1. Caracteristica generala a spirochetelor, clasificarea si rolul lor in patologia uman Spirochetele bacterii helicoidale, flexibile i mobile (fibrile interne), rspndite n natur, comensale ale mucoaselor umane. Familii : Spirochaetaceae, Leptospiraceae

2. MICROBIOLOGIA I DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL SIFILISULUI Familia Spirochaetaceae Genul Treponema Specii : - T.pallidum (patogen)

subspecii (variante): T.pallidum pallidum (agentul sifilisului) T.pallidum endemicum (agentul bejelului, sifilis endemic nevenerian leziuni cutanate) T.pallidum carateum (agentul pintei/carate, nevenerian, America Central i de Sud)

T. pertenue (agentul pianului, maladie cutanat, nevenerian, zone tropicale i subtropicale)Treponeme comensale-Orale (T.denticola, T.orale, etc) -Genitale (T.phagedenis, T.refringens, etc)

CARACTERE MORFOLOGICE I TINCTORIALE T.pallidum bacterie fin, helicoidal, cu 8-14 spire regulate i capetele ascuite, mobil cu micri de flexie, nurubare i translaie. Gram -. Evidenierea :

- preparate native (microscopul cu fond negru, contrast de faz) - Nu se coloreaz dup Gram - Romanovsky-Giemsa roz-pal - Impregnare cu sruri de argint (filamente negre-brune pe fondul galben) - Frotiuri Burri necolorate pe fondul negru

CARACTERE DE CULTUR Cultivarea T.pallidum in vitro imposibil Pasaje succesive n testicule de iepure (tulpina Nichols de T.pallidum).

Suspensii de astfel de treponeme supravieuiesc 72 ore n mediul Mayer- Nelson (la 25 grade n anaerobioz).

STRUCTURA ANTIGENIC Haptene lipidice (antigen cardiolipinic / cardiolipin, Ag nespecific) fosfolipid prezent la treponeme patogene i esuturi ale mamiferelor (extras din cord bovin)

Antigen proteic, de grup, comun treponemelor patogene i nepatogene (obinut din tulpina Reiter a T. phagedenis) Peptide i glicopeptide din membrana extern, specifice T.pallidum (obinute din tulpina Nichols a T.pallidum

FACTORI DE PATOGENITATE :Factori de adeziuneFactori de invazie( hialuronidaza)Factori de sensibilizareEndotoxinaSupresia rspunsului imun celular n stadiile iniiale ale bolii

In 11 luni ale anuluiu 2009 au fost nregistrate 2164 cazuri de sifilis, inclusiv 87 cazuri la copii, comparativ cu 2201 cazuri, inclusiv 89 cazuri la copii n anul 2008. n 2 luni ale anului 2010 s-au nregistrat 394 cazuri de sifilis (2 luni 2009 400 cazuri) i 238 cazuri de gonoree acut i cronic (2 luni 2009 300 cazuri), inclusiv 11 i respectiv 10 cazuri la copii pn la 17 ani

PATOGENEZA SIFILISULUI Sursa de infecie omul bolnav Caile de transmitere:

1.Contact direct (sexual, srut) 2.Contact indirect (obiecte, instrumente chirurgicale recent contaminate, transfuzii de snge, etc.) 3.Transplacentar (vertical)

Poarta de intrare tegumentul lezat, mucoasa genital, bucal, anal Perioada de incubaie 2-6 sptmni Evolutie sifilisului:

Sifilisul primar (4-6 sptmni) la poarta de intrare apare ancrul sifilitic: ulceraie cu baza indurat, nedureros, bogat n treponeme (99% localizare genital i anal, 1% - bucal). -Adenopatie satelit -Vindecare spontan a ancrului (imunitatea

Sifilisul secundar (urmare a diseminrii sangvine) dup 6-8 spt. de evoluie - Manifestri cutanate (rozeole, sifilide erozive,etc) - Manifestri mucoase (plci mucoase) - Poliadenopatie - Leziuni ale organelor interne (hepatite, nefrite, periostite, meningite, etc) - Rspunsul imun poate duce la dispariia leziunilor n 1-3 luni

Sifilisul latent (treponemele persist n ganglioni limfatici i splin) - Lipsa semnelor clinice - Necontagios - Posibile recidive Sifilisul teriar (dup 4-30 ani de la contaminare) - Afeciuni cardio-vasculare (aortite, anevrisme) - Afeciuni neurologice (tabes, paralizie general) - Afeciuni osoase i cutanate (gome) - Deces posibil

Sifilisul congenital - n timpul graviditii moartea ftului prin afeciuni poliviscerale - La finele graviditii sau la natere leziuni tardive (dentare, osoase, oculare) Imunitatea (nesteril) - Umoral - Celular (protectoare, deprimat n sifilisul primar i secundar) DIAGNOSTICUL DE LABORATOR Prelevate: serozitatea din leziunile primare sau secundare, puncii din ganglioni limfatici, serul sangvin, LCR Metode de diagnostic1.Examenul microscopic -Microscopia pe fond negru, contrast faz -RIF -Impregnare argentic, coloraia Giemsa

Examenul serologic (sifilis secundar, teriar) I Reacii nespecifice (cu Ag cardiolipinice) -Reacia VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) - reacie de precipitare Ieftin, facil, specificitate redus Reacii fals pozitive: viroze, colagenoze, paludism, ciroze, reumatism, graviditate, etc. -RFC (Wassermann)

Reacii specifice (cu Ag treponemice) -RFC Wassermann sau Kolmer -RHAI (Ag lizat din tulpina Nichols fixat pe hematii) -RIFI (Ag suspensie de T.pallidum fixat pe lam) -RIT (testul Nelson) (Ag tulpina Nichols a T.pallidum) -RIE (ELISA) -PCR (detectarea ADN) n LCR, lichidul amniotic, tesut

MICROBIOLOGIA I DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL LEPTOSPIROZELOR Leptospirele sunt bacterii care pot infecta numeroase specii de animale (n special vertebrate) i accidental omul. Clasificare Familia Leptospiraceae Genul Leptospira Spp. L.interrogans (patogen pentru om i animale)

L.biflexa (saprofit, ape de suprafa) L.parva (saprofit, apa de conduct)

CARACTERE MORFOBIOLOGICE Caractere morfologice bacterii fine i spiralate, cu 10-30 spire strnse i regulate, cu capetele ndoite n crlig (aspect de S, C, ?).

Realizeaz micri de nurubare, flexie i translaie. Pot fi examinate la microscopul cu fond negru sau cu contrast de faz. Coloraia Giemsa roz-pal

CARACTERE MORFOBIOLOGICE Caractere de cultura -Medii lichide cu sruri anorganice tamponate cu fosfai i mbogite cu ser de iepure (mediile Korthof, Stuart), medii semisintetice -Aerobioz -28-30 grade C Leptospirele se multiplic n 3-10 zile (pn la o lun) fr a tulbura mediu

CARACTERE MORFOBIOLOGICE Structura antigenic a L.interrogans 1. Antigene cu specificitate de gen, LPZ 2. Antigene majore de grup (peste 20 serogrupuri) Ex.: L.icterohaemorrhagia, grippotyphosa, hebdomadis, canicola, pomona, autumnalis, etc. 2. Antigene minore de tip (peste 200 serotipuri/variante) proteice

PATOGENEZA LEPTOSPIROZELOR Sursa de infecie: roztoarele slbatice, accidental-roztoarele peridomestice sau animalele domestice (porci, cini, cai, bovine) tubii contori proximali renali Poarta de intrare: tegument i mucoase Caile de transmitere

- Alimentar (alimente i apa contaminat) - Contact direct cu animalele infectate - Contact indirect (cu apa contaminat

Leptospirele sunt antrenate n circulaia sangvin fr leziuni la poarta de intrare Incubaia 1-2 sptmni (10 zile) Evoluia leptospirozelor: 1. Faza septicemic (generalizat) 7 zile - febr, frison, sindrom meningeal 2. Faza afebril (1-3 zile) 3. Faza organic (febr, sindrom meningeal, sindrom hepato-renal, sindrom cardio-vascular-hemoragic, icter) Imunitatea: umoral, specific de tip, durabil

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR Prelevate: snge, LCR (prima sptmn), urin (din sptmna II de boal), probe necroptice (seciuni histologice renale, hepatice) Metode de diagnostic

- Examenul microscopic (fond negru, contrast de faz, coloraia Giemsa sau impregnaia argentic a seciunilor histologice), RIF

-Examenul bacteriologic Probele sunt nsmnate n cte 3-5 tuburi cu mediu de cultur, incubate n aerobioz la 28 grade pn la 1-3 luni. Identificarea n baza caracterelor: -Microscopice -De cultur -De patogenitate -Serologice (RFC, RAL)

-Examenul biologic (inocularea intraperitoneal la cobai). Peste 1-3 zile leptospirele pot fi depistate n exsudatul din cavitatea abdominal. -Tehnici PCR (detectarea ADN) -Diagnocticul serologic (din spt. II) 1.Reacii cu specificitate de gen (RFC, RHAI, RIFI, ELISA) 2.Reacii cu specificitate de tip (de referin)-RAL (Reacia de aglutinare-liz)

Titrul diagnostic - 1/400 sau cretrea n dinamic de 4 ori TRATAMENT I PROFILAXIE Tratament: penicilin, tetraciclin, gama-globulina antileptospiroas

Profilaxie: deratizarea, igiena i protecia muncii, supravegherea bazinelor de ap, vaccinarea selectiv (vaccin inactivat, durata imunitii-1 an)

MICROBIOLOGIA I DIAGNOCTICUL DE LABORATOR AL BORRELIOZELOR ClasificareaFamilia Spirochaetaceae Genul Borrelia Specii

- B.recurrentis (transmis prin pduchi) - B.duttoni, B.hispanica, B.persica, B.burgdorferi, etc (transmise prin cpue) 10

CARACTERE MORFOBIOLOGICE Morfologia: filamente spiralate cu 5-8 spire neregulate, flexibile i mobile, cu micri de flexie i nurubare. Gram-, colorate n albastru-violet dup Giemsa. Caractere de cultur: bacterii anaerobe, cultiv in vitro pe medii complexe i in vivo (ou embrionat, artropode, animale de laborator)

Structura antigenic: variabilitate pronunat Habitat - Omul bolnav n snge i esuturi infectate - Roztoare - Vectori (pduchi, cpue) n lichidul celomicFebra recurent epidemic Agentul cauzal - B.recurrentis Sursa de infecie omul bolnav Vector - Pediculus humanus Contaminare prin lichidul celomic eliberat la zdrobirea pduchilor Poarta de intrare tegumentul lezat, conjunctiva

Febra recurent endemic Agenii cauzali - B.hispanica, B.persica, B.duttoni, etc Sursa de infecie roztoarele slbatice sau peridomestice Vectori cpue din genul Ornithodoros Contaminare prin nep- tur, prin intermediul lichidului coxal, prin dejecii anale PATOGENEZA FEBREI RECURENTE

Perioada de incubaie 3-14 zile (borreliile se multiplic n viscere ficat, splin, creier, etc.) Perioada febril debut brutal, cu febr 40-41 grade i frison (endotoxina eliberat n snge la distrugerea borreliilor). Algii difuze, stare de tifos, semne meningeale, hepato-splenomegalie, icter. Criza febril dureaz 7 zile. Urmeaz o perioad afebril de o sptmn, succedat de alt criz termic cu durat mai scurt Accesele se repet (2-4-10 recurene)

Sub aciunea anticorpilor bactericizi formai la sfritul acceselor febrile se selecteaz varianta antigenic responsabil de urmtorul acces. Febra recurent endemic are o evoluie mai benign

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL FEBREI RECURENTE Prelevate: snge, LCR Metode de diagnostic:

1. Examenul microscopic (n perioada febril): - preparate native (fond negru, contrast de faz) -Frotiuri colorate Giemsa -RIF

2. Examenul biologic (infectarea cobailor, obolanilor)

TRATAMENTUL I PROFILAXIA FEBREI RECURENTE Tratament: peniciline, tetracicline, cloramfenicol

Profilaxie: lupta contra vectorilor i protecia individual 21.09.2010 12 BOALA LYME

Agentul cauzal Borrelia burgdorferi (B.burgdorferi sensu stricto, B.afzelii, B.garinii) Caractere morfoculturale bacterie helicoidal, mobil prin micri de flexie i rotaie. Nu se coloreaz prin metoda Gram.

Se cultiv lent (cteva sptmni) numai pe medii speciale HABITAT I CONTAMINARE Rezervor de infecie: roztoare, animale domestice (cini, cai, etc), psri. Vectori: cpue din genurile Ixodes i Amblyomma, nari, tuni Contaminare: prin nep-

tura vectorului infectat

EVOLUIA BOLII LYME Incubaie 2-4 sptmni

I Faza primar (leziune cutanat eritemul cronic migrator). Durata 3-4 sptmni

Faza secundar durata 2-6 sptmni manifestri neurologice, cardiace, cutanate, artralgii Faza teriar dureaz luni, ani afeciuni cronice cutanate (acrodermatit cronic atrofiant), articulare (artrite cronice), neurologice (encefalomielite)

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL BOLII LYME Prelevate: biopsii cutanate, snge, LCR, lichid synovial.Metode de diagnostic1.Examenul microscopic (preparate native, coloraia special a biopsiilor, impregnare argentic)

Examenul bacteriologic 3.Diagnosticul serologic (RIFI, ELISA, Western-blot) 4.PCR

Tratament peniciline, tetracicline Profilaxie informarea populaiei, extragerea cpuelor