CUPRINS
Capitolul I
Capitolul II
2
CAPITOLUL I
Datele din literatură cu privire la acţiunea unor produse biostimulatoare asupra
germinaţiei seminţelor sau asupra speciilor patogene şi saprofite care colonizează sămânţa
sunt foarte rare. Cele mai multe studii au evidenţiat acţiunea/interacţiunea patogeni –
îngrăşăminte foliare aplicate în diferite culturi legumicole.
Aplicarea îngrăşămintelor chimice (cu azot, fosfor şi potasiu) în doze moderate,
echilibrate, are o acţiune favorabilă asupra plantelor. În schimb, aplicarea unor doze mari de
azot contribuie la sensibilizarea accentuată a plantelor faţă de agenţii patogeni. De asemenea,
dozele ridicate de azot determină o creştere luxuriantă a plantelor, dezvoltarea unui foliaj
bogat, împiedicând o bună aerisire la nivelul frunzelor şi crescând umiditatea relativă la
nivelul plantei.
Insuficienţa îngrăşămintelor chimice influenţează, de asemenea, comportarea
plantelor faţă de boli. Astfel, incidenţa patogenilor Alternaria porri f. sp. solani, A. alternata
f. sp. lycopersici, A. tenuissima este explozivă când plantele sunt slab nutrite, lipsa unui singur
element nutritiv (de exemplu magneziul) determinând accentuarea gravităţii atacului pe
frunze şi fructe.
Interactiunea dintre bolile si ingrasaminte este de un mare interes practic si s-au
efectuat numeroase studii asupra interactiunii dintre ingrasamintele pe baza de azot si boala.
Aplicarea azotului peste doza recomanadata a dovedit ca determina cresterea semnificativa a
razei de actiune a bolii si a suprafetei lezate. Aceste studii s-au facut si la Magnaporthe grisea
si Blumeriaia graminis ssp. tritici si la făinarea tomatelor Oidium lycopersici.
O insuficienta a ingrasamintelor conduce la sensibilitatea plantei si avansarea bolilor.
Supraabundenta ingrasamintelor conduce la o hipersensibilitate fie aprovizioneaza excese de
ingrasamant care sunt disponibile direct pentru a sustine cresterea patogenilor. Mai puţine
studii sunt îndreptate către studierea efectului îngrăşămintelor din categoria fertlizanţi foliari
şi biostimulatori asupra creşterii şi dezvoltării agenţilor patogeni. Studiile au fost îndrepatate
către influenţa îngrăşămintelor foliare cu azot şi potasiu de tipul ureei şi sărurilor: azotat de
amoniu, sulfat de amoniu, azotat de potasiu, clorură de potasiu, sulfat de potasiu şi fosfat acid
de potasiu faţă de patogenii Alternaria solani la tomate şi Alternaria macrospora la bumbac
(Blachinski şi al., 1996).
Biostimulatorii utilizaţi în prezent în culturile ecologice au un efect stimulativ asupra
sistemului radicular, in particular. Produsul BioRootz este un biostimulator universal pentru:
3
cultivarea răsadului, legumicultură, sere, solarii, cultivarea cartofului, căpşuni, pepeni, plante
tehnice, grădinărit, gazon, cultivarea florilor etc. Acesta se aplică la nivelul solului pentru a
stimula creşterea numărului de microorganisme existente din sol, în beneficiul dezvoltării
rădăcinii.
Numărul crescut al microorganismelor provoacă o absorţie mult mai mare de nutrienţi
precum şi a îngrăşămintelor folosite în paralel. Acest lucru se poate demonstra prin diferenţa
de dezvoltare a structurii rădăcinii constatată la plantele tratate cu BioRootz, faţă de acele
plante care nu au fost tratate. Ca urmare, mediul rădăcinii este mai puţin expus la diverse boli
ale solului; mai mult, acest produs are efect inhibitor asupra mucegaiului patogen. Produsul
BioRootz elimină bolile determinate de virusuri; în cele mai multe cazuri virusul fiind
îndepărtat pentru întreg sezonul. În cazul în care virusul este depistat a fi prezent, efectele
acestuia sunt semnificativ diminuate comparativ cu situaţiile în care plantele nu sunt tratate cu
BioRootz (EcoIndustries)
Avantajele utilizării produsului BioRootz:
- Stabilizarea mediului biologic în mediu de creştere;
- Reducerea poluării organice din sistemul de scurgere;
- Creşterea capacităţii de absorţie a îngrăşămintelor şi a nutrienţilor de către plantă cu
cca 40%;
BioRootz are efecte pozitive asupra bolilor care apar în legumicultură, incluzând:
virusul X al cartofului, virusul Pepino Mosaic sau specii ale genurilor: Clavibacter, Fusarium,
Pythium, Phytophthora, Verticilium şi Botrytis. Proprietaţile acestui produs sunt enumerate în
tabelul 1.
BioRootz are rezultate semnificative în diminuarea numărului bolilor; prin efecte
pozitive, în procesul de recuperare a părţilor afectate ale plantelor şi în 99% dintre cazuri la
eliminarea răspândirii viitoare a acestor boli şi infestări. Se poate spune că acest produs
elimină în cele mai multe cazuri virusurile, îndepărtândul pentru tot sezonul. Atunci când
virusul este depistat a fi prezent, efectele acestuia sunt semnificativ diminuate comparativ cu
plantele care nu sunt tratate cu BioRootz.
În cazul ciupercilor (Fusarium spp.) acţiunea acestora este redusă (până la stopare)
întrtr-o perioadă foarte scurtă. Ciupercile atacă rădăcinile după care atacă planta în întregime.
4
BioRootz activează micorizele din sol, care pot stopa dezvoltarea speciilor de
Fusarium (distrugerea comlpetă a acestei ciuperci în numai o zi de la aplicarea tratamentului
cu BioRootz).
Produsul poate fi folosit în scop profilactic, pentru a preveni apariţia bolilor la plante.
BioRootz poate fi folosit pe întreaga cultură, de la înfiinţare acesteia şi până la recoltare.
Produsul poate fi considerat ca o asigurare a culturii, care poate fi folosită de la bun început
pentru a acoperi riscurile împotriva bolilor şi plăgilor.
Tabelul 1.1
Proprietăţile caracteristice produsului BioRootz
lichid cu aspect maro închis, miros plăcut;
acţionează rapid
asigură dezvoltarea unui sistem radicular puternic şi sănătos
uşor aplicabil pe teren, putând fi injectat în bazinele de irigat sau
stropit;ideal pentru orice tip de sol;
conţinut bogat în elemente nutritive
obţinut din materii prime organice 100% naturale;
raport calitate/preţ foarte avantajos;experienţă îndelungată în aplicarea
cu succes a acestuia în Europa
randament crescut al recoltei cu până la 30-40%încă din primul an de
aplicare.
BioRootz este alcătuit din 100% extracte şi uleiuri vegetale (tabelul 1.2). Toate
materiile prime provin dintr-un ciclu ecologic închis, produs fără agenti chimici, sintetici sau
fertilizatori.
Un alt produs, ProBalance, este un regenerator al plantei şi al rădăcinii, cu efect
antibiotic, conţinând un complex de elemente de bază din plante şi comcentrat din fructe.
ProBalance se descompune 100% în natură, astfel încât sete prietenos cu mediul. Produsul
actionează în două etape: în prima etapa se manifestă ca un dizolvant nutritiv biochimic, iar în
cea de-a doua, stimulează micro-organismele la o activitate mărită, cu ajutorul
micronutrienţilor pe care îi conţine.
5
ProBalance sustine producţia sucului alcaloid (conexiunile toxice N produse de plante,
care vatămă insectele) şi prin urmare, sistemul natural de apărare al plantelor este semnificativ
îmbunătăţit
Tabelul 1.2.
Copompoziţia produsului BioRootz
Componentul Concentraţia
(mg/l)
Ca 480-960
Co 960-1200
Cu 0,24-0,50
Fe 28,0-40,0
Mg 80,0-120,0
K 4400-6000
S 800-1600
Ureea 40-50
Ulei plante 1400
Ulei acizi 0,8-1,2 %
Ph 9,4
Densitate 1,05 kg/l
.
ProBalance este alcătuit din extracte şi uleiuri 100% naturale din plante şi fructe.Toate
componentele folosite la obţinerea acestuia provin dintr-un ciclu ecologic închis, produs fără
agenti sau fertilizatori sintetici sau chimici.
ProBalance aduce plantei o semnificativă protecţie împotriva fungilor, acarienilor şi
insectelor.Produsul ajută la prelevarea manganului, magneziului, potasiului, bioxidului de
siliciu şi calciului.
ProBalance îmbunătăţeşte reacţia plantei la insecte şi boli şi accelerează circulaţia
zahărului şi a amidonului în plantă. Produsul creşte forţa rădăcinilor şi a frunzelor.
6
ProBalance şi-a dovedit eficacitatea asupra tuturor tipurilor de culturi acţionând ca o
barieră fizică împotriva infestărilor cu insecte şi boli.
Tabelul 1.3.
Copompoziţia produsului ProBalance
Componentul Concentraţia (%)
Extract de legume 50, 0
Glicerină 4,0
K2O 4,0
SI 0,3
N 0,02
Ca 0,03
H2O Depinde de concemtratia de H2O din cartof
Ulei esenţial de lămâie 0,05
Ulei esenţial de portocală 0,05
Ulei din sămânţă de rapiţă 2,05
Ulei de floarea soarelui 2,00
Ulei aromatizat din India 1,00 - 2,00
7
CAPITOLUL II
REZULTATE PRIVIND ACŢIUNEA BIOLOGICĂ A UNOR
BIOSTIMULATORI FAŢĂ DE PATOGENI TRANSMIŞI PRIN
SEMINŢELE DE LEGUME ŞI GERMINAŢIA ACESTORA
2.1. Justificarea temei
Odată cu începerea cultivării plantelor de către om a apărut şi interesul păstrării şi
îmbunătăţirii germinaţiei seminţelor cu scopul de a putea asigura înfiinţarea culturilor în anii
următori sau la distanţe mari de locul în care au fost produse.
Păstrarea îndelungată a seminţelor a declanşat o serie de căutări pentru a găsi condiţiile
cele mai bune de menţinere a germinaţiei. Datorită condiţiilor fiziologice cât şi a celor de
producere, de condiţionare şi de păstrare, valoarea germinaţiei scade în timp.
Bolile şi dăunătorii care acţionează în perioada de producere şi păstrare a seminţelor,
influenţează negativ germinaţia. Din aceste motive cât şi pentru a asigura o răsărire rapidă,
chiar explozivă şi uniformă a culturilor a fost şi este necesar să se efetueze permanent teste cu
ajutorul cărora să se stabilească metode de menţinere a germinaţiei la un nivel optim o
perioadă cât mai îndelungată.
Este cunoscut faptul că tratamentele chimice efectuate în perioada de condiţionare şi
ambalare a seminţelor afectează negativ menţinerea germinaţiei o perioadă îndelungată.
Datorită acestei situaţii, mulţi agricultori caută să păstreze seminţele netratate, iar înainte de
însămânţare aplică diferite tratamente. Îmbunătăţirea germinaţiei şi obţinerea de plante
sănătoase şi viguroase determină o serie de cercetări care să înlocuiască substanţele chimice
de sinteză cu produsele obţinute din diferite părţi ale unor plante.
In acest context, obiectivele noastre au urmărit atât efectul unor tratamente naturale,
aplicate la sămânţă, asupra indicatorilor de calitate ai acesteia în ceea ce priveşte germinaţia
(procentul de germinare, apariţia de germeni cu cât mai puţine deficienţe structurale) cât şi
acţiunea biologică a acestora asupra potenţialilor agenţi patogeni seed borne.
8
2.2. Obiective
Studiul nostru a urmărit atât efectul unor tratamente naturale - biostimulatori, aplicate
la sămânţă, asupra indicatorilor de calitate ai acesteia în ceea ce priveşte germinaţia (procentul
de germinare, apariţia de germeni cu cât mai puţine deficienţe structurale) cât şi acţiunea
biologică a acestora asupra potenţialilor agenţi patogeni seed borne (transmisibili cu sămânţa).
2.3. Material şi metode
Experienţele necesare analizelor de germinaţie au fost montate în cadrul Laboratorului
Central pentru Controlul Calităţii Seminţelor şi Materialului Săditor Bucureşti. Experienţele
care au urmărit estimarea acţiunii biologice in vitro a biostimulatorilor utilizati asupra unor
agenţi patogeni au fost realizate în cadrul laboratorului de Fitopatologie al catedrei de
genetică, Ameliorare şi Protecţia plantelor, Facultatea de Agricultură, USAMV Bucureşti.
Laboratorul Central pentru Controlul Calităţii Seminţelor şi Materialului Săditor
Bucureşti este Autoritatea Oficiala pentru certificarea şi controlul calităţii semintelor din
judeţul Ilfov, parţial judeţul Călăraşi şi Bucureşti.Laboratorul central, coordonează din punct
de vedere tehnic, activitatea tuturor celor 30 Inspectoratelor Teritoriale şi a celor 7 filiale din
judeţele ţării. Laboratorul central împreună cu toate inspectoratele teritoriale şi filialele ţării,
sunt subordonate Inspecţiei Naţionale pentru Calitatea Seminţelor din cadrul Ministerului
Agriculturii Pădurilor şi Dezvoltării Rurale.
Laboratorului Central pentru Controlul Calităţii Seminţelor şi Materialului Săditor
Bucureşti este compus din 10 laboratoare servicii şi compartimente tehnice după cum
urmează: Laborator de Puritate. Laborator Fitosanitar; Laborator de Germinaţie; Laborator de
Umiditate şi Primiri Probe; Laborator de Electroforeză; Serviciul Analize Laborator şi
Asigurarea Calităţii; Serviciul Control, Certificare, Înregistrare; Compartiment Acreditare,
Implementare, Verificare Metode Analize; Compartiment Informatizare; Compartiment
Financiar – Contabilitate şi Resurse Umane
Laboratorul de Puritate execută toate analizele de puritate fizică (P), determinarea
corpurilor străine(CS), determinarea masei a o mie de boabe (MMB), pregăteşte probele
pentru post control (PC), pregăteşte probele oficiale (PO) pentru păstrare. Laboratorul
Fitosanitar execută toate analizele de stare sanitară (SS) care sunt ridicate oficial de la agenţii
economici autorizaţi.
9
Laboratorul de Umiditate şi Primiri Probe înregistrează toate probele oficiale ridicate
de la agenţii economici autorizaţi, execută determinările de umiditate(U) şi cează fişele de
analiză. Laboratorul de Germinaţie execută toate determinările de germinaţie (G) şi de could
test (CT) la probele ridicate oficial de la agenţii economici autorizaţi. Laboratorul de
Electroforeză execută analize de puritate biologică, la probele ridicate oficial de la agenţi
economici autorizaţi.
Serviciul Analize Laborator şi Asigurarea Calităţii verifică toate fişele de analiză
executate în toate celelalte laboratoare şi compartimente, a probelor ridicate oficial de la
agenţii economici autorizaţi şi stabileşte calitatea seminţelor în vederea eliberării buletinului
orange (BO) care însoţeşte seminţele în Comunitatea Europeană (CE). Se ocupă de instruirea
şi verificarea cunoştinţelor Împuterniciţilor ISTA din întreaga ţară care ridică probe oficiale
destinate exportului.
Serviciul Control, Certificare, Înregistrare, se ocupă de stabilirea calităţii seminţelor
destinate comercializării pe piaţa internă în vederea eliberării Certificatului de Origine şi
Calitate al Seminţelor (COCS). Coordonează activitatea celor 11 inspectori oficiali atestaţi pe
care îi are laboratorul, care certifică loturile de seminţe şi material săditor, produse de agentii
economici autorizaţi. Se ocupă de înregistrarea, evidenţa şi controlul agenţilor economici
autorizaţi să producă şi să comercializeze seminţe în teritoriul de care răspunde.
Compartimentul Acreditare, Implementare, Verificare Metode Analize se ocupă de
acreditarea laboratoarelor din cadrul inspectoratelor teritoriale şi filialelor din ţară, de
elaborarea manualului calităţii, de pregătirea tehnică şi verificarea cunoştinţelor tehnice ale
tuturor laborantilor şi eşantionorilor oficiali, verifică implementarea şi respectarea metodelor
de analiză oficială la toate inspectoratele din ţară.
Compartimentul Informatizare se ocupă de confecţionarea tuturor etichetelor oficiale
destinate loturilor de seminţe analizate şi care corespund calitativ standardelor în vigoare.
Completează toate certificatele de calitate ale seminţelor analizate.
Compartimentul Financiar – Contabilitate şi Resurse Umane se ocupă de taxarea
tuturor analizelor efectuate şi a tuturor serviciilor prestate de personalul din cadrul
laboratorului către agenţii economici. În cadrul laboratorului au intrat în acest an 4850 probe,
pe care s-au efectuat 16530 analize diferite.
10
2.3.1. Material biologic vegetal
Determinările de germinaţie s-au efectuat pe 31 de probe de seminţe (aparţinând
plantelor din diferite familii botanice), sondate de la agenţi economici de pe teritoriul
judeţului Ilfov şi din Bucureşti, zone arondate pentru analize şi certificare la LCCS Bucureşti.
Aceste seminţe nu au fost tratate cu nici o substanţă chimică cu excepţia tratamentelor din
experienţă. Elementele de identificare ale loturilor analizate sunt prezentate în tabelele 2.1 –
2.5.
Tabelul 2.1
Elemente de identificare a loturilor de seminţe din familia Umbeliferae
Nr. fişă Specia/Soiul Unitatea Producătoare
2304 Păstârnac Alb Lung Unisem
3211 Morcov Milenium 3 Unisem
3039 Ţelină Edward Amia Internaţional
2643 Ţelină de Rădăcină Mentor Universal Impex
3002 Pătrunjel Gigante Amia Internaţional
3003 Pătrunjel Lenka Amia Internaţional
2600 Pătrunjel Ory Amia Internaţional
2303 Pătrunjel de Rădăcină Zaharat Unisem
Tabelul 2.2.
Elemente de identificare a loturilor de seminţe din familia Cruciferae
Nr. fişă Specia/Soiul Unitatea Producătoare
2392 Muştar Alb Alex ITC
2393 Rapiţă Wilma Alfa Semence
3031 Conopidă Rober Amia Internaţional
3038 Gulie Wiedenska Biala Amia Internaţional
3034 Varză Albă Ditmarska Amia Internaţional
3033 Varză Albă Camienna Glowa Amia Internaţional
3036 Varză Roşie Haco Amia Internaţional
3037 Varză Albă Brusel Groninger Amia Internaţional
11
Tabelul 2.3.
Elemente de identificare a loturilor de seminţe din familia Cucurbitaceae
Nr. fişă Specia/Soiul Unitatea Producătoare
2302 Castraveţi Lord Unisem
Tabelul 2.4.
Elemente de identificare a loturilor de seminţe din familia Solanaceae
Nr. fişă Specia/Soiul Unitatea Producătoare
2301 Ardei Opal Unisem
2300 Ardei Galben Superior Unisem
2432 Ardei Orest Unisem
2433 Ardei Siret Unisem
3214 Ardei Iute Delicios Unisem
2305 Tomate Kristinica Unisem
2174 Vinete Luiza ICDLF Vidra
Tabelul 2.5.
Elemente de identificare a loturilor de seminţe din familia Liliaceae
Nr. fişă Specia/Soiul Unitatea Producătoare
2311 Ceapă Wolska Amia Internaţional
3004 Ceapă Wolska Amia Internaţional
3005 Praz Gros Long D`ete Amia Internaţional
3006 Praz De Carentan2 Amia Internaţional
12
La Laboratorul Central Pentru Calitatea Seminţelor şi Materialului Săditor au fost
efectuate determinări de germinaţie pe cele 31 de probe de seminţe, în trei variante. Produsele
utilizate au fost BioRootz şi Probalance. Variantele test sunt prezentate în tabelul 2.6.
Tabelul 2.6
Variante test – analiza de germinaţie
Var. Specificaţie
Martor probele martor, netratate, puse la germinat pentru determinările
oficiale, conform Standardului Român SR 1634 din iunie 1999
pentru eliberarea certificatelor de calitate
V1 probele puse la germinat folosind pentru umectarea stratului de
germinatie soluţia ProBalance in concentraţie de 3%.
V2 probele puse la germinat folosind pentru umectarea stratului de
germinatie soluţia BioRootz in concentraţie de 1%.
2.3.2. Metode de cercetare
2.3.2.2 Metode pentru analiza germinaţiei seminţelor.
Metodele utilizate în analizele de germinaţie sunt prezentate în tabelul 2.7. Ele sunt
difeite, în funcţie de lotul de seminţe supus analizei.
Au fost urmărite umătoarele elemente: porcentul d egerminare, numărul de germeni
anormal, caracterizarea acestora şi procentul de germeni anormali în raport cu proba martor.
Materiale folosite: strat de germinaţie: hârtie de sugativă şi filtru.
Compoziţia hârtiei: din lemn albit chimic, bumbac sau altă celuloză vegetală
purificată. Trebuie sa fie liberă de ciuperci, bacterii şi substanţe toxice care pot
influenţa dezvoltarea germenilor în timpul germinaţiei.
Textura: poroasă astfel încât rădăcinile germenilor să crească pe suprafaţa hârtiei nu în
interiorul ei.
Rezistenta: suficient de rezistentă pentru a putea rezista la rupere în timpul testului.
13
Tabelul 2.7
Metode utilizate în analizele de germinaţie
Nr
Crt.Specia
Soiul Metoda
(strat/temperatură)
2304 Pastinaca sativa
(Păstarnac)Alb lung
BP/20-30OC
Lumină -28 zile
3211 Daucus carota
(Morcov)
Milenium 3 BP/20 OC
Lumină -14 zile
3039 Apium graveolens
(Ţelină)Edward
TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
2643 Apium graveolens
(Ţelină)Mentor
TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
3002 Petroselinum crispum
(Pătrunjel)Gigante
TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
3003 Petroselinum crispum
(Pătrunjel)
Lenka TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
2600 Petroselinum crispum
(Pătrunjel)Ory
TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
2303 Petroselinum crispum
(Pătrunjel)Zaharat
TP/20-30 OC
Lumină -21 zile
2392 Sinapis alba
(Muştar)
Alex TP/20 OC
Lumină -7zile
2393 Brassica napus
(Rapiţă)
Wilma TP/20 OC
Lumină -7zile
3031 Brassica oleracea var. botrytis
(Conopidă)Rober
TP/20 OC
Lumină -10zile
3038 Brassica oleracea
var.gongylodes
(Gulie)
Wiedenska Biala
TP/20 OC
Lumină -10zile
3033 Brassica oleracea var capitata
(Varză) Camienna Glowa
TP/20 OC
Lumină -10zile
3034 Brassica oleracea var capitata
(Varză)Ditmarska
TP/20 OC
Lumină -10zile
3036 Brassica oleracea Haco TP/20 OC
14
var.capitata rubra
(Varză roşie)
Lumină -10zile
3037 Brassica oleracea var.capitata
(Varză)Groninger
TP/20 OC
Lumină -10zile
2301 Capsicum annum
(Ardei)Ardei Opal
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2300 Capsicum annum
(Ardei)Ardei Galben Superior
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2432 Capsicum annum
(Ardei)Ardei Orest
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2433 Capsicum annum
(Ardei)Siret
BP/20-30OC
Lumină-14zile
3214 Capsicum annum
(Ardei)
Delicios
Iute
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2305 Lycopersicon esculentum
(Tomate)Kristinica
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2174 Solanum melongena
(Vinete)Luiza
BP/20-30OC
Lumină-14zile
2311 Allium cepa
(Ceapă)
Wolska BP(PP)/20 OC
Lumină-12zile
3004 Allium cepa
(Ceapă)
Wolska BP(PP)/20 OC
Lumină-12zile
3005 Allium porum
(Praz)Gros LungD`ete
BP(PP)/20 OC
Lumină-16zile
3006 Allium porum
(Praz)
De Carentan 2 BP(PP)/20 OC
Lumină-16zile
2302 Cucumis sativusLord
BP/25OC
Lumină-8zile
Capacitatea de umectare: capacitate mare de reţinere a apei încât să ajungă pentru
întreaga perioadă a testului astfel încât să asigure continuu aprovizionarea cu apă a
seminţei.
PH: valori cuprinse între 6,0 - 7,5.
Păstrarea hârtiei: intr-o cameră rece cu o umiditate relativă cât mai scăzută; va fi
ambalată corespunzator pentru a fi protejată de murdărire şi deteriorare în timpul
păstrării.
Sterilizarea hârtiei: necesară în cazul în care s-au dezvoltat mucegaiuri în timpul
păstrării.
15
Testul biologic al calităţii hârtiei: pentru a compara hârtia de calitate necunoscută cu
hârtie din stoc de calitate acceptabilă cunoscută, trebuie efectuat un test biologic
pentru depistarea straturilor vătămătoare. Pentru acest test se folosesc seminţe din
anumite specii cunoscute ca fiind sensibile la substanţele toxice din compoziţia hârtiei.
Acest test se poate face cu următoarele specii: Phleum pretense, Agrostis gigantea,
Eragrostis curvula, Festuca rubra var. commutate si Lepidium sativum.
Aprecierea hârtiei se face prin compararea dezvoltării rădăcinii germemilor crescuti pe
cele două tipuri de hârtie. Aprecierea se face în ziua sau cu o zi înainte, specificată pentru
prima numărare la specia folosită în testare. Este obligatorie aprecierea germenilor în
această perioadă deoarece simptomele de inhibare a creşterii rădăcinii datorate toxicitătii
sunt mult mai pronunţate într-un stadiu mai timpuriu al creşterii rădăcinii. Asemenea
simptome sunt: scurtarea rădăcinilor şi uneori decolorarea varfurilor rădăcinilor, ridicarea
rădăcinilor deasupra hârtiei si inmănuncherea perilor radiculari.
Apa folosită pentru prepararea soluţiilor folosite în umectarea straturilor de
germinaţie:
Apa folosită trebuie să fie liberă de impurităţi organice si anorganice.
Calitatea apei: dacă apa curentă nu este destul de bună pentru a fi folosită la prepararea
soluţiilor de umectare a stratului,se poate folosi apă deionizată sau apă distilată.
pH 6,0-7,5.
Controlul calitaţii apei: periodic analize pentru determinarea pH-ului şi efectuarea
analizei microbiologice şi a compoziţiei chimice (la o instituţie specializată).
Verificarea calităţii apei se face pe probe comparative folosind pentru umectarea
stratului unei probe apa curentă iar la cealaltă probă apa distilată. Rezultatele obţinute
trebuie să fie asemănătoare.
Modul de lucru. Pentru determinari BP (rulou) s-a folosit hârtie sugativă şi de filtru
cu dimensiunile de 60x15 cm. Se umectează stratul de germinaţie la începutul lucrului într-un
vas cu soluţia preparată, până la capacitatea de reţinere a hârtiei. Cantitatea de soluţi absorbită
de stratul de hârtie trebuie să fie suficientă pentru intreaga peroadă de germinaţie.
Seminţele se aşează distanţat pe hârtia de sugativă şi se acoperă cu o faşie de hârtie de
filtru. Stratul astfel pregătit se rulează şi se introduce într-o pungă din polietilenă în poziţie
verticală, se inchide cu o agrafă la partea superioară iar apoi se aşeaza in aparatul de
germinaţie.
16
Pentru determinările TP s-a folosit rondele de sugativa 170 mm: seminţele se asează
pe suprafaţa hârtiei (stratul de germinaţie) in vase Petri sau cutii transparente.
Se umectează stratul de germinaţie la inceputul lucrului intr-un vas cu soluţia
preparată, până la capacitatea de reţinere a hârtiei, iar vasele se acoperă după înfinţarea
fiecărei repetiţii cu capac pentru a reduce evaporaţia. Cantitatea de soluţie absorbită de stratul
de hârtie trebuie să fie suficientă pentru întreaga peroadă de germinaţie.
Pentru determinările BP (PP pliseu mijlociu din sugativă): s-a folosit hârtia cu
dimensiunile 60x32 cm plus strat pentru învelirea pliseului cu dimensiunea de 32/12 cm.
Seminţele sunt aşezate pe fâşii de hârtie de filtru plisată, asemenea acordeonului, după care se
umectează cu soluţia pregatită pentru testare. Pliseul se înfăşoara într-o fâşie de sugativă, se
aşează în pungi de plastic şi se duc în camera de germinaţie.
Seminţele rămân în camera de germinaţie pentru perioada stabilită în condiţiile
prevăzute în SR 1634/1999, pentru „Determinarea germinaţiei”.
Evaluarea germenilor. Evaluarea germenilor se face atunci când aceştia au atins faza
în care structurile lor esenţiale pot fi apreciate corect. Germenii normali vor fi îndepărtaţi de
pe strat la fiecare evaluare. În timpul perioadei de testare se înlătură de pe stratul de
germinaţie şi germenii afectaţi de boli pentru a înlătura riscul infectării seminţelor în curs de
germinare.
2.3.2.2. Metode pentru estimarea acţiunii biologice a biostimulatorilor (in vitro).
Testele pentru determinarea acţiunii biologice a biostimulatorilor asupra creştreii
miceliene a unor izolate patogene au fost derulate în cadrul laboratorului de Fitopatologie,
Facultatea de Agricultură, DepartamentulStiinţele plantelor, USAMV Bucureşti.
Laboratorul de Protecţia plantelor (A III 125) este dotat cu aparatură de bază necesară
derulării cercetărilor clasice de micologie, bacteriologie, microbiologie. Astfel, în dotarea
laboratorului există aparatură necesară izolarii, identificării, cultivării şi studiului diferiţilor
agenţi fitopatogeni (ciuperci, bacterii).
Laboratorul respectă normele de securitate şi igiena specifice domeniului
microbiologiei: deşeurile biologice (culturi de ciuperci, bacterii) sunt supuse decontaminării
prin autoclavare; celelalte tipuri de deşeuri sunt clasate în pubele etichetate specific.
Evidentierea actiunii biologice a celor trei produse test s-a realizat prin metoda
includerii acestora în mediul artificial de cultură PDA (Potato Dextrose Agar, Sigma
Agrohmicals, 39 g/l).
17
Concentraţiile test au fost 0,1 – 0,5 – 1 – 3%. Materialul biologic fungic a gost
reprezentat de un izolat al speciei Alternaria longipes (izolat de pe seminţe de ardei) şi un
izolat de Fusarium cucurbitacearum (izolat de pe seminţe de castraveţi).
După omogenizare, mediul a fost repartizat în vase Petri. Mediul astfel preparat a fost
însămânţat cu inoculul patogen, reprezentat de discuri miceliene cu diametrul de 8mm
prelevate de la periferia culturilor pure, în vârstă de o săptămână. Vasele Petri astfel
însămânţate au fost incubate în termostat la 24ºC, la întuneric. Efectul biologic a fost estimat
în comparaţie cu un martor cultivat pe mediul PDA, cu etanol in concentratia la care se
gaseste in extractul alcoolic. S-au realizat câte 3 repetiţii pentru fiecare produs testat şi fiecare
concentraţie.
Observaţiile s-au realizat după 5 şi 7 zile de incubare iar acţiunea biologică a fost
evaluată prin măsurarea creşterii miceliene (diametrului coloniilor).
Diametrele medii ale celor trei repetiţii au fost comparate cu cele ale martorului,
calculându-se astfel procentul de inhibare a creşterii miceliene (sau eficacitatea extractelor
vegetale) formula: % inhibare a creşterii (eficacitate) = (Dmt – Dvar)/Dmt x 100, unde
Dmt = diametrul coloniei miceliene a martorului netratat; Dvar = diametrul coloniei miceliene
a variantei test.
2.4. Rezultate obţinute
2.4.1.Rezultate privind influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor
Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor plantelor din familia
Umbeliferae este prezentată în figura 2.1.
Astfel, remarcăm, în cazul seminţelor de păstârnac, lipsa germinării, la toate variantele
test. Pentru seminţele de morcov (soiul Milenium), tratamentele cu BioRootz şi ProBalance
au menţinut sau chiar au stimulat germinaţia.
In schimb, aplicarea acestor tratamente la sămânţă de ţelină, indiferent de soi, nu a
avut efect de stimulare, valorile germinaţiei seminţelor tratate fiind mult scăzute comparativ
cu martorul (fig. 2.1).
La seminţele de pătrunjel, a fost înregistrată o variaţie a valorilor germinaţiei
seminţelor. Astfe, la soiul Gigante, doar varianta BioRootz a stimulat germinaţia seminţelor.
18
La soiul Lenka, aplicarea produselor a menţinut valorile germinaţiei în apropierea
celei înregistrată la martor.
Un comportament asemănător a fost înregistrat la soiul Zaharat, cu specificarea că aici
germinaţia a avut valori scăzute, inclusiv la martor.
Fig. 2.1. Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor - Umbeliferae
Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor plantelor din familia
Brassicaceae este prezentată în figura 2.2.
Semnalăm efectul de stimulare a germinaţiei seminţelor de muştar alb (soiul Alex), în
cazul celor trei variante de tratament. In cazul seminţelor de rapiţă, aplicarea tratamentului cu
BioRootz a ridicat valoarea germinaţiei la 86% (comparativ cu martorul – 81%). Celelalte
doua tratamente nu au modificat valoarea germinaţiei calculată pentru martor.
19
0
20
40
60
80
100
germ
inat
ia (%
)
M V1 V2
M 0 76 62 85 59 65 13 30
V1 0 76 24 26 63 57 9 32
V2 0 83 39 84 41 60 18 32
pastarnac Alb lung
morcov Milenium
3
telina Edward
telina Mentor
patrunjel Gigante
patrunjel Lenka
patrunjel Ory
patrunjel Zaharat
.
Fig. 2.2. Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor - Brassicaceae
Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor plantelor din familia
Solanaceae este prezentată în figura 2.3. In cazul seminţelor de solanacee, remarcăm creşterea
procentului de germinare la majoritatea acestora (excepţia soiul de ardei Galben Superior), în
cazul aplicării produsului BioRootz. In cazul tomatelor, valorile germinaţiei au rămas
apropiate de martor şi în cazul celorlalte doua variante.
Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor plantelor din familia
Alliaceae este prezentată în figura 2.4. Cele două loturi de ceapă, soiul Wolska, s-au
comportat diferit. In cazul lotului 2311 au fost înregistraţi numai germeni morţi iar la
seminţele lotului 3004, germinaţia a fost foarte scăzută.
Varianta ProBalance a reuşit creşterea procentului de seminţe germinate de la 13%
(martor) la 23%. Nu a fost semnalat un efect stimulator al germinaţiei nici la seminţele de
praz tratate.
20
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
germ
inat
ia (%
)
M V1 V2
M 87 81 75 77 80 78 15 80
V1 90 86 57 66 60 72 6 79
V2 94 81 60 72 60 74 14 75
Muştar Alb Alex
Rapiţă Wilma
Conopidă Rober
Gulie Wiedenska Biala
Varză Albă
Ditmars
Varză Albă
Camien
Varză Roşie Haco
Varză Albă
Brusel
Fig. 2.3. Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor - Solanaceae
Fig. 2.4. Influenţa biostimulatorilor asupra germinaţiei seminţelor - Alliaceae
21
0
20
40
60
80
100
germ
inat
ia (%
)
M V1 V2
M 24 57 29 55 70 92 87
V1 29 47 43 60 73 94 87
V2 21 50 27 64 63 94 79
Ardei Opal
Ardei Galben
Superior
Ardei Orest
Ardei Siret
Ardei Iute
Delicios
Tomate Kristinic
a
Vinete Luiza
0
20
40
60
80
100
germ
inat
ie (%
)
M V1 V2
M 0 13 84 88
V1 0 4 53 61
V2 0 23 84 88
Ceapă Wolska Ceapă WolskaPraz Gros Long
D`etePraz De
Carentan2
In timpul analizelor de germinaţie a seminţelor se înregistrează se caracterizează
aspectul germenilor şi se descriu/centralizează germenii anormali. Aceste date, însoţite de
descrierea germenilor anormali, sunt prezentate în figurile 2.5 – 2.8.
In general, pentru seminţele de umbelifere, aplicarea tratamentelor cu biostimulatori a
redus apariţia de germeni anormali (fig 2.5). Insă, în cazul seminţelor de ţelină (ambele
soiuri), în cazul variantelor tratate a fost înregistrat un număr mai mare de germeni anormali
comparativ cu martorul. Remarcăm o creştere semnificativă a germenilor anormali în cazul
aplicării produsului MBS, la 79 de germeni la soiul Mentor (doar unul la varianta martor).
Fig. 2.5. Germeni anormali – Umbeliferae
Tratarea seminţelor de brasicacee cu biostimulatorii test a determinat scăderea
numărului de germeni anormali, în majoritatea cazurilor, ceea ce se corelează cu datele
referitoare la procentul de germinare (figura 2.6).
Influenţa tratamentelor cu biostimulatori asupra germenilor a fost variată, în cazul
seminţelor de solanacee (figura 2.7). Astfe, la soiul de ardei Opal, numărul de germeni
anormali a fost redus, comparativ cu martorul, în urma aplicării tratamentelor. In schimb, la
soiul Galben superior, la varianta ProBalance a fost înregistrat un număr mai mare de germeni
anormali, comparativ cu martorul şi cu celelalte doua variante. Acelaşi fenomen a fost
înregistrat şi la soiurile Orest şi Delicios.
22
0 1 4 1 5 4 5 30 1
27
54
05 2 20 1
26
5 2 3 1 3
0
20
40
60
80
past
arna
c A
lb lu
ng
mor
cov
Mile
nium
3
telin
a E
dwar
d
telin
a M
ento
r
patr
unje
l Gig
ante
patr
unje
l Len
ka
patr
unje
l Ory
patr
unje
l Zah
arat
M V1 V2
Fig. 2.6. Germeni anormali – Brassicaceae
Fig. 2.7. Germeni anormali – Solanaceae
23
1214
5
15
8
4
10
4
97
8
18
45
78
5
14
10
18
4
7
15
6
02468
101214161820
Muş
tar
Alb
Ale
x
Rap
iţă
Wil
ma
Con
opid
ăR
ober
Gul
ieW
iede
nska
Bia
la
Var
ză A
lbă
Dit
mar
ska
Var
ză A
lbă
Cam
ienn
aG
low
a
Var
zăR
oşie
Hac
o
Var
ză A
lbă
Bru
sel
Gro
ning
er
M V1 V2
8
5
8
14
6
3 34
3
5
14
21
56
8
16
13
7
1
6
02468
1012141618
Ard
eiO
pal
Ard
eiG
albe
nSu
peri
or
Ard
eiO
rest
Ard
eiSi
ret
Ard
ei I
ute
Del
icio
s
Tom
ate
Kri
stin
ica
Vin
ete
Lui
za
M V1 V2
La tomate, aplicarea produselor BioRootz şi proBalance a determinat înregistrarea
unui număr mai mic de germeni anormali. In schimb, acest efect nu s-a înregistrat şi la vinete.
In cazul seminţelor de alliacee, numai la ceapa Wolska, lotul 3004 au fost semnalaţi
mai puţini germeni anormali comparativ cu martorul, şi aceasta la toate variantele test (figura
2.8).
Fig. 2.8. Germeni anormali – Alliaceae
Germinaţia seminţelor unor loturi analizate şi exemple de germeni anormali sunt
prezentate în figurile 2.9 şi 2.10.
24
0
1210
8
0
4
29
33
0
97 6
0
5
10
15
20
25
30
35
Ceapă Wolska Ceapă Wolska Praz Gros LongD`ete
Praz DeCarentan2
germ
eni a
norm
ali
M
V1
V2
Fig. 2.9 Aspecte din timpul testărilor – variantele test cu seminţe de crucifere
Fig. 2.10. Tipuri de germeni anormali
26
2.4.2. Rezultate privind influenţa biostimulatorilor asupra creşterii miceliene a
unor izolate patogene
Testarea eficacităţii biostimulatorilor în inhibarea creşterii miceliene a patogenilor a
fost realizată prin metoda includerii acestora în mediul artificial de cultură PDA.
Concentraţiile test au fost 0,1 – 0,5 – 1 – 3%.
Materialul biologic fungic a gost reprezentat de un izolat al speciei Alternaria longipes
(izolat de pe seminţe de ardei) şi un izolat de Fusarium cucurbitacearum (izolat de pe seminţe
de castraveţi). Observaţiile au urmărit creşterea miceliană a patogenilor.
Rezultatele noastre semnalează lipsa unei acţiuni fungicide directe a celor trei produse
supuse studiului, creşterea miceliană înregistrată fiind normală (figura 2.11).
Ne putem explica eventual, acţiunea fungicidă a produselor BioRootz şi Probalance
descrisă în fişa tehnică prin stimularea unor mecanisme de apărare ale plantei, fapt care este
semnalat în literatura de specialitate pentru extracte vegetale sau alţi compuşi.
27
Fig. 2.11. Creşterea miceliană a izolatelor test în prezenţa compusului BioRootz
Mt0.1%
3%0.5%
1%
Fc
Al%
biorootz
28
2.5. Concluzii
Datele din literatură cu privire la acţiunea unor produse biostimulatoare asupra
germinaţiei seminţelor sau asupra speciilor patogene şi saprofite care colonizează sămânţa
sunt foarte rare. Cele mai multe studii au evidenţiat acţiunea/interacţiunea patogeni –
îngrăşăminte foliare aplicate în diferite culturi legumicole.
Este cunoscut faptul că tratamentele chimice efectuate în perioada de condiţionare şi
ambalare a seminţelor afectează negativ menţinerea germinaţiei o perioadă îndelungată.
Datorită acestei situaţii, mulţi agricultori caută să păstreze seminţele netratate, iar înainte de
însămânţare aplică diferite tratamente. Îmbunătăţirea germinaţiei şi obţinerea de plante
sănătoase şi viguroase determină o serie de cercetări care să înlocuiască substanţele chimice
de sinteză cu produsele obţinute din diferite părţi ale unor plante.
In acest context, obiectivele noastre au urmărit atât efectul unor tratamente naturale,
aplicate la sămânţă, asupra indicatorilor de calitate ai acesteia în ceea ce priveşte germinaţia
(procentul de germinare, apariţia de germeni cu cât mai puţine deficienţe structurale) cât şi
acţiunea biologică a acestora asupra potenţialilor agenţi patogeni seed borne.
Rezultatele noastre semnalează efectul aplicării unor biostimulatori la sămânţă, asupra
indicatorilor de calitate ai acesteia în ceea ce priveşte germinaţia (procentul de germinare,
apariţia de germeni cu cât mai puţine deficienţe structurale).
Tratamentele aplicate au avut la bază biostimulatori cunoscuţi pentru efectul lor în
stimularea germinaţiei seminţelor: BioRootz şi ProBalance.
Determinările de germinaţie s-au efectuat pe 31 de probe de seminţe, sondate de la
agenţi economici de pe teritoriul judeţului Ilfov şi din Bucureşti, zone arondate pentru analize
şi certificare la Laboratorul Central Pentru Calitatea Seminţelor şi Materialului Săditor din
Bucureşti.
Efectul asupra germinaţiei seminţelor a fost extrem de variat, în funcţie de planta
gazdă, de soi si, în cadrul aceluiaşi soi, şi de lotul analizat. In majoritatea cazurilor, a fost
semnalat un efect de îmbunătăţire a germinaţiei seminţelor şi reducerea numărului de germeni
anormali.
Au fost însă, şi cazuri, în care în urma aplicării tratamentelor, germinaţia a fost
afectată iar numărul de germeni anormali înregistraţi a fost mai mare comparativ cu martorul.
Pentru a analiza influenţa tratamentelor cu biostimulatori asupra unor patogeni
transmisibili cu sămânţa, au fost iniţiate teste in vitro.
29
Rezultatele noastre semnalează lipsa acţiunii directe, fungicide sau fungitoxice, a
biostimulatorilor testaţi. Acţiunea fungicidă descrisă în fişele tehnice se poate datora, mai
curând, unei activări a unor mecanisme de apărare în planră, fenomen descris pentru unele
extracte naturale (în compoziţia acestor biostimulatori regăsim astfel de principii, din plante).
30
Bibliografie
1. Agrios, G. 2005. Plant pathology, 5th Edition, Academic Press, New York.
2. Dordas, C. 2009. Role of nutrients in controlling plant diseases in sustainable
agriculture: a review. Lichtfouse et al. (eds.) Sustainable agriculture, EDPSciences
3. Solomon, P., Kar-Chun T., Oliver R. 2003. The nutrient supply of pathogenic fungi; a
fertile field for study. Molecular Plant pathology, $ (3), 203-210
31
Top Related