelat fa de celelalte dou

cu o nlime de 0,1- 0,2 mm (nscris pe fiecare camer). Pe platforma central este

gravat o reea de linii perpendiculare, care delimiteaz o anumit suprafa divizat

de ctre linii perpendiculare n microcelule de form ptratic (ptrele elementare).

Diferenierea dintre tipurile de citometre const n mrimea variabil a

suprafeei unui ptrel elementar, n cazul citometrului Thoma, suprafaa de 1

mm2 este divizat de ctre linii n 400 de ptrele elementare cu (Fig. 1) latura de

1/20 mm.

Fig. 1 Profilul i reeaua citometrului Thoma

Pentru numrare se plaseaz o pictur din suspensia de celule de analizat pe

platforma central, n dreptul suprafeei delimitate. Peste suspensie se plaseaz o

lamel care se sprijin pe cele dou platforme laterale i astfel ntre lamel i citometru

se creeaz o pelicul de lichid cu nlime egal cu denivelarea platformei centrale (0,1

mm).



2

Preparatul obinut se studiaz la microscop cu obiectiv cu grosisment x 40, cnd

n cmpul microscopic poate fi vizualizat un grup de 16 ptrele elementare, din care

se numr celulele a cror suprafa se afl mai mult de jumtate n interiorul careului

de 4x4 ptrele elementare. Se fac numrri de celule din mai multe cmpuri

microscopice (n = 100) i se calculeaz numrul mediu de celule pe un ptrel

elementar.

Suprafaa (S) de 1 mm2 este divizat de ctre linii n 400 de ptrele

elementare cu latura de 1/20 mm. Suprafaa ptrelului elementar este:

nlimea platformei centrale:

Volumul ptrelului elementar:

Numrul mediu de celule pe un ptrel elementar:

Numrul de celule prezente ntr-un cm3 de suspensie de analizat se

determin cu formula:

n care:

n - numrul mediu de celule pe un ptrel elementar;

k - coeficient de diluie.

n cazul bacteriilor, aceast metod este greu de aplicat, att din cauza

dimensiunilor reduse ale celulelor ct i a faptului c de multe ori ele prezint

mobilitate.

Cadrul didactic

Tema: METODE DIRECTE DE NUMRARE NUMRAREA CU CITOMETRE


1. Analizai profilul i reeaua citometrului Thoma

2. nregistrai datele obinute n tabelul de mai jos:

Suprafaa ptrelului elementar, mm2

Spe =

nlimea platformei centrale, mm

h =

Volumul ptrelului elementar, cm3

Vpe

Numrul mediu de celule pe un ptrel elementar: x (numrul de cmpuri cercetate)

n (nr. celulele )

x (numrul de cmpuri cercetate)

n (nr. celulele )

1 6

2 7

3 8

4 9

5 10

Numrul de celule prezente ntr-un cm3 de suspensie

N =




1

INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU ASUPRA DEZVOLTRII MICROORGANISMELOR

n procesul de nutriie i deci n cel de dezvoltare a microorganismelor, acestea sunt supuse influenelor unor factori de mediu care condiioneaz activitatea microbian determinnd fie stimularea creterii i reproducerii, fie inhibarea activitii (inactivarea microorganismelor).

Procesele metabolice se desfoar n limite stricte de temperatura, specifice fiecrui microorganism. Factorul temperatur poate favoriza sau inhiba dezvoltarea microorganismelor, iar n anumite cazuri poate chiar determina moartea acestora.

Modul de lucru

Pentru a testa influena temperaturii asupra dezvoltrii microorganismelor se folosesc dou microorganisme test (Bacillus subtilis i Saccharomyces cerevisiae), sub form de suspensie.

Pentru fiecare microorganism luat n studiu, se iau cte trei plci Petri sterile. Cu o pipet steril se introduc n fiecare plac, cate 1 cm3 suspensie. n fiecare plac Petri se toarn apoi cca. 15 cm3 mediu de cultura (BCA bulion de carne cu agar, pentru Bacillus subtilis i MMA must de mal cu agar, pentru Saccharomyces cerevisiae) fluidificat i rcit la 455C. Mediile se repartizeaz uniform n plci prin rotirea acestora n plan orizontal, apoi sunt lsate n repaus pn se produce solidificarea. Pe capacul plcilor se noteaz numele probei, mediul utilizat i apoi se termostateaz la temperaturi de 4, 25, 37C, timp de 3 zile. Dup perioada de termostatare se va evalua creterea microorganismelor n fiecare plac i se va nota nivelul de cretere, n tabelul din fisa de lucru.

Pentru a aprecia dezvoltarea microorganismelor sau activitatea enzimelor este necesar s se cunoasc valoarea activitii apei.



2

Disponibilitatea apei dintr-un mediu de cultur pentru transferul de substane i reaciile chimice este exprimat prin activitatea apei (aw). Acest parametru ia valori de la 0 la 1. Prezena substanelor solubile n apa face ca activitatea apei pure s scad sub valoarea 1. Cu ct concentraia unei soluii este mai mare, cu att scderea valorii activitii apei este mai mare i vice-versa, ceea ce poate crea un soc osmotic.

Mod de lucru

Pentru a testa influena temperaturii asupra dezvoltrii microorganismelor se folosesc dou microorganisme test, Bacillus subtilis i Saccharomyces cerevisiae, sub form de suspensie i medii de cultura cu concentraii diferite de sare (0%, 0.5%, 2% NaCl)/ diferite activiti ale aw.

Pentru fiecare microorganism luat n studiu, se iau cte trei placi Petri sterile. Cu o pipet steril se introduc n fiecare plac, cate 1 cm3 suspensie. n fiecare plac Petri se toarn apoi cca. 15 cm3 mediu de cultura (BCA bulion de carne cu agar pentru Bacillus subtilis i MMA must de mal cu agar pentru Saccharomyces cerevisiae) fluidificat i rcit la 455C. Mediile se repartizeaz uniform n placi prin rotirea acestora n plan orizontal, apoi sunt lsate n repaus pn se produce solidificarea. Pe capacul plcilor se noteaz numele probei, mediul utilizat, concentraia de sare i apoi se termostateaz la temperatura de 25C timp de 3-5 zile plcile inoculate cu suspensie de Saccharomyces cerevisiae i temperatura de 37C, timp de 48 ore, plcile inoculate cu suspensie de Bacillus subtilis. Dup perioada de termostatare se va evalua creterea microorganismelor n fiecare plac i se va nota nivelul de cretere n tabelul din fisa de lucru.

Cadrul didactic

Tema: FACTORI CARE INFLUENEAZ DEZVOLTAREA MICROORGANISMELOR

Scopul: nelegerea modului n care diveri factori influeneaz dezvoltarea microorganismelor

1. Influena temperaturii asupra dezvoltrii microorganismelor

Notai n tabel nivelul de cretere a microorganismelor dup termostatare la diferite

temperaturi.

MICROORGANISM TEMPERATURA

4C 25C 37C

Bacillus subtilis

Saccharomyces cerevisiae ++ cretere maxim

+ cretere medie - cretere nul

2. Influena activitii apei asupra dezvoltrii microorganismelor

Notai n tabel nivelul de cretere a microorganismelor dup inoculare pe medii de cultura

cu concentraii diferite de NaCl si valori diferite ale activitii apei.

MICROORGANISM Concentraie NaCl/aw 0% 0,5% 2%

Bacillus subtilis Saccharomyces cerevisiae

++ cretere maxim + cretere medie

- cretere nul


L1_1_Reguli de protectie a muncii.pdfL1_2_Microscopul.pdfL2_0_Studiul bacteriilor.pdfL2_1_Studiul bacteriilor prin colorare simpla.pdfL2_2_Iaurt.pdfL2_3_Smantana.pdfL2_4_Bors.pdfFisa L2.pdfL3_1_Studiul bacteriilor prin colorare diferentiala.pdfL3_2_Bacillus subtilis.pdfL3_3_Otet.pdfFisa L3.pdfL4_0_Studiul drojdiilor.pdfL4_1_Saccharomyces cerevisiae.pdfL4_2_Pichia.pdfL4_3_Torulopsis.pdfFisa L4.pdfL5_1_Candida.pdfL5_2_Rhodotorula.pdfL5_3_Kloeckera apiculata.pdfFisa L5.pdfL6_0_Studiul mucegaiurilor.pdfL6_1_Mucor mucedo.pdfL6_2_Rhizopus stolonifer .pdfFisa L6.pdfL7_1_Aspergillus niger.pdfL7_2_Aspergillus oryzae.pdfL7_3_Aspergillus glaucus.pdfL7_4_Penicillium expansum.pdfFisa L7.pdfL8_1_Botrytis cinerea.pdfL8_2_Geotrichum candidum.pdfL8_3_Alternaria alternata.pdfL8_4_Fusarium graminearum.pdfL8_5_Cladosporium herbarum.pdfFisa L8.pdfL9_Tehnii de izolare a culturilor pure.pdfL10_Tehnii de indirecte de numarare.pdfFisa L10.pdfL11_Metoda directa de numarare_Beed.pdfFisa L11.pdfL12_Metoda directa de numarare_Thoma.pdfFisa L12.pdfL13_Influenta factorilor de mediu.pdfFisa L13.pdf

Laborator Microbiologie generala

Documents

Transcript of Laborator Microbiologie generala