stagiu microbiologie

download stagiu microbiologie

of 93

  • date post

    20-Jul-2015
  • Category

    Documents

  • view

    206
  • download

    0

Embed Size (px)

Transcript of stagiu microbiologie

LOGICA LABORATORULUI DE MICROBIOLOGIE CLINIC

care trebuie s ofere ct mai rapid i precis informaiile necesare pentru decizia clinic la un pacient cu boal infecioas.

Microbiologia clinic: disciplin a medicinei de laborator,

MICROBIOLOGIA CLINICDisciplin a microbiologiei aplicate

Ofer semne paraclinice importante pentru diagnosticul etiologic al bolilor infecioase intete terapia antimicrobian cnd este posibil i necesar Monitorizeaz eficient terapia antimicrobian INSTRUMENT DE LUCRU AL CLINICIANULUI

Pacientul ntreab:

M vindec? Nu mor? Nu rmn nenorocit? Membrii familiei sunt la adpost de aceast boal? Ct m cost?

Organele decizionale ntreab: ct ne cost? Direct: diagnostic, terapie, spitalizare, combatere, profilaxie Indirect : zilele de munc pierdute

Microbiologul face observaii i msurtori expuse variaiilor i erorilor: Biologice Analitice Pre-analitice Post-analitice

Variaii, erori n microbiologia clinic

Variaii biologice

Variaii interindividuale - legate de vrst

Variaii intraindividuale legate de alterarea temporar sau definitiv a mecanismelor de eliminare microbiancolonizri microbiene ale traheei la pacieni cu disfuncii ale filtrului aerodinamic sau/i ale transportului muco-ciliar etc.

variaia titrului semnificativ al ASLO de la copilul mic la adolescent i adult; variaii ale microbiotei vaginale la diferite vrste; colonizarea cu bacili gram-negativi a oro-faringelui la vrstnici .a.

Variaii preanalitice

fiziologice

Variaii analitice

prelevarea probelor (alegerea produsului, momentul recoltei, modul de recoltare), etichetarea, conservarea i transportul lor la laborator, ntocmirea cererii de analiz. materialul utilizat (medii de cultur, reactivi, instrumente, aparate) tehnica de lucru performanele individuale ale personalului implicat ntre momentul obinerii rezultatului de laborator i nsuirea acestuia de ctre medic erori de transcriere a datelor.

diureza terapia antimicrobian

Variaii post-analitice

Standardizarea i controlul de calitate n microbiologia clinic Controlul variaiilor preanalitice

norme pentru alegerea, recoltarea i transportul probelor standarde de calitate a probelor acceptate pentru examinare atitudinea fa de probele neadecvate

Controlul variaiilor analitice

controlul de calitate al reactivilor controlul performanelor aparaturii de laborator

Controlul variaiilor post-analitice

sistem de nregistrare i comunicare a rezultatelor care reduce la minimum numrul transcrierilor i permite controlul lor n orice moment

Exist diferene ntre metodele de diagnostic al bolilor infecioase determinate de: Microorganisme patogene (clasice sau emergente) Microorganisme condiionat patogene/oportuniste Sindroame polietiologice Emergena i amplificarea rezistenei la antibiotice

Exigenele microbiologiei clinice (actuale/clasice) Metode performante: eficacitate vs. eficien, precizie Flux informaional controlat ntre clinic i laborator Norme i standarde

Performanele testelor de laboratorRezultatele testului Prezena bolii Prezent Absent Totaluri

Pozitiv (anormal)Negativ (normal) Totaluri

Real pozitiv (RP)Fals negativ (FN) RP + FN (total cu boal)

Fals pozitiv (FP)Real negativ (RN) FP + RN (total fr boal)

RP + FPFN + RN RP + FP + RN + RN =N (total observaii)

Sn = RP/ RP + FN Sp = RN/ FP + RN

PP = RP/ RP + FP PN = RN/ FN + RN Ef = RP + RN/ N Pr = RP + FN/ N

Examinri repetate i asocieri de teste

Regula crede pozitivul

suficient un singur rezultat pozitiv din serie ori din asociere crete sensibilitatea investigaiei scade specificitatea

Regula crede negativul

necesar pozitivitatea tuturor testelor din serie sau din asociere scade sensibilitatea crete specificitatea

Controlul erorilor n microbiologia clinic controlm fluxul informaional clinic-laborator; alegem teste performante; standardizm i controlm calitatea activitii; utilizm criterii obiective pentru interpretarea rezultatelor; supervizm activitatea i pregtirea continu a personalului; asigurm comunicarea clar a rezultatelor; atragem clinicianul n programul controlului de calitate al investigaiei microbiologice.

Circuitul informaional ntre medic i laborator. Subcircuite feed-back asigur o operaie corect.

Hemocultura

Definiii Hemocultura punerea n condiii de cultivare a unei probe de snge urmrete izolarea i identificarea rapid a bacteriilor sau fungilor antrenai de curentul circulator n anumite condiii patologice

Bacteriemie pasaj tranzitoriu prin snge al bacteriilor, benign, fr expresie clinic sau doar cu o scurt ascensiune termic Septicemie ptrundere repetat sau continu cu multiplicarea bacteriilor n snge, acompaniat de sindrom infecios grav

Consideraii fiziopatologice Curentul circulator se debaraseaz rapid de microorganismele ptrunse ocazional n snge. n hemocultur pot crete: Bacteriile de contaminare prin defect de prelevare Microorganisme surprinse ocazional n circulaie n condiii diverse:

Bacterii antrenate constant n snge n

efracii cutaneo-mucoase (cateterizri, drenaje, extracii dentare, detartraj, chiuretajul pungilor parodontale), obstruciile cilor biliare sau urinare, supuraii profunde etc. n majoritatea cazurilor episoadele sunt trectoare, fr urmri. Dar la pacienii cu leziuni endocardice (valvulopatii, ancorarea electrozilor stimulatorului cardiac etc.) sunt condiii de risc pentru endocardite infecioase.

endocarditele infecioase, febrele enterice, infecii cu serotipul b (invaziv) de Haemophilus influenzae, bruceloz, frecvent n pneumoniile lobare acute, meningite. Pot evolua cu localizri metastatice septice

Microorganisme izolate de la pacieni cu bacteriemie (Diekema et al, 1999) Enterobacteriaceae Escherichia coli..............................1751 cazuri Klebsiella spp..................765 Enterobacter spp.............................399 Serratia spp..136 Proteus mirabilis122 Salmonella, toate serotipurile..93 Citrobacter spp.76 complex Enterobacter agglomerans..44 Morganella morganii..................26 Staphylococcus aureus.2151 Stafilococi coagulazo-negativi1256 Enterococcus spp.794 Streptococcus pneumoniae...475 Pseudomonas aeruginosa451 Streptococi beta-hemolitici307 Acinetobacter spp.206 Streptococi viridans154 Stenotrophomonas maltophilia69 Haemophilus spp.27 Corynebacterium spp..20

Alte microorganisme

Necesar Set de transfer steril Medii de cultur condiionate n flacoane cu presiune negativ Sisteme de prelucrare manual i citire vizual Sisteme automatizate Sisteme de centrifugare liz pentru detectarea micobacteriilor i altor bacterii intracelulare

Bucat de muama 40/40 cm Soluii decontaminante:spun lichid, un antiseptic din seria etanol sau propanol de 70, iodofori sau clorhexidin. ! ALCOOL IODAT 2% ! ETER (precauii) ndeprteaz iodul las epiderma uscat

Tampoane sterile din tifon Garou

Procedura

Momentul prelevrii

Schimbul de informaii ntre clinician i microbiolog Numrul probelor Cantitateaobligatoriu 2 hemoculturi, din vene periferice diferite mai mult de 3 probe sunt cheltuial inutil La adult - cca 10 ml snge La copilul mic - 1-2 ml snge

Neselectiv, cnd bacteriemia este continu n faza de frison sau ascensiune termic - descrcri bacteriene discontinui naintea terapiei antimicrobiene

Prelevarea

Utilizeaz medii de hemocultur prenclzite la 37C. Lucreaz la adpost de cureni de aer. Plaseaz pacientul n decubitus dorsal cu bucata de muama sub cot, n zona de puncie Decontamineaz-i minile prin splare de tip medical i usuc-le cu hrtie de unic folosin Aplic garoul pentru a repera vizual i prin palpare vena pentru puncie D drumul la garou Antiseptizeaz-i degetele cu alcool iodat 2% sau alt antiseptic din gama betadin ori clorhexidin Decontamineaz larg, concentric zona de puncie, nti prin splare cu ap i spun lichid, apoi prin badijonare cu unul din antisepticele precizate mai sus. Dup cca 1 minut, badijoneaz zona, tot concentric, cu tampon nmuiat n eter (precauii), pentru a lsa tegumentul uscat. O antiseptizare a tegumentului realizat superficial sau puncia prin tegument umed cresc riscul contaminrii hemoculturilor. Dezinfecteaz cu grij dopul de cauciuc al flacoanelor cu medii de cultur ce urmeaz a fi nsmnate. Puncioneaz vena Agit blnd flaconul pentru omogenizarea sngelui n masa mediului de cultur. Asigur, n cel mai scurt timp, transportul flacoanelor fiecrei hemoculturi la laborator, fr refrigerare.

Criterii de calitate a hemoculturilor1. Prelevarea naintea terapiei antimicrobiene sau, dac nu este posibil, naintea dozei subsecvente de antibiotic. Precizarea antibioticului utilizat. 2. Puncionarea altei vene la fiecare hemocultur. 3. Evitarea prelevrilor prin cateter intravascular. 4. Expedierea imediat la laborator sau, dac nu este posibil, incubarea flacoanelor la 37C pn n momentul expedierii. 5. Izolarea aceleiai bacterii n mai multe flacoane.

Specificaii fcute n cererea de analiz diagnosticul clinic ora recoltrii n caz de tratament antimicrobian, antibioticul i ora ultimei administrri nainte de prelevare dac prelevarea a fost fcut n cursul frisonului sau puseului febril

Interpretarea rezultatelor Argumente de competena microbiologului:

Izolarea aceleiai bacterii (specie, antibiovar etc.) n mai multe hemoculturi din vene diferite, are semnificaie clinic. Izolarea de bacterii diferite din flacoanele hemoculturilor de la acelai pacient indic o contaminare. Hemocultura cantitativ argumenteaz mai convingtor semnificaia clinic a izolatelor condiionat sau accidental patogene i este indicat cnd decontaminarea tegumentului pentru puncie este dificil. Prezena unor structuri bacteriene implicate n patog