Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

download Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

of 78

Transcript of Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    1/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    2/78

    Caracteristicile majore care le

    difereniaz de celelalte microorganisme: Dimensiunea redus (20-300nm) Genomul posed un singur tip de acid nucleic, fie ARN,

    fie ADN

    Sunt total dependente de celula vie, fie eucariot, fieprocariot, pentru replicare i existen

    Nu posed ribozomi sau aparat propriu de sintez aproteinelor, mitocondrii sau surs proprie de energie

    Dei unele virusuri posed enzime proprii ca, de pild,ARN- sau ADN-polimeraza, ele nu pot amplifica ireproduce informaia n propriul genom, n absenacelulei gazd

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    3/78

    Structura Structura de baz, obligatorie, a virionului o

    reprezintnucleocapsida

    Virusurile formate numai din nucleocapsid senumesc virusuri neanvelopate.

    Virusurile care prezint pe lngnucleocapsidi un nveli extern lipoproteic derivat dinsistemul membranar al celulei gazd (peplos sauanvelop), se numesc virusuri anvelopate.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    4/78

    Genomul viral Este constituit dintr-un singur tip de acid nucleic

    fie ADN, fie ARN (niciodat ambii), care conine

    ntreaga informaie genetic necesar replicriivirusului i care reprezint suportul infeciozitiiacestuia.

    Molecula acidului nucleic poate fi simplu

    spiralat (ss) sau dublu spiralat (ds), liniar saucircular,continu sau segmentat.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    5/78

    Acidul nucleic al tuturor virusurilor ADN, cu excepia

    parvovirusurilor, este ds (hepadnavirusurile au ADNparial ds cnd nu sunt n timpul replicrii). Acidul nucleic al tuturor virusurilor ARN, cu excepia

    reovirusurilor, este ss .

    n cazul virusurilor ARNss, genomul conine acid nucleic carepoate fi: cu polaritate pozitiv (+), caz n care poate aciona direct

    ca ARNm (mesager) n interiorul celulei infectate,

    sau poate fi cu polaritate (-), caz n care trebuie transcrisde o enzim asociat virusului, ARN-transcriptaza, ntr-unARN cu polaritate (+) = imaginea n oglind.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    6/78

    Mrimea genomului viral se coreleaz cu mrimeacapsidei sau anvelopei.

    virusurile mari au un genom de dimensiuni

    mari care conine cteva sute de gene icodificun numrrelativ mare de proteine (poxvirusurile,herpesvirusurile, etc)

    virusurile mici au un genom de dimensiunireduse care conine doar 3 sau 4 gene icodificun numr mic de proteine.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    7/78

    Capsida viral Capsida viral este un nveli format din

    numeroase uniti proteice numite capsomere. proteine de dimensiuni mici care se

    autoasambleaz n structuri capsomerice mariiar in final se asambleaz sub forma capsideivirale.

    capsomerele individuale pot fi puse n eviden

    prin ME. Fiecare capsomer trebuie s posede o anumitstructurchimic ce i permite s se asamblezecu capsomere asemntoare pentru a forma o

    structurcomplex cum este capsida.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    8/78

    Peplosul (anvelopa) reprezint o membran cu structur similar membranei

    citoplasmatice a celulei gazd - conine lipide, proteine ilipoproteine.

    pe suprafaa ei - formaiuni specifice virale, codificate devirus:

    1. spiculi(peplomere) de natur glicoproteic. Au funcia deadsorbie i penetrare n celula.

    2. factori de fuziune. Se gasesc sub form inactiv (F0) iar subaciunea proteazelor celulei gazd se scindeaz genernd

    forme active (F1, F2). Au funcia de iniiere a infeciei.

    3. proteina M (matrix)cptuete faa intern a anvelopei. Launele virusuri, faciliteaz asamblarea, iar la altele, asigurmeninerea formei.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    9/78

    Funciile nveliului sunt:a) de ataare - asigurataarea virusurilor anvelopate(nvelite) la celula gazd

    b) de protecie - Rolul protector alnveliului viral esteanihilat de tratamentul cu solveni lipidici (eter,cloroform, sruri biliare), rezultnd inactivareaparticulei virale. Pe baza acestui fenomen, virusurile

    sunt clasificate n:- eter-sensibile = virusurile nvelite- eter-rezistente = virusurile nenvelite

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    10/78

    Replicarea (multiplicarea)viral

    Virusurile prezint un nalt grad de parazitism intracelular isunt inerte metabolic pn cnd infecteaz o celulsusceptibil. n celula gazd, virusurile se replicredirecionnd mecanismele biochimice ale celulei spreformarea de componente pentru noi particule virale.

    Virusurile mari au, de obicei, acid nucleic cu greutatemolecularcrescuti care are capacitatea de a codifica unnumrmare de proteine.

    Virusurile mici au un acid nucleic cu greutate molecularsczuti un potenial de codificare limitat, de accea codificdoar unele din proteinele lor structurale iutilizeaz cel puincteva enzime ale celulei gazd, pentru propria replicare.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    11/78

    Replicarea virusurilor parcurge urmtoarele etape:

    1. recunoaterea celulei gazd2. adsorbia(ataarea ) virusului de celula gazd3. penetrarea (ptrunderea) virusului n celula gazd4. decapsidarea virusului

    5. sinteza macromoleculara) biosinteza ARNm precoce i a proteinelor precoce= proteine-enzimeb) replicarea genomului viral

    c) biosinteza ARNm tardivi a proteinelor tardive =proteine structurale

    6. eliberarea virionilor progeni din celula gazd

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    12/78

    1.Recunoaterea celulei gazd

    Pentru a infecta o celul, virusul trebuie, srecunoasc celula care i permite replicarea.

    Acest proces este realizat datorit existenei unorsitusuri receptor-specifice (de natur proteic)

    situate pesuprafaa

    extern

    a particulei virale. Acestea reacioneaz specific cu receptori

    corespunztori (de natur glicoproteic sauglicolipidic) de pe suprafaa celulelor "int".

    Prin aceast interaciune precis de tip "cheie-broasc" se explic faptul c anumite virusuriprezint tropism pentru anumite gazde i pentruanumite esuturi ale gazdei respective.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    13/78

    2.Ataarea virusului de celula gazd Ataarea virusurilor este specific i implic legareasitusurilor receptor-specifice de receptorii specifici aflai pe

    membrana citoplasmatic a celulei gazd.a) Structurile de ataare ale virusului pot fi:- capsomerele capsidei, prezente la virusurile neanvelopate- glicoproteinele, ce reprezintproiecii alenveliului viral, la

    virusurile anvelopate.b) Receptorii specifici de pe membrana citoplasmatic a

    celulei gazd sunt constitueni normali ai acesteia.

    Multiplele interaciuni dintre proteinele virale de ataareireceptorii celulei gazd, ataeaz ferm virusul de celulagazd. Aceste interaciuni pot reprezenta mecanismultrigger (declanator) n urma cruia este eliberatnucleocapsida n celula gazd.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    14/78

    3. Penetrarea sau ptrunderea virusului n celula

    gazd (internalizarea) Dupataarea la celula gazd, virusul trebuie s penetreze

    membrana celularexternis elibereze genomul viral nmediul intracelular, pentru replicare. Penetrarea se poate

    realiza prin 3 mecanisme, n funcie de structura virusului: fuziuneanveliului viral la membrana celularextern, cueliberarea ulterioar a acidului nucleic viral,

    viropexia (pinocitoza) - internalizarea ntregului virion ifuziunea ulterioar cu o membran intern vacuolar,

    pentru eliberarea acidului nucleic viral penetrarea direct - virusurile lipsite de membran

    lipidic par streac direct prin membrana citoplasmaticextern.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    15/78

    4. Decapsidarea i migrarea

    acidului nucleic la locul replicrii Decapsidarea const n ndeprtarea sau distrugereacapsidei virale astfel nct genomul viral s devinaccesibil mecanismelor de transcripieitranslaie.

    n multe cazuri, penetrarea i decapsidarea se producsub forma unui proces unic. Astfel, n cursul traversriimembranei citoplasmatice, unele virusuri suferalterri la nivelul structurii capsidei, aceste alterri

    facilitnd intrarea acidului nucleic n citoplasm. n cazul virusurilor lipsite de anvelop, se poateproduce fuziunea cu lizozomi, astfel nctdecapsidarea se realizeaz prin enzimele lizozomale.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    16/78

    5. Sinteza macromolecular.

    Biosinteza componenilor virali

    Convenional, se consider c ARNm (specia deARN care funcional se fixeaz pe ribozomi pentru ai se traduce mesajul genetic) are o polaritate pozitiva

    "+". Transcripia cu formarea ARNm pentru sintezaproteinelor precoce difer n funcie de acidul nucleicviral. Acizii nucleici dc au dou catene : una pozitiv (+) i una

    negativ (-), deci polaritatea va fi notata (). Pentruformarea de ARNm (+), genomul acestor virusuri, ADN sauARN, este transcris asimetric, adic va fi transcris osingura caten, cea cu polaritate (+).

    Acizii nucleici mc au catena fie cu polaritate (+), identic cucea a ARNm, fie cu polaritate (-), complementar cu cea aARNm.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    17/78

    5.1. Transcripia genomului viral n ARN

    mesager (ARNm) i replicarea genomului

    viral

    A. Virusuri ARN

    Virusurile ARN pot urma 3 tipuri de transcripie, nfuncie de sensul mesajului nscris n genomul lor:

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    18/78

    In cazul virusurilor ARN cu polaritate pozitiv,ARN-ul viral este ARNm i poate fi translat nproteine virale.

    ARN-ul viral "parental", cu polaritate pozitiv, estefolosit direct ca ARNm viral, din care vor fitranslate direct proteinele virale precoce i tardive.

    Replicarea genomului parental se produce prinsinteza unei forme intermediare dublu catenaredin care, sub aciunea ARN-polimerazei (proteinviral precoce), sunt sintetizate multe copii alegenomului parental.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    19/78

    n cazul virusurilor ARN cu polaritate negativ,

    iniial sunt produse copii cu polaritate pozitiv alegenomului parental (sub aciunea ARN-polimerazei virale). Aceste copii constituie ARNm i ele sunt apoi

    translate n proteine virale. ARN polimerazele virale transcriu ARN-ul

    parental, cu polaritate negativ, ntr-o copiecomplet sub forma unui intermediar dublucatenar.

    Din acesta se vor sintetiza noi molecule deARN cu polaritate negativ care vor fincorporate n noii virioni.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    20/78

    Cea de-a treia modalitate de transcripie este

    caracteristicretrovirusurilor. ARN-ul viral parental este transcris sub aciunea unei

    revers-transcriptaze virale (ADN polimeraz-ARNdependent) ntr-un ADN monocatenar care formeazun hibrid ADN-ARN.

    Lanul ARN al acestui hibrid este distrus i este nlocuitde o copie ADN, rezultnd astfel o molecul de ADNdc.

    Acest ADNdc (numit ADN proviral) este integrat nADN-ul celulei gazd.

    Din ADN-ul proviral sunt transcrise moleculele deARNm care sunt apoi translate n proteine virale. Din ADN-ul proviral sunt transcrise i copii complete

    de ARN viral care vor fi ncorporate n noii virioni.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    21/78

    B. Virusuri ADN

    Virusurile ADN trebuie, de asemenea, sproducun transcript ARNm. Acest proces este, de obicei, realizat sub aciunea

    unei enzime a celulei gazd (ARN-polimerazaADN-dependent).

    Moleculele de ARNm viral sunt translate nproteine precoce i tardive.

    ADN-ul parental dc este de obicei replicat de oADN-polimeraz ADN-dependent codificat devirus.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    22/78

    5.2. Sinteza proteinelor virale.

    Biosinteza proteinelor nestructurale precoce precedereplicarea acidului nucleic viral. Acestea inhib sintezaproteinelor celulei gazd i sunt implicate n replicarea

    acidului nucleic viral. Biosinteza proteinelor structurale tardive ncepe imediat

    dup replicarea genomului viral. Biosinteza se realizeazaprin translaia ARNm format n etapa anterioar, n

    proteine specifice particulei virale (proteine capsidale,peplomere). Speciile de ARNm care servesc drept matripentru proteinele tardive sunt diferite de cele care servescca matri pentru proteinele precoce

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    23/78

    Moleculele de ARNm viral sunt translate pe poliribozomiicelulei gazd pentru sinteza proteinelor virale structurale inestructurale. Enzime ale celulei gazd sunt responsabilede citirea mesajului genetic al virusului.

    Proteinele structurale sunt proteine constitutive aleparticulei virale, n timp ce proteinele nestructurale sunt

    componente cu funcii importante (de obicei, enzimatice),dar care nu fac parte din virion. Dup ce au fost sintetizate, proteinele virale structurale

    migreaz la nivelul membranei citoplasmatice se acumuleaz n citoplasma sau n nucleul celulei gazd.

    n toate cele 3 situaii, ele sufer transformri biochimicesub aciunea enzimelor celulei gazd.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    24/78

    6. Eliberarea virusului din celula

    gazd Aceast etap se poate realiza prin dou mecanisme:eliberarea prin nmugurire i eliberarea prin lizcelular.

    In cazul virusurilor eliberate prin nmugurire, o parte dinproteinele virale sunt transportate la nivelul membranei

    celulare externe a celulei gazd, iar alte proteine structuralevirale se cantoneaz la nivelul membranei celulare interne.Proteinele i acidul nucleic se asambleaziproemin prinmembrana celular. Aceast proeminen ("mugure") esteapoi desprins i virionul este eliberat. Adesea, n cazul

    virusurilor eliberate prin nmugurire, procesul descris maisus se repet succesiv, astfel nct o celulgazdelibereazvaluri succesive de noi particule virale.

    Eliberarea prin liz celular presupune asamblareacomplet a virionului n citoplasma celulei gazd ieliberarea sa prin lizi moartea celulei respective.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    25/78

    Familia Poxviridae4 genuri cu semnificaie n patologia uman:

    genul Orthopoxvirus genul Parapoxvirus genul Yatapoxvirus

    genul Molluscipoxvirus

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    26/78

    Virusul variolic

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    27/78

    Morfologie

    cele mai voluminoase virusuri

    virusul variolic msoar aproximativ 300/170 nm

    virionii sunt de formparalelipipedic sau ovoidal

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    28/78

    Virusul variolic - ME

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    29/78

    Structur

    Virionii sunt compui dintr-o anvelop i un nucleoidcentral.

    Anvelopa are o structurcomplex :un strat dublu lipoproteic

    un complex de structuri tubulare

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    30/78

    Nucleoidul centralconine acidul nucleic viral (ADN)ce este nconjurat de o membran dubllipoproteic. ADN-ul viral este bicatenar, circular,covalent nchis i este flancat de doi corpi lateralicare dau aspectul de "halter".

    genomul viral codific un numr mare de proteinestructurale (peste 100) i enzime (ADNtranscriptaza-ADN-dependent, ARN-polimeraza-

    ADN-dependent)

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    31/78

    Replicare

    poxvirusurile se replic doar n citoplasma celular,cu formarea de corpi de incluziune

    decapsidarea se realizeaz cu participareaenzimelor celulei gazdi a enzimelor virale

    ARN-polimeraza ADN-dependent mediaztranscripia ARNm, parcurgndu-se n continuareetapele replicative ale virusurilor cu genom ADN

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    32/78

    Epidemiologie

    actualmente, variola este considerat drept boalinfecioas eradicat prin vaccinare (eradicareglobalconfirmat de OMS n 1980)

    infecia variolic a fost prima boal n care s-aaplicat profilaxia specific

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    33/78

    eradicarea variolei a fost posibil deoarece :- omul era singurul rezervor cunoscut de virus

    variolic

    - nu existpurttori asimptomatici ai virusului- virusul variolei nu determin infecie latent saupersistent

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    34/78

    Patogenezmodelul patogenic-cel al unei infecii acute

    generalizate

    calea de ptrundere a virusului n organism respiratorie

    multiplicare activ local i la nivelul ganglionilorregionali

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    35/78

    perioada de incubaie era de 10-12 zile

    debutul - acut, febril

    erupie cutanat iniial macular, cu evoluieulterioar spre papule - vezicule - pustule cruste

    la pacienii care supravieuiau, se constataucicatrici tegumentare persistente

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    36/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    37/78

    Variol - erupie

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    38/78

    Variol - cruste

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    39/78

    Variol

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    40/78

    Se deosebeau 2 forme clinice de variol, cauzatede dou tipuri virale cu diferene minime ntreele:

    variola major - cu mortalitate de peste 30%

    variola minor (alastrim) - form atenuat(mortalitate sub 1%)

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    41/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    42/78

    Virusul variolei maimuelor

    infecteaz primatele n zonele ecuatoriale

    infecia omului este rar i se manifest prinerupiecutanatgeneralizat

    letalitatea este de aproximativ 15%

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    43/78

    Virusul variolei bovine

    infecia la om se produce prin contactul cu vaciinfectate

    leziunile eruptive localizate pe ugerul vacilorinfectate constituie sursa de infecie pentru om(mulgtori) care dezvolt leziuni similare pe

    mini ibrae(frtendin de generalizare)

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    44/78

    Leziuni eruptive localizate pe mn

    v.variolei bovine

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    45/78

    Diagnostic de laboratorInoculare n ou embrionate- pe membrana corio-alantoidian :

    - Evidenierea incluziilor caracteristicen epiteliul cornean (cornee de iepure) :virusul variolei determin apariia corpusculilor

    Guarnieri (incluzii eozinofile, nconjurate de un halou

    clar) - mici (1-2) incluziile sunt mai mari (3-7) i mai numeroase n

    cazul virusului vaccinal

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    46/78

    Familia

    Orthomyxoviridae

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    47/78

    Clasificare

    Familia include 4 genuri:

    Genul Influenzavirus A include virusul gripal tip A Genul Influenzavirus B include virusul gripal tip B

    Genul Influenzavirus C include virusul gripal C

    Genul Thogotovirus include virusurile Thogoto,

    Dhori i Batken.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    48/78

    Virusurile gripale A, B i C

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    49/78

    Clasificarea virusurilor gripale

    n tipuri i subtipuri.Specificitate Antigen CaracteristiciDe gen NP (nucleopreoteina)

    M (matrix)

    -3 genuri : A, B, C

    -3 genuri: A, B, C

    De tip HA (hemaglutinina)

    N (neuraminidaza)

    -14 tipuri HA (n patologia

    uman doar : HA1, HA2,

    HA3)

    -9 tipuri N (n patologia

    uman doar : N1 i N2)

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    50/78

    Morfologie i structurVirionii sunt de form sferic sau alungit, cu

    diametrul de 100-200 nm, prevzui cu anvelop.

    Sunt caracterizai prin pleiomorfism, astfel nctuneori se pot observa virioni cu form

    filamentoasi cu lungimi pn la 1000 nm.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    51/78

    Structura virusului gripal

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    52/78

    Structura virionului:Anvelopa - strat dublu lipoproteic ce deriv din

    membrana celulei infectate.

    Stratul extern este prevzut cu spiculi care coninhemaglutinin (HA)ineuraminidaz (N).

    Stratul intern conine proteina M (matrix) cu rol nmeninerea formei virionului.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    53/78

    Hemaglutinina se gsete sub forma inactiv careeste activat prin scindare sub aciunea proteazelorcelulei gazd. n urma scindriirezultdou tipuri desegmente : H1 i H2.

    Rolul HA - ataarea virionului la celul- eliberarea intracitoplasmatic a ARN

    viral.

    Neuraminidaza (prezent doar la virusurile gripale Ai B) mediaz ptrunderea virionului n stratul demucus al cilorrespiratorii.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    54/78

    Capsida - simetrie helicoidal

    Genomul - ARN monocatenar cu polaritate negativ.Componente suplimentare asociate genomului

    nucleoproteina (NP) - proteininternasociat ARN,cu rol n protejarea acestuia.

    polimeraze : PB1, PB2, PA.proteine nestructuraleNS1, NS2 i BM2 .

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    55/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    56/78

    Patogenez

    Infecia este transmis pe cale respiratorie,interesnd, de obicei, tractul respirator superior.Virusul se replic la nivelul epiteliului respirator,

    determinnd distrugerea cililor.Infecia viral a tractului respirator inferior

    (pneumonia gripal) se manifest cu semne majorede toxemie i cu letalitate ridicat.

    Mai frecvent, pneumonia este rezultatulsuprainfeciei bacteriene secundare (S. aureus, H.influenzae, streptococi hemolitici).

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    57/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    58/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    59/78

    Manifestri clinice Gripa

    Boala la om se manifest,dup o incubaie de 2-5zile, prin febr nalt (39-40C), cefalee, mialgii,artralgii, astenie marcat, simptome respiratorii (tuseuscat, rinoree).

    Dup o perioad de stare de aproximativ osptmn, febra scade, tusea devine productiv,iar evoluia este autolimitant cu vindecare lent (1-2sptmni).

    Grupele de risc pentru infecia gripal sunt copiiimici, btrnii, persoanele cu afeciuni cronicedebilitante, imunosupresaii.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    60/78

    Diagnostic de laborator

    Examen direct Microscopia electronic Imunofluorescena - detectarea antigenelor viraleCultivare Se realizeaz pe culturi celulare primare de rinichi de

    maimu. Efectul citopatic nu este caracteristic, daridentificarea se poate realiza prin hemaglutinaredirect.

    i n cazul inoculriioulorembrionate, diagnosticulse pune tot pe baza proprietilorhemaglutinante alev. gripal.

    Inocularea la animale de experien produce fieinfeciaexperimental, fie, doar creterea titrului deanticorpi specifici.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    61/78

    Serologia Decelarea anticorpilor specifici de tip (anti-NP) i de

    subtip (anti-HA) prin :- hemaglutinoinhibare- seroneutralizare- fixarea complementului

    - ELISA

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    62/78

    Profilaxie

    Msuri generale

    Pe plan european i mondial exist programe desupraveghere i control menite sprevinis limitezeextinderea epidemiilor de grip.

    Chimioprofilaxia

    Preparatele antivirale (Amantadina, Rimantadina)

    sunt eficiente doar pentru virusul gripal A iadministrarea lor este grevat de efecte secundarerelativ severe mai ales la copii.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    63/78

    Profilaxia specific activ se realizeaz prinadministrarea de vaccinuri.

    Vaccinurile inactivate se prepar din tulpini virale

    selectate anual.

    Se asigur anual vaccinuri care s conin cumaxim probabilitate tulpinile circulante n sezonulrespectiv sau variante strns nrudite.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    64/78

    Vaccinurile vii atenuate se afl nc n faza destudiu.

    Vaccinurile recombinante se studiaz elaborareade vaccinuri pe baz de sisteme recombinante declone de ADNc al ARN gripal cu obinerea devaccinuri cu antigene virale purificate sau peptide

    nalt imunogene.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    65/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    66/78

    Familia Rhabdoviridae

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    67/78

    Clasificare

    Familia Rhabdoviridae include dou genuri cuimportan pentru patologia uman :

    Genul Lyssavirus- virusul rabic

    Genul Vesiculovirus- virusul stomatitei veziculare

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    68/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    69/78

    Este agentul etiologic al rabiei(turbrii).

    Boala se transmite prin muctura animalelorinfectate.

    Sursa de virus este reprezentat att de animaleslbatice (lupi, vulpi, lilieci, obolani, etc) ct i de

    animale domestice (cini, pisici).

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    70/78

    Morfologie i structur

    Virionul are o formalungit,caracteristic de "glon"sau "obuz", cu diametrul de 70-80 nm i lungimea de120-240 nm.El se compune din anvelop,capsidi genom.- Anvelopa este alctuit dintr-un strat dublu lipidic. La

    suprafaa stratului proemin formaiuni glicoproteice- spiculi (glicoproteina G), iar n interior se gseteproteina M- proteina structuralmajor

    Glicoproteina G este implicat n ataareavirionului la celula int, avnd i activitatehemaglutinant.

    - Capsida are simetrie helicoidal.- Genomul este ARN monocatenar cu polaritatenegativ.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    71/78

    R li

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    72/78

    Replicare

    Ptrunderea virionului n celul este mediat dereacia ntre proteina G i receptorii specifici celularii se realizeaz prin endocitoz. Virusul prezint

    tropism neuronal.Replicarea are loc n citoplasm. La acest nivel se

    acumuleaz nucleocapside virale sub form deincluziuni intracitoplasmatice (corpusculii Babe-

    Negri - aspect patognomonic).Eliberarea virionilor se realizeaz prin nmugurire.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    73/78

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    74/78

    Patogenez

    Virusul se transmite prin muctura animalelorinfectate (excreiesalivarintens de virus).

    Se multiplic la nivelul porii de intrare (n muchiiesutul conjunctiv).

    Incubaia este variabil (ntre 10 zile i 1 an ) nfuncie de localizarea i gravitatea plgii mucateinfectante.

    Genomul viral trece n axoplasma nervilor perifericidin vecintateaporii de intrare,unde se multiplic.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    75/78

    Infecia disemineaz centripet (spre sistemul

    nervos central), pe traiectul nervilor periferici,invadnd creierul (encefalita rabic).Dup replicarea la acest nivel, virusul

    disemineaz centrifug, de-a lungul nervilor

    periferici, ajungnd s invadeze alte esuturi,inclusiv glandele salivare.Datorit leziunilor nervoase centrale i periferice

    se produc simptome specifice :

    hiperexcitabilitate, anxietate, spasm faringian,convulsii, paralizii.Evoluia este ntotdeauna letal.

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    76/78

    CultivareSe realizeaz n culturi celulare primare (rinichi

    de hamster) sau n linii celulare deneuroblastom.

    Identificarea se face prin imunofluorescen cuanticorpi monoclonali sau pe baza efectuluicitopatogen (incluziunile patognomonice).

    Inocularea intracerebral la oareci produceparalizii spastice .

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    77/78

    Examen direct: ELISA cu varianta rapidRREID (Rapid Rabies Enzyme Immuno-Diagnosis) deceleaz Ag rabice n esutulcerebral.Serologia decelarea de Ac rabici

    specifici n ser i n lichidul cefalo-rahidianprin:

    teste de seroneutralizare (deceleaz Acanti-glicoproteina G) ELISA

    P fil i

  • 8/2/2019 Lucrari Practice Virusologie Anul II MG

    78/78

    Profilaxie

    Imunizarea se realizeaz cu vaccin viral inactivat.

    n urma mucturii potenial infectante, profilaxiarabiei se realizeaz cu imunoglobulin umanspecific.