Post on 04-Apr-2018
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 1/61
Hemostaza si fibrinoliza
Lucrarea Practica nr. 3
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 2/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina
• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatiafactorului V Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 3/61
Cascada Coagulării
Slide 25
Calea comună TF(III)-VIIa
PL
XIIIa
XIII
Trombina (IIa)
PolimeriFibrină Fibrinogen (I)
Monomeri Fibrina (Ia)
Protrombina (II)
XaVa
PL, Ca2+
X
Calea extrinsecă
XI
XIa
Calea intrinsecă
HMW
Kininogen
IX
IXaVIIIa
PL, Ca2+
Ca2+
XIIa
Colagen
Prekalicreina
XII
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 4/61
Inhibitorii procesului de coagulare
• Antitrombina formează complexe cutoţi factorii coagulării serin-proteazici,
cu excepţia FVII. Viteza de formare a
complexelor este crescută sub
efectul heparinei şi al moleculelor cu acţiune heparin-like de pe suprafaţa
celulelor endoteliale.
• Proteina C este transformată în
enzimă activă de către trombină,
după fixarea trombinei la nivelul unei
proteine endoteliale(trombomodulină). Proteina C
activată inactivează consecutiv
cofactorii plasmatici V şi VIII (prin
proteoliză limitată). Funcţia
inhibitoare a proteinei C esteamplificată de roteina S .
Proteina Cactivata
V,VIII
-
Proteina C
Proteina S
TM + trombina
Trombina
Trombina +Antitrombina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 5/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteina C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatiafactorului V Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina
• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 6/61
ANTITROMBINA
• Antitrombina este o proteina anticoagulanta
• Deficienta de antitrombina conduce la unstatus hipercoagulant si risc de TV
• Deficienta dobandita este mult maifrecventa comparativ cu deficienta ereditara
de antitrombina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 7/61
ANTITROMBINA
• Recoltare:
– Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai
rapid posibil;• Valori normale:
– 80 – 130%;
– 17-39 mg/dl;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 8/61
ANTITROMBINA
• Metodologie:
– Metoda functionala: se adauga heparina +trombina + substrat cromogenic
– Metoda imunologica: determinarea cantitativa aantitrombinei cu ajutorul anticorpilor impotriva
antitrombinei
Heparina
+
Trombina
Antitrombina+
- Substratcromogenic
SPECTROFOTOMETRIE
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 9/61
ANTITROMBINA
DEFICIT DE ANTITROMBINA(0,17%)
Test functional
+ - Alte cauze
Test imunologic
Deficit cantitativ(tip I)
0,02%
Deficit caliativ(tip II)
0,15%
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 10/61
ANTITROMBINA
• Deficienta dobandita este intalnita in:
scarderea sintezei hepatice, tratament cu L-asparaginaza, consum (tromboza, CID),cresterea clearenceului hepatic (doze mari deheparina), proteinurie, nivele crescute deestrogen (sarcina).
• Deficienta ereditara:
– Heterozigoti au nivele AT = 45-75%, riscul detromboza de 5 ori mai mare;
– Homozigotii – incompatibile cu viata (exceptiemutatiile “heparin-binding” care au nivele normale
ale antitrombinei dar activitate mai scazuta(deficienta tip II).
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 11/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina
• Proteina C• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factorului VLeiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina
• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 12/61
Inhibitorii procesului de coagulare
Proteina C este transformată în
enzimă activă de către trombină,
după fixarea trombinei la nivelul uneiproteine endoteliale
(trombomodulină). Proteina C
activată inactivează consecutiv
cofactorii plasmatici V şi VIII (prin
proteoliză limitată). Funcţia
inhibitoare a proteinei C este
amplificată de proteina S .
Proteina Cactivata
V,VIII
-
Proteina CProteina S
TM + trombina
Trombina
Trombina +Antitrombina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 13/61
PROTEINA C
• Proteina C este natural anticoagulanta
• Deficienta de Proteina C conduce la un status
hipercoagulant si risc de TV• Deficienta dobandita este mult mai frecventa
comparativ cu deficienta ereditara de
antitrombina si creste riscul de tromboza de 7ori
! ! ! Nivelele Proteinei C sunt scazute de catre
WARFARINA (Coumadin)
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 14/61
PROTEINA C
• Recoltare:
– Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru:
– maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai
rapid posibil;
• Valori normale:
– 70 – 140%
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 15/61
PROTEINA C
• Metoda functionala (colorimetrica):Proteina C este activata prin adaugarea unui venin
de sarpe specific;
• Metoda imunologica: – ELISA;
– Detecteaza doar deficitele tip I;
Proteina C
+
Veninsarpe
Substrat cromogenic Spectrofotometrie
!!! Se efectueaza la 10 zile de la intreruperea tratamentului cu Warfarina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 16/61
PROTEINA C
• Deficienta dobandita este intalnita in: scardereasintezei hepatice, tratament cu L-asparaginaza,consum (tromboza, CID), deficit de vitamina K sautratament cu Warfarina, prezenta de autoanticorpi.
!!! Una din primele proteine care scad in disfunctiahepatica (T1/2 = 6-8 ore)
• Deficienta ereditara:
– Heterozigoti au nivele protein C = 35-65%, risculde tromboza de 7 ori mai mare;
– Homozigotii – rare, fatale daca sunt netratate(purpura fulminans sau CID in perioada
neonatala)
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 17/61
EXPORAREA TROMBOZEI SIFIBRINOLIZEI
• Antitrombina
• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factorului VLeiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 18/61
Inhibitorii procesului de coagulare
• Proteina S este o proteina vitaminKdependenta
• este un cofactor necesar pentru
activitatea anticoagulanta a
proteinei C.
• Proteina C cu proteina S ca si
cofactor degradeaza partial factorii
V si VIII.
• 60% din proteina S totala estelegata de C4b-binding protein, fiind
inactiva.
• 40% din cantitatea de proteina S
este libera, fiind activa functional.
Proteina Cactivata
V,VIII
-
Proteina CProteina S
TM + trombina
Trombina
Trombina +Antitrombina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 19/61
PROTEINA S
• Prepararea pacientului:
– 10 zile de la intreruperea tratamentuluicu Warfarina;
– Verificat daca pacienta este insarcinata sau sub tratament
cu estrogeni;
• Recoltare: – Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai rapid posibil;
• Valori normale:
– 70 – 140%
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 20/61
PROTEINA S
• Metoda functionala: – masoara capacitatea proteinei S de a servi drept
cofactor al proteinei C de a degrada factorii V si
VIII si de a prelungi APTT sau PT.
– se realizeaza de prima intentie;
• Metoda imunologica:
– ELISA; – Doua tehnici:
• Proteina S totala;
• Proteina S libera;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 21/61
PROTEINA S
• Deficit dobandit de proteina S: – Disfunctie hepatica;
– Tratament cu L-asparaginaza;
– Deficit de vitamina K sau tratament cu
Warfarina; – Consum (tromboza, CID);
– Sarcina sau tratament cu contraceptive,estrogeni;
– Reactii de faza acuta (cresterea C4b-bindingprotein)
– Varicela, HIV;
– Sindrom nefrotic.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 22/61
PROTEINA S
• Deficite ereditare de proteina S: – 0,7% in populatia generala;
– Heterozigoti :
• Activitate a proteinei S de 20-60%;
• Tromboze cu debut intre 10 si 50 ani;
– Homozigoti :
• In perioada neonatala – purpura fulminans sau CID;
Type Test functional Proteina S libera Proteina S totala
FAA TAA
I ↓ ↓ ↓
II (IIb) ↓ n n
III (IIa) ↓ ↓ n
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 23/61
EXPORAREA TROMBOZEI SIFIBRINOLIZEI
• Antitrombina
• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatiafactorului V Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina
• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 24/61
Inhibitorii procesului de coagulare
• Activitatea anticoagulanta aproteinei C implica degradarea
proteolitica a factorilor V si VIII la
nivelul unor reziduri specifice arg,
cu inactivarea acestora;
• Factor V Leiden este o mutatie
punctiforma G1691A (Arg506Glu);
• Apare la 5% din populatia
caucaziana;
• Mai exista alte doua mutatii
activatoare ale factorului V,
cauzatoare de rezistenta la
proteina C.
Proteina Cactivata
V,VIII
-
Proteina CProteina S
TM + trombina
Trombina
Trombina +Antitrombina
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 25/61
FACTORUL V LEIDEN
• Recoltare:
– Venopunctie;
– Vacutainer: - citrat – analiza screening;
- EDTA – analiza genetica;
• Timp de lucru:
– In functie de test:
• maxim 4 ore de la colectare - screening;
• 24 ore analiza ADN;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai rapid posibil;
• Valori normale:
– PCA prelungeste APTT de doua ori la indivizii normali si < 2
la pacientii cu Factor V Leiden.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 26/61
• Metoda functionala: – Proba e diluata 1:5 cu plasma deficienta in factor V;
– Se efectueaza APTT pe proba diluata inainte si dupa
adaugarea de PCA;
– Specificitate 100%, sensibilitate 100%;
• Metoda PCR:
– Se extrage AND-ul din proba nediluata, necentrifugata;
– Se determina prezenta mutatiei prin tehnici ca PCR-RFLP,
TaqMan, etc.
– Singura care poate determina homo- sau heterozigotia;
FACTORUL V LEIDEN
Echilibrul coagulare - fibrinoliza
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 27/61
Echilibrul coagulare - fibrinoliza
Calea intrinseca
activarea la contact
Calea extrinseca
eliberare de factor tisular
VII VIIa
X XaVaCa2+ Fosfolipide
Ca2+
Protrombina(Factor II)
Factor IIa (trombina)
XIII XIIIa
Fibrinogen Fibrina
(solubila)
Fibrinopeptide A si B
Fibrina(insolubila)
Produsi de degradare aifibrinei
Inhibarea fibrinolizei
PAI-1
t-PA / u-PA
Plasminogen(suprafata fibrinei)
Plasminogen(faza fluida)
Plasmina(suprafata fibrinei)
Plasmina(faza fluida)
α - antiplasmina
FIBRINOLIZACOAGULAREA
XII XIIa
XI XIa
IX IXa
Fosfolipide
VIII
Ca2+
III
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 28/61
FIBRINOLIZA
http://www.ki.se/labmed/klinkem/f.gif
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 29/61
EXPORAREA TROMBOZEI SIFIBRINOLIZEI
• Antitrombina
• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina
• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 30/61
PLASMINOGEN
• Precursorul plasminei ce distruge trombii de fibrina;
• Plasminogenul e activat de t-PA sau u-PA;
• Plasmina degradeaza fibrinogenul si fibrina;
• Plasmina inactiveaza factorii Va si VIIIa;
• Deficienta ereditara este rara predispunand la
tromboza;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 31/61
PLASMINOGEN
• Recoltare: – Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai
rapid posibil;• Valori normale:
– 75 – 130 %;
– 6 – 14 g/dl.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 32/61
PLASMINOGEN
• Metodologie:
– Metoda functionala:
• Se adauga streptokinaza + substrat cromogenic;
– Metoda imunologica:
• Radial imunodiffusion assay;
• Determina cantitatea de plasminogen.
Steptokinaza
Plasmapacientuluicuplasminogen
+
PlasminaSubstrat
cromogenicSpectrofotometrie
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 33/61
PLASMINOGEN
• Deficienta dobandita: – Terapie trombolitica;
– Disfunctie hepatica;
– Consum (CID);
• Deficienta ereditara:
– Rara;
– Deficitul sever e asociat cu conjunctivitis lignosa:
• conjunctivita pseudomembranoasa caracterizataprin depozite masive de fibrina;
• depozitele de fibrina se datoreaza absentei sauscaderii clearence-ului fibrinei de catre
plasminogen.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 34/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 35/61
INHIBITORUL ACTIVATORULUIPLASMINOGENULUI – 1
• PAI-1 inhiba activatorul tisular al plasminogenului, t-
PA;
• Nivele crescute de PAI-1 sunt asociate cu tromboza
arteriala datorata inhibarii fibrinolizei;
• Deficitul de PAI-1 se asociaza cu sindromul
hemoragipar datorita fibrinolizei excesive;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 36/61
!!! PAI-1 prezinta ritm circadian – ridicat dimineata !!!• Recoltare:
– Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru:
– maxim 2 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mai rapid posibil
(centrifugare 2000-3000 g pentruu 15 minute);
• Valori normale:
– 4 – 40 ng/ml (metada imunologica);
– 0 – 12 unitati/ml (metoda functionala).
INHIBITORUL ACTIVATORULUIPLASMINOGENULUI – 1
INHIBITORUL ACTIVATORULUI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 37/61
• Metoda functionala:
– Plasma este adaugata unei cantitati cunoscute
de urokinaza, PAI-1 din plasma pacientului leaga
urokinaza, restul de urokinaza este inactivat prin
adaugare de plasminogen, care va fi transformat
in plasmina. Plasmina cliveaza un substrat
cromogenic – spectrofotometrie.
• Metoda imunologica:
– Anticorpi specifici;
INHIBITORUL ACTIVATORULUI
PLASMINOGENULUI – 1
INHIBITORUL ACTIVATORULUI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 38/61
• Este un reactant de faza acuta;
• Sinteza lui e stimulata de nivelele de insulina
sau glucoza;
• Creste dupa evenimente trombotice si in
sarcina;
• Nu este un test de rutina in clinica medicala;
• Poate fi determinat la pacientii cu infarct
miocardic la varste tinere.
INHIBITORUL ACTIVATORULUI
PLASMINOGENULUI – 1
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 39/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 40/61
ANTIPLASMINA
• Plasmina mediaza fibrinoliza si antiplasmina inhiba
plasmina;
• Factorul XIII activat leaga antiplasmnia la fibrina,
protejand-o de fibrinoliza;
• Antiplasmina se leaga, de asemenea de
plasminogen si il poate impiedica sa se lege lafibrina;
• Determinarea antiplasminei nu se face de rutina.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 41/61
• Recoltare: – Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mairapid posibil;
• Valori normale:
– 48 – 80 mg/dl (metada imunologica);
– 80 – 130% (metoda functionala).
ANTIPLASMINA
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 42/61
ANTIPLASMINA
• Metoda functionala:
– Plasmina in exces este adaugata peste plasma,
excesul cliveaza un substrat cromogenic,eliberandu-l si putand fi detectat prin
spectrofotometrie.
• Metoda imunologica:
– Foloseste anticorpi specifici anti-antiplasmina.
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 43/61
ANTIPLASMINA
• Deficit dobandit de antiplasmina:
– Disfunctie hepatica;
– Terapie trombolitica;
– Consum (CID)
• Deficit ereditar de antiplasmina: – Cantitativ – tip I;
– Calitativ – tip II;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 44/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteina C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
D DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 45/61
D-DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AIFIBRINEI
• Fibrinoliza este mediata de plasmina;
• Plasmina degradeaza :
– trombii de fibrina la D-dimeri si produsi de degradare aifibrinei (PDF);
– Fibrinogenul intact generand produsi de degradare ai
fibrinogenului (PDF);
• Prezenta indica:
– D-dimerilor – fibrina s-a format si a fost degradata;
– PDF – fibrina/fibrinogen sunt degradate;
D DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 46/61
• Recoltare: – Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 8 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mairapid posibil;
• Valori normale:
– D-dimeri < 0,5 micrograme/ml;
– PDF < 5 micrograme/ml;
D-DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AIFIBRINEI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 47/61
D-DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AIFIBRINEI
• Metodologie:
– Latex aglutinare – semicantitativa si cantitativa;
– ELISA - cantitativa; – SimpliRed (sange integral) - semicantitativa;
• Nu se foloseste de rutina pentru monitorizarea
terapiei trombolitice;
• Nivele ridicate de FR pot conduce la rezultate
fals pozitive;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 48/61
D-DIMERI SI PRODUSI DE DEGRADARE AIFIBRINEI
• D-dimerii si PDF sunt pozitive in:
– CID;
– Tromboza venoasa;
– Infarct miocardic; – Disfunctie hepatica (scade clearence-ul hepatic);
– Postoperator;
– Sangerare semnificativa;
– Hemodializa;
– Eclamsie;
– Cancer (grad scazut de CID cronic);
– Sarcina;
O O O S O
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 49/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 50/61
Panelul de hipercoagulare
• Rezistenta la proteina C activata si mutatiafactorului V Leiden
• Antitrombina
• Antiplasmina
• Proteina C• Proteina S
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Teste de agregare plachetara;• Timp de trombina;
• Timp de reptilaza;
• Anticorpi antifosfolipidici;
• Mutatia G20210A a protrombinei;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 51/61
Panelul de hipercoagulare
Boala Prevalenta in populatiagenerala
Prevalenta in populatiacu TV
Deficienta de
antitrombina
0,17 1-5
Deficienta de proteina C 0,14 – 0,5 3 - 9
Deficienta de proteina S 0,7 2-8
Protrombina G20210A 2 6
Hiperhomocisteinemie 5-10 10-25
Factor V Leiden 5 (Caucazieni) 20-50
Cauze ereditare
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 52/61
• Varsta inaintata;
• Boli de colagen;
• Trombocitemie indusa de heparina;
• Hiperhomocisteinemie;• Estrogen;
• Imobilizare / trauma;
• Boala Inflamatorie intestinala;
• Sindrom antifosfolipidic;
• Neoplazii;
• Sindrom nefrotic;
• Boli mieloproliferative;
• Postoperator;
• obezitate;.
Panelul de hipercoagulare
Cauze dobandite
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 53/61
• Anticorpi anti-cardiolpina: – ELISA;
– Reactioneaza incrucisat cu antigenele dinsifilis;
• Lupusul anticoagulant: – Pare sa se lege de fosfolipide impiedicand
actiunea acestora de cofactor in cascaada
coagularii;
– Doua teste screening + test mixing (daca e +) +
teste de confirmare (cu exces de fosfolipide);
– Daca LA este prezent testele de coagulare raman
prelungite dupa efectuarea mixingului.
Anticorpi antifosfolipidici
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 54/61
• Teste screening:
– APTT, timp de kaolin;
• Teste de confirmare:
– Testul de screening initial la care se adauga exces
de fosfolipide pentru saturarea anticorpilor,conducand la scurtarea timpului de coagulare
folosit.
Anticorpi antifosfolipidici
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 55/61
Anticorpi antifosfolipidici
TESTE SCREENING
alungit normal
STUDII DE MIXING
scurtareIdentificarea deficituluide factor de coagulare
nemodificat
TESTE DE CONFIRMARE (cu fosfolipide in exces)
Scurtarea timpului
de coagulare
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 56/61
• Recoltare: – Venopunctie;
– Vacutainer tub albastru (citrat);
• Timp de lucru: – maxim 4 ore de la colectare;
– Separarea plasmei de celule realizata cat mairapid posibil;
• Valori normale:
– Negativ pentru lupus anticoagulant;
– Anticorpi anticardiolipina < 15 unitati;
Anticorpi antifosfolipidici
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 57/61
Anticorpi antifosfolipidici
• Diagnosticul de sindrom antifosfolipidic – teste
pozitive la doua determinari diferite separate
de cel putin 6 saptamani.
• Anticorpii pot aparea tranzitor in:
– Sifilis (anti-cardiolipina);
– HIV; – Tratament cu medicamente (hidralazina,
phenitoina)
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 58/61
Mutatia G20210A a protrombinei
• Este o mutatie comuna care predispune la tromboza;
• Este prezenta in 2,3% din populatia generala;
• Prezenta ei este asociata cu nivele ridicate de
protrombina si risc crescut de tromboza venoasa de
2-3 ori;
• Este detectata prin tehnica PCR-RFLP (HindIII);
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 59/61
EXPORAREA TROMBOZEI SI FIBRINOLIZEI
• Antitrombina• Proteins C
• Proteina S
• Rezistenta la proteina C activata si mutatia factoruluiV Leiden
• Plasminogen
• Inhibitorul activatorului plasminogenului – 1
• Antiplasmina• D-dimeri si produsi de degradare ai fibrinei
• Panelul de hipercoagulare
• Panelul CID
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 60/61
PANELUL CID
• Timpul partial de tromboplastina activata
(APTT);
• Timpul de protrombina (PT);
• Hemograma completa;
• D-dimeri;
• Produsi de degradare ai fibrinei/fibrinogenului(PDF)
• Fibrinogen;
7/30/2019 3 Hemostaza Lp 3
http://slidepdf.com/reader/full/3-hemostaza-lp-3 61/61
• CID acut: – Cresterea D-dimeri, PDF;
– Prelungirea APTT (50% din cazuri) si PT (70% dincazuri);
– Scaderea fibrinogenului (50% din cazuri);
– Scaderea numarului de plachete;
!!! Toate aceste teste pot fi uneori normale !!!
• CID cronic: – Cresterea fibrinogenului si plachetelor;
– Scurtarea PT si APTT;
– Cresterea D-dimeri PDF;
PANELUL CID