LP 1 FIZIOLOGIE – ANUL II M.G. SEMESTRUL I

DETERMINAREA HEMATOCRITULUI SI A VOLUMULUI DE SANGE

DETERMINAREA HEMATOCRITULUI

Hematocritul = reprezintă exprimarea procentuală a raportului dintre volumul plasmei si cel al elementelor figurate

- metoda de determinare se bazează pe faptul ca datorită greutății lor, elementele figurate celulare se separa prin centrifugare de plasma sanguina- cum volumul leucocitelor si trombocitelor constituie < 1% din volumul total al elementelor figurate, el poate fi considerat ca fiind neglijabil, notiunea practica de hematocrit referindu-se, in special la volumul globulelor rosii.

Materiale necesare- seringa cu ac sterila- vata- alcool sanitar- garou- tuburi capilare gradate pentru hematocrit (L=50 mm, diametru interior = 0,5 mm)

divizate in 100 parti egale- heparina CU ROL ANTICOAGULANT !!!!- capsula de plastic- bagheta de sticla- centrifuga

Tehnica de lucru- in seringa se aspira heparina, iar o picatura se depune pe capsula de plastic (capsula de plastic se mentine la 37 0 C pana se usuca complet heparina)- tehnica se efectueaza dimineata, pe nemancate- se recolteaza 2- 3 ml de sange prin venopunctie, cu staza minima si cu respectarea regulilor de asepsie si antisepsie- sangele recoltat se pune in capsula de plastic, peste heparina uscata- se agita continutul cu bagheta de sticla- un capat al tubului capilar de hematocrit se introduce in capsula de sticla si sangele va urca prin capilaritate - un capat al tubului se inchide la becul de gaz- tubul se fixeaza in centrifuga si se centrifugheaza timp de 5 min la 3000 rot/ min- se citeste diviziunea la care se afla nivelul rosu al elementelor figurate = procentul de globule continute in sangele de cercetat- valoarea hematocritului se calculeaza dupa formula:

Ht = (h / H ) x 100 unde h = inaltimea coloanei de hematii H= inaltimea coloanei totale introduse in tub

Important:- valoarea hematocritului obtinut din sangele venos trebuie corectata in raport cu 2 factori de corectie:

1. pentru plasma incatusata = vol de plasma care se gaseste prins intre hematii, chiar la sfarsitul centrifugarii (din timpul determinarii hematocritului)

- reprezinta aproximativ 4% din volumul globular- trebuie corectata cu in factor de corectie = 0,96%

2. pentru hematocritul somatic = raportul dintre vol globular total din corp fata de volumul sanguin - se gaseste in raport constant cu hematocritul venos care este cu 9% mai mare - acest raport are o valoare de 0,91% (al II lea factor de corectie)

Valori normale:- barbati – 44- 46%- femei – 41- 43%- copil – 54%

variatii fiziologice:- varsta - Nou Nascut 56% - 1 an 32% - 4 ani 37% - 12 ani 40% - varstnici mai scazut fata de adulti- in functie de locul de unde s-a recoltat sangele: - arterial 40% - venos 47% - capilar 44% - capilar splenic 70%- creste- in efortul fizic (iese din interstitii) - la altitudine (poliglobulie) - stress (mobilizarea sangelui de rezerva)- scade- sarcina prin hemodilutie

Variatii patologice:- scade- anemii- creste- poliglobulii

Importanta determinarii:- aprecierea cantitativa a leucocitelor si trombocitelor- aprecierea aspectului plasmei- determinarea starii de anemie, policitemie- calcularea constantelor si indicilor eritrocitari

DETERMINAREA VOLUMULUI SANGUIN

Definitie = cantitatea totala de sange din organism (suspensie de celule intr-un lichid)- volumul sanguin este format din- volumul globular - volumul plasmatic

Principiul metodei = principiul dilutiei (un volum necunoscut de lichid poate fi masurat daca se dilueaza in el o cantitate cunoscuta dintr-o substanta usor de determinat denumita TRASOR sau INDICATOR Conditii ce trebuiesc indeplinite de indicator:

- sa se distribuie uniform in compartimentul pe care vrem sa-l determinam- sa nu fie toxic- sa nu fie metabolizat de organism- sa nu provoace hemoliza- sa nu traverseze peretii endoteliului- sa nu dea reactii chimice sau de culoare cu constituentii din sange- sa se elimine din organism- sa fie usor de dozat si identificat

Tipuri de indicatori folositi:- pentru vol plasmatic- macromolecule de PVP (polivinilpirolidona)

- coloranti- albastru Evans, rosu Congo - albumina serica marcata cu iod radioactiv (I131)- pentru vol globular- metale marcate radioactive care se fixeaza selectiv pe elementele celulare (Fe55, Fe19, Cr51, P32)

DETERMINAREA VOLUMULUI PLASMATIC CU ALBASTRU EVANS

Materiale necesare- seringi cu ace sterile- vata- alcool sanitar- garou- centrifuga- anticoagulant- solutie de albastru Evans 0,2%- apa distilata

Tehnica de lucru- cu 24 ore inainte de determinare pacientul este sfatuit sa manance fara grasimi (lipemia

crescuta falsifica rezultatele), iar timp de 12 ore sa nu manance nimic- pe parcursul efectuarii probei, cat si inainte sa se afle in repaus absolut, comfort termic- se punctioneaza o vene de la plica cotului- se recolteaza 10 ml sange venos- o parte din sange este folosit pentru determinarea hematocritului venos- alta parte din sange se centrifugheaza pentru a obtine plasma martor- pe acelasi ac se injecteaza 3 ml de solutie albastru Evans- la trei minute de la terminarea injectarii indicatorului se recolteaza de la celalat brat 10 ml

prin punctie venoasa- acest esantion se centrifugheaza pentru a obtine un esantion de plasma de cercetat- se determina la spectrofotometru sau fotometru densitatea optica pentru cele doua

esantioane de plasma (martor si de cercetat)- infunctie de curba de etalonare se poate determina concentratia indicatorului

corespunzatoare fiecarei valori a densitatii optice citite la spectrofotometru (pentru proba martor si cea de cercetat)

- se calculeaza cu ajutorul formulelor – volumul plasmatic - volumul globular - volumul sanguin total

Formule de calcul

Volumul plasmatic = concentratia probei martor / concentratia probei de cercetat

Volumul sanguin total = (volumul plasmatic x 100) / (100- Ht somatic)

Ht somatic = Ht venos x 0,91 (factorul de corectie = 0,91)

Volumul globular = volumul sanguin total – volumul plasmatic

Valori normale- volumul sanguin total- 4-5 litri (6- 8% din G corp)- volumul plasmatic- 2,4- 3 litri (4- 4,5% din G corp)

variatii fiziologice1. varsta- NN mai mare - varstnici- scade

2. sex- > la barbati3. greutate corp- creste proportional cu masa musculara4. stare fiziologica- creste la gravide - efort fizic - sportivi