RAPORT FINAL - incdsb.ro · vegetala. (Domeniul 5: Agricultura, ... tehnologii "safe-extraction";...
Transcript of RAPORT FINAL - incdsb.ro · vegetala. (Domeniul 5: Agricultura, ... tehnologii "safe-extraction";...
Institutul National de Cercetare-Dezvoltare pentru Stiinte Biologice Bucuresti
RAPORT FINAL
Proiect: PN-II-PT-PCCA-2013-4-0361
Valorificarea superioara a sub-produselor si reziduurilor vegetale pentru a asigura exploatarea durabila a
resurselor naturale
Acronim: HIVEGRES
Contract nr. 145/2014
Cuprins Pag
Consortiu, obiective 1
Gradul de realizare a rezultatelor estimate 2
Impactul rezultatelor obtinute 3
Proiectul HIVEGRES este realizat de un consortiu academic-industrial (IMM uri) format din :
• Institutul National CD pentru Stiinte Biologice Bucuresti, coordonatorul proiectului, (CO)
• Universitatea din Bucuresti, Facultatea de Chimie (P1)
• Centrul de cercetare si prelucrare a plantelor medicinale Plantavorel SA, Piatra Neamt (P2)
• Cosfel Actual S.R.L, Bucuresti (P3)
Scopul proiectului este acela de a obtine prin metode sigure un continut imbunatatit de compusi naturali cu
valoare nutraceutica, care sa fie utilizati in obtinerea de produse alimentare ca si suplimente si aditivi de origine
vegetala. (Domeniul 5: Agricultura, siguranta si securitate alimentara, directia prioritara 5.2. Modernizarea
productiei alimentare si obtinerea de produse corespunzatoare principiilor dezvoltarii durabile si securitatii
alimentare)
Obiectivele proiectului HIVEGRES conform contract 145/01.07.2014:
• Valorificarea superioara, utilizarea durabila a resurselor naturale prin reciclarea reziduurilor si sub-
produselor vegetale ca urmare a cresterii randamentului de extractie;
• Introducerea de noi instrumente pentru controlul si monitorizarea procesului de productie si pentru
evaluarea calitatii produselor: retea de nano-biosenzori;
• Crearea de noi oportunitati pentru diversificarea produselor de tip alimente functionale si largirea
segmentului de piata al partenerilor industriali –companii mici si mijlocii- din proiect catre industria
alimentara, pe segmentul de piata care le implica.
Proiectul, ca urmare a modificarii graficului de finantare, a avut o durata de implementare de 36 de luni,
planificarea activitatilor incluzand urmatoarele etape, care au fost realizate integral
1. Reciclarea reziduurilor si subproduselor vegetale si imbunatatirea randamentelor de extractie;
tehnologii "safe-extraction"; evaluarea si stabilizarea produsilor de extractie
2. Reciclarea reziduurilor si subproduselor vegetale si imbunatatirea randamentelor de extractie;
tehnologii "safe-extraction"; evaluarea si stabilizarea produsilor de extractie (continuare).
Implementarea de noi instrumente analitice si protocoale pentru evaluarea calitatii materialelor
biologice si a produselor si pentru controlul proceselor.
3. Reciclarea reziduurilor si subproduselor vegetale si imbunatatirea randamentelor de extractie;
tehnologii "safe-extraction"; evaluarea si stabilizarea produsilor de extractie (continuare-partea a 3a).
Implementarea de noi instrumente analitice si protocoale pentru evaluarea calitatii materialelor
biologice si a produselor si pentru controlul proceselor (continuare). Realizare model demonstrator
extractie MAE
4. Implementarea de noi instrumente analitice si protocoale pentru evaluarea calitatii materialelor
biologice si a produselor si pentru controlul proceselor (continuare 2016). Realizare model
demonstrator extractie MAE (continuare 2016). Formularea de produs nou
Rezultate
estimate Grad de realizare al rezultatelor
Proceduri
analitice
validate
(HPLC;
TEAC) pentru
evaluarea
materialului
vegetal
1. Metoda de determinare a capacitatii antiradicalice a compusilor extrasi, utilizand
TEAC -raport RST etapa I
2. Metoda de determinare a capacitatii antiradicalice a compusilor extrasi, utilizand
ORAC -raport RST etapa I
3. Metoda de analiza HPLC-DAD a suportat o validare partiala in termeni de limita
de detectie, limita de cuantificare, repetabilitate, precizie intermediara si exactitate
- raport RST -etapa a II-
4. Metoda dezvoltata este aplicabila pentru determinarea continutului de carotenoide
β-caroten, luteina, licopen din probe cu matrice de baza de tip ulei- raport RST -
etapa a II-a Protocoale de
evaluare si
stabilizare a
principiilor
active.
1. Au fost dublu standardizate extractele din afin și merisor, la nivel de continut de
antociani (echivalent cianidin) si la nivel de continut de polifenoli (echivalent acid
clorogenic) si au fost elaborate protocoalele de evaluare si stabilizare a principiilor
active utilizand acid citric – raport RST etapa II-a si raport RST etapa a III-a.
2. A fost stabilizat cu BHA extractul uleios de β caroten -raport RST etapa a III-a Dezvoltare
retea de
senzori cu
utilizare in
evaluarea
materialului
vegetal
1. Validarea fezabilității ipotezei privind utilizarea biosenzorilor pe bază de lacază
pentru determinarea polifenolilor și compușilor metoxi-substituiti s-a realizat și pe
probe reale, reprezentarea relativă a concentrațiilor de acid clorogenic determinate
prin HPLC-MS si prin utilizarea biosenzorului ca instrument de măsura pentru
extractele MAE de afin și merisor conducând, din nou, la o corelație liniară intre
cele două raspunsuri pentru determinarea echivalentului în acid clorogenic-raport
RST etapa a III-a;
2. Cerere brevet inventie A00824/2015 publicata RO131153 (A0) 2016-05-30 Tehnologie
pentru
extractie
sigura si
eficienta
1. Tehnologie realizare extract solid afin, maces, merisor-Plantavorel- raport RST
etapa III-a
2. Tehnologie MAE realizare extract uleios beta-caroten – Cosfel si INCDSB – raport
RST atapa III-a; cerere brevet A00877/nov 2016
Documentatie
brevet MAE. Cerere brevet A00877/nov 2016
Specificatie
tehnica
prototip de
Retea biosenzor pentru determinarea continutului in compusi fenolici si polifenoli metoxi-
substituiti cu senzor determinare capacitate antioxidanta CO-INCDSB
laborator
pentru retea de
senzori.
Retea nanosenzori bazati pe nanooxizi metalici – P1 UB
Documentatie
brevet
biosenzor
pentru
activitatea
antioxidanta
Documentatie cerere brevet -anexa 1 la raport RST etapa IV
Model
demonstrator
modul
extractie.
Workshop. Nu s-a realizat Documentatie
tehnica pentru
un fito- produs
formulat.
Au fost formulate doua tipuri de produse noi
- Supliment alimentar;
- Produse cosmetice.
- Au fost realizate trei fise tehnice, pentru urmatoarele produse:
➢ Urovit C – supliment alimentar vezi anexa 2, RST etapa IV
➢ Ulei dupa plaja, regenerant – produs cosmetic, vezi anexa 3 si 5, RST etapa
IV
➢ Ulei protectiv, de plaja – produs cosmetic, vezi anexa 4 si 6, RST, etapa IV Protocoale
pentru analiza
fito-
produselor.
• Au fost dezvoltate protocoale pentru analiza/evaluarea calitatii fito-produselor,
raport RST etapa IV, fisele tehnice (incluse in raport) si specificatiile tehnice
(anexate raportului)
• S-a demonstrat viabilitatea utilizarii retelei de biosenzori si senzori pentru
determinarea eficacitatii antioxidante si a continutului total de compusi polifenolici
pentru extractele standardizate la acid clorogenic. 1 articol ISI 1. Cristea D., Danet A et al, ANTIOXIDANT ASSAY FOR FRUIT JUICES BY
USING A CHEMILUMINESCENCE METHOD BASED ON THE CO(II)EDTA
/LUMINOL/H2O2 SYSTEM Revista de Chimie (nr. 5/2016)
2. Popa, C.V., Litescu, S. C., Vasilescu, A., Radu, G.L., Danet, A.F., 2017, Analysis
of some compounds based on the antioxidant properties evaluated by using metallic
oxides nanosensor array”, trimis spre publicare.
Impactul rezultatelor obtinute
1. Aparat si tehnologie de extractie asistata de microunde
Eficientizarea utilizarii resurselor vegetale secundare, cele de tip reziduu/sub-produs tehnologie de prelucrare
primara poate fi realizata prin utilizarea unor tehnologii avansate de extractie, alegerea acestora depinzand de:
tipul de biomolecula si matrice, nivelul de procesare (laborator sau industrial), raportul dintre costul de productie
si valoarea economica a compusului ce urmeaza a fi obtinut.
Fig. 1. Instalatia de uscare si sterilizare a materialului
vegetal
Fig. 2. Detaliu model demonstrator sistem de
extractie asistata de microunde
Cea mai frecventa prelucrare a materialului vegetal este prelucrarea mecanica in vederea asigurarii unor
randamente de extractie imbunatatite. In prezent sunt disponibile diverse metode de extractie pentru principiile
active din produse vegetale, de la distilare pana la extractii cu solvent super- sau sub-critic. Obtinerea de produse
cu valoare adaugata–care face de fapt obiectul acestui proiect de transfer de cunostinte-inseamna utilizarea de
tehnologii de extractie performante, de instrumente de analiza si control avansate, care sa asigure o eficientizare
atat a valorificarii materialului vegetal prin extractii specifice din reziduuri si sub-produse vegetale, cat si a
procesului de realizare a fito-produselor ca urmare a folosirii unor tehnici, protocoale si instrumente de
caracterizare specifice, rapide, sensibile, sigure si care sa asigure reducerea costurilor.
Compusii cu potential comercial ridicat prezenti in deseurile alimentare si produsele secundare trebuie separati
de matrice printr-o abordare complexa (utilizarea combinata a diferitelor tehnici fizice, chimice si biochimice)
in vederea unei extractii selective a compusilor tinta ce vor fi utilizati ca aditivi alimentari sau la obtinerea de
produse alimentare cu valoare adaugata mare.
Extractia de componente cu valoare adaugata mare trebuie sa fie fezabila din punct de vedere economic, acest
obiectiv putand fi realizat fie prin utilizarea de tehnici de extractie performante fie prin imbunatatirea
compozitiei extractului obtinut ca urmare a aplicarii unor sisteme de separare si eventual concentrare selectiva.
Pe langa metodele conventionale de extractie a principiilor active din materialul vegetal cum sunt distilarea si
extractia cu solvent (metoda Soxhlet) exista un numar mare de extractii solid-lichid (SLE) care au dezavantajul
timpului de extractie indelungat si utilizarii unor cantitati mari de solventi. Prin urmare aceste proceduri sunt
costisitoare, poluante si ineficiente economic datorita limitarii numarului de probe procesate pe unitatea de timp.
Tehnicile de extractie neconventionale reprezinta o alternativa eficienta, exemple de tehnici neconventionale
fiind extractia solid-lichid in flux fortat (FFSLE), extractia solid-lichid la presiune medie (MPSLE) si extractia
prin metoda de rotire in plan (RPE) precum si metoda de extractie cu solvent in camp de microunde (MAE),
metoda foarte rapida utilizata pentru extractia selectiva a diferiti compusi din tipuri de probe variate, de la sol
pana la materialul vegetal. MAE este o tehnologie inovativa de extractie cu solvent ce ofera multe avantaje fata
de metodele conventionala de tip SLE, datorita producerii eficiente de caldura specifica in volumul probei.
Aplicatiile MAE includ extractia de compusi de mare valoare din surse naturale constand in fito-nutrienti,
nutraceutice si ingrediente alimentare functionale, si substante active farmaceutice din biomasa, utilizarea
acestei tehnologii rezultate in urma implementarii HIVEGRES constituinf pe mai departe o componenta a
transferului de cunostinte catre alte parti interesate. Unul dintre potentialii utilizatori ai acestui aparat si ai
tehnologiei de extractie este HOFIGAL, care si-a manifestat interesul in a introduce in linia tehnologica un
astfel de tip de extractor MAE.
Realizarea unei extractii selective prin utilizarea unor membrane de extractie specifice dezvoltate/ „croite” astfel
incat sa asigure imbunatatirea calitatii extractului prin cresterea rezolutiei intre principiile active chiar din etapa
de separare a compusilor activi reprezinta o alta abordare capabila sa contribuie la cresterea valorii fito-
produsilor.
La nivel national si international exista o tendinta clara de orientare a cercetarilor spre obtinerea de [...]
bioproduse cu valoare adaugata, bazate pe bioresurse regenerabile.
La nivel global o astfel de abordare este sustinuta de faptul ca Romania detine un potential extrem de valoros
de bioresurse naturale care nu este exploatat suficient (cca. 50% din speciile florei europene), iar biotehnologiile
reprezinta o sansa de dezvoltare pentru IMM-uri asigurand oportunitati pentru inovare si dezvoltare. Din datele
statistice existente s-au identificat 150 de firme romanesti din domeniu care aplica rezultatele cercetarilor
realizate in cadrul subdomeniului cu un numar de salariati de 1500 inregistrandu-se o cifra de afaceri de cca 300
mil. Euro si un excedent de balanta comerciala pe domeniu de 200 mil euro.
In acelasi timp trebuie mentionat ca se inregistreaza in prezent o cerere de piata in continua crestere de produse
care au drept caracteristica definitorie componenta „BIO” nu doar la nivel national si regional ci si
european/mondial.
Utilizarea inteligenta a resurselor naturale care se poate realiza prin implementarea de cunostinte privind
tehnologii de extractie, caracterizare si formulare eficiente, cu consum redus de reactivi, precum si prin folosirea
de instrumente de masura si control care au un impact mic asupra mediului vor contribui la reducerea amprentei
de mediu atat a produsului final cat si a organizatiei/intreprinderii, facandu-se astfel cativa pasi catre
introducerea si pe piata fito-produselor a asa numitelor „produse verzi”.
Orientarea catre beneficiari tinta ai produsului. Beneficiarii tinta ai acestui rezultat al proiectului sunt
intreprinderile mici si mijlocii din domeniul procesarii materiilor prime si a reziduurilor vegetale de tipul plante
medicinale si aromatice, fructe de padure (unele radacinoase cum sunt morcovii, sfecla rosie, telina) care au
continut ridicat de principii active cu rol de reducere a stresului oxidativ la nivel celular.
Conform FAOSTAT, piata europeana a consumului in sectorul plantelor medicinale si aromatice se situa in anul
2009 la o productie de cca 120 mii de tone si 1,2 miliarde de euro, principalii jucatori care domina piata de
consum (peste 58%), fiind Marea Britanie, Germania, Romania si Ungaria. Sectorul de retail detine la consum
cca 35-40%, iar sectorul de catering ocupa in piata cca 10 – 15%. Producatorii conventionali principali sunt
Germania, Austria, Bulgaria si Polonia, iar producatorii ecologici la nivel european sunt Romania, Finlanda si
Ungaria. Trendul ascendent pe plan mondial se datoreaza consumatorilor influentati de noul curent de intoarcere
la traditiile culturale si culinare, asociate cu dorinta unui nou stil de viata, bazat pe cresterea calitatii vietii,
pastrarea sanatatii individuale, a familiei si mediului. Cele mai importante tari producatoare sunt cele care au o
suprafata semnificativa de teren agricol si venituri pe cap de locuitor, relativ mici: Romania, Bulgaria si Ungaria.
Impreuna, aceste tari reprezinta 86% din producția UE. Productia s-a dezvoltat bine si in Republica Ceha (+25%
pe an), Ungaria (+20%) si Romania (+13%).
2. Formulare de produs nou. Evaluarea calitatii produsului
In formularea prototipului de produs nou s-au urmarit urmatoarele aspecte :
- Valorificarea produselor intermediare - extracte vegetale rezultate in urma activitatilor in etapele anterioare
din cadrul proiectului: extracte uscate din fructe de merisor, maces si afin, realizate de catre partenerul P2-
Plantavorel si a extractului uleios din radacina de morcov, realizat de Coordonator- INCDSB Bucuresti ;
- Necesitatea si adresabilitatea produsului:
➢ suplimentul alimentar - datorita anatomiei aparatului urinar, infectiile urinare sunt printre cele mai
comune si frecvente afectiuni ale femeilor. Cistita (inflamaţia mucoasei vezicii urinare) este mai
frecvent întâlnită la sexul feminin şi la vârste tinere. Se apreciază că 50% dintre femei suferă măcar o
dată în decursul vieţii de cistită. Studiile arată că si dupa tratamentul cu antibiotice specifice
predispoziția spre infecția urinară rămâne la 75% dintre cazuri iar aceasta poate fi prevenita cu remedii
baza de plante medicinale si aromatice. 90% dintre produsele existente pe piata suplimentelor
alimentare au in compozitia lor fructele sau extractul din fructe de merisor asociate cu alte plante sau
extracte.(ex. URIFIN, UROPLANT, CISTORENAL, Urinal-Balance, etc);
➢ produsul cosmetic – expunerea indelungata la radiatiile UV poate sa aiba efecte negative imediate
asupra pielii, cum ar fi arsurile solare. Insa acest tip de radiatii ne pot afecta grav sanatatea si pe termen
lung, provocand imbatranirea prematura a epidermei sau, in cazuri extreme, cancer de piele. Organizatia
Mondiala a Sanatatiii estimeaza ca in jur de 65 000 de persoane mor anual din cauza expunerii
prelungite la soare. Urmare a costientizarii acestui risc exista o tendinta crescuta pentru utilizarea
produselor pentru protectia solara.
In elaborarea prototipului de produs nou au fost abordate doua directii :
1. formularea de produs nou – supliment alimentar, care are la baza utilizarea ca materie prima extractele
uscate din fructe de merisor si maces in combinatie cu alte materii prime, conditionat sub forma de capsule
gelatinoase tari(operculate) – produs pentru sustinerea si imbunatatirea functionarii sistemului urinar ;
2. formularea de produs nou – produs cosmetic, o gama pentru protectie solara formata din doua produse,
conditionate sub forma de ulei, respectiv, ulei pentru pregatirea pielii in vederea expunerii la soare si ulei pentru
regenerarea pielii dupa expunerea la soare, care are la baza utilizarea ca materie prima a extractului uleios de
morcov.
Au fost realizate urmatoarele produse