Microbiologie Exam

download Microbiologie Exam

of 73

  • date post

    04-Jan-2016
  • Category

    Documents

  • view

    18
  • download

    5

Embed Size (px)

description

Examen microbiologie

Transcript of Microbiologie Exam

1. Microbiologia. Obiectul de studiu. Disciplinile microbiologice si obiectele de studiu. Etapele istorice de dezvoltare a microbiologiei. Rolul savantilor A. Leeuwenhoek, L. Pasteur, R. Koch, I.Mecinicov in dezvoltarea microbiologiei.

Obiectul de studiu:

1. mi/o si activitatea lor vitala (forma, structura, metabolism, crestere si multiplicare) ( identificare

2. relatiile mi/o cu mediul ambiant si cu organismul-gazda

Scopurile studierii mi/o:

1) patogene, oportuniste = prevenire maladii infectioase

2) utile, inofensive = productie AB, medicamente prin ADNrec (streptokinaza, insulina), alimente (unt, brinza)

3) insecticide biologice

4) fabricare plastic biodegradabil ???

5) decompunere deseuri, metan

Disciplini microbiologice:

particularitati biologice mi/o

bacteriologie

virologie

protozoologie

micologie, etc

habitat mi/o

microbiologia solului

... marina

... cosmica

implicatii in activitatea umana

microbiologia medicala

... veterinara

... alimentara, etc

Genetica microbiana

Ecologia microbiana

Microbiologia medicala studiaza:

a) relatia mi/o-gazda umana

b) capacitatile patogene mi/o

c) capacitatile antiinfectioase organism uman

d) metode de diagnostic etiologic al bolilor infectioase

e) metode de terapie/profilaxie antimicrobiana

Etape istorice in dezvoltarea microbiologiei:

I. empirica (pina in sec. 15)

II. morfologica (sec. 16-18)

A. von Leewenhoek: 1673 prima observare si descriere a mi/o

III. fiziologica (sec. 19)

L. Pasteur: prepararea vaccinurilor contra antraxului, turbarii, holerei; sustine necesitatea sterilizarii instrumentelor, bandajelorR. Koch: introducerea mediilor de cultura solide; izolare agent antrax, tbc; elaborare teorie despre rolul etiologic al mi/o in bolile infectioase (postulatele lui Koch)

I. Mecinicov: argumentare rolul florei intestinale (antagonism); descoperire fagocitoza si rolul antimicrobian al inflamatiei

2. Tipurile de laboratoare microbiologice si sarcinile lor. Regimul si regulile de lucru in laboratorul microbiologic. Clasificarea laboratoarelor in functie de exigenta sigurantei antiinfectioase.

3. Notiune de microorganisme. Categoriile taxonomice, tipuri acelulare si celulare. Deosebirile dintre microorganismele procariote si eucariote.

Mi/o = organisme microscopice (micro-nano- metri) + alge, protozoare, virusuri, agenti subvirali (prioni), cipuerci microscopice (fungi, micete)

Clasificari mi/o: fenotipica (prima tentativa Carl von Linne)

genotipica

filogenetica (bazata pe studiul fosilelor sau al HLA)

Grupe taxonomice: domeniu ( regn ( increngatura ( clasa ( ordin ( familie ( gen ( specieTaxoni infraspecifici din cadrul speciei, care prezinta anumite diferente:

biovar (activitate biochimica/fiziologica)

serovar (structura Ag)

patovar (grad de patogenitate)

lizovar (sensibilitate la bacteriofagi)

antibiovar (sensibilitate la AB)

Rolul taxonilor infraspecifici: markeri epidemiologici!

Clasificare mi/o: forme acelulare (virusuri, viroizi, prioni)

forme celulare:

bacteria = procariote, eubct

1) G-2) G+

3) micoplasme (lipsite de PC)

archaea = procariote, PC fara peptidoglican, habitat in conditii extremale

eucarya = eucariote (fungi, protozoare)

4. Metodele microbiologice de diagnostic si esenta lor. Metoda microscopica in diagnosticul bolilor infectioase. Tipurile de microscoape, utilizarea practica, particularitatile si rolul uleiului de emersie.

Metode microbiologice de diagnostic: diagnostic direct (detectare agent patogen sau a produselor lui)

1. microscopic (orientativ) ( prezenta bct, nr, forma, structura2. bacteriologic ( izolare culturi pure de bct, identificare si testare la AB

3. biologic (experimental) ( inoculare produs patologic la animale de laborator, provocare maladie tipica

4. depistare Ag mi/o in lichide biologice

5. identificare AN mi/o prin tehnici de biologie moleculara

diagnostic indirect (imunologic)

1. serodiagnostic ( detectare si titrare Ac specifici in serul bolnavului

2. intradermoreactie ( introducere alergen microbian epidermal/intradermal; reactie pozitiva = aparitie eritem ( hipersensibilitate specifica (intilnire repetata cu Ag)

5. Morfologia bacteriilor. Grupurile morfologice de bacterii. De desenat. Caracterele tinctoriale ale bacteriilor. Colorantii de baza utilizati in microbiologie. Metodele de colorare. Aplicarea practica.

Bct = mi/o, unicelular, procariot, autonomGrupe morfologice de bct:

coci:

1. micro

2. diplo (neisseria=bob de cafea, pneumococi=lanceolati)

3. tetra

4. strepto (lant) + enterococcus, lactococcus5. stafilo (gramezi)

6. sarcine (pachete 8-16-32 coci)

bastonase

1. bacterium capete rotunjite, nu formeaza spori (ex. E. coli)

2. bacillus capete retezate, formeaza spori ce nu depasesc diametrul celulei (ex. B. anthracis); posibilitate formare lanturi = streptobacili

3. clostridium capete rotunjite, formeaza spori ce depasesc diametrul celulei (ex. C. perfringens)

spiralate/incurbate

1. vibrio (ex. V. cholarae)2. campylo-/helico- bacter = 2 apire. aspect de pasare in zbor (ex. C. jejuni)

3. spirillum = cel. spiralate rigide

4. spirochaeta = cel. spiralate flexibile, 5-25 spire (ex. Treponema, Leptospira, Borrelia)

polimorfe (Actinomyces, Rickettsia, Chlamydia, Mycoplasma)

6. Etapele si tehnica de pregatire a frotiurilor din culturile bacteriene crescute pe medii lichide. Tehnica de pregatire a frotiurilor din biosubstrate: sputa si frotiuri amprente. Metodele de fixare.

Pregatirea frotiurilor ( examen microscopicEtape in pregatirea frotiului:

1) etalare material microbian

2) uscare

3) fixare ( oamoara bct, mareste afinitatea pt colorant

4) colorare ( asigura contrast intre mi/o si fundal

5) examinare (microscop optic cu imersie)

Caracter tinctorial = capacitatea mi/o de a fixa colorantul

7. Etapele si tehnica de pregatire a frotiurilor din culturile bacteriene crescute pe medii solide. Tehnica de pregatire a frotiurilor din biosubstrate: singe, puroi. Metodele de fixare.8. Structura celulei bacteriene. Enumerati elementele permanente (obligatorii) si nepermanente (neobligatorii) de structura. Membrana citoplasmatica si citoplasma. Structura, compozitia chimica si functiile biologice. Metodele de evidentiere.

Elemente permanente: PC, MCt, Ct, nucleoid, ribosomi, mezosomi ( G+ (E, citocromi)Elemente nepermanente: capsula, spor, flageli, fimbrii, plasmide, incluziuni celulare

MCt:

mozeic fluid Singer

lipsa colesterol, contin sterol-like molecules hopanoizi

mai bogata in prot. decit eucariotele ( fctii multiple (la eucariote indeplinite de organite)

PBP catalizare transpeptidare si sinteza PC

permeaze transport

prot. sist. de secretie

receptori

E lant respirator

Rol MCt:

1. Bariera semipermeabila, selectiva ( difuziune simpla, facilitata

2. Permeaze ( transport activ

3. E ( activitate metabolica

4. Metabolism energetic

5. Participa la diviziunea celulara

6. Sinteza PG si fosfolipidelor

7. Chemotaxis (R specifici)

Mezozomi: cresc S MCt ( cresc activitatea metabolica, energetica

Ct:

Lipsesc organitele

Prezenta: ribozomi, nucleoid, inclusiuni, plasmide

pH acid

Rol Ct: sediul proceselor metabolice

9. Peretele celular bacterian, functiile. Particularitatile de structura ale peretelui celular al bacteriilor gram pozitive. Coloratia Gram. Tehnica si mecanismul de colorare. Importanta practica. Exemple de bacterii gram pozitive.

PC = invelis rigid ceinconjoara protoplastul; e constituit din PG.PG = mureina = heteropolimer macromolecular, format din 2 parti:

Partea glicanica (PZ) = catene liniare paralele: NAG + NAM

Partea peptidica = peptide 4*aa (izoforme D si L) legate de NAM ( protectie de proteaze

G-: tetrapeptidele unite direct (bidimensional)

G+: tetrapeptidele unite prin punti interpeptidice 5*Gly (tridimensional)

Structuri prezente doar la procariote:

1. ac. diaminopimelic (tetrapeptid, la G+)

2. izoforma D aa

3. NAM

Fragmente solubile de mureina (PG) ( interactiune cu toll-likeR/CD14R de pe macrofage ( secretie citokine ( soc septic!

Rol PC:

1. Protectie de liza osmotica

2. Forma

3. Factor de patogenitate (soc septic)

4. Protectie contra subst. toxice (AgO, E din spatiul periplasmatic)

5. Tinta de atac a unor substante:

Lizozim scindare legaturi din catena glicanica (intre NAG si NAM)

AB inhibitie proces de transpeptidare

PC G+:

Componente:

PG (tridimensional) 40-80%

ac. teichoici (fixati de NAG), ac. lipoteichoici (fixati de MCt) = polimeri de ribitol, glicerol-fosfat;

sarcina electrica negativa

transfer de ioni

fctie Ag

activare complement pe cale alternativa

stimulare secretie citokine

adeziune intercelulara

prot. asociate PC

Streptococcus pyogenes = prot. M

Staphylococcus aureus = prot. A (clumping factor), prot. fixatoare de fibronectina

Uniform

Grosime 80 nm

10. Peretele celular bacterian, functiile. Particularitatile de structura ale peretelui ce