DETERMINAREA CANTITATII DE GRASIME

DETERMINAREA CANTITATII DE GRASIMEGrasimea din lapte se gaseste sub forma de globule de dimensiuni micronice, avand la periferie o pelicula de natura lipoproteica. Extragerea grasimii (cantitativ) presupune distrugerea peliculei respective, aceasta putandu-se efectua pe doua cai: pe calea fizica, cu ajutorul caldurii, sau pe cale chimica, prin hidroliza. Separarea grasimii de celelalte componente ale laptelui se poate face prin solvire selectiva cu ajutorul solventilor organici sau prin centrifugare pe baza diferentei de greutate.

METODA ACID-BUTIROMETRICA (GERBER).

Principiul metodei.Proba de lapte este introdusa intr-un butirometru, unde este supusa hidrolizei partiale si rapide cu ajutorul acidului sulfuric concentrat. Prin reactia dintre acidul sulfuric concentrat, cazeina si sarurile de calciu se separa grasimea in butirometru. Separarea grasimii de celelalte componente se efectueaza cu ajutorul centrifugarii, caldurii si alcoolului izoamilic, iar cantitatea exprimata procentual se citeste direct pe tija butirometrului.

Aparatura, materiale si reactivi:

butirometru pentru lapte cu dop de cauciucpipete cu bula de 10 ml pentru acid sulfuric si de 1 ml pentru alcool amilic, sau dozatoare automate;pipete cotate de 11 ml pentru lapte;centrifuga electrica sau manuala pentru butirometre, cu 800 1000 turatii pe minut;baie de apa cu stativ pentru butirometre;acid sulfuric cu densitatea de 1,817 0,003;alcool amilic cu densitatea de 0,810 0,002.

Acidul sulfuric trece cazeina din forma sarurilor de calciu in forma unei combinatii solubile de sulfat de cazeina si sulfat de calciu insolubil conform reactiilor:H2N-R(COO)6 + Ca3 + 3 H2SO4 H2N-R (COOH)6 + 3 CaSO4 cazeinat de calciu cazeinaH2N-R (COOH)6+ H2SO4 H2SO4 . H2N-R (COOH)6 sulfat de cazeinaPentru favorizarea unirii globulelor de grasime este adaugat si 1 ml de alcool izoamilic care reduce tensiunea superficiala a globulelor. Procesul unirii si separarii globulelor este favorizat de incalzirea si centrifugarea butirometrului.

Mod de lucru:

In butirometrul de lapte curat si uscat se introduc 10 ml acid sulfuric (d = 1,817 0,003) fara a atinge gatul butirometrului, peste care se adauga cu pipeta 11ml lapte din proba care a fost bine omogenizata (adaugarea laptelui se face cu atentie pe peretele butirometrului) si 1 ml alcool amilic. Se inchide butirometrul cu dopul de cauciuc (care a fost in prealabil probat) aplicat prin insurubare, iar butirometrul se protejeaza cu o bucata de panza, dupa care se agita prin rasturnari repetate pana la arderea completa a substantelor proteice si omogenizarea amestecului, care are aspect brun negricios, fara sa se mai observe particule albe.

Butirometrul, avand continutul cald, este introdus in centrifuga, iar dupa atingerea turatiei de 1000 ture/minut, se centrifugheaza inca 2 3 minute, dupa care centrifuga se lasa sa se invarteasca in continuare prin inertia imprimata. Se scoate butirometrul din centrifuga si tinandu-l cu tija in sus, se introduce in baia de apala 650C, timp de 5 minute. Cu ajutorul dopului, prin isurubare sau desfacere, se aduce stratul de grasime in portiunea scarii gradate in asa fel ca limita inferioara (linia de separare acid- grasime) sa fie la nivelul unei diviziuni intregi, dar coloana de grasime sa fie cuprinsa pe scara gradata a butirometrului.

Pe tija gradata a butirometrului, tinut in pozitie verticala si la nivelul ochiului, se citeste diviziunea corespunzatoare limitei inferioare si cea corepunzatoare limitei superioare coloanei de grasime. Prin efectuarea diferentei celor doua valori se obtine direct continutul de grasime, exprimat procentual.

NOTA:

In cazul unui lapte cu continut excesiv de mare in grasime cand coloana de grasime separata nu poate fi cuprinsa pe tija gradata,se poate proceda in felul urmator:laptele se poate dilua cu apa o data sau de mai multe ori si se supune determinarii in aceasta forma. In acest caz, rezultatul final se multiplica de atatea ori cate dilutii au fost facute;in loc de 11 ml lapte se introduce in butirometru o cantitate mai mica de lapte, respectiv 1 10 ml. In aceasta situatie, continutul in grasime se calculeaza cu ajutorul urmatarei formule:grasime, % = in care: 11 cantitatea de lapte pentru care este conceput butirometrul;m cantitatea de lapte care este conceput butirometru, in ml;Gb - cantitatea de grasime citita pe tija gradata a butirometrului.

Daca se lucreaza mai multe probe, dupa omogenizare, butirometrele se introduc intr-o baie cu apa calda, avand temperatura de 65 20C, dupa care se centrifugheaza din nou. In lipsa centrifugei, butirometrele astfel pregatite se pun la baia de apa cu temperatura de 65 20C, cu dopul in jos, unde se tin cel putin 2 ore, dupa care se citeste grasimea separata pe tija gradata.

Calculul rezultatelor:Fiecare diviziune minora de pe scala tijei corespunde la 0.1% grasime iar fiecare diviziune majora corespunde la 1% grasime iar fiecare diviziune majora corespunde la 1% grasime (diviziunile majore sunt notate).Continutul de grasime exprimat in procente, se calculeaza cu formula:Grasime= B A [%]n care:A valoarea corespunzatoare punctului inferior al coloanei de grasime, in %;B - valoarea corespunzatoare punctului superior al coloanei de grasime, la punctul inferior al meniscului, in %.

Interpretare:

Cantitatea de grasime din laptele integral (de vaca) poate varia intre 2 si 6%, avand media de 3,5%. Cu cat laptele provine de la un numar mai mare de vaci, cu atat cantitatea de grasime varieaza mai putin, iar pentru laptele de colectura, grasimea este aproape constanta.Pe specii, media % de grasime este urmatoarea: bivolita 8, oaie 7.5, capra 3.5, iapa1.0, magarita 1.1.In reteaua comerciala, laptele de consum poate contine: 1.5 0.1%; 1.8 0.1%; 2.5 0.1%; 3.0 0.1%; 3.5 0.1%grasime.

In urma determinarii continutului de grasime din lapte, pot rezulta doua categorii de situatii anormale:continut de grasime sub limita normala (standardizata).In acest caz poate fi vorba de adaos de apa sau de extragere de grasime;continut de grasime excesiv (nejustificat) de mare. In acest caz poate fi vorba de mai multe situatii:lapte incorect omogenizat, recoltat din stratul gras superior al recipientului;lapte colostral;adaos de grasimi straine, animale (lapte de oaie sau de capra) sau vegetale.

Proiect realizat de:Trifan Razvan-AlexandruAn: I IPA