PROIECT LICEN

INTRODUCERE:

Spectroscopia Uv.-Viz este o metod de analiz aplicatat compusilor organici n a cror structur exist legaturi multiple, i se folosesc n spectoscopia aplicat pe domeniul ultraviolet i vizibil (UV.-VIZ.).Ea reprezint metoda ce poate fi aplicat unui tip relativ retrns de compui organici, i totui ea reprezint selectivitile avantajului absoiei radiaiei ultraviolete si vizibil de ctre sistemele polienice, indetific cu uurin faptul care permite prentena a acestor sisteme in structuri moleculare complexe.Radiaia electromagnetic n spectru, domeniului UV. , se afl in regiunea de raze X i n domeniul regiuni vizibile, cuprinznd lungimi de unde aflate in 10-400 n.m.Subdiviziunea UV. Pe trei regiuni UV.-A(400-320 n.m.), UV.-B (320-280 n.m.) i ultima UV.-C (280-10 n.m). S-a constat innd cont biologic ca efect ale radiaiilor asupra organizmelor vii.Analiza compuilor organici folosit in radiaia electromagnetic, prin aceast metod, se afl n domeniul vizibil lungimea de und caracterizat este cuprins n domeniul 400-800 n.m. Deci mai concret spectrul UV.-VIZ este o reprezentare grafic a intensitaii absorbite in funcie de lungimea de und a radiaiei electromagnetice, n care se iradiaz proba coninnd compusul organic care este studicat de noi.Spectroscopia optic (domeniul optic al radiaiilor electromagnetice care cuprinde toate undele care pot fi manipulate cu mijloace optice ) se bazeaz pe coleraia care exist ntre radiaie i materie, n sensul c radiaia apare i se sfrete n matrie. ntre aceste extreme exist o gaur larg de interaciuni.Moleculele i atomi liberi au strri discrete de energie, trecerea de la o stare la alta, implicnd emisia, absoria sau fiind absorbite sau mprtiate de ctre matrie, n special de ctre cea sub form de gaze sau vapori rarefiai (atomi izloai, molecule libere ) snt deosebit de clar legate de propietaile atomilor (moleculelor) n cauz, deci snt caracteristice specifice acestora, att n ce privete frecventa lor (lungime de und), multitudinea i grupajul, ct i intensitaile corespunztoare.Prin aceasta se pot face analize spectrale, calitative i cantiatative, deosbit de operativ i precis.Cazurile cele mai fericite din punct de vedere al definirii precise a legaturi-atom snt acelai cu ale particulelor izolate(gaze, vapori rarefiai, 10-6 -760 n.m col Hg) spectre atomice, spectre moleculare, care, pe lng faptul c fac posbil analiza spectral, au vaste aplicaii n fizica plasmei, a gazelor i vaporilor de tot felul, cum ar fi determinarea temeperaturii electronilor sau gazului, punerea n evident a particulelor ionizate, infornaii asupra ciocnirilor.S subliniem, c analiza spectral prin emisie const n determinarea lungimilor de und ale radiailor monocromatice caracteristice fiecrei specii de atomi(analiz calitativ) i n msurarea intensitaii unora dintre aceste radiai(analiz caliatativ).n special acestor dou tipuri de msuratori regsim ntreaga spectroscopie optic aplicat(prin emisie).Atomii i moleculele n stare condensat (lichide,solide) au de asemenea spectre optice de o specificitate remarcabil.Fenomene care pot fi puse in eviden substanele amorfe (stare vitroas).Structura nivelelor aceleai substane difer n starea amorf fa de cea cristalin, pe cale spectral, gradul de cristalizare a unor materiale.Spectroscopia optic mai n toate domeniile de cercetare i de aplicaie practic, ceea ce se simnte sensibilitaii ei deosebite, preciziei mari i uurina relativ cu care se obine informaii despre orice fel de substan pe aceast cale,caracterlui ei aproape totdeauna nedistructiv (probele rmn practic intacte).Analiza spectroscopic se poate face cu ajutorul aparatelor spectrale dispersive i auxiliare, completate cu ajutorul mijloacelor de producere i detecie a radiaiilor izvoarelor (sursele) spctrale i receptorii opticii-spectrolii.Spectrometria prin absorie necesit utilizarea unor surse sepctrale optice continue pe un domeniu relativ larg, de sute sau mii de n.m. , din care monocromatorul spectrometrului selecioneaz cte o poriune ngust (0,1-10 n.m) pe rnd, pentru fiecare determinare extenciei (transmisiei) probelor n lungul spectrului.Exist dou surse specifice regiuni ultraviolete vizibil (UV.-VIS.) : lupa cu descaracare n arc, n denteriu, 170-360 n.m. i becul cu filament de wolfram, 300-3000 n.m. i mai multe surse pentru domeniul infaloru uzual, 2-50 n.m. cum sunt : filamentul Nerust.

CAPITOLUL IPRINCIPI I REGULI DE SELECIE

Strile electronice ale nivelelor organice i ale moleculelor organice se afl la anuminte diferene enegetice care mai corespund oridinului de mrime al energiei aduse de UV. Sau vizibil.Moleculele n stare de rezonan pot absorbi o cantitate cuantificat de energie adus de electromagnetica radiaiei , constatnd c efectul poate promova electroni din orbitali moleculari de energii mici (joase) n orbitali moleculari de enrgii mari (nalte).Spectroscopia UV.-VIZ din acest motiv a mai fost denumit i spectroscopia electronic. Tranziiile electronice responsabile care paticip pentru desoria radiaiei UV.-VIZ. se numete cromofor.La o condiie de rezonana ntre energia absorbit n decursul unei tranziii electronice UV.-VIZ. care produce aceast tranziie este: E=nc/E=reprezint energia absolut in tranziia eneregetic;n-reperint contanta lui Plauck;c-viteza lumini;-lungimea de und a radiaiei UV.VIZ.Timpul de via (10-6 -10-9s) corespunde tranziiei electronic, care este rapid in stare de excitare, conform princpiului Franck-Coudon se constat n timp c molecula ce avea absoria radiaiei aceeai configuraiei i aceeai energie cinetic ed vibraie, att n stare de excitare ct i n stare fundamental. Vorbind la general benzile de absoie UV.-VIZ. au spectrul unor benzi largi,care sunt adesea influenate de condiiile (solvent, temeperatur) de nregistrare.

a) Curbele Morse Epotentiala=f(r) unde r=distanta interatomica, pentru doua stari electronice ale unei molecule diatomice si tranzitii electronice 20, 30, 40b) alura benzii de absorbtie rezultate prin suprapunere

a)Regula excluziunii de spin (spinul global) nu se modific n timp ce are loc tranziia elelctronic; nu are loc inversarea spinului electronului n decursul tranziiei electronice.b)Principiul autisimetrizrii, aici se modific n decursul tranziiei momentul dipolar i nu poate fii unul , din din cauza simetriei orbitale care va situa electroni in decursul tranzitiei. c)Legea supropunerii orbitalelor indic o posibil acumulare a momentului tranziiei electronice , atunci cnd oribitalii participani se suprapun putin ( deloc ) in spatiu. De exemplu, tranziilor electronice intermoleculare de transfer de sarcin are loc de la o molecul electrosudonatoare spre molecula electro-acceptoare.

Tipuri de tranzitii electronice. n domeniul UV-VIZ tranziiile electronice se exprima sau constau in excitare unui electrom de valen situat ntr-un orbital molecular ( OM ) de legatur O sau , sau ntr-un orbital molegtur n , spre un OM de autilegtur O* sau *. Compui organici cu structur complex in coul spectrelor UV-VIZ , este folosit cea mai probabil tranziie notat * care poate promova molecular determinarea unui electron din orbizalul molecular ocupat de energia HOMO ( Highest Occupied Molecular Orital) in orbitalul molecular care este vacant i are energie joas LUMO(Lowest Unoccupied Moleculor Orbital).Tranzitiile electronice care au loc ntre orbitralii moleculari ai moleculelor oragnice pot fi reprezentate astefel:-tranziii o-o*, prin producerea acestor tranziii necesit radicaii UV cu lungimi de unde scurte; se produc astefel de tranziii electronice n cazul alacanilor , care pot fi folosit drept solvent, transparent pentru nregsistrarea spectrelor UV.-VIZ.-tranziii u-o*; n spectrul UV. Sunt tranziii care sunt permise prin reguli de selecie i conduc nregistrarea unor benzi intense , cu valori mici de lungimi de und. Sunt folosii drept solvenii cu lungimi de und mare i cu absorii intense.-tranziii - *;lungimea de und situat pe msura uzual al domeniuliui (UV. aproape VIZ) care sunt studiate experiemental cel mai mult.-tranziii n- * ; intensitaea benziilor corespunztoare din spectre UV.-VIZ. este sczut, aceste tranzii sunt interzise din punct de vedere al regulilor de selecie.

Factori structurali care determin pozia benzilor de absorie UV.-VIZ.n cazul spectrului UV.-VIZ. poziia care in se situeaz o anumit band de absoie. Ea este dependent de factori care ne infuleneaz nivelele energilor relative de orbitalilor moleculelor:-legturilor sunt efecte de conjugare;-substituenilor ale sitemului conform naturii lor;- natura solventului folosit pentru nregistrarea spectrului de absorbie.Conform metodei orbitalilor moleculari pot fi descrise starea electronic a unor molecule coninnd sisteme polienice conjugate prin calcul aproximativ care ia n considerare numai orbitali atunci, de la fiecare atom de carbon hibriziat de sistemul conjugat.Nivele energetice electronice ale unor sisteme polienice i tranziiile - * care determin apariia benzilor de absorie UV.-VIZ.

a)etena;b)1,3-butadiena;c)1,3,5 heatrina.Fenomenele n spectru UV sunt caracterizate de apariia unei benzi intense situate la max =215-250 n.m datorate tranziiei permise - * cu o band de absorie (slab) la max=310-330 n.m. datorit tranziiei interzise n- *.Dar 1,3,5 hexatrina are deosbirea n sistemul aromatic din structura benzonului ce produce mereu n spectrul UV.-VIZ. trei benzi de absobie de intensitai diferite: dou benzi absorbite de intensitai slabe i o band larga de absorbie.

Nivele energetice electronice ale moleculelor i tranziiile care determin apariia benziilor de absorie UV.-VIZ.a)formaldehda;b)2 butenal.Benzi de absorie UV.-VIZ. al benzenuluimax184 nm(max=60.000)203 nm(max=7400)256 nm(max=204)

ClarDenumireBraudep

E1E2B

Platt*Tranzitii electroniceTeoria grupurilor**1B1A1La1A1Lb1A

1E1u1A1g1B1u1A1g1B2u1A1g

Simbolizarea strii electronice : A stare fundamenatala; B stare excitat. Simbolizarea claselor de simetrie din teoria grupurilor: Rotaie n jurul axei Cn , de ordin : A simetric , B antisimetric; E stare dubl degenerat , T stare tripl degenereaz indici : Inversie : g simetric , u antisimetric ; Axe C2 perpendiculare pe Cn : 1 simetric , 2 antisimetric ; Plan de simetrie Ou ( perpendicular pe Cn ) : simetric , antisimetric

Capitolul IIIEfectul solventului folosit la intregistarea spectrului UV.-VIZ.nregistrarea spectrelor electronice se va face n solui foarte diluate ( 10-3 10-4 M ) fiind folosit un solvent fie transparent pe domeniul spectral analizat. nregistrarea spectrului UV.-VIZ. , a unui solvent cuprinde lungimi de und mai mari dect prin absorbii propri cramoforului din structura solventului devin excesive acoperind benzile caracteristice ale compusului studiat , daca solventul si substana de analizat prezint benzii de absorbie in regim apropiat.Lungimi de und limit ale celoar mai uzuli solveni folosii n spectrografia UV.-VIZ.

Solventlim[nm]

Apa205

Etanol210

Hexan210

Ciclohexan210

Metanol210

Dietil eter210

Acetonitril210

Tetrahidrofuran220

Diclorometan235

Cloroform245

Tetraclorura de carbon265

Benzen280

Poziile benzilor si energiile tranziiilor electronice n spectrele UV.-VIZ. sunt de natura solventului influenate in care este dizolvat compusul organic analizat dup care este compararea spectrelor nregistare pentru compui diferii poate fi facut numai in acelai solvent.

Spectrometrul UV.-VIZ. schem de principiuMai toate aparatele au n componena lor o oglind pivantant care descompune radiaia monocromatic n dou fascicule care merg peste cuva de referin ( conind solvent) i peste cuva de msurare in care exista soluia diluat in concentraie 10-4 mol XL-1 ( pentru domeniul UV , cuvele sunt din coar , care este un material transparent n domeniul de lucru iar pentru VIZ cuvele sunt din sticl) . La un detector ajunge radiaia emergent cu care se msoar radiaia transmis cu ocazia aceasta nregistrolul traseaz spectrul UV.-VIZ. sub forma grafic a absorbiei n funcia de lungimea de und A = f ( ).Intensiatea i poziia unei benzi de absorbie sunt principalele caracteristici. Lungimea de und max corespunde n poziia de absorbie a radiaiei electromagnetice n care energia este egal cu energia necesara pentru producerea tranziiei electronice.

De doi factori depind intensitatea absorbiei : probabilitatea interaciuni dintre radiaia electromagnetic si sistemul electronic astfel nct sa devin posibil efectuarea unei tranziii din stare fundmantal ntr-o stare excitat i polarizarea stri excitate. Pentru exrimarea intensitii absorbiei se pot utiliza mrimile : Transmintant T , definit prin raportul : T= 1/10 Unde : 10 este intensitatea radiaiei incidente pe probe . 1 este intensitatea radiaei transmise prin solutia probei . -Absorbant A , dat de relaia : A= log (10/1) = log(10/T) Daca soluia folosit n prob nu absorbe deloc radiaia e.m. incidenta , avem atunci transmitana T este 100% , iar absorbia apare nul . n conformitate dac ntreaga cantiate de radiaie e.m. este absorbit , avem atunci T = 0% iar absorbana este infinit.O legatur empiric ntre absorbia i lungimea drumului parcurs de radiaia e.m i concentraia probei este stabilit de legea LAENBERT-BEER .A=log(10/1 ) = ciUnde : este absorbivitatea molar , exprimat in L * mol-1 u.m.-1

Spectrul UV.-VIZ. se face reprezentat n mod vizual folsind n modul valorilor de absorbana nregsitrate n funcie de lungimea de und a radiaiei emise A=f().Legea lui LAENBERT-BEER este respectat la concentraii relativ mici (n solutii diluate). Spectrele UV.-VIZ. au i o alt variant de reprezentare grafic care nu va reda variaia absorvibitaii molare n funci de lungime de und log =f () sau absorvibitaii molare n funcie de numarul de und exprimat n u.m.-1 log =f (v); devenind atunci ct mai avanatajos repretzentarea ntr-un spectru o band instens se situeaza n vecinitatea unei benzi de intensitate slab.Metoda matematic este mai recent utilizat de devierea curbei de absorie = f () pentru observarea unei diferene mici n spectru.Caracteristici nregistrate n spectrul UV.-VIZ. care sunt atribute structurate bogate pe absorii.HIDROCARBURIn domeniul UV. hidrocarburile saturate (alcanii si cicloalcanii ) sunt substane care produc benzi de absorbie, ndepertat datorit tranziiilor transimise o-o*. n domeniul UV.-VIZ. , uzual de nregistrate a spectrului, hidrocarburile saturate nu produc benzi de absorbie i din acest motiv pot fi folosite drept solveni transpareni pe acest domeniu.n domeniul hidrocarburilor,spectrele nesaturate UV.-VIZ., au legturi duble izolate care sunt determinate ce prezint cromoforului etilenic ce se caracterizeaz prin nregistrarea unei benzi de absorie intense care sunt situate n domeniul 165-200 n.m. (=104) Structurabaza dienaIncrementecalculat[nm]

217(aciclica)+2 x 5(alchil)227

214(heteroanulara)+2 x 5 (alchil)+5 (legatura dubla exociclica)229

253(homoanulara)+2 x 5 (alchil)263

253(homoanulara)+30 (legatura dubla extinde conjugarea+3 x 5(alchil)+5(legatura dubla exociclica)303

Benzenul prezint 3 benzi de absorie care au valori situate astfel: 184 n.m (max=60.000)(band montat E1 sau ),204 n.m. (max=7.500)(E2 sau p) si 256 n.m. (max=200)(band sau ) corespunztoare unor tranziii -*. Unde avem banda B care conine o structur foarte fin, care n cazul n care n probele de vapori sau solveni nepolari , ale nnivelelor elrctronice. Mai aveau n solveni polari, intersaciunea dintre solvent i moleculele de benzen innd o acoperire a structurii fine.SubstituentISubstituentISubstituentI

-CH33.0-Br6.5-OH7.0

-CN20.5-Cl6.0-O-31.5

-CHO46.0-NH226.5-OCH313.5

-COCH342.0-NHCOCH338.5

-CO2H25.5-NO265.0

Compui Heterociclici aromaticiAcesti compui au straturi cu unele de cinci sau ase atomi sunt compui heterociclcici, au transparena la lungimea de und mare (200 n.m.) deci rezult c numai compui heterociclici aromatici abrosbind radiaia n domeniul spectrului UV. apropiat.n domeniul spectrului UV.-VIZ. compui aromatici monoheetroatomici cu inel de cinci atomi i conine dou benzi de absorbie situate n domeniul spectrului UV. apropiat.Aceste structuri sau substituirea lor , heterociclice care determin o mutare sau deplasare batoeroma a pozitiilor maximelor de absorie i o intensifivcare a lor.Un alt compus heterocilic aromatic PIRIDINA , cu inel de ase atomi.Este caracterizat n domeniul de un spectru UV.-VIZ. coninnd trei benzi de absorbie. Asemnarea spectrului UV.-VIZ. al Piridinei este similar cu cel al benzenului . Este diferit doar printr-o intensitate de absotie mai mare corespunztoare benzi B si cu o structur fin. Datorit creteri polariti solventului are un efect foarte mic de micare asupra benzii B a benzenului , dar produce o micare a acestei benzi n cazul Piridinei.Mai ntlnim Chinolina care n acest domeniu prezint un spectru UV.-VIZ. cu trei maxime de absorie similare naftalinei. Mai este iar Ancridina care in acest domeniu prezint in spectru UV.-VIZ. asemntor cu cel al antracenului, pozitile benzilor de absorie. Poziii de maxim al benzilor de absorie UV.-VIZ. cu carectreristicile hidrocarburilor aromatice policilice cu unde condensate si compui heterociclici aromatici.Compusmax[nm], ()Solvent

naftalina221 (104), 286 (103), 312 (102)etanol

antracen256 (104), 375 (103)etanol

fenantren251 (104), 345 (103)etanol

furan207 (103),hexan

pirol235 (103)hexan

tiofen231 (104), 243 (103)hexan

piridina251 (103), 256 (103), 264 (103)hexan

chinolina226 (104), 230 (104), 281 (103), 301 (103)etanol

acridina249 (105), 351 (104)etanol

piridazina246 (103), 251 (103), 340 (102)hexan

pirimidina242 (103), 293 (103), 307 (102), 313 (102), 324 (102)hexan

pirazina260 (104), 328 (103)hexan

Centonele si aldehidelie satuarate in domeniul UV prezint trei benzi de absorbie iar doua dintre ele fiind absevate ndeprtat.Calculul valorilor tmax pentru compui de carboni , nesaturate n etalon.

baza(nm)

cetone aciclicesau cicluri cu 6 atomi215

cicluri cu 5 atomi202

aldehide207

acizi si esteri197

Grupari functionaleIncremente I

legatura dubla externa unui ciclu5

legatura dubla externa simultan la doua cicluri10

Conjugare aditionala C=C :aciclica sau heterociclicahomoclicica+30+39

Substituent

-R alchil (incluzand parti ale ciclului carbonilic)+10+12+17+17

-OR alcoxi+35+30+17+31

-OH hidroxi+35+30+30+50

-SR tioeter+80

-Cl cloro+15+12+12+12

-Br bromo+25+30+25+25

-OCOR aciloxi+6+6+6+6

-NH2, -NHR, -NR2amino+95

Compui de transfer de soreinPunerea n eviden i formarea unor compui de transfer de sarcin in spectroscopia UV-VIZ este o metod care prin interaciunea dintre o molecul cu densitate mare de electroni i o alta molecul cu deficit electronic.Am observat o molecul eletron-donatoare care poate participa la formarea a mai multor orbitali moleculari cu orbitalul HOMO ocupat cu o parte din electroni, iar molecula acceptoare particip cu orbitalul LUMO vacant.

Cap. 4 Florescena i fosforscen.Florescena ( situat in domeniul UV.-VIZ. ) este o proprietate a unor molecule de a absorbi radiaia electromagnetic a lungimi de und i tot de o anumit radiaie electromagnetic de o alt lungime de und care poate fi situat n domeniul vizibil. O dat cu interceperea iradierii emise de radiaia florescent a moleculelor probei cu radiaie electromagnetica ce poate produce trecerea moleculei din stare fundamental intr-o stare excitat. Fosforescena este un fenomen asemntor sau similar cu fosforescena unde moleculele vor continua ca s emit radiatile electromagnetice cu o anumit perioad de timp si dup interceperea iradierii exterioare .Procesele de relaxare care apar in fenomenele de fosforescen si florescen si revin la starea fundamental , aceste fenomene au loc prin emisia de radiaie electromgnetic.In urma absoriei de energie mai pot avea loc mai nti un fenomen de relaxare prin conversie intern i acest fenomen const in tranziile electronice care au loc spre nivelele de vibraie superioare ale orbitalelor moleculari LUMO , care conducnd n starea de vibraie cea mai joas a acestei stri electronice.Tranziii electronice au loc cu conservarea multiplicaii de spai electronice ntre stri singlet.n fosforescen acest fenomen, tranziile electronice, pot avea multiplicri diferite i ntre stri. Dintr-o stare excitat , inversia spinului electronic ajunge la o stare triplet T. Aceste stri triplet T , sunt foarte stabile i au un timp de via lung , ceea ce duce ca relaxarea prin emisie de radiaie din starea T spre starea fundamental sa fie observat i dup oprirea absorbiei de radiaie electromagnetic.

Exemple de spectre UV :a)Poliene conjugate i poliene cu legturi duble izolate ;b)Compus carbonic , nesaturat si compus carbonic , y saturat ;c)1,4 dihidroantracen i 9,10 dihidroantrecen.

Se constat dac o mostr conine mai mult de 3-4 specii chimice disticte care se manfiest deodat n aceeaii regiune a spectrului , va fi greu ( imposibil) s le decalm. n cazul solidelor este avantajos s lucrm la temperaturi ct mai sczute.Surse de erori n tranarea spectrelor de absorbie 1.Erori de aparat : a.Puritatea spectrului Avem nevoie de un fascicul monocromatic pentru trasarea unei curbe de abosrie , avnd lungimea de und si variabli.n sensul strict al cuvntului mai putem produce fascicole monoctromatice. Ele nu sunt niciodata riguroase sau mai puin sau mai mult monocromatice b.Viteza de nregistrare Viteza de pargurgere n cazul aparatelor automate ( spectrometre pentru domenile UV , vizibil i inflarou ) Parcugerea a spectrului n anumite limite poate fi aleasa uneori de operator . Are doi factori de care depind , factori care sunt strns legai ntre ei:I ) Spectrofotometrul al receptorului i trebuie timpul de relaxare al receptorului.II ) Spectrul de masurarea are nfinarea componentelor ( benzilor spectrului masurat ) Considerm c un spectru de absorie poate fi bine redat att de un spectrometru cnd viteza are valoare mai mica decat viteza de nregistrare.n domeniul inflarou unele spectrofotometre au un dispozitiv care pargurge, schimba, viteza de parcurgere a spectrului uneori n mod automat de ndat ce inscritorul de micorare are tendina de micorare rapid ( iese o pant abrupt a benzi) n sus i ncepnd de la capt , totul automat , parcurge cu o vitez mare de ndat ce spectrul revine uor , lin , sau materialul nu poate absoarbe.Ca de exemplu tipul UR 10 produs de firma zeisa , RDG.n aceste efecte uneori trebuie s complectm unul legat de parcurgerea de vitez a spectrului. Atunci cnd uneori semnalul optic este slab , exist fie din anumit caz c suntem la capatul marginei util a spectrului sursei, sau unei sensibiliti a receptorul , ori substana supus pentru msurare absoarbe foarte mult n domeniul spectrului . III ) Margini ale unor benzi puternice de absorbie Parcurgem in sensul vizibil ultraviolet ( absorbie optic al unui cristal KCl n domeniul 185 800 n.m. al spectrului ) .Acest cristal are foarte pronunat band de absorie , saturat grupului OH , avnd marginea care se vede foarte bine situat la cca. 220 n.m , depinde de grosimea cristalului sau chiar mai jos i de concentraia OH-ului ; cristalul este transparent.Inflarou in acest domeniu apropiat i n cel vizibil intensitatea sursei este mult mai mare ( de exemplu un bec cu filament Wolfram ) , iar receptori au sensibilitatea ( fotorosisten , RbS , fotomultiplinator ) de asemenea , vom lucra cu foarte mici domeni ale monocromatorului aici.Mergnd mai departe sau trecnd in domeniul ultravioletelor , sursa va fi mereu sau mai bine zis totdeauna o lampa de hidrogen care s aib mereu o intensitate relativ satisfctore pn dincolo de 185 n.m. , ns pe msur ce ne apropiem mai mult de marginea de la 185 n.m a spectrului , receptorul va fi tot mai puin sensibil . Suntem nevoii ca urmare s marim tot mai mult monocromatorul fantelor pentru a realiza un semnal de zero , satisfctor , n vederea msurri.Spectroscopia prin absorie Surse de radiaie optice n aces domeniu spectrofotometria prin absorie aveam ca necesitate utilizarea unor surse de spectru optice continue pe un domeniu relativ larg de de sute sau mii de n.m , din care monocromatorul spectrometrului selecionez o poriune ngust ( 0,1 10 n.m ) pe rnd pentru fiecare determinare a probelor in lungul spectrului.Apare ca existen surse specifice regiuni ultraviolete si vizibil ( UV.-VIZ. ) : lampa cu descrcare n arc , 170 -360 n.m., si becul cu filament de Wolfram , 300- 3000 n.m.

Aceste de mai sus sunt componentele ale sepctrofotometrului de absorie . Componentele unui spectrofotometru de absorie n UV.-VIZ.

Legea Lambert-Beer , cu acest lege este folosit ca baz n analize sau determinri.

n acest desen este reprezentat absoria luminii n cazul legii Lambert- Beer unde : I0 reprezint radiaia incident monocromatic ; l- lungimiea ;I-intensitatea final. 9