subiecte microbi-virusologie 4-6

5
Sub 4 : Diagnosticul virusologic in gripa Diagnostic direct: -se recolteaza tampon faringian , nazal, spalatura nazala -produsele patologice se recolteaza in primele ¾ zile de boala -metoda clasica : izolare pe culture de celule sau oua embrionate; se folosesc colonii primare –maimuta-sau linii permanente -efect citopatic nespecific -oua embrionate –in cavitatea amniotica pentru adaptare-pasaje successive in cavitatea alantoida –lichid alantoidian (se evidentiaza virusurile)=r. de hemaglutinare -prin r. de hemaglutinare: se realizeaza titrarea virusurilor si cuantificarea -identificarea : se realizeaza prin inhibarea hemaglutinarii -metode rapide : detectarea antigenelor virale( imunofluorescenta, ELISA) sau detectarea genomului PCR Diagnosticul indirect –serodiagnosticul : -se cauta anticorpii in serul pacientului -reactii antigen-anticorp, ELISA, RIH, fixare a complementului -se urmareste aparitia dinamicii semnificative, seroconversie Reactie de hemaglutinare: Lichid alantoidian + - Hematii + + 1

description

subiecte

Transcript of subiecte microbi-virusologie 4-6

Page 1: subiecte microbi-virusologie 4-6

Sub 4 : Diagnosticul virusologic in gripa

Diagnostic direct:

-se recolteaza tampon faringian , nazal, spalatura nazala

-produsele patologice se recolteaza in primele ¾ zile de boala

-metoda clasica: izolare pe culture de celule sau oua embrionate; se folosesc colonii primare –maimuta-sau linii permanente

-efect citopatic nespecific

-oua embrionate –in cavitatea amniotica pentru adaptare-pasaje successive in cavitatea alantoida –lichid alantoidian (se evidentiaza virusurile)=r. de hemaglutinare

-prin r. de hemaglutinare: se realizeaza titrarea virusurilor si cuantificarea

-identificarea : se realizeaza prin inhibarea hemaglutinarii

-metode rapide : detectarea antigenelor virale( imunofluorescenta, ELISA) sau detectarea genomului PCR

Diagnosticul indirect –serodiagnosticul :

-se cauta anticorpii in serul pacientului

-reactii antigen-anticorp, ELISA, RIH, fixare a complementului

-se urmareste aparitia dinamicii semnificative, seroconversie

Reactie de hemaglutinare:

Lichid alantoidian + -

Hematii + +

! !

Umbreluta ( r+) buton rosu(r-)

Reactive de inhibitie a hemaglutinarii:

Lichid alantoidian h1n1 h2n3

Hematii +

Ac specifici + +

(r+) buton (r-) umbreluta

1

Page 2: subiecte microbi-virusologie 4-6

Sub 5.- Diagnosticul virusologic in rabie

Rabia este determinate de virusul rabic ce se gaseste in saliva, fiind transmisa de animale sau prin aerosoli-liliecii-. Diagnosticul se face atat la om cat si la animalul bolnav.

Diagnosticul efectuat este cel direct. Diagnosticul indirect se realizeaza pentru evidentierea ac – eficacitate vaccin.

La om se recolteaza raclat cornean, saliva, biopsie cutanata, mucoasa bucala.

La animale, post mortem , se recolteaza fragmenet de creier sau saliva.

In fragmenetele de creier, in M.O se vad corpusculuii Babes-Negri, incluziuni virale, iar in imunofluorescenta –ac marcati cu o substanta fluorescent sau elisa- sunt metode rapide pentru detctarea antigenelor virale.

Pentru detectarea genomului viral : PCR.mai putin rapida este izolarea pe culture de celule, soricei n.n. –paralizii spastic.

Identificare : reactii de neutralizare, IF, ELISA.

2

Page 3: subiecte microbi-virusologie 4-6

Sub 6. – Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala acuta cu VHB

• markerii serici ai hepatitei cu virus B (Ag şi Ac) evidenţiaţi prin reacţii imunologice (ELISA, HAP, IF, RIA) prezintă importanţă diagnostică şi prognostică:

- diagnostic direct: AgHBs(infectiozitate in boala acuta, cronica sau portaj-fals pozitiv), AgHBe-contagiozitate (AgHBc este prezent numai intrahepatic)

- diagnostic indirect: Ac anti-HBc (IgM – infectie acuta/recenta si recaderi- cel mai important marker ; Ig G anamnestici) si Ac totali anti-HBc – trecerea prin boala sau cronicizare), anti-HBe, anti-HBs (ultimii care apar si singurii protectori);

• PCR pentru decelarea virusului infecţios.

Ag HBs Ag HBe Ac antiHBc-ig m

Ac anti Hbc totali

Ac anti HBs

Ac anti HBe

+ + + +Hepatita acuta

+(>6 luni) +(>6 luni) ALAT normal

Purtator sanatos

+ + + Alat >2-5 ori

Hepatopatie cronica

+ + +Trecere prin boala cu imunizare+ vaccinare-postinfectie

VHB- are un antigen de suprafata HBs, unul specific corpului HBc, si unul enzimaticHBe+ anticorpi anti HBs, HBc,HBe.

-prezinta AND viral

Diagnosticul direct se pune prin PCR(id. De genom), ELISA( id ag virale), imunofluorescenta ( id ag virale),sau indirect, prin detectarea anticorpilor (ELISA)

3