Lucrari de Lab. Fiziologia Vegetala

download Lucrari de Lab. Fiziologia Vegetala

of 14

Transcript of Lucrari de Lab. Fiziologia Vegetala

Lucrare de laborator 1. SELECTIVITATEA MEMBRANEI CELULARESelectivitate reprezint o proprietate a membranelor de a permite ptrunderea difereniat a substanelor n celul.

Mersul lucrrii: n calitate de model experimental se confecioneaz o celul artificial prin fixarea unei foliide celofan la captul unui tub de sticl care se va introduce ntr-un pahar chimic. Folia trebuie s fie umectat astfel, nct s ia forma unui scule. n calitate de mediu extracelular se va utiliza un pahar cu diferite soluii chimice, tabelul 1: Tabelul 1. Soluia utilizat ca mediu extracelular (n pahar) ap distilat soluie de 5% de I n KI de 10% soluie de 5% de FeCl3 Timp de monitorizare 20 30 de minute. Mediu intracelular (n scule) soluie zaharoz 20% pap de amidon 5%; soluie de 3% de tanin sau fiertur de coaj de stejar.

Reactivi i utilaje:Tuburi de sticl cu diametrul de 2,5-3 cm i lungimea de 3 - 4 cm; celofan; pahare cu volum de 50 - 100 ml; soluie de 5% de I n KI 10%, soluie de 5% de FeCl 3; pap de amidon de 5%; soluie de tanin de 3%; foarfece; sfoar subire; baghete de sticl.

Activiti i evaluare:1. Formulai scopul lucrrii de laborator 2. Prezentai schematic cele trei variante de experiena (vasul cu celula artificial) i scriei concluziile respective:

3. Rspundei succint la ntrebri: - Care sunt particularitile de structur a membranelor celulare ce asigur permiabilitatea selectiv?

-

Care din caracteristicile fizice ale substanelor condiioneaz viteza de ptrundere a acestora prin membrane?

-

Sub ce form trec prin membrane compuii chimici din mediul extern?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 2. PREPARAREA CELULEI ARTIFICIALE TRAUBE

Semipermiabilitatea este o proprietate a membranelor biologice (plasmalema, tonoplastul) de a permite ptrunderea unor substane (apa n calitate de solvent) i a reine ptrunderea / eliminarea altora (substanele dizolvate). Mersul lucrrii:n calitate de membran semipermeabil artificial poate servi membrana obinut prin reacia chimic dintre sulfatul de cupru i ferocianura de potasiu. 2CuSO4 + K4[Fe(CN)6] Cu2[Fe(CN)6]+ 2K2SO4 Ferocianura cupric ce se obine n urma reaciei prezint membrana unei celule - numit celula artificial Traube, care are nsuirea de a permite trecerea apei i a reine substanele dizolvate n ea. n patru eprubete se introduc 5 ml soluie de CuSO4 de 0,5n i o pictur de K4[Fe(CN)6] cu concentraie descrescnd, tabelul 1. Tabelul 1. Nr. eprubetei CuSO4 K4[Fe(CN)6 1 0,5 n 1n 2 0,5 n 0,5 n 3 0,5 n 0,25 n 4 0,5 n 0,125 n Celula Traube poate fi obinut i prin utilizarea a 5 ml soluie de CuSO4 de 1,5 n i cteva cristale de K4[Fe(CN)6].

Reactivi i utilaje: stativ cu eprubete; soluii de CuSO4 1,5n, 0,5n; soluii de K4[Fe(CN)6] de 1n, 0,5n, 0,25n, 0,125n; cristale de K4[Fe(CN)6]; pipete. Activiti i evaluare:1. Formulai scopul lucrrii de laborator 2. Descriei schematic cele 5 variante de experiena i formulai concluziile respective:

3. Rspundei succint la ntrebri: - De ce celul artificial format, treptat alunec spre fundul eprubetei, crete n dimensiuni, membrana fragil crap i n locul ei se formeaz o membran de Cu2[Fe(CN)6] nou? - Din ce cauz celula artificial i modific forma fiind n medii cu aceeai concentraie a sulfatului de cupru?

- Ce reprezint soluii hiper-, hipo- i izotonice?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 3. PLASMOLIZA I DEPLAZMOLIZA

Plasmoliz prezint fenomenul reversibil de desprindere a plasmalemei de la anvelopa celular n rezultatul procesului de exoosmoz.

Mersul lucrrii: Experiena 1. Din stratul epidermic al frunzei modificate de ceap cu coninut nalt de antocian se obinseciuni de 1-2 straturi de celule care se examineaz la microscop ntr-o pictur de ap pe lama portobiect (a). La urmtoarea etap a experienei, apa este absorbit de pe lam cu ajutorul hrtiei de filtru, iar din partea opus se adug cteva picturi de KNO3 de 1M i peste 5 - 10 minute se examineaz seciunile la microscop (b). n continuare soluia de KNO3 este nlocuit complet cu ap similar procedurii descrise anterior sub monitorizarea seciunilor la microscop (c). Dup deplasmolizarea complet a celulelor, lama cu seciunea este nclzit la spirtier, n aa fel, nct apa s nu se evapore complet. Dup ce apa rmas pe lam este nlocuit cu o pictur de KNO3 1M, seciunea este din nou privit la microscop (d). Experiena 2. Seciuni din stratul epidermic al frunzelor modificate de ceap se analizeaz direct pe lamel portobiect n soluie de KNO3 1M i Ca(NO3)2 0,7M. Fixm timpul de apariie al plasmolizei, ncepnd cu forma incipient apoi concav i ultima form - convex (e). Viteza trecerii de la forma concav la forma convex determin gradul de viscozitate al protoplasmei. Cu ct viscozitatea este mai mic, cu att trecerea va fi mai rapid i vicevers.

Reactivi i utilaje: bulbi de ceap, KNO3 1M; Ca(NO3) 0,7M; bisturiu; ace de desecare; microscop; spirtier;hrtie de filtru; pipete.

Activiti i evaluare:1. Formulai scopul lucrrii de laborator 2. Descriei schematic cele 5 variante de experiena (a, b, c, d, e) i formulai concluziile respective:

3. Rspundei succint la ntrebri: - Cum se numete starea de saturaie cu apa a celulelor observat la microscop n cazul (a)? - Din ce cauz apa iese din celul, acestea trecnd n stare plasmolizat, fenomen observat n varianta (b)? - Plasmoliza celulelor decurge treptat sau instantaneu, reuindu-se observarea unor forme intermediare? - Care sunt condiiile ce determin revenirea celulelor la starea fiziologic normal? - Toate celulele plasmolizeaz? - Prin compararea vitezei de trecere a plasmolizei concave n convex se poate aprecia gradul de viscozitate al protoplasmei. Care este importana aprecierii gradului de viscozitate dup timpul de plasmoliz? - Cum explicai influena diferit a ionilor de calciu i potasiu asupra celulelor privind viscozitatea acestora? ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 4. PERMIABILITATEA MEMBRANELOR CITOPLASMATICE

Membranele citoplasmatice, plasmalema i tonoplastul nu sunt detaabile de citoplasm similar membranei pectocelulozice, se aseamn structural dar se deosebesc prin densitate i permiabilitate care este mai mic la tonoplast. Mersul lucrrii: Dintr-o sfecl roie prin utilizarea perforatorului se obin seciuni cilindrice din care cu bisturiul se taie rondele de aceeai grosime (0,5 1 cm). Rondelele se spal cu ap pn cnd apa rmne incolor, apoi se introduc n 5 eprubete. Una dintre eprubete cu ap o fierbem timp de 2 minute, aruncm lichidul i turnm din nou 5 ml de ap. Toate eprubetele se introduc ntr-un stativ i se las timp de 30 40 minute, periodic agitndu-le. Monitorizm timpul de colorare a lichidului introducnd datele n tabel: Nr. eprubetei 1 2 3 4 5 Varianta experienei 5 ml ap distilat 5 ml ap (se fierbe timp de 2 min.) 5 ml ap i 0,5 ml cloroform 5 ml acid acetic 30% 5 ml alcool 50% Timpul colorrii lichidului din eprubet

Reactivi i utilaje: sfecl roie; cloroform; acid acetic 30%; alcool 50%; bisturiu; spirtier; hrtie de filtru;pipete; stativ cu eprubete.

Activiti i evaluare:1. Formulai scopul lucrrii de laborator 2. Descriei schematic cele 5 variante de experiena i formulai concluziile respective:

3. Rspundei succint la ntrebri: - Ce influen au temperaturile nalte i substanele toxice asupra permiabilitii membranelor biologice?

- Prin ce se explic timpul diferit de colorare a mediului n care s-a aflat materialul biologic ?

- Care sunt componentele structurale ce asigur integritatea membranelor?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 5. DETERMINAREA PRESIUNII OSMOTICE A SUCULUI CELULAR PRINMETODA PLASMOLITIC

Presiunea osmotic se numete presiunea care apare n interiorul celulei (vacuol) n rezultatul acumulrii substanelor osmotic active (diferii ioni i electrolii) i determin direcia de difuzie a apei (solventului) prin membrane semipermiabile (osmoz) de la soluia diluat la cea concentrat. Mersul lucrrii: Se utilizeaz soluiile de zaharoz /sare de buctrie n diferite concentraii n calitate de plasmolizani. Se pregtesc soluiile n creuzete conform datelor prezentate n tabel. Se pregtesc seciuni microscopice din epiderma inferioar a frunzei modificate de ceap cu celule bogate n antocian care sunt inute n ap distilat pentru a menine starea de turgescen a celulelor. Seciunile (1-2), uscate de surplusul de ap cu hrtie de filtru sunt introduse n soluiile cu diferite concentraii, cu un interval de 2 minute, i se las timp de 15-30 minute. Dup expirarea timpului, n ordinea n care au fost introduse, seciunile vor fi examinate la Modul de pregtire (la Coeficient Forma plasmolizei 10ml) izotonic NaCl 1M, ml H2O, ml 1,0 10 0 1,62 0,8 8 2 1,64 0,7 7 3 1,66 0,5 5 5 1,70 0,4 4 6 1,73 0,3 3 7 1,75 0,2 2 8 1,78 0,1 1 9 1,83 microscop ntr-o pictur de soluie n care s-a aflat seciunea. Analiznd seciunile la microscop trebuie identificat concentraia izotonic care va fi folosit pentru calcularea presiunii osmotice a sucului celular, folosind formula lui Vant-Goff: P = iRTC x 101,3 unde, i coeficient izotonic; R constanta gazelor perfecte (0,0821); C concentraia izotonic; Ttemperatura absolut (273 + temperatura din laborator); 101,3coeficientul pentru raportarea atmosferelor (kPa). Concentraia soluiilor pentru experien

Reactivi i utilaje: creuzete; bisturiu; microscop; NaCl 1M; ceap cu coninut nalt de antocian. Activiti i evaluare:1. Completai tabelul i formulai concluziile respective:

2. Calculai presiunea osmotic a celulelor analizate. 3. Rspundei succint la ntrebri: - Fenomenul de osmoz este caracteristic tuturor celulelor? - Care este importana n aspect aplicativ a determinrii presiunii osmotice a sucului vacuolar? - Cnd plantele vor dezvolta o presiune osmotic mare a sucului vacuolar? ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 6. STUDIEREA STOMATELOR LA PLANTEStomatele snt celule specializate n realizarea procesului de transpiraie, localizate la nivelul epidermei. Stomatele se gsesc preponderent pe partea inferioar a frunzei, ns pot fi i pe ambele pri sau numai pe partea superioar a frunzei.

Mersul lucrrii: Experiena 1: Procedeul lui G.Moli (metoda de infiltrare). Se vor utiliza urmtoarele substane: xilen care ptrunde uor prin orificii, benzen cu o capacitate medie de infiltrare i alcool etilic care ptrunde n esutul vegetal doar prin orificii larg deschise. Pe partea dorsal a unei frunzei, cu ajutorul unei baghete de sticl sau a unei pipete, se pune o pictur de alcool, benzen i xilen. Frunza este inut n poziie orizontal pn cnd dispar picturile i apoi este examinat la lumin. Astfel de observaii se fac la mai multe specii de plante, completnd tabelul: Specia pantei Substanele analizate xilen Gradul de deschidere a stomatelor

alcool

benzen

Experiena 2: Procedeul lui Buscaniole. Din partea dorsal a frunzei se desprinde un segment de epiderm i se introduce imediat n alcool etilic de 50%; se las pentru fixare 5-10 minute i se examineaz la microscop ntr-o pictur de alcool. Experiena 3: Procedeul lui G.H.Molotcovski (metoda mulajelor). Pe partea inferioar a frunzei, cu ajutorul baghetei de sticl, se depune un strat subire de colodium. Se formeaz o pelicul. Cu ajutorul unei pense se detaeaz aceast pelicul de pe frunz i se examineaz ntr-o pictur de ap la microscop. Se determinm gradul de deschidere a stomatelor, indicnd numrul stomatelor nchise, deschise i semideschise.

Reactivi i utilaje: plante de camer, benzen, xilen, alcool de 50% i 90%, colodiu (penoplast dizolvat n toluen sau xelen), microscop. Activiti i evaluare:1. Completai tabelul i formulai concluziile respective. 2. Desenai celulele stomatice indicnd gradul de deschidere a osteolei i particularitile de structur a stomatelor.

3. Rspundei succint la ntrebri: - Ce reprezint fenomenul de transpiraie? - Care este importana acestui fenomen? - Cnd plantele vor dezvolta o presiune osmotic mare a sucului vacuolar? - Care sunt particularitile de structur i evenimentele ce stau la baza nchiderii i deschiderii osteolei. ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 7. PIGMENII FOTOSINTETICI I PROPRIETILE LOR CHIMICEPigmenii fotosintetici reprezint compui organici cu grupri cromofore i sisteme de legturi duble conjugate. Absorb selectiv cuantele de lumin din regiunea vizibil a spectrului (400-700 nm). Se cunosc trei grupe de pigmeni: clorofilieni, carotenoizi i ficobilini.

Mersul lucrrii: Se obine extract de pigmeni prin omogenizarea a 2 g de material proaspt n 2 - 3 ml de alcool etilic. Omogenatul se transfer (cantitativ cu poriuni mici de alcool etilic) pe un filtru de sticl nr.3, care este unit cu balonul Bunsen i se filtreaz cu ajutorul unei pompe. Extractul din balonul Bunsen urmeaz a fi transferat ntrun balon cotat i folosit pentru studierea proprietilor chimice ale pigmenilor. Experiena 1. Separarea pigmenilor. ntr-o eprubet se introduc 3 ml de extract de pigmeni la care se adug 4 ml de benzin, agitm i lsm timp de 3- 4 minute. n stratul de sus (benzin) se afl clorofila a, b i carotena, iar n stratul de jos (alcool) xantofila. Experiena 2. Saponificarea clorofilei. n eprubeta, n care a avut loc separarea pigmenilor se adaug cristale de KOH. Agitm minuios i lsm timp de 1-2 minute. Are loc saponificarea clorofilei. De la molecula de clorofil se desprinde alcoolul metilic i fitolul iar sarea de potasiu a acidului clorofilinic se depune n stratul de jos mpreun cu xantofila. n stratul de sus rmne carotena. Reacia decurge n felul urmtor: COOCH3 COOK [C32H30ON4Mg] + KOH [C32H30ON4] + CH3OH + C20H39OH COOC20H39 COOK

Experiena 3. Obinerea feofitinei. La 2-3 ml extract de pigmeni se adaug 2-3 picturi de acid clorhidric concentrat. Se obine o culoare verde maro (feofitina). A avut loc nlocuirea atomului de Mg din molecula de clorofil prin atomii de hidrogen. Dac n eprubet se adaug cteva cristale de acetat de zinc sau de acetat de cupru i se nclzete la o spirtier observm dispariia culorii brune i apariia culorii verzi a clorofilei. Prin urmare culoarea verde a clorofilei este condiionat de prezena n molecul a metalului Mg. Reacia decurge n felul urmtor:COOCH3 [C32H30ON4Mg] + 2HCl [C32H32ON4] COOC20H39 COOC20H39 COOCH3 + MgCl2

Reactivi i utilaje: frunze verzi, piuli de porelan, foarfece, cilindre gradate, eprubete, balonul Bunzen, filtru de sticl N3, spirtier, alcool, benzin, cristale de KOH, soluie de HCl, cristale de Cu(CH3COO)2. Activiti i evaluare:1. Prezentai schematic variantele experimentale i formulai concluziile respective.

2. Rspundei succint la ntrebri: - De ce depinde selectivitatea absorbiei cuantelor de lumin de ctre diferii pigmeni? - Care este structura chimic a clorofilei? - Prin ce se deosebete clorofila a de b? - Care sunt particularitile de structur a pigmenilor i evenimentele ce determin culoarea verde a plantelor? ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 8. SEPARAREA PIGMENILOR ASIMILATORI PRIN METODACROMATOGRAFIEI PE HRTIECromatografia pe hrtie cromatografic permite separarea unui amestec de pigmeni n baza solubilitii diferite a acestora n solventul organic, care sub aciunea forelor de capilaritate se mic ascendent, antrennd i moleculele de pigmeni.

Mersul lucrrii: Se obine extract de pigmeni prin omogenizarea a 1- 2g de material proaspt n 2-3 ml amestec de aceton i alcool (3:1). Omogenatul se transfer (cantitativ cu poriuni mici de amestec de aceton i alcool) pe un filtru de sticl nr.3, care este unit cu balonul Bunsen i se filtreaz cu ajutorul unei pompe. Extractul din balonul Bunsen urmeaz a fi transferat ntr-un balon cotat i folosit pentru cromatografie. Se pregtete hrtia cromatografic cu dimensiuni de 13 -16 cm, tiat astfel ca fibrele de celuloz din compoziia ei s fie ndreptate paralel cu latura de 13 cm. Paralel la latura de 16 cm la o distan de 2,5cm se traseaz cu un creion simplu o linie de start, lsnd n pri un cmp de 2,5cm. Pe aceast linie de marcare se depune 2 ml extract de pigmeni cu ajutorul unui capilar sau a unei pipete. Dup uscare hrtia se face sul, se prinde cu o clam i se introduce ntr-o camer de cromatografie, n care n prealabil a fost introdus un amestec de eter de petrol i alcool n raport de 20:1. Camera cromatografic se acoper cu o hrtie neagr i cu un capac de sticl, pentru a evita ptrunderea razelor de lumin. Separarea pigmenilor decurge timp de 20-30 minute.

Reactivi i utilaje: frunze verzi, piuli de porelan, foarfece, eprubete, balonul Bunzen, filtru de sticl N3, spirtier, alcool 96 %, aceton, eter de petrol, hrtie cromatografic, cilindre cromatografice. Activiti i evaluare:1. Formulai scopul lucrrii de laborator

2. Prezentai schematic separarea pigmenilor pe cromatogram i formulai concluziile respective.

2. Rspundei succint la ntrebri: - Care este principiul cromatografiei a diferitor amestecuri organice? - Care este solubilitatea pigmenilor n amestecul de eter de petrol i alcool n raport de 20:1? - Ce solveni pot fi folosii la extragerea pigmenilor asimilatori?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 9. DETERMINAREA ACTIVITII CATALAZEI PRIN METODAGAZOMETRICCatalaza reprezint o enzim din clasa oxidoreductazelor larg rspndite n natur, catalizeaz descompunerea peroxidului de H2O2, toxic pentru plante. Activitatea enzimei poate fi determin dup cantitatea de oxigen eliminat.

Mersul lucrrii: se obine omogenat din 0,2 - 0,3 g de mas vegetal (esut verde, germeni etc.) n 2 - 3ml de soluie tampon cu pH = 6 care se transfer cantitativ cu un volum de 13 ml extragent n braul mare al vasului de

reacie (vas special cu dou brae). n braul mic al vasului de reacie se introduc 3ml H 2O2 de 3 % n calitate de substrat. Vasul de reacie se acoper imediat cu un dop de gum unit la o biuret de 50 ml umplut cu lichid. Se agit vasul de reacie n scopul incubrii extractului enzimatic i al substratului timp de 15 min. Oxigenul eliminat dislocuiete apa din burete. Dup scderea nivelului apei se determin volumul oxigenului degajat. Fixarea datelor se efectueaz la intervale de 3 min i poate fi exprimat n cm3 O2 / 1g material vegetal /15 min, conform tabelului de mai jos: Specia plantei Masa S-a degajat un volum de O2 (ml) timp de 6 min 9 min 12 min 15 min materialului(g) 3 min Activitatea catalazei ml O2/1g/min

Reactivi i utilaje: dispozitiv pentru determinarea activitii catalazei; piulie de porelan; H2O2 de 3 %; cntar;material vegetal.

Activiti i evaluare:1. Completai tabelul i formulai concluziile respective.

2. Rspundei succint la ntrebri: - Ce reprezint catalaza, structura chimic? - Care este funcia catalazei n plante? - Ce indic o activitate mare a catalazei ?

- Exist i alte enzime a cror activitate determin descompunerea peroxidului de hidrogen n ap i oxigen ce poate fi msurat?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare delaborator 10. DETERMINAREA ACIDULUI ASCORBIC N PLANTEAcidul ascorbic este unul din componenii lanului transportator de electroni alternativ, activ n diferite stri metabolice ale plantei. O enzim din grupa oxidazelor - ascorbatoxidaza ce are n calitate de cofactor ionul de cupru particip la oxidarea acidului ascorbic cu formarea acidului dehidroascorbic i reducerea ulterioar a oxigenului, formndu-se apa endogen.

Mersul lucrrii: material proaspt (frunze de mrar, ptrunjel, ceap verde, varz verde sau murat, roii etc.) se majoreaz ntr-o piulu de porelan i printr-un tifon se colecteaz suc. n 4 creuzete se introduc reactivele indicate n tabel:Experiena 1 I I I I Experiena 2 II II II II Nr. balonului 1 2 3 4 Nr. balonului 1 2 3 4 Cantitatea acidului ascorbic (%) 5 10 20 30 Cantitatea acidului ascorbic (%) 10 20 40 60 Cantitatea acidului ascorbic (%) 50 100 200 300 CuSO45H2O 0,046%, (ml) 1 2 4 6 CuSO45H2O 0,09%, (ml) 1 2 4 6 CuSO45H2O 0,465%, (ml) 1 2 4 6 KI 1% (ml) 1 2 4 6 KI 2% (ml) 1 2 4 6 Amidon 0,15% (ml) 4 4 4 4 Amidon 0,3% (ml) 4 4 4 4 Amidon 1.5% (ml) 4 4 4 4 H2O (ml) 14 12 8 4

Experiena 3 III III III III

Nr. balonului 1 2 3 4

KI 10% (ml) 1 2 4 6

n primul balon se picur 6-7 picturi de suc cercetat, agitnd energic amestecul balonului care are culoarea albastr datorit prezenei iodului i amidonului. n cazul n care acidul ascorbic este prezent n materialul cercetat n cantiti suficiente, are loc reducerea iodului i coninutul balonului se decoloreaz. Dac n experiena 1 se decoloreaz primul balon, atunci coninutului acidului ascorbic e mai mare de 5 %. Pentru verificare se adaug extract vegetal n baloanele 2 i 3. Dac se decoloreaz coninutul balonului 2, atunci cantitatea de acid ascorbic e mai mare de 10 %, iar dac nu acidul ascorbic constituie 5-10 %. Atunci cnd se decoloreaz coninutul balonului 3 i 4, cantitatea de acid ascorbic este mai mare de 20-30 %. n acest caz se repet balonul 3 din experiena 2. n cazul cnd coninutul balonului nu se va decolora , acidul ascorbic va constitui 30 40 %. Rezultatul experienei se includ n tabelul urmtor: Specia plantei Coninutul acidului ascorbic, 5% Concluzii

Reactivi i utilaje: creuzete; pipete gradate de 5ml, 10ml; cilindru gradat de 25 ml; biurete; soluie de CuSO45H2O de 0,046%, 0,09%, 0,465%; soluie de KI 1%, 2%, 10%; amidon de 0,15%, 0,3%, 1,5%, material vegetal. Activiti i evaluare:1. Completai tabelul i formulai concluziile respective. 2. Rspundei succint la ntrebri: - Ce reprezint ascorbatoxidaza, structura chimic? - Care este funcia oxidazelor n plante? - Ce reprezint un lan transportor de electroni i care este rolul biologic al acestuia? ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 11. DETERMINAREA INTENSITII RESPIRAIEI DUPCANTITATEA DE CO2 ELIMINATIntensitatea respiraiei (evaluat prin coninutul de oxigen absorbit /dioxid de carbon eliminat raportat la o unitate de suprafa) variaz n dependen de specia plantei, organ, esut vrst etc. Acest indice este stimulat de prezena unor elemente minerale (Fe, Cu, Zn, Mo, Co, P..), de atacul unor ageni patogeni, lezarea mecanic a plantelor.

Mersul lucrrii: 5 - 10 g de semine germinate ntr-un scule de tifon se introduc intr-un vas nchis cu 25 ml soluie de Ba(OH)2 i se menine astfel timp de 30-40 min, cu agitare periodic pentru a distruge pelicula de BaCO 3, ce se formeaz la suprafaa lichidului. n calitate de control - un vas similar cu 25 ml de Ba(OH) 2 fr material vegetal. Dup expirarea timpului, n ambele vase se toarn cte 2-3 picturi de fenolftalein de 1% i se titreaz cu soluie de acid oxalic sau HCl de 0,1 n, pn la dispariia culorii roz. Concomitent, se efectueaz determinarea coeficientului de corecie (c) al soluiei de barit. n dou baloane se toarn 10 ml soluie de barit i 2 - 3 picturi de fenolftalein i se titreaz cu acid oxalic de 0,1n pn la dispariia culorii roz. C = Vacid / Vbarit Intensitatea respiraiei se calculeaz dup formula: Ir = ((V1 V2) T / m t) C, unde V1 volumul de acid, care a fost folosit la titrarea probei de control (ml); V2 volumul de acid, care a fost folosit la titrarea probei ezperimentale (ml); T titrul soluiei de barit (0,088); C coeficientul de corelaie a soluiei de barit; m masa materialului de cercetat; t timpul ezpoziiei (ore). Intensitatea respiraiei se exprim n mg CO2/1g/1 or.

Reactivi i utilaje: semine germinate, tifon, cntar tehnic, vesel chimic cu volum 200-300 ml, HCl sauH2C2O4, Ba(OH)2.

Activiti i evaluare:1. Scriei ecuaiile reaciilor

2. Facei calculele i concluziile respective

3. Rspundei succint la ntrebri: - Ce reprezint respiraia celular?

- Cum poate fi influenat intensitatea respiraiei ?

- n ce const interdependena dintre respiraie i fotosintez?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 12. ANALIZA MICROCHIMIC A CENUII PLANTELORCenua reprezint elementele minerale care au rmas n urma arderii materiei organice i constituie 0,2 - 20%. n componena plantelor au fost identificate mai bine de 60 elemente chimice. Coninutul total de cenu poate varia n funcie de plant, de natura i vrsta organelor i este n strns legtur cu compoziia solului i condiiile de umiditate din sol.

Mersul lucrrii: se prepar extract apos sau extract acid de cenu. Se vor utiliza lame portobiect pe care se pun cte 1-2 picturi de extract i la o distan de 2-3 mm de la pictur, se adaug o pictur de reactiv specific care

cu ajutorul unei baghete de sticl se vor uni. Lamela se usuc puin la flacra unei spirtiere, apoi se examineaz la microscop. 1. Evidenierea K se efectueaz cu ajutorul reactivului hexanitrocupriat de sodiu i plumb Na2Pb[Cu(NO2)6]. Dreapt rezultat al reaciei apar cristale. 2KCl + Na2Pb[Cu(NO2)6] K2Pb[Cu(NO2)6] + 2NaCl 2. Evidenierea ionilor de Ca2+ se efectueaz cu H2SO4 1%. n urma reaciei se formeaz cristale aciculare de gips. CaCl2 + H2SO4 CaSO4 + 2HCl 3. Evidenierea ionilor de Mg2+ se efectueaz cu NaHPO4 1% n prezena NH4OH. La pictura de extract de pe lama microscopic se adaug o pictur de NH4OH, dup ce se unete cu pictura reactivului corespunztor. Apar cristale de fosfat amoniacomagnezian. MgCl2 + NaH2PO4 + NH4OH MgNH4PO4 + 2NaCl + H2O

Reactivi i utilaje: cenu de plante, eprubete, pipete, plnii cu filtru de hrtie, microscop, lame portobiect,reagenii indicai n lucrare.

Activiti i evaluare:1. Examinai forma cristalelor la microscop i facei concluziile respective.

2. Rspundei succint la ntrebri: - De ce coninutul n elemente minerale variaz n funcie de organ i faz de dezvoltare? - Care este importana elementelor minerale ?

- Care sunt procesele de baz care asigur absorbia i transportul elementelor minerale?

Prin ce se aseamn / deosebete absorbia apei i a elementelor minerale de ctre plante? ! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 13. DETERMINAREA AZOTULUI SUB FORM DE NITRIIAzotul este absorbit de ctre plante din soluia solului sub form de NO3-, NO2 i NH4+. n mitocondrii sau cloroplaste are loc reducerea NO3- i NO2 pn la formele amoniacale. Pentru evidenierea azotului nitric, pot fi folosite probe vegetale la diferite faze ale ontogenezei.

Mersul lucrrii: ntr-o pictur de extract de frunze, peiol, legume se adaug 1-2 picturi de difenilamin de 1%. Peste 5-10 secunde apare o culoare albastr care indic prezenta NO3-. NO3- + 2(C6H5)2NH (C6H5)4N2 2(C6H5)2NH + 1/2O2 (C6H5)4N2 + H2O

Azotul nitric poate fi evideniat i n felul urmtor: 5-10g buci de tulpini sau frunze se introduc ntr-o eprubet, se adug 5-10ml de ap i se fierb timp de 10 minute. Se transfer 2 - 3 ml de extract n alt eprubet, se adug 1ml de difenilamin i cu ajutorul unei pipete se introduce la fundul eprubetei 1 ml de acid sulfuric concentrat, care, fiind mai greu, rmne la fundul eprubetei, ridicnd nitraii deasupra. n interfaz va aprea un inel albastru sau portocaliu.

Reactivi i utilaje: material vegetal, pipete, mojare, difenilamin de 1%, acid sulfuric concentrat. Activiti i evaluare:1. Prezentai schematic evidenierea azotul nitric i formulai concluziile respective.

2. Rspundei succint la ntrebri: - De ce depinde concentraia nitriilor i nitrailor n plante? - Care este efectul concentraiilor nalte de nitrii/nitrai asupra omului?

- Nitriii/nitraii se distrug la fierbere?

- Care este rolul azotului n plante?

- Sub ce form azotul se depoziteaz i este transportat prin plant?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.

Lucrare de laborator 14. DETERMINAREA ENERGIEI I CAPACITII GERMINATIVECapacitatea de germinare reprezint procentul de semine capabile s germineze ntr-o durat de timp specific fiecrei specii, iar energia germinativ constituie procentul de semine germinate timp de sau alte perioade de timp relativ mai scurte comparativ cu cea stabilit pentru analiza capacitii germinative.

Mersul lucrrii: n cutii Petri pe hrtie de filtru umezit cu ap distilat se aranjeaz la distane de 0,5 - 1,0 cm seminele cercetate, se acoper i se introduc n termostat la ntuneric, la o temperatur de 15 - 25 oC n dependen de temperatura specific de germinare. Pe parcursul germinrii se controleaz zilnic umiditatea i temperatura. Prima fixare a datelor se efectueaz dup 24 - 30 ore de germinare i reprezint energia germinativ. La a doua numrare (peste 100-200 ore) se determin capacitatea germinativ. Rezultatele obinute se introduc n tabel:

Parametrii Varianta I Energia germinaiei Capacitatea germinaiei

Numrul seminelor germinate, % Varianta II Varianta III Varianta IV

Reactivi i utilaje: semine, cutii Petri, hrtie de filtru, termostat. Activiti i evaluare:1. Formulai concluziile analizei capacitii i energiei germinative la diferite specii de plante.

2. Rspundei succint la ntrebri: - n ce perioad are loc germinarea seminelor?

- Ce modificri structurale au loc n perioada germinrii seminelor?

- Care sunt transformrile biochimice ce asigur creterea embrionului ?

- Care sunt condiiile ce trebuie asigurate pentru a evita asfixierea germenilor?

! Oformarea lucrrii se va efectua direct pe foia imprimat, fiind utilizat dup necesitate i spaiul de pe pagina verso.