MANUAL DE RECOLTARE -...

49
SPITALUL MILITAR DE URGENTA SIBIU „Dr. Alexandru Augustin LABORATORUL DE ANALIZE MEDICALE MANUAL DE RECOLTARE ESANTIOANE PRIMARE F04-PG-17 Editie 03 Revizie 00 Data 15.05.2018 Pagina 1 din 43 F04-PG-17 MANUAL DE RECOLTARE ESANTIOANE PRIMARE ACEST MANUAL A FOST EDITAT ŞI DIFUZAT SUB RESPONSABILITATEA Domnului dr. GAVRILA GABRIELA ARIADNA - DIRECTOR DE LABORATOR Data :15.05.2018 SEMNATURA APROBAT Director General DR.CHELCEA DANIEL Exemplar controlat : Da AVERTISMENT : Acest document este proprietatea SPITALULUI MILITAR DE URGENTA “Dr. ALEXANDRU AUGUSTIN” SIBIU - Laborator Analize Medicale si urmeaza regimul documentelor cu caracter CONFIDENTIAL, stabilit prin decizia nr.235 Copiile sunt numerotate si controlate. Reproducerea si difuzarea acestui document este in exclusivitate dreptul SPITALULUI MILITAR DE URGENTA “Dr. ALEXANDRU AUGUSTIN” SIBIU - Laborator Analize Medicale

Transcript of MANUAL DE RECOLTARE -...

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 1 din 43

F04-PG-17

MANUAL DE RECOLTARE ESANTIOANE PRIMARE ACEST MANUAL A FOST EDITAT ŞI DIFUZAT SUB RESPONSABILITATEA

Domnului dr. GAVRILA GABRIELA ARIADNA - DIRECTOR DE LABORATOR

Data :15.05.2018 SEMNATURA APROBAT Director General DR.CHELCEA DANIEL Exemplar controlat : Da AVERTISMENT : Acest document este proprietatea SPITALULUI MILITAR DE URGENTA “Dr.

ALEXANDRU AUGUSTIN” SIBIU - Laborator Analize Medicale si urmeaza regimul documentelor cu caracter CONFIDENTIAL, stabilit prin decizia nr.235 Copiile sunt numerotate si controlate. Reproducerea si difuzarea acestui document este in exclusivitate dreptul SPITALULUI MILITAR DE URGENTA “Dr. ALEXANDRU AUGUSTIN” SIBIU - Laborator Analize Medicale

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 2 din 43

F04-PG-17

INDICATORUL ACTUALIZĂRILOR, APROBĂRILOR ŞI AL REVIZIILOR F04-PG-01

Ed / Rev Data aplicării

Numărul capitolului şi al paginilor revizuite

Nume, prenume şi semnătură

Elaborat Verificat Aprobat

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 3 din 43

F04-PG-17

Laboratorul SMU are o politica clara pentru recoltarea probelor biologice si managementul probelor. De asemenea aplica si respecta normele si prevederile legale.

Legea nr. 46 din 21 ianuarie 2003 publicat in: monitorul oficial nr. 51 din 29 ianuarie 2003 cu referire la DREPTURILE PACIENTILOR

ARTICOLUL 18. Consimtamantul pacientului este obligatoriu pentru recoltarea, pastrarea, folosirea tuturor produselor biologice prelevate din corpul sau, in vederea stabilirii diagnosticului sau a tratamentului cu care acesta este de acord.

ARTICOLUL 21 Toate informatiile privind starea pacientului, rezultatele investigatiilor, diagnosticul, prognosticul, tratamentul, datele personale sunt confidentiale chiar si dupa decesul acestuia.

ARTICOLUL 22 Informatiile cu caracter confidential pot fi furnizate numai in cazul in care pacientul isi da consimtamantul explicit sau daca legea o cere in mod expres.

ARTICOLUL 24 Pacientul are acces la datele medicale personale.

ARTICOLUL 25 (1) Orice amestec in viata privata, familiala a pacientului este interzis, cu exceptia cazurilor in care aceasta imixtiune influenteaza pozitiv diagnosticul, tratamentul ori ingrijirile acordate si numai cu consimtamantul pacientului. (2) Sunt considerate exceptii cazurile in care pacientul reprezinta pericol pentru sine sau pentru sanatatea publica.

Instructiuni de recoltare pentru pacienti Biochimie

NU consumati alimente sau lichide dulci cu 12 ore inainte de recoltare. Sa NU fie imediat dupa un efort fizic mare. Anuntati daca sunteti sub tratament cu minerale, !

Teste de hemostaza Se recolteaza a jeun. Anuntati daca sunteti sub tratament cu anitcoagulante!

Recoltarea urinii • Examenul sumar de urina Se recolteaza prima urina de dimineata dupa igiena locala cu apa si sapun . • Urocultura Se recolteaza dimineata, din prima urina (in recipient steril-urocultor-procurat de la

laborator obligatoriu) dupa igiena cu apa si sapun. Apoi primul jet este eliminat in toaleta, iar jetul mijlociu este colectat in urocultor (avand grija sa nu atingem capacul urocultorului de nimic din jur pentru a nu contamina proba). Restul urinii este eliminat in closet.

Nu se recolteaza urina pentru examenul sumar in timpul fluxului menstrual

Anuntati daca sunteti sub tratament cu antibiotice! Recoltarea materiilor fecale

• Examen coproparazitologic/ Coprocultura Recoltarea probelor se face in recoltoare speciale – coprorecoltoare dupa cum urmeaza: se

recolteaza cu lingurita coprorecoltorului esantioane mici de materii fecale din mai multe locuri. Exudatul faringian

NU mancati si nu beti nimic inaintea recoltarii. Nu va spalati pe dinti! Anuntati daca sunteti sub tratament cu antibiotice!

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 4 din 43

F04-PG-17

I. ETAPELE DE LUCRU PNETRU RECOLTARE ESANTIOANE 1.1. Pregatirea pacientului pentru recoltarea probelor biologice primare Se are in vedere faptul ca exista o serie de variabile intrinseci, asa cum sunt sexul, varsta,

rasa sau sarcina, ce pot influenta rezultatele determinarilor de laborator. Din acest motiv, pentru unii analiti, interpretarea rezultatelor se face in functie de intervalele biologice de referinta aferente varstei sau sexului.

Exista si factori extrinseci ce pot duce la modificari ale rezultatelor la unele teste de laborator. In acest caz, se pot enumera alimentatia, fumatul, postul, exercitiul fizic sau altitudinea.

In general, pentru a se evita interpretarea eronata a datelor de laborator, recoltarea probelor biologice se va face dupa 12 ore de post si activitate fizica redusa.

Medicamentele, unele procedee sau proceduri diagnostice sau terapeutice la care este supus pacientul isi pot exercita efectele si asupra testelor de laborator. Recoltarea probelor biologice primare se va face, de preferinta, inaintea procedurilor diagnostice sau terapeutice.

1.2. . Identificarea pacientului Identificarea pacientului este foarte importanta pentru ca asistenta medicala de recoltare din

Laboratorul de analize medicale sa se asigure ca proba recoltata apartine pacientului notat pe formularul de solicitare a analizelor.

Asistenta medicala de recoltare din Laboratorul de analize medicale care face punctia venoasa nu va recolta nici o proba biologica daca nu are acceptul pacientului sau a tutorelui (dupa caz). Toate obiectiile din partea pacientului se raporteaza medicului sef de laborator sau loctiitorului in lipsa acestuia.

1.3 . Recoltarea probelor biologice 1.3.1 Materiale necesare procesului de recoltare esantioane primare

Materialele trebuie sa fie disponibile in orice punct de recoltare in care se efectueaza punctia venoasa:

• mese instrumentare: sunt proiectate astfel incat sa fie usor manevrabile si permit depozitarea temporara a materialele necesare

• stativele de colectare a sangelui: simple, usoare, cu spatii si compartimente suficiente

• manusi: unica folosinta • masti de unica folosinta • ace si holdere: acele si holderele sunt compatibile cu tuburile de recoltare folosite.

Dimensiunile acelor pentru punctia venoasa variaza de la 19G la 23G. Acele sunt intotdeauna sterile.

• seringile sterile: in general recoltarea cu ac si siringa se evita din motive de siguranta. Uneori este necesar recoltarea cu seringi sterile de diferite dimensiuni.

• tuburi de recoltare a sangelui venos: acestea sunt sterile si concepute pentru a obtine un volum predeterminat de sange.

• garouri • scaun special de recoltare • trusa de prim ajutor • canapea

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 5 din 43

F04-PG-17

• solutii dezinfectante • vata • plasturi de unica folosinta sterili • antiseptice: pentru pregatirea zonei de punctie se folsesc antiseptice, ca de exemplu:

alcool izopropilic sau alcool etilic 70% • tampoane de tifon, preambalate: se evita tampoanele de vata deoarece acestea pot

disloca dopul plachetar de la nivelul punctiei venoase • container rezistent la intepaturi: conform reglemantarilor in vigoare o frigider

1.3.2. Punctia venoasa 1.3.2.1.Zone de punctie.

• Electiv: venele de la plica cotului (bazilica, cefalica, mediana cubitala, cefalica accesorie) sau la nou nascuti si sugari venele jugulare si epicraniene, venele maleolare interne, venele femurale, venele subclaviculare.

• Alternativ: venele antebratului superior (mediana a antebratului, radiala) sau dorsale ale mainii (metarpiene, reteaua venoasa dorsala).

1.3.2.2. Procedura de prelevare cu seringa. • Se plaseaza pacientul in decubit dorsal sau in pozitie sezanda cu cotul sprijinit pe

suportul de brat. • Se decontamineaza mainile celui care urmeaza sa efectueze tehnica prin spalare

ingrijita cu apa si sapun, urmata de uscare cu prosop curat. • Se aplica garoul la circa 10 cm, proximal de zona punctiei si se strange pentru a

aprecia prin palpare dimensiunea si elasticitatea venei de punctionat.Simpla inspectie vizuala frecvent nu depisteaza venele profunde excelente pentru punctie.La nevoie, venele sunt mai bine evidentiate daca pacientul strange si relaxeaza de cateva ori pumnul.Nu se maseaza si nu se flageleaza antebratul. Se da drumul la garou.

• Se aseptizeaza degetele cu alcool sau alcool iodat 2%. • Se decontamineaza larg, concentric zona de punctie cu alcool.Tegumentul va fi

lasat cat mai uscat.Se aplica garoul. • Se fizeaza tegumentul deasupra punctului de punctie prin tensionare pe brat cu

degetele mainii libere si cu seringa pozitionata in axul venei, in unghi de 30 grade cu cu tegumentul si acul cu bizoul in sus, se punctioneaza pielea si vena subiacenta printr-o miscare moderat de brusca.Se inainteaza pentru a plasa in vena bizoul cu o parte din ac.

• Se detaseaza garoul ; • Se exercita o usoara presiune negativa prin retragerea pistonului.sangele trebuie sa

patrunda liber in seringa.Cand scurgerea este neregulata se roteste usor seringa pentru a repozitiona bizoul in vena.Cand sangele incepe sa curga liber in seringa se da drumul la garou pentru a preveni formarea unui hematom.

• Volumul de sange necesar este in functie de investigatiile solicitate. • Se retrage acul din vena si se preseaza imediat punctul de punctie cu tampon steril,

timp de 3-4 min sau mai mult pentru cei care sunt sub tratament cu anticoagulant. • Se arunca intr-un container pentru obiecte ascutite in acord cu reglementarile in

vigoare. • Tampoanele, manusi si alte materiale utilizate se arunca in cutie galbena pentru

infecte

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 6 din 43

F04-PG-17

1.3.2.3. Recoltarea sangelui venos cu sistemul vacutainer. • Recoltarea se face dimineata a jeun (pe nemancate). • Se aseaza pacientul in decubit dorsal, confortabil cu membrul superior in abductie,

extensie si supinatie sau in pozitie sezanda cu mana sprijinita pe marginea scaunului. • Asistentul(a) se spala pe maini cu apa si sapun , imbraca manusi sterile, verifica

banda de siguranta a acului(integritate, valabilitate) • Aplica garoul la o distanta de 7-8 centimetri deasupra locului punctiei,

strangandu-l astfel incat sa opreasca circulatia venoasa fara a comprima artera. Se recomanda pacientului sa stranga pumnul, venele devenind astfel turgescente.

• Indeparteaza carcasa de culoare alba a acului prin miscari de rasucire. • Infileteaza capatul liber al acului in holder. • Alege locul punctiei si il aseptizeaza, prin dezinfectia tegumentului de tip I (cu

tamponul imbibat in alcool se badijoneaza tegumentul timp de 30 secunde) • Indeparteaza carcasa colorata a acului. • Introduce tubul in holder apucand aripioarele cu indexul si mediul, iar cu policele

impinge tubul in holder si astfel va fi strapunsa diafragma gumata a dopului. • Se detaseaza garoul ; • Dupa prelevarea sangelui se scoate tubul din holder prin miscari de impingere

asupra aripioarelor laterale si i se imprima miscari usoare de inclinare-rasturnare pentru omogenizare cu aditivul.

• Se retrage acul din vena si se preseaza imediat punctul de punctie cu tampon steril, timp de 3-4 min sau mai mult pentru cei care sunt sub tratament cu anticoagulant, fara a flecta antebratul pe brat

• Se arunca intr-un container pentru obiecte ascutite in acord cu reglementarile in vigoare.

• Tampoanele, manusi si alte materiale utilizate se arunca in cutie galbena pentru infecte

1.3.2.4. Ordinea recoltarii: Se recolteaza in ordinea :

- citrat pentru testele de Hemostaza si se agita prin rasturnare de 4-5 ori ; - pe heparina; - pentru testele de Imunologie ; - pe gel pentru Biochimie ; - EDTA pentru Hematologie - se agita prin rasturnare de 7-8 ori - tub cu citrat pentru VSH (dop negru) 1.6 ml - pentru Biochimie

1.4 Etichetarea tuburilor cu probe de sange si inregistrarea orei de recoltare Tuburile cu probe de sange sunt identificate avand eticheta cu cod de bare bine atasata si

contin urmatoarele informatii:

• numele si prenumele pacientului; • sectia; • numarul de identificare; • tipul sectorului/analizei;

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 7 din 43

F04-PG-17

• Eticheta se aplica pe tub inainte de a pleca pacientul.

1.5 Transportul probelor biologice Transferul probelor biologice la laborator de la punctele de recoltare se face cu cutie

frigorifica cu sistem de recire propriu 2-80 Celsius .

In aceste cazuri se va avea in vedere evitarea producerea hemolizei la probele de sange. LAM recomanda si impune ca intre momentul recoltarii si centrifugarea probelor sa nu treaca mai mult de o ora.

Pe masura ce acest timp se prelungeste, incep sa apara modificari ale concentratiei unor analiti in sange.

Probele biologice se analizeaza in maxim 2- 4 ore de la recoltare, in functie de tipul de examinare si specificatiile respective.

1.6 Depozitarea probelor biologice Cele mai importante cauze ale alterarii calitatii specimenului biologic sunt reprezentate de:

metabolismul eritrocitelor (glucoza), evaporare, reactii chimice, descompunere microbiana, procese osmotice, efectele luminii, difuzia gazelor.

Transportul rapid si depozitarea de scurta durata a probelor biologice cresc credibilitatea in rezultatele furnizate de LAM. Probele biologice se depoziteaza intotdeauna in recipiente inchise pentru a preveni evaporarea (acest proces poate avea loc chiar si in frigider).

Analizele suplimentare sunt solicitate de catre pacient in intervalul orar de lucru al laboratorului de analize medicale prin completarea formularului Cerere de analize, respectand timpul maxim admis, caracteristic pentru fiecare tip de analit, pentru a nu

influenta rezultatul final

1.7. Cauze frecvente de aparitie a erorilor Nerespectarea standardelor de pregatire a pacientilor, de recoltare, transport al probelor sau

de depozitare va avea ca efect aparitia posibilelor erori:

• inscriptionarea gresita a recipientelor; • identificarea gresita a pacientilor; • aplicarea necorespunzatoare a garoului; • omogenizarea prea viguroasa a probelor recoltate in recipiente cu aditivi; • recoltarea in recipiente gresite; • nerespectarea ordinii de recoltare; • recoltarea din vena situata deasupra locului de administrare a tratamentului

perfuzabil in curs; • folosirea pentru recoltare a dispozitivelor de acces venos fara pregatirea lor

prealabila In ciuda respectarii procedurilor din faza preanalitica ramane totusi ca si cauza de aparitie a

erorilor de laborator interferenta diferitilor compusi din plasma sau ser cu metoda de testare. Cel mai des incriminate sunt probele hemolizate, lipemice si icterice.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 8 din 43

F04-PG-17

1.7.1 Proba hemolizata nu se lucreaza in mod obisnuit !

Se poate lucra in conditii de urgenta, specificindu-se pe Buletinul de analiza ca serul a fost hemolizat.

Hemoliza este definita ca eliberarea componentelor intracelulare eritrocitare sau a altor celule sanguine in spatiul extracelular sanguine (ser, plasma). Hemoliza se poate produce in vivo sau in vitro. Hemoliza poate avea la baza mecanisme chimice, imunologice, mecanice sau fizice:

imunologic – hemoliza dependenta de complement, in cazul transfuziilor; fizic – distructia hematiilor in mediu hipoton, presiune crescuta sau scazuta; mecanic – recoltare defectuoasa, valve cardiace, centrifugare necorespunzatoare; chimic – detergenti. Hemoliza poate fi vizualizata dupa centrifugarea sangelui, ca fiind o coloratie roz pana la

rosu intens a plasmei sau serului.

Hemoliza in vivo sau in vitro produce modificare ale rezultatelor unor analiti (cresteri sau scaderi). La baza acestor efecte stau o serie de mecanisme:

a) cresterea concentratiei constituentilor intracelulari in spatiul extracelular.

Constituentii intracelulari cu concentratie de 10 ori mai mare decat in spatiul extracelular vor creste in plasma in cazul existentei hemolizei (ASAT, LDH, potasiu).

c) interferenta cu metoda analitica

Componentii intracelulari pot interveni direct sau indirect in metoda analitica. Adenilatkinaza eliberata din eritrocite poate duce la cresterea activitatii CK si CKMB, mai

ales atunci cand in reactie se utilizeaza o cantitate necorespunzatoare de inhibitori de adenilatkinaza. In schimb, adenilatkinaza nu va influenta determinarea imunologica a CKMB. Activitatea pseudoperoxidazica a hemoglobinei libere interfera in metoda Jendrassik-Grof de determinare a bilirubinei, prin inhibarea formarii compusului diazonic colorat. Proteazele eliberate din celulele sanguine reduc activitatea factorilor de coagulare, in timp ce formarea produsilor de degradare ai fibrinei este crescuta.

c) interferenta optica

Cel mai des, culoarea rosie a hemoglobinei determina cresterea absorbtiei de radiatie la anumite lungimi de unda sau modificarea blank-ului

1.7.2 Proba lipemica

Lipemia este reprezentata de prezenta unui anumit grad de turbiditate a plasmei sau serului. Este determinata de prezenta unei concentratii crescute a lipoproteinelor si este vizibila cu ochiul liber. Pentru a detecta prezenta lipemiei este necesar sa se utilizeze containere de recoltare care sa nu distorsioneze continutul.

Cel mai frecvent, lipemia este determinata de cresterea concentratiei trigliceridelor in ser sau plasma. Cresterea concentratiei trigliceridelor poate fi consecinta ingestiei de alimente, prezentei unor tulburari ale metabolismului lipidic sau infuziei de lipide (alimentatie parenterala).

a) Interferenta in analizele spectrofotometrice

Lipemia interfera in determinarile spectrofotometrice prin absorbtia de radiatie si fenomene de dispersie a luminii (light scattering). Rezultatele obtinute pot fi atat crescute cat si scazute in

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 9 din 43

F04-PG-17

functie de blanking-ul procedurii. O turbiditate mare poate chiar impiedeca obtinerea rezultatului, atunci cand linearitatea metodei este depasita.

b) Efectul depletiei de volum

Lipoproteinele determina o scadere aparenta a concentratiei analitilor prin reducerea volumului apei, astfel incat volumul ocupat de lipoproteine in ser sau plasma va fi inclus in calculul concentratiei analitului. In acest mod se explica concentratia scazuta a sodiului si potasiului in serul lipemic, atunci cand masuratorile se fac flamfotometric sau este utilizata metoda indirecta cu electrozi ion-selectivi, comparative cu metoda directa cu electrozi ion-selectivi.

c) Interferenta prin mecanisme fizico-chimice

Lipoproteinele din ser pot lega o serie de analiti, cum ar fi anticorpii, astfel incat acestia nu mai intra in reactia specifica. Si determinarile electroforetice si cromatografice sunt influentate de prezenta lipoproteinelor 4.

1.7.3 Proba icterica nu se lucreaza

Bilirubina este prezenta in plasma sau ser sub forma libera sau legata de proteine (albumina). Bilirubina conjugata este prezenta sub forma de mono- si diglucuronat si este solubila in apa. Drept urmare, atunci cand este prezenta in cantitate crescuta in sange, va apare si in urina.

Mecanisme de interferenta ale bilirubinei:

a) Interferenta spectrala

Bilirubina prezinta o absorbtie crescuta la lungimi de unda de 340 nm si 500 nm. Metodele spectrofotometrice ce utilizeaza aceste lungimi de unda pot fi influentate de concentratiile creste de bilirubina. Reducerea absorbtiei ca rezultat al oxidarii bilirubinei in solutie alcalina este principala cauza a interferentei bilirubinei in metoda Jaffe fara deproteinizare prin care se determina creatinina.

b) Interferenta chimica

Bilirubina interfera in metodele bazate pe sistemul oxidaza/peroxidaza. Proportional cu concentratia sa, bilirubina reactioneaza cu H2O2 formata in sistemul de testare, determinand obtinerea unor rezultate fals scazute atunci cand sunt utilizate metode enzimatice de determinare a glucozei, colesterolului, trigliceridelor, acidului uric si creatininei.

1.9.Recoltarea de sange capilar Sangele capilar se recolteaza din pulpa degetului, dezinfectat in prealabil cu alcool, prin

intepare cu un ac de unica folosinta, steril. Folosirea sangelui capilar se recomanda pentru executarea unor frotiuri in scopul determinarii: morfologiei eritrocitare, formulei leucocitare, trombocitelor in trombopenie sau cand trombocitele din sangele recoltat pe anticoagulant sunt agregate.

2. RECOLTARE ESANTIOANE PENTRU HEMATOLOGIE 2.1 HEMOLEUCOGRAMA COMPLETA Prelevare proba

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 10 din 43

F04-PG-17

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop mov (EDTA K3). Se preleveaza 3ml sange (sau pana la semn).

Pregatire proba : • Se omogenizeaza proba recoltata prin rasturnare, pentru a evita formarea

coagularii. • O proba gata de lucru trebuie sa fie intr-un un volum corespunzator si sa nu

prezinte coagul. Conservare proba :

• 24 de ore la 2-80C. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca sangele este hemolizat sau coagulat. 2.1.1. FORMULA LEUCOCITARA, MORFOLOGIE ERITROCITARA Pregatire pacient:

• Pacientul se prezinta la recoltare a jeun Prelevare proba :

• Se recolteaza sange capilar si se executa imediat un frotiu pe lama Pregatire proba :

• Se noteaza o lama de microscopie in scopul identificarii ulterioare a probei Respingere proba :

• Frotiu executat incorect

INTERFERENTE

a. NUMAR DE ERITROCITE

Scaderi : prezenta de aglutinine la rece poate determina o scadere falsa a numarului de eritrocite.

b. HEMOGLOBINA:

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : Hipertrigliceridemie, numar de leucocite > 25 000/microlitru False cresteri : prezenta de Hb C sau Hb S, boli hepatice in stadiu avansat, globuline care

precipita usor (ca in mielom multiplu sau macroglobulinemie Waldenstrom)

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : la marii fumatori (din cauza prezentei de CO Hb, care este nefunctionala).

Scaderi :

Medicamente care produc anemie aplastica: • Antineoplazice: azathioprina, busulfan, ciclofosfamida, citarabina, daunorubicina,

doxorubicina, fluorouracil, melphalan, mercaptopurina, metotrexat, nitrogen mustard, tioguanina, vinblastina, vincristina .

• Antimicrobiene: amfotericin B, cloramfenicol, peniciline, ristocetina, streptomicina, sulfonamide, tetracicline.

• Analgezice: aspirina, indometacin, fenacetina, fenilbutazona, oxifenbutazona. • Anticonvulsivante: carbamazepin, mephenitoin, fenitoin, primidon, trimetadion.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 11 din 43

F04-PG-17

• Metale: compusi organici ai arsenului, bismut, compusi de aur, mercur, argint coloidal.

• Psihotrope: clordiazepoxid, clorpromazina, meprobamat, promazina, trifluoperazina. • Antimalarice: pirimetamina, quinacrina. • Antihipertensive: captopril. • Hipoglicemiante orale: carbutamida, clorpropamida, tolbutamida. • Antitiroidiene: carbimazol, metimazol, perclorat, propiltiouracil, tiocianat. • Diuretice: acetazolamida, clorotiazida, triamteren. • Antihistaminice: clorfeniramina, tripelenami

Medicamente care produc hemoliza, la pacienti cu deficit de G6 PD: • Antimicrobiene: cloramfenicol, sulfonamide. • Analgezice: aspirina, fenacetina. • Metale: compusi organici ai arsenului. • Alcaloizi cinchona: chinidina, chinina. • Antimalarice: clorochina, primachina, pirimetamina, quinacrina. • Antihipertensive: captopril. • Sulfone: dapson, solapson • Nitrofurani: furazolidona, nitrofurantoin, nitrofurazon • Diverse: dimercaprol, albastru de metilen, acid nalidixic, fenazopiridina, probenecid.

Medicamente care produc hemoliza imuna:

• Antineoplazice: melphalan, metotrexat. • Antimicrobiene: amfotericin B, cephaloridin, cefalotin, peniciline, sulfonamide. • Analgezice: ibuprofen, acid mefenamic, fenacetina. • Anticonvulsivante: carbamazepin. • Psihotrope: clorpromazin. • Alcaloizi cinchona: chinidina, chinina. • Antihipertensive: procainamida. • Hipoglicemiante orale: carbutamid, clorpropamida, tolbutamida • Diverse: acid p-aminosalicilic, insulina, izoniazid, levodopa, metildopa, rifampin,

stibofen.

c. HEMATOCRIT

INTERFERENTE IN VIVO :

Scaderi : alfa interferon, trombolitice (alteplaza, anistreplaza, streptochinaza), medicamente care produc anemie aplastica, medicamente care produc anemie hemolitica la pacienti cu deficit de G6 PD, medicamente care produc anemie hemolitica prin mecanism imun (vezi INTERFERENTE PENTRU HEMOGLOBINA IN VIVO)

d. VEM:

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : abuz de alcool, zidovudin, medicamente care produc anemie megaloblastica

(aciclovir, acid aminosalicilic, anticonvulsivante, azatioprina, azauridin, colchicina, cicloserina, citarabina, fluorouracil, glutetimid, hidroxiuree, izoniazid, acid mefenamic, mercaptopurina, metformin, metotrexat, neomicina, nitrofurani, contraceptive orale, pentamidin, fenacetin,

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 12 din 43

F04-PG-17

pirimetamin, tioguanina, triamteren, trimetoprim).

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : aglutinine la rece, numar de leucocite > 25 000 / µl

e. HEM:

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri: hiperchilomicronemie(tipurile I si V), hipertrigliceridemie, numar de leucocite>=

25 000 /µl.

False cresteri : in prezenta Hb C sau a Hb S, in boli hepatice avansate, in prezenta globulinelor care precipita usor (ex: in mielom multiplu, macroglobulinemie Waldenstrom).

INTERFERENTE IN VIVO : Scaderi : abuz de alcool

f. CHEM:

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : hiperlipoproteinemie tip I si V, aglutinine la rece, numar de leucocite >25 000 /µl,

hiperbilirubinemie.

g. LARGIMEA DISTRIBUTIEI ERITROCITARE:

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : aglutinine la rece, leucemie limfatica cronica cu numar mare de leucocite,

hiperglicemie.

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : dupa administrare de masa eritrocitara; in hemoliza de cauza extraeritrocitara (in

vas).

h. NUMAR DE TROMBOCITE:

Observatie: la valori =< 10 000 /µl , rezultatul nu este precis, la determinarile executate automat.

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : in leucemii (fragmente citoplasmatice ale celulelor leucemice sunt numarate drept

trombocite), concentratie de EDTA prea mare (> 2 mg/ml)

Scaderi : Satelitism plachetar (dependent de EDTA), aglutinare plachetara (de obicei dependenta de EDTA), chiaguri trombocitare (datorate unei coagulari incipiente a probei).

INTERFERENTE IN VIVO :

Cresteri : algluceraza, epinefrina, metoprolol, miconazol, propranolol.

Scaderi :

Medicamente care afecteaza orice pacient, daca sunt administrate in doza suficienta:

• Antineoplazice: actinomicina D, asparaginaza, azathioprin, busulfan, clorambucil, cisplatin, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazin, daunorubicin, doxorubicin, etoposid, mecloretamina, mercaptopurina, metotrexat, nitrosouree, plicamicin, procarbazin, tioguanina, vincristina (rar), vinblastina.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 13 din 43

F04-PG-17

• Diuretice: acetazolamida, bumetanid, diazoxid, furosemid, diuretice mercuriale, tiazide, triamteren.

• Metale grele: bismut, cupru, compusi de aur, argint • Medicamente hipoglicemiante: carbutamid, clorpropamida, glibenclamida, insulina,

tolbutamida. Medicamente psihotrope: antidepresive (ex. amitriptilina, desipramina), barbiturati, meprobamat, fenotiazine

i. NUMAR DE LEUCOCITE:

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri false: prezenta de crioproteine in proba de singe stocata la +40 C Scaderi : in leucemia limfatica cronica ( numai in unele cazuri, din cauza fragilitatii

celulelor); aglutinine la rece sau gamapatii monoclonale (numai in unele cazuri, din cauza aglutinarii leucocitelor); pacienti cu leucemie netratata, cu uremie; dupa administrarea de : azatioprin, clorambucil, ciclofosfamida, daunorubicin, hidroxiuree, melfalan, metotrexat, prednison, vincristina.

j. FORMULA LEUCOCITARA:

Observatii: detectarile fals pozitive sau fals negative ale celulelor imature sunt comune si frecventa lor variaza cu aparatul automat utilizat (examenul microscopic este deci indispensabil pentru acest capitol).

• NEUTROFILE:

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : acetilcolina, monoxid de carbon, caseina, clorpropamida, corticosteroizi,

corticotropin, digitalice, endotoxine, epinefrina, etilenglicol, etiocolanolon, heparina, histamina, venin de insecte, plumb, mercur, norepinefrina, clorat de potasiu, turpentin.

Medicamente care afecteaza pe toti pacientii, daca sunt administrate in doza suficienta:

Antineoplazice: actinomicina D, amsacrina, asparaginaza, azatioprina, busulfan, carboplatin, clorambucil, cisplatin, ciclofosfamida, citarabina, daunorubicin, dacarbazina, doxorubicin, epirubicin, etopozid, fluorouracil, melfalan, mecloretamina, mercaptopurina, metotrexat, mitomicina, mitoxantrona, nitrosouree, plicamicin, tioguanina, vincristina, vinblastina.

• EOZINOFILE:

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri frecvente:

Medicamente alergizante: anticonvulsivante (carbamazepin, fenitoin); antimicrobiene (cefalosporine, cloramfenicol, eritromicine, peniciline, sulfonamide, tetracicline, vancomicina); medicamente tuberculostatice; fenotiazine.

Alte cresteri : acid aminosalicilic, clorpropamida, imipramina, mefenesin, nitrofurantoin, penicilina,

sulfasalazina, sulfonamide (produc eozinofilie in cadrul unui sindrom Loeffler); alopurinol, dapsona,

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 14 din 43

F04-PG-17

etretinat, metotrexat, metildopa, nafarelin, penicilamina, procarbazin, triamteren.

Scaderi : corticotropin, epinefrina, glucocorticoizi, metisergid, niacin, procainamida.

• BAZOFILE: INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : estrogeni, antitiroidiene, desipramina.

Scaderi : corticosteroizi, corticotropin, iradiere cu raze X, chimioterapie, procainamida, tiopental.

• LIMFOCITE:

INTERFERENTE IN VIVO :

Cresteri : albuterol, acid aminosalicilic, carbon disulfid (otravire), epinefrina, griseofulvin, haloperidol, isoproterenol, levodopa, analgezice narcotice, niacinamida, norepinefrina, fenitoin, mefenitoin, compusi organici ai arsenului, plumb (intoxicatie), tetracloretan (otravire), acid valproic.

Scaderi : ser antilimfocitar, asparaginaza, clorambucil, clorochina, corticotropin, glucocorticoizi, litiu, mecloretamina, metisergid, niacin, iradiere X.

• MONOCITE:

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : carbon disulfid (otravire), griseofulvin, haloperidol, mephenitoin, metsuximid,

fosfor (otravire), prednison, tetracloretan (otravire).

2.2.DETERMINAREA GRUPELOR SANGUINE OAB si FACTORULUI RH

Prelevare proba • Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop mov (EDTA K3). Se

preleveaza 3ml sange (sau pana la semn). Pregatire proba :

• Se omogenizeaza proba recoltata prin rasturnare, pentru a evita formarea de coagul.

Conservare proba : • 24 de ore la 2-80C.

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca sangele este hemolizat sau coagulat., ori recoltat pe

alt vacutainer (ex.dop rosu) INTERFERENTE: Proteine serice anormale, inlocuitoare de plasma, eritrocite transfuzate,

eritrocite pe care sunt fixati anticorpi, gelatina Wharton, fibrinogen, autoanticorpi, protamin-sulfat, septicemie cu microorganisme Gram-negative cu activitate "B-like".

2.3.VSH Prelevare proba

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop NEGRU ( citrat de sodiu). Se preleveaza in vacutainer de 1.6 ml – la copii,si 2.9 ml la adulti, cat permite vacuumul.

Pregatire proba :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 15 din 43

F04-PG-17

• Se omogenizeaza proba recoltata prin rasturnare, pentru a evita formarea de coagul.

• O proba gata de lucru trebuie sa fie intr-un un volum corespunzator si sa nu prezinte coagul sau hemoliza.

Conservare proba : • 2 ore la 250C • 12 de ore la 2-80C.

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca sangele este hemolizat sau coagulat., ori recoltat pe

alt vacutainer (ex.dop rosu). 3. RECOLTARE ESANTIAONE HEMOSTAZA

3.1. TIMP DE TROMBOPLASTINA PARTIAL ACTIVAT (APTT), TIMP DE PROTROMBINA QUICK, FIBRINOGEN

Prelevare proba • Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop BLEU (citrat de sodiu

3.2%).Se preleveaza cat permite vacuumul. Pregatire proba :

• Se omogenizeaza proba recoltata prin rasturnare. • Centrifugare 15 minute la 3000tr/min

Conservare/stabilitate proba : • 2 de ore la 250C.

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca sangele este hemolizat/ coagulat, sau vacutainerul

nu este plin. Surse de eroare :

o Punctie venoasa dificila, urmata de contaminarea cu factor tisular (tromboplastina) ;

o Staza venoasa ; o Recoltare postprandiala ; o Nerespectarea raportului dintre volumul de sange si volumul de anticoagulant ; o Incorecta omogenizare ; o Prezenta urmelor de heparina ; o Depasirea timpului de 3 ore de la recoltare pana la efectuarea testului ; o Incorecta reconstituire a reactivilor ; o Reactivi perimati sau incorect conservati ; o Interferenta unor medicamente ;

- anticoagulante (derivati sa ;licilati, antiinflamatoare, antibiotice, hormoni tiroidieni, steroizi si anabolizante, antihistaminice, hipolipemiante si hipoglicemiante ;

- care diminueaza efectul anticoagulant (meprobamat, barbiturice, contraceptive orale, antitiroidienele)

INTERFERENTE • APTT

Valori crescute: heparina adaugata in proba (recoltare pe cateter heparinizat), lipemie INTERFERENTE IN VIVO :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 16 din 43

F04-PG-17

Cresteri : anistreplaza, clorpromazina, acid valproic • TIMP QUICK

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri: acid aminosalicilic, steroizi anabolizanti, anistreplaza, asparaginaza, aspirina

(doza mare), carbenicilina, cefalosporine (mai ales cefamandol, cefmetazol, cefoperazon, cefotetan, moxalactam), colestiramina (rar), colestipol (rar), ciclofosfamida, etanol (cantitati mari, alcoolism),halotan, heparina (efect legat de concentratie, mai ales la doze intermitente), hetastarch (tranzitoriu), alfa-2b interferon, laxative,metotrexat, niacin, anticoagulante orale.

Medicamente care produc efect aditiv la anticoagulantele orale : alopurinol, amiodarone, cloramfenicol (inhiba metabolizarea), cimetidina, clofibrat, disulfiram, eritromicina, acid etacrinic, glucagon, acid mefenamic, metronidazol, miconazole, acid nalidixic, oxifenbutazona, feniramidol, fenitoin (efect initial tranzitoriu), sulfinpirazona, sulfonamide, tamoxifen, tiroxina, fenilbutazona.

Scaderi : alcool (abuz cronic), aspirina (doze mici), menadiol, mercaptopurina, fitonadion, contraceptive orale.

• FIBRINOGEN INTERFERENTE IN VIVO : Transfuziile sanguine in ultima luna pot modifica rezultatele. Fibrinolizinele scindeaza fibrinogenul,reducandu-i nivelele serice. Dieta bogata in acizi grasi omega-3 si omega -6 poate ↓ nivelele fibrinogenului. ↓ nivelele: acidul valproic, androgenii, asparaginaza, danazolul, dextranul, fenofibratul,

fenobarbitalul,lovastatina, pentoxifilina, streptokinaza, ticlopidina, urokinaza. 4 RECOLTARE ESANTIOANE IMUNOLOGIE 4.1. ASLO Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU . • Se preleveaza cat permite vacuumul.

Pregatire proba : • Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina - ceea ce poate duce la

rezultate false. Conservare proba :

• Probele de ser pot fi depozitate 7 zile la 2 - 80 C, 2 luni la -200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului, inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

- sangele este intens hemolizat sau prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure, val la suprafata)

LIMITELE METODEI - Serurile intens lipemice dau reactii nespecifice. - Se va evita hemolizarea probei ! - In cazul specimenelor de ser contaminate cu Bacillus cereus sau Pseudomonas,

βlipoproteinele existente in produsii de crestere bacterieni, neutralizeaza proprietatile hemolitice ale streptolizinei O, determinind obtinerea de rezultate fals crescute.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 17 din 43

F04-PG-17

- β lipoproteinele din serul pacientilor cu boli hepatice, neutralizeaza proprietatile hemolitice ale streptolizinei O, determinind obtinerea de rezultate fals crescute. INTERFERENTE Antibioticele si corticosteroizii pot ↓ nivelele ASLO. Titrul ASLO poate fi fals ↑ in cazul existentei unor nivele inalte ale betalopoproteinelor intrucat acestea inhiba streptolizina O.

4.2 FACTORUL REUMATOID Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU:

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina - ceea ce poate duce la

rezultate false. Conservare proba :

• Probele de ser pot fi depozitate 7 zile la 2 - 80 C, 2 luni la -200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului,

inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

- sangele este intens hemolizat sau prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure, val la suprafata)

INTERFERENTE Aproximativ 5% din persoanele sanatoase pot prezenta titruri scazute de FR. La varstnici, rezultatele sunt frecvent fals pozitive. Nivelele serice inalte de lipide sau crioglobuline pot determina rezultate fals pozitive; se

impune repetarea testului dupa respectarea unei diete cu continut redus in grasimi!

4.3 PCR Prelevare proba:

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba : • Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina - ceea ce poate duce la

rezultate false. Conservare proba :

• Probele de ser pot fi depozitate 7 zile la 2 - 80 C, 2 luni la -200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului,

inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

- sangele este intens hemolizat sau prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure, val la suprafata)

INTERFERENTE: Consumul moderat de alcool,scaderea ponderala,supresolicitarea fizica sau administrarea de

fibrati/statine pot ↓ nivelele proteinei C reactive. Antiinflamatoarele nesteroidiene,salicilatii si steroizii pot determina teste fals negative

datorita efectelor supresoare asupra inflamatiei.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 18 din 43

F04-PG-17

Nivele ↑ pot apare la pacientii cu hipertensiune arteriala,indice de masa corporala ridicat,sindrom metabolic,diabet zaharat,infectii/inflamatii cronice,nivele scazute ale HDL/trigliceridelor.

Estrogenii,progesteronul sau fumatul pot ↑nivelele. 4.4 HELICOBACTER PYLORI (H.P.) PREGATIRE PACIENT: a jeun SPECIMEN RECOLTAT: sange venos sau plasma Precautii: - anticoagulantele ca heparina, EDTA si citratul nu afecteaza rezultatul testului - interferente relevante: seruri hemolizate, factorul reumatoid, lipemia, seruri icterice RECIPIENT DE RECOLTA: Vacutainer cu/fara gel activator (capac rosu) 6 ml CANTITATE RECOLTATA: 5 ml PRELUCRARE NECESARA DUPA RECOLTARE: se separa serul imediat. STABILITATE PROBA Serul separat este stabil: - 7 zile la 20-80 C - 6 luni la -200 C INTERFERENTE: Un rezultat pozitiv indica fie o infectei curenta, fie o infectie in antecedente; din acest

motiv, testul serologic nu prezinta acuratete diagnostica la persoanele care au avut deja infectie. Testul nu poate fi folosit pentru controlul eficientei tratamentului, deoarece anticorpii pot persista pana la 3 ani dupa o infectie.

4.5 RPR SI ANTICORPI TREPONEMA PALLIDUM

PREGATIRE PACIENT - a jeun SPECIMEN RECOLTAT A. Pentru RPR : - sange venos sau plasma B. Pentru TPHA : - sange venos - lichid cefalorahidian Cauze de respingere pentru singe venos: A. Pentru RPR : - specimen lipemic (apar rezultate care nu pot fi interpretate) B. Pentru TPHA : - specimen hemolizat - specimen lipemic (apar rezultate care nu pot fi interpretate) - specimen contaminat bacterian RECIPIENT DE RECOLTA Pentru sange venos : - Vacutainer cu/fara gel activator (capac rosu) Pentru lichid cefalorahidian :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 19 din 43

F04-PG-17

- recipient steril cu dop infiletat CANTITATE RECOLTATA - 5 ml pentru singe venos - 1 ml pentru LCR PRELUCRARE NECESARA DUPA RECOLTARE Pentru sange venos : Dupa ce singele a coagulat, vacutainer-ul se centrifugheaza 10 min. la 3000 t/min. Serul

separat se decanteaza in recipiente Eppendorf. Determinarile se executa imediat. Daca acest lucru nu este posibil, serul se pastreaza la +2°C-+8°C sau la -20°C.

Pentru lichid cefalorahidian : LCR se centrifugheaza ; supernatantul se separa; se lucreaza imediat. Daca acest lucru nu

este posibil, supernatantul se pastreaza la +2ºC-+8ºC sau la –20ºC. STABILITATE PROBA Serul si supernatantul lichidului cefalorahidian sunt stabile : - 7 zile la +2°C-+8°C. - timp indelungat la -20°C LIMITELE METODEI : A. Limitele tehnicii RPR Reactii fals pozitive : Boli infectioase bacteriene : - pneumonie pneumococica, scarlatina, lepra, febra recurenta, endocardita bacteriana,

malarie, rickettsiose, psitacoza, leptospiroza, sancru moale, tuberculoza, pneumonie cu Mycoplasma, tripanosomiaza.

Boli virale : - variola, varicela, pojar, mononucleoza infectioasa, oreion, hepatita virala, SIDA. Cauze neinfectioase : - graviditate, boli cronice de ficat, neoplasme avansate, mielom multiplu, boli ale tesutului

de colgen, transfuzii multiple, virsta inaintata. Serurile puternic lipemice (lactescente) produc o reactie dubioasa.

B. Limitele tehnicii TPHA . Reactii fals pozitive apar la pacienti care : - au mononucleoza infectioasa, lupus, lepra, malarie, febra recurenta, leptospiroza - au un nivel anormal de Ig G sau Ig M - au avut sifilis si nu au fost tratati precoce Serurile puternic lipemice (lactescente) produc o reactie dubioasa. Pentru serurile pozitive sau dubioase se recomanda executarea reactiei FTA – ABS

(Fluorescent Treponemal Antibody – Absorbtion) ce evidentiaza anticorpii anti-Treponema.

5.RECOLTARE ESANTIOANE BIOCHIMIE 5.1. TESTE CINETICE 5.1.1. RATE UP : FSA, α- AMILAZA, GAMA GT, CREATININA 5.1.1.1. DETERMINAREA FOSFATAZEI ALCALINE SERICE Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 20 din 43

F04-PG-17

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina - ceea ce poate duce la

rezultate false. • Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• Probele de ser pot fi depozitate 7 zile la 2 - 80 C, 2 luni la -200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului, inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat sau prezinta semne de contaminare bacteriana

(tulbure, val la suprafata) 2) proba supusa temperaturilor ridicate 3) valori de 20 mg/dl ale bilirubinei totale şi de 100 mg/dl ale hemoglobinei

au efect neglijabil ( mai mic de 5% ) asupra rezultatului; INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : Medicamente, care produc colestaza : acid aminosalicilic, amitriptilina, steroizi

anabolizanti, androgeni, azotioprina, benzodiazepine, carbamazepin, carbazona, clorotiazida, clorpropamida, acid clavulanic, dapsona.

Medicamente care produc o afectare hepatocelulara : acetaminofen, alopurinol, acid aminosalicilic, amiodarone, amitriptilina, steroizi anabolizanti, androgeni, asparaginaza, aspirina, azatioprina, carbamazepin, chenodiol, clorambucil, cloramfenicol, clorpropamida, cimetidina, ciclosporine, danazol, dantrolen, dapsone, diclofenc, dicumarol (rar), disulfiram, eritromicina, estrogeni, etionamida, glyburide (glibenclamid), saruri de aur, imipramina, mercaptopurina, metimazol, acid nicotinic, nitrofurantoin, contraceptive orale, estrogeni, etanol (exces), etionamida, fluconazol, halotan, ibuprofen, imipramina, indometacin, saruri de fier (supradozare), izoniazida, ketoconazole, inhibitori MAO, mercaptopurina, metotrexat, metoxifluran, metildopa, naproxen, papaverina, parametadion, penicilamina, peniciline, fenotiazine, fenilbutazona, progestative, propoxifen, sulfonamide, sulfone, sulindac, tamoxifen, tolbutamida, perhexilin, fenazopiridina, fenidiona, fenobarbital, fenilbutazona, fenitoin, plicamicin (mitramicin), probenecid, procainamida, propiltiouracil, pirazinamida, chinidina, rifampin, salicilati, sulfasalazina, sulfonamide, tamoxifen, tetracicline, trimetadiona, acid valproic, vitamina A, warfarina (rar).

Scaderi : azatioprina, clofibrat, danazol, estrogeni, contraceptive orale. INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) Scaderi : teofilina. Cresteri : metotrexat 200 micrograme/ml, nitrofurantoin 40 micrograme/ml. 5.1.1.2. DETERMINAREA α-AMILAZEI

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 21 din 43

F04-PG-17

Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • Probele de ser sau plasmă sunt stabile 7 zile la 2 - 80C sau o luna la -200C fără

modificarea activităŃii enzimatice • S-au raportat interferenŃe date de anticoagulanŃi ca citratul şi florurile; • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului,inainte de a fi

lucrata. Respingere proba : Se va respinge proba in caz ca :

1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana(tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

5.1.1. 3. DETERMINAREA GAMMA GT( gama glutamiltransferazei ) Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• Probele sunt stabile şapte zile la 2 - 80 C, -20 0C mai putin de un an, fără modificarea activităŃii enzimatice;

• Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : acetaminofen (otravire), barbiturati, captopril (rar), cefalosporine, estrogeni,

etanol (la bautori moderati sau inraiti), contraceptive orale, graviditate, fenitoin, primidona,

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 22 din 43

F04-PG-17

propoxifen, streptokinaza.

Medicamente, care produc colestaza : acid aminosalicilic, amitriptilina, steroizi anabolizanti, androgeni, azotioprina, benzodiazepine, carbamazepin, cabrazona, clorotiazida, clorpropamida, acid clavulanic, dapsona.

Medicamente care produc o afectare hepatocelulara : acetaminofen, alopurinol, acid aminosalicilic, amidarome, amitriptilina, steroizi anabolizanti, androgeni, asparaginaza, aspirina, azatioprina, carbamazepin, chenadiol, clorambucil, cloramfenicol, clorpropamida, cimetidina, ciclosporine, danazol, dantrolen, dapsone, diclofenc, dicumarol (rar), disulfiram, eritromicina, estrogeni, etionamida, glyburide (glibenclamid), saruri de aur, imipramina, mercaptopurina, metimazol, acid nicotinic, nitrofurantoin, contraceptive orale, estrogeni, etanol (exces), etionamida, fluconazol, halotan, ibuprofen, imipramina, indometacin, saruri de fier (supradozare), izoniazida, ketoconazole, inhibitori MAO, mercaptopurina, metotrexat, metoxifluran, metildopa, naproxen, papaverina, parametadion, penicilamina, peniciline, fenotiazine, fenilbutazona, progestative, propoxifen, sulfonamide, sulfone, sulindac, tamoxifen, tolbutamida, perhexilin, fenazopiridina, fenidiona, fenobarbital, fenilbutazona, fenitoin, plicamicin (mitramicin), probenecid, procainamida, propiltiouracil, pirazinamida, chinidina, rifampin, salicilati, sulfasalazina, sulfonamide, tamoxifen, tetracicline, trimetadiona, acid valproic, vitamina A, warfarina (rar).

Scaderi : acid ascorbic (1 g/zi timp indelungat), bezafibrat, clofibrat, fenofibrat 51.1.4. DETERMINAREA CREATININEI Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • Probele de ser/plasmă sunt stabile: 7 zile la 2 – 80 C, 3 luni la -200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului, inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana(tulbure,val la suprafata) 3)proba supusa temperaturilor ridicate INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : Medicamente nefrotoxice . INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) : Cresteri : lidocaina , prolina. Scaderi : dipirona (Metamizol), n-acetilcisteina (Fluimucil, Mucomyst).

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 23 din 43

F04-PG-17

5.1.2.RATE DOWN: ALAT/ ALT / GPT/ TGP ,ASAT/ AST/ GOT/ TGO, UREE 51.2.1. DETERMINAREA ALAT(ALT/GPT/TGP) Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• serul - dupa punctia venoasa se lasa un timp pentru coagulare, dupa care se centrifugheaza. Separarea de globule rosii trebuie facuta cat mai repede. Fibrina poate da rezultate eronate. Eritrocitele contin de 3 – 5 ori mai mult ALT decat serul.

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • Serul, plasma – stabile 7 zile +20C +80C

- 12 saptamini – 200C • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba : Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba a fost supusa temperaturilor ridicate INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : Medicamente, care produc colestaza : acid aminosalicilic, amitriptilina, steroizi

anabolizanti, androgeni, azotioprina, benzodiazepine, carbamazepin, carbazona, clorotiazida, clorpropamida, acid clavulanic, dapsona.

Medicamente care produc o afectare hepatocelulara : acetaminofen, alopurinol, acid aminosalicilic, amiodarone, amitriptilina, steroizi anabolizanti, androgeni, asparaginaza, aspirina, azatioprina, carbamazepin, chenodiol, clorambucil, cloramfenicol, clorpropamida, cimetidina, ciclosporine, danazol, dantrolen, dapsone, diclofenc, dicumarol (rar), disulfiram, eritromicina, estrogeni, etionamida, glyburide (glibenclamid), saruri de aur, imipramina, mercaptopurina, metimazol, acid nicotinic, nitrofurantoin, contraceptive orale, estrogeni, etanol (exces), etionamida, fluconazol, halotan, ibuprofen, imipramina, indometacin, saruri de fier (supradozare), izoniazida, ketoconazole, inhibitori MAO, mercaptopurina, metotrexat, metoxifluran, metildopa, naproxen, papaverina, parametadion, penicilamina, peniciline, fenotiazine, fenilbutazona, progestative, propoxifen, sulfonamide, sulfone, sulindac, tamoxifen, tolbutamida, perhexilin, fenazopiridina, fenidiona, fenobarbital, fenilbutazona, fenitoin, plicamicin (mitramicin), probenecid, procainamida, propiltiouracil, pirazinamida, chinidina, rifampin, salicilati, sulfasalazina, sulfonamide, tamoxifen, tetracicline, trimetadiona, acid valproic, vitamina A, warfarina (rar).

Injectiile intramusculare pot provoca o crestere usoara a ALT. INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) Cresteri : cazuri cu proteine serice totale crescute si cu imunoglobuline crescute (mielom

multiplu)

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 24 din 43

F04-PG-17

5.1.2.2. DETERMINAREA ASAT(AST/GOT/TGO) Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Proba = ser sau plasmă recoltată pe EDTA sau heparină; stabile 4 zile la +20+25˚C, 7 zile +2+8˚C, 12 saptamani -20˚C

• Ser – dupa punctia venoasa se lasa sa se coaguleze, atentie la bolnavii care fac tratament cu anticoagulante, durata coagularii este mai lunga. Fibrina da rezultate eronate.

• Dupa prelevare separarea hematiilor de ser se face cat mai repede posibil. • Plasma – anticoagulantele acceptate heparinatul de litiu, heparinatul de

sodiu. Nu se foloseste heparinatul de amoniu. Centrifugarea probelor se face la timp, cu eliminarea plachetelor sangvine pentru separarea globulelor rosii din plasma.

Conservare proba : • 4 zile la +20+25˚C, • 7 zile +2+8˚C, • 12 saptamani -20˚C • se vor evita congelarile si decongelarile repetate • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului, inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : Medicamente, care produc colestaza : acid aminosalicilic, amitriptilina, steroizi

anabolizanti, androgeni, azotioprina, benzodiazepine, carbamazepin, carbazona, clorotiazida, clorpropamida, acid clavulanic, dapsona.

Medicamente care produc o afectare hepatocelulara : acetaminofen, alopurinol, acid aminosalicilic, amiodarone, amitriptilina, steroizi anabolizanti, androgeni, asparaginaza, aspirina, azatioprina, carbamazepin, chenodiol, clorambucil, cloramfenicol, clorpropamida, cimetidina, ciclosporine, danazol, dantrolen, dapsone, diclofenc, dicumarol (rar), disulfiram, eritromicina, estrogeni, etionamida, glyburide (glibenclamid), saruri de aur, imipramina, mercaptopurina, metimazol, acid nicotinic, nitrofurantoin, contraceptive orale, estrogeni, etanol (exces), etionamida, fluconazol, halotan, ibuprofen, imipramina, indometacin, saruri de fier (supradozare), izoniazida, ketoconazole, inhibitori MAO, mercaptopurina, metotrexat, metoxifluran, metildopa, naproxen, papaverina, parametadion, penicilamina, peniciline, fenotiazine, fenilbutazona, progestative, propoxifen, sulfonamide, sulfone, sulindac, tamoxifen, tolbutamida, perhexilin, fenazopiridina, fenidiona, fenobarbital, fenilbutazona, fenitoin, plicamicin (mitramicin), probenecid, procainamida, propiltiouracil, pirazinamida, chinidina, rifampin, salicilati, sulfasalazina, sulfonamide, tamoxifen, tetracicline, trimetadiona, acid valproic, vitamina A, warfarina (rar).

False cresteri : complexe AST-Ig G sau AST-Ig A INTERFERENTE CHIMICE

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 25 din 43

F04-PG-17

Scaderi : tolazamida 55 mg/dl, n-acetilcisteina 180 mg/dl Cresteri : ser hemolizat. 5.1.2.3. DETERMINAREA UREEI Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• Probele de ser,plasmă sunt stabile 7 zile la 2 – 80 C, o lună la -200 C; • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana(tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : corticosteroizi, tetracicline, tiroxina (exces), medicamente nefrotoxice : Metale: antimoniu, arsenic, bismut, cadmiu, cupru, aur, fier, plumb, litiu, mercuriale, argint,

talium, uraniu. Analgezice: acetaminofen supradozat, aminopirina, antiinflamatoare nesteroidiene

(ibuprofen, indometacin, naproxen, fenoprofen), fenacetina, fenilbutazona, salicilati. Antimicrobiene: aminoglicozide (ca: amicacin, gentamicin, kanamicina, neomicina,

streptomicina, tobramicina), amfotericin B, capreomicin, cefalosporine, (cefaloridina, cefalotin), colistin, cotrimoxazol, foscarnet, peniciline (ex : ampicilina, meticilina, oxacilina), polimixina B, rifampin, sulfonamide, tetracicline, vancomicina.

Antineoplazice : cisplatin, ciclofosfamida, ifosfamida, metotrexat (doza mare), mitomicina, nitrosouree (ex : lomustin, semustin), plicamicin (nitramicin), streptozocin,.

Solventi organici : benzen, tetraclorura de carbon, etilenglicol, tetracloretilen. Scaderi : hormon de crestere INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) Cresteri : hemoliza, ioni amoniu Scaderi : citrat de sodiu, fluorura de sodiu (concentratie mare).

5.2. TESTE COLORIMETRICE, END UP: IRON, MAGNEZIU, CALCIU, ACID

URIC, PROTEINE TOTALE, BILIRUBINA DIRECTA, BILIRUBINA TOTALA, TRIGLICERIDE, COLESTEROL, HDL-COLESTEROL DIRECT, GLICEMIE

5.2.1. DETERMINAREA FIERULUI

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 26 din 43

F04-PG-17

Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

• La persoanele sanatoase, variatiile sunt decilabile in cursul zilei scad dupa masa si mai pronuntat seara.

• ConcentraŃii mari ale hemoglobinei pot conduce la valori fals crescute ale sideremiei ca urmare a contaminării probei cu fierul legat de hemoglobină;

• In cazurile pacienŃilor trataŃi cu deferoxamină, medicamentul are capacitatea de a lega ionii de fier care nu vor mai participa la reacŃii rezultând astfel concentraŃii fals scăzute de fier;

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • probele ( ser/plasmă ) sunt stabile 1 zi la 20 - 250 C, 3 săptămâni la 2 - 80 C, -200C mai mult de un an. • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului,

inainte de a fi lucrata. • La persoanele sanatoase, variatiile sunt decilabile in cursul zilei scad dupa masa si

mai pronuntat seara. • concentraŃii mari ale hemoglobinei pot conduce la valori fals crescute ale

sideremiei ca urmare a contaminării probei cu fierul legat de hemoglobină; • In cazurile pacienŃilor trataŃi cu deferoxamină, medicamentul are capacitatea de a

lega ionii de fier care nu vor mai participa la reacŃii rezultând astfel concentraŃii fals scăzute de fier;

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este -intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana(tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO : Valori crescute : cloramfenicol, cisplatin, estrogeni, etanol, fier dextran, plumb, metotrexat,

contraceptive orale. Valori scazute : alopurinol, steroizi anabolizanti, aspirina (doze mari), corticotropin,

cortizon, metformin. INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) : Valori scazute : desferal 250 mg/dl, cupramine (penicilinamina} 5.2.2. DETERMINAREA MAGNEZIULUI Prelevare proba : Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 27 din 43

F04-PG-17

Pregatire proba : � Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. � Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. � Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• intre 2 si 80C - ser, plasma, urina 7 zile • la – 200 - ser, plasma, urina 1 an • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului,

inainte de a fi lucrata. • în cazul urinii recoltate pe 24 ore se recomandă colectarea acesteia într-un

recipient nemetalic, fără adaugare de conservanŃi; Respingere proba : Se va respinge proba in caz ca :

1) sangele este -intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba a fost supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : aspirina (tratament prelungit), litiu, produse cu magneziu, medroxiprogesteron,

progesteron, triamteren, vitamina D (insuficienta renala cronica). Scaderi : albuterol (salbutamol), aldosteron, aminoglicozide, ammonium chloride,

amfotericin B, saruri de calciu, cisplatin, citrati (transfuzie de singe), ciclosporina, digoxin, diuretice (acid etacrinic, furosemid, diuretice tiazidice), etanol, glucagon, insulina (doze mari in coma diabetica), laxative (abuz cronic), contraceptive orale, pentamidina, fenitoin.

INTERFERENTE CHIMICE BS-300) : Scaderi : fosfor seric = 9 mg/dl Cresteri : calciu seric total = 20 mg/dl, hemoliza (se elibereaza magneziul intracelular). 5.2.3. DETERMINAREA CALCIULUI Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun, sange venos, in vacueta cu dop ROSU Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • probele de ser/plasmă sunt stabile: 7 zile la 20 - 250 C, 3 săptămâni la 2 -

80C sau 8 luni la – 200C, iar cele de urină 2 zile la 20 - 250 C, 4 zile la 2 - 80 C sau 3 saptamini la -200C ;

• se vor evita congelarile si decongelarile repetate.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 28 din 43

F04-PG-17

• proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului, inainte de a fi lucrata.

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca :

1) sangele este -intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : medicamente antiacide (alcaline), androgeni, saruri de calciu, calusteron, danazol,

dietilbestrol (crestere rapida in 24 ore la pacienti cu cancer de sin), dihidrotahisterol, administrare cronica de diuretice (clortalidon, acid etacrinic, furosemid, tiazide), ergocalciferol, isotretinoin, litiu, progesteron, PTH, tamoxifen, testolactona, vitamina D, vitamina A.

Scaderi : albuterol, alprostadil, aminoglicozide (ex : gentamicin), asparaginaza, barbiturice (la batrini), calcitonina, carbamazepin, carbenoxolona, carboplatin, corticosteroizi; diuretice (efect initial): acetazolamida, acid etacrinic, furosemid; ergocalciferol, estrogeni (in post-menopauza), fluoruri, gastrina, glucagon, glucoza, indapamid, insulina, izoniazida, laxative (exces), saruri de magneziu, meticilina, fenitoin, fosfati, plicamicin, solutii saline (efectul apare in caz de hipercalcemie), tetraciclina (in graviditate), suramin 300 µg/ml.

5.2.4. DETERMINAREA ACIDULUI URIC Pregatire pacient:

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• probele de ser/plasmă sunt stabile: 5 zile la 2 - 80C sau 6 luni la - 200 C; • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este - intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE IN VIVO :

Cresteri : blocanti betaadrenergici (atenolol, propranolol, nadolol, timolol), cisplatin, corticosteroizi (in leucemii acute), ciclosporine, diazoxid, didanosine, diuretice (ex : acetazolamida, clortalidon, acid etacrinic (oral), furosemid (oral), quinetazona, tiazide, triamteren), epinefrina, etanol, etambutol, filgrastim, fructoza, acid nicotinic (doze mari),

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 29 din 43

F04-PG-17

norepinefrina, pirazinamida, salicilati (doze mici), unele antineoplazice (fludarabina, hidroxiuree, idarubicin, mecloretamina), teofilina

INTERFERENTE CHIMICE (BS-300) : Scaderi : acid ascorbic (doze mari), acid gentisic (metabolit al salicilatului), hidralazina

(antihipertensiv) 5.2.5. DETERMINAREA PROTEINELOR TOTALE Pregatire pacient:

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• Probele de ser/plasmă sunt stabile: 5 zile la 2 - 80C sau 6 luni la - 200 C; • Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului, inainte de a fi lucrata. Respingere proba :

• Se va respinge proba in caz ca : 1) sangele este - intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) 3) proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE CHIMICE Cresteri: dextran, hemoliza INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : steroizi anabolizanti, androgeni, clofibrat, corticosteroizi, corticotropin,

epinefrina, insulina, progesteron, preparate tiroidiene. Scaderi : alopurinol, estrogeni, trimestrul III de graviditate, repaus prelungit la pat. False cresteri : aplicarea prelungita a garoului, stat in picioare citeva ore inainte de recoltare

sau chiar 1 ora ( se recomanda deci o recoltare dis de dimineata), staza venoasa datorata unei ocluzii vasculare, sau unui colaps vascular periferic.

False scaderi : recoltarea probei dintr-un punct aflat deasupra locului de perfuzare (hemodilutie locala), perfuzii masive

(hemodilutie). 5.2.6. DETERMIBAREA GLUCOZEI SERICE Pregatire pacient:

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 30 din 43

F04-PG-17

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in suspensie.

Conservare proba : • Probele de ser/plasmă sunt stabile: 4 ore la temperatura camerei; • separarea serului trebuie sa fie completa (centrifugare 10 minute la 2000t/min) NOTA : valoarea glicemiei scade cu aproximativ 7% la fiecare 1 ora de mentinere a probei

necentrifugate, la temperatura camerei. Serul se analizeaza in maxim 4 ore; daca acest lucru nu este posibil, serul se stocheaza la +2°C - +8o C sau la -18o C

INTERFERENTE CHIMICE (BS-300 ) : Scaderi : acid ascorbic, lipemie, hemoliza, proteine totale serice < 5 g/dl, fibrina restanta

(nu centrifugati proba inainte de coagularea completa a sangelui), acetaminofen, levodopa. Cresteri : proteine totale serice >10g/dl INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : ACTH, asparaginaza, agonisti beta adrenergici (ex. albuterol, isoproterenol,

terbutalina), cofeina, calcitonina (salmon), corticosteroizi, diazoxid, diuretice (acetazolamida, clortalidona, acid etacrinic, furosemid, tiazide, triamteren), dopamina, epinefrina, estrogeni, fructoza, glucagon, indometacin, carbonat de litiu, morfina, acid nicotinic (doze mari), octreotid (somatostatin), contraceptive orale, fenotiazine, fenitoin, rifampin, streptozotocin, teofilina, tiabendazol, D-tiroxina.

Scaderi: acetaminofen (doze toxice), blocanti beta adrenergici, steroizi anabolizanti (la diabetici), antihistaminice, aspirina (doze toxice), bezafibrat, captopril, ciproteron, disopiramid, etanol, fenfluramina (la diabetici), analogi ai guanetidinei, indometacin (efecte variabile), marijuana, inhibitori MAO, nifedipina (neconcludent), pentamidina (dupa cateva zile), pivampicilina, protionamida, spironolactona, trometamina.

5.2.7. DETERMINARE COLESTEROL TOTAL Pregatire pacient: Conditii optime pentru interpretarea corecta a rezultatelor: pacientul sa nu manance cu min..12 ore inainte de recoltare

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul in maxim 2 ore si se analizeaza cat se poate de repede. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba : • Probele de ser/plasmă sunt stabile: 4 ore la temperatura camerei; • 5-7 zile la +4o C • 3 luni la -20o C • separarea serului trebuie sa fie completa (centrifugare 10 minute la 2000t/min) INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : amiodarone, androgeni, catecholamine, acid chenodeoxicolic (chenodiol),

ciclosporine, disulfiram, diuretice (efect mic), ergocalciferol (doze mari), etretinat, corticosteroizi glucogenici, grasimi inalt saturate, dieta bogata in colesterol, izotretinoin, levodopa, miconazole.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 31 din 43

F04-PG-17

Scaderi: acid aminosalicilic, asparaginaza, carbutamida, colestiramina, clomifen, clonidina, colestipol, ciproteron acetat, doxazosin, estrogeni, fenfluramina, derivati ai acidului fibric (clofibrat, gemfibrozil) , inhibitori ai 3-hidroxi-3 metilglutaril-CoA reductazei (lovastatin, pravastatin, simvastatin), hidralazina, interferon, ketoconazole (doze mari), dieta saraca in colesterol si bogata in grasimi polinesaturate, niacina, neomicina, prazosin, probucol, tiroxina.

5.2.8. DETERMINARE TRIGLICERIDE Pregatire pacient: Conditii optime pentru interpretarea corecta a rezultatelor: pacientul sa nu manance cu min..12 ore inainte de recoltare

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul in maxim 2 ore si se analizeaza cat se poate de repede. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba : • Probele de ser/plasmă sunt stabile: 4 ore la temperatura camerei; • 5-7 zile la +4o C • 3 luni la -20o C • separarea serului trebuie sa fie completa (centrifugare 10 minute la 2000t/min) INTERFERENTE CHIMICE (BS-300 ) : Cresteri : glicerol liber (neesterificat) endogen crescut, ca de exemplu : in diabet zaharat,

ischemie cardiaca, administrare de medicamente antilipiemiante care elibereaza glicerol. INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : betablocante, catecholamine, colestiramina, corticosteroizi, ciclosporine, danazol,

diazepam, diuretice, estrogeni, etanol, etretinat, interferon, isotretinoin, retinol, aport caloric excesiv, dieta bogata in carbohidrati, miconazol IV.

Scaderi : acid ascorbic (doze mari), acid aminosalicilic, asparaginaza, acid chenodeoxicolic (chenodiol), doxazosin, derivati ai acidului fibric (clofibrat, gemfibrozil), heparina, niacin, acizi grasi omega-3 (ulei de peste), prazosin, terazosin, progestative.

5.2.9. DETERMINARE BILIRUBINA TOTALA, BILIRUBINA DIRECTA PREGATIRE PACIENT: a jeun SPECIMEN RECOLTAT: sange venos Cauze de respingere: - specimen hemolizat - specimen neprotejat de lumina RECIPIENT DE RECOLTA a) Vacutainer cu/fara gel activator (capac rosu). CANTITATE RECOLTATA: 5 ml (pana la semn) PRELUCRARE NECESARA DUPA RECOLTARE

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 32 din 43

F04-PG-17

Se separa serul imediat si se lucreaza in max. 4 ore; in perioada de asteptare, serul este protejat de lumina (expunerea la lumina, produce scaderi semnificative dupa 2-3 ore). Daca nu se poate lucra in 4 ore, serul separat se stocheaza la + 4�C sau - 20�C

STABILITATE PROBA Serul separat este stabil la intuneric: - 4 ore la temperatura camerei - 48 ore la +2°C - +80 C - 6 luni la -200 C INTERFERENTE CHIMICE (BS-300 ) : Cresteri: Acid aminosalicilic, hemoglobina, levodopa, lipemie, fenazopiridina, cefotiam,

Pansporin, cefuroxim (Kefurox, Zinacef), biliverdina. Scaderi: aminofenazona False scaderi: specimen care nu a fost pastrat la adapost de lumina. INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri: A) medicamente care produc colestaza: acid aminosalicilic, amitriptilina, steroizi

anabolizanti, androgeni, azotioprina, benzodiazepine, carbamazepin, carbazona, clorotiazida, clorpropamida, acid clavulanic, dapsona.

B) medicamente care produc : a) hemoliza la pacienti cu deficit G6PD: cloramfenicol, sulfonamide, aspirina, fenacetina,

saruri organice de arsen, chinidina, chinina, clorochina, primachina, pirimetamina, quinacrina, captopril, dapson, solapson, furazolidon, nitrofurantoin, nitrofurazon, dimercaprol, albastru de metilen, acid nalidixic, fenazopiridina, probenecid.

b) hemoliza imuna: melfalan, metotrexat, amfotericin B, cefaloridina, cefalotin, peniciline, sulfonamide, ibuprofen, acid mefenamic, fenacetina, carbamazepin, clorpromazina, chinidina, chinina, procainamida, carbutamid, clorpropamida, tolbutamida, acid p-aminosalicilic, insulina, izoniazid, levodopa, metildopa, rifampin, stibofen.

BILIRUBINA DIRECTA INTERFERENTE CHIMICE (BS-300 ) : Cresteri : amfotericin B, biliverdina, hemoglobina, levodopa, metotrexat, nitrofurantoin,

fenazopiridin, piroxicam, sulfasalazina (interferente spectrale - dezvolta culoare galbena). La expunerea la lumina, se formeaza fotobilirubina, care va fi masurata drept bilirubina conjugata (crestere de 1 mg/dl)

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : carbamazepin, izotretinoin, fenobarbital, fenitoin 5.3. DETERMINAREA ELECTROFOREZEI SERICE Pregatire pacient:

• Pacientul este asezat in scaunul special pentru recolta cu mana sprijinita pe suportul de brat.

Prelevare proba : • Se recolteaza a jeun ,sange venos, dupa dezinfectia locala a regiunii plicii

cotului,prin punctie, folosind ac steril de unica folosinta,infiletat in holder,iar la capatul protejat in cauciuc se ataseaza vacueta cu dop rosu.

• Se preleveaza 5ml sange

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 33 din 43

F04-PG-17

Pregatire proba : • Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului. • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. • Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va

indeparta • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina, hematii sau alte particule in

suspensie. Conservare proba :

• Probele de ser/plasmă sunt stabile: 7 zile la 2 - 80C , serul va fi depozitat imediat dupa obtinerea prin centrifugare;

Respingere proba : • Se va respinge proba in caz ca : 4) sangele este - intens hemolizat ; 5) prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata)

INTERFERENTE PENTRU ALBUMINE : INTERFERENTE IN VIVO : Scaderi : allopurinol, asparaginaza, azatioprin, clorpropamid, cisplatin, dapsone, dextran,

estrogeni, ibuprofen, izoniazida, nitrofurantoin, contraceptive orale, fenitoin, prednison (doze mari), sargramostim, acid valproic.

INTERFERENTE CHIMICE : Scaderi : (metoda Bromcresol green): clofibrat, fenilbutazona. Erori : hemoliza, ser chilos, precipitate. INTERFERENTE PENTRU alpha-1 GLOBULINE : INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : testosteron. INTERFERENTE PENTRU alpha-2 GLOBULINE : INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri :estrogeni, contraceptive orale, fenitoin Scaderi : asparaginaza. INTERFERENTE PENTRU beta GLOBULINE INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : estrogeni, contraceptive orale Scaderi : asparaginaza. INTERFERENTE PENTRU gama GLOBULINE NOTA : langa fractia gamaglobuline, poate sa apara un peak de fibrinogen : a) la cazurile tratate cu anticoagulante b) daca sangele a fost centrifugat, inainte de a coagula complet. c) in coagulopatii 6.RECOLTARE ESANTIOANE PENTRU DETERMINARI HORMONI 6.1.TSH-Hormon de stimulare tiroidiana Pregatire pacient:

• Pacientul este asezat in scaunul special pentru recolta cu mana sprijinita pe suportul de brat.

Prelevare proba

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 34 din 43

F04-PG-17

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, dupa dezinfectia locala a regiunii plicii cotului,prin punctie, folosind ac steril de unica folosinta,infiletat in holder,iar la capatul protejat in cauciuc se ataseaza vacueta cu dop rosu.

• Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba :

• Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false

• O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie

Conservare proba: • 8 ore la temp camerei ; • 48 ore la o temperatura de 2-8oC • dupa 7 zile de la prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o

temperatura de -20oC nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta. • se vor evita congelarile si decongelarile repetate(nu apar modificari ale rezultatelor

la 3 cicluri de congelare decongelare). • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului • proba se lucreaza in maxim 3 ore de la incarcarea ei in aparat

Respingere proba Se va respinge proba in caz ca: sangele este

1) intens hemolizat, 2) prezinta semne de contaminare bacteriana(tulbure,val la suprafata)

Nota : • valorile scazute de TSH sau TSH nedecelabil impun o dozare a Free-T4 pentru un

diagnostic de hipertiroidism. INTERFERENTE IN VIVO : Explorarile recente cu radioizotopi pot modifica rezultatele testului. Afectiunile debilitante pot ↓ nivelele TSH. Cresteri : acidul valproic, agentii antitiroidieni,amiodarona, benserazida, flunarizina, iosura

de potasiu, litiul, metoclopramidul, morfina, propanololul, tratament substituiv cu hormoni tiroidieni si derivati ai acestora, propiltiouracil, TRH (thyrotropin releasing hormone).

Scaderi: acidul acetilsalicilic,carbamazepina, corticosteroizii,dopamina, heparina, levodopa, nifedipina, piridoxina si T3 (triiodotironina).

6.2 Free T4 (Tiroxina libera) Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu. • Se preleveaza 5ml sange

Pregatire proba : • Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se

centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false • O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in

suspensie Conservare proba :

• 8 ore la temp camerei ; • 48 ore la o temperatura de 2-8oC

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 35 din 43

F04-PG-17

• dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta.

• Se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • Proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a tubului • Proba se lucra in maxim 3 ore de la incarcarea ei in aparat.

Respingere proba : Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) • proba supusa temperaturilor ridicate

Nota : • Rezultate fals crescute la pacientii cu tratament cu anticorpi monoclonali de

soarece(HAMA), nu se va face dozarea pe Axsym in acest caz. • Analiza nu se face la nou-nascut • Diagnosticul se va face in concordanta cu datele clinice si cu alta dozari ale

hormonilor tiroidieni. • Interferente :cu fenilbutazona,difenilhidantoin, salicilatii cu care exita competitie

pentru locusurile de legare a proteinelor si care scad nivelul de T4 • La copii si la nou-nascuti valorile sunt mai mari datorata scaderii cc.TBG in serul

nn. Principalul avantaj al masurarii FT4 (comparativ cu determinarea T4 total) consta in faptul ca fractiunea libera nu variaza cu fluctuatiile proteinemiei.

NOTA : la pacientii hipotiroidieni, dupa administrare de tiroxina, nivelul de tiroxina libera creste, atingind un maxim, la 1-6 ore de la ingestie; in consecinta, proba trebuie prelevata exact inainte de administrarea dozei urmatoare de tiroxina.

Daca pacientul se afla in tratament cu biotina >5 mg/zi, recoltarea de singe pentru determinarea FT4, prin electrochemiluminiscenta, se face la 8 ore dupa ultima administrare.

Daca pacientul se afla in tratament cu medicamente hipolipemiante care contin tiroxina, recoltarea de sange pentru determinare FT4, se va face la 4-6 saptamini dupa intreruperea acestuia.

INTERFERENTE IN VIVO : Explorarile recente cu radioizotopi pot modifica rezultatele testului. Cresteri : acid acetilsalicilic, , danazol, propanolol, heparina, administrarea exogena de

levotiroxina. Scaderi : anticonvulsivante (carbamazepin, fenitoin), metadona, rifampin, antiinflamatoare

(salicilati, fenilbutazona), copii nounascuti prematur. 7.RECOLTARE MARKERI INFECTIOSI 7.1. ANTIGEN HBs Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu. • Se preleveaza 5ml sange

Pregatire proba : • Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului • Probele care se centrifugheaza inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 36 din 43

F04-PG-17

• Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta

O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie. Conservare proba :

• 8 ore la temp camerei ; • 4 zile la o temperatura de 2-8oC • dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC

nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta. • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba : Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) • proba supusa temperaturilor ridicate

7.2. Ac Anti HBs Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu. • Se preleveaza 5ml sange

Pregatire proba : Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza

inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie. Conservare proba

• 8 ore la temp camerei ; • 4 zile la o temperatura de 2-8oC • dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC

nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) • proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE: Rezultate neconcludente in cazul tratamentului cu biorina in doze mari. . 7.3. Ac Anti HCV Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 37 din 43

F04-PG-17

• Se preleveaza 5ml sange Pregatire proba : Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza

inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie. Conservare proba

• -8 ore la temp camerei ; • 4 zile la o temperatura de 2-8oC • dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC

nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata) • proba supusa temperaturilor ridicate

INTERFERENTE: Rezultate fals negative pot fi intalnite la imunodeprimati, pacienti cu insuficienta renala. Rezultate fals pozitive pot aparea in boli autoimune, prezenta de factor reumatoid

7.4. Ac Anti HIV Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu. • Se preleveaza 5ml sange

Pregatire proba : Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza

inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. Daca proba prezinta dupa centrifugare un strat superior lipemic acesta se va indeparta O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie. Conservare proba

• 8 ore la temp camerei ; • 5 zile la o temperatura de 2-8oC • dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC

nedeterminat fara sa prezinte diferente de performanta • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata)

proba supusa temperaturilor ridicate

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 38 din 43

F04-PG-17

INTERFERENTE: Exista o “fereastra serologica” (6-12 saptamani de la contactul infectant), adica o perioada cand HIV se gaseste in sange si celelalte produse, dar anticorpii nu au aparut inca.

Atentie! Acest sange donat poate sa transmita HIV-ul. 8 RECOLTARE DETERMINARI MARKERI TUMORALI 8.1. PSA TOTAL Prelevare proba :

• Se recolteaza a jeun ,sange venos, in vacueta cu dop rosu. • Se preleveaza 5ml sange

Pregatire proba : Se separa serul prin centrifugare dupa formarea cheagului.Probele care se centrifugheaza

inainte pot avea fibrina care poate da rezultate false. O proba gata de lucru trebuie sa nu contina fibrina,hematii sau alte particule in suspensie. Conservare proba

• 3 ore la temp camerei ; • 24 ore la o temperatura de 2-8oC • dupa prelevare si separarea serului, proba se congeleaza la o temperatura de -20oC

5 luni de zile fara sa prezinte diferente de performanta • se vor evita congelarile si decongelarile repetate. • proba congelata se va omogeniza prin miscari blande de rasturnare a

tubului,inainte de a fi lucrata. Respingere proba Se va respinge proba in caz ca:

• sangele este intens hemolizat; • prezinta semne de contaminare bacteriana (tulbure,val la suprafata)

Precautii Testul se efectueaza inaintea efectuarii tuseului rectal sau la cateva ore dupa acesta ! INTERFERENTE Examinarile rectale pot ↑ usor nivelele PSA. Manipularea prostatei prin biopsie sau rezectie transuretrala cresc de asemenea nivelele ; se

recomanda efectuarea testului inaintea acestor proceduri sau dupa un interval de 6 saptamani. Infectiile de tract urinar sau prostatita pot determina nivelele PSA persistent crescute (de

pana la 5 ori tipm de circa 6 saptamani). Finasteridul poate ↑ concentratia serica a PSA. 9. RECOLTARE PENTRU DETERMINARI BIOCHIMICE DIN URINA EX URINA - SUMAR SI SEDIMENT PREGATIRE PACIENT : nu este necesara SPECIMEN RECOLTAT : prima urina de dimineata. Cauze de respingere: - specimen care nu a fost tinut la +2°C-+8°C, daca a depasit 2 ore de la recoltare. RECIPIENT RECOLTA : eprubeta sau pahar de plastic (unica folosinta) pentru urina. CANTITATE RECOLTATA : 10-100 ml PRELUCRARE NECESARA DUPA RECOLTARE

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 39 din 43

F04-PG-17

Daca proba nu se poate lucra in primele 2 ore de la recoltare, va fi tinuta la +2°C - +8°C; ea va fi lucrata in ziua respectiva.

STABILITATE PROBA - 2 ore la temperatura camerei pana la sfirsitul zilei, la +2°C -+8°C INTERFERENTE CHIMICE: Scaderi : urina alcalina (pH > 6,5) Cresteri : proteine urinare in concentratie de 100-750 mg/dl. PENTRU pH: INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : acetazolamida, aldosteron, amilorid, amfotericin B, carbenoxolona, epinefrina,

mafenid, niacinamida, fenacetina, citrat de potasiu, bicarbonat de sodiu, expunere indelungata a specimenului la temperatura camerei, regim vegetarian.

Scaderi : fosfat acid, clorura de amoniu, acid ascorbic, corticotropin, diazoxid, metenamina hipurat si mandelat, metionina.

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri false: Serenium, Azo Gantrisin, piridium, nitrofurantoin, riboflavina. PENTRU NITRITI INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : nitrit de sodiu (antidot in intoxicatia cu cianuri si agent folosit in industria

alimentara pentru preparate de carne) Fals negativ: diureza crescuta - urina nu stationeaza suficient in vezica urinara (pacientul

trebuie sa bea mai putina apa in seara care precede testul); vitamina C in doze mari, consum de suc de fructe (recoltarea de urina se va face la 10 ore dupa ultima ingestie); dieta fara vegetale; hranire exclusiv prin perfuzie; infometare.

Fals pozitiv: fenazopiridina, suprainfectarea specimenului tinut la temperatura camerei. PENTRU PROTEINE: Cresteri : nifedipin. False cresteri : in timpul sau dupa perfuzia cu polivinilpirolidona, fenazopiridina; resturi de

saruri cuaternare de amoniu (detergenti) sau clorhexidina (dezinfectante), amidoamine in recipientul de recoltare reutilizat (agenti de inmuiere).

False scaderi : albuminuria masiva diminua sensibilitatea determinarii; acid ascorbic (doze mari sau consum de suc de fructe) - se va repeta determinarea la 10 ore dupa ultima administrare; prezenta de corpi cetonici in urina.

PENTRU GLUCOZA: INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : carbamazepin, corticosteroizi, D-tiroxina, diuretice (ex: acetazolamida,

clortalidon, acid etacrinic, furosemid, tiazide), EDTA, carbonat de litiu, acid nicotinic, fenotiazine, plumb (intoxicatie la copii).

INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : perhidrol, hipoclorit, detergenti (utilizate pentru spalarea recipientelor de

recoltare). Scaderi : acid ascorbic (la un nivel de glucoza < 100 mg/dl), aspirina, levodopa, diuretice

mercuriale, tetracicline preparate cu acid ascorbic, acid 5 hidroxiindolacetic, dipirona. PENTRU CORPI CETONICI: a) pentru ACETO ACETAT INTERFERENTE CHIMICE:

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 40 din 43

F04-PG-17

Cresteri : acetil cisteina, captopril, cisteina, dimercaprol (BAL), 8 hidroxiquinolina (prezervant), levodopa, mesna (2 mercaptoetansulfonat de sodiu), D-penicilamina, fenazopiridina, fenolftaleina, fenilcetone.

INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : aspirina (intoxicatie), etanol, anestezie cu eter, inozitol, izopropanol, metformin,

metionina, acid nicotinic, fenformin, acid valproic. b) pentru ACETONA INTERFERENTE CHIMICE: Cresteri : captopril, levodopa, mesna (2 mercaptoetan sulfonat de sodiu), alti compusi cu

radical -SH; nivel crescut de fenilcetone, 8 hidroxiquinolina (prezervant) c) pentru ACID BETA HIDROXIBUTIRIC Reactii fals pozitive: mesna, acetilcisteina, cisteina, dimercaprol, captopril, D-penicilamina. PENTRU UROBILINOGEN: INTERFERENTE IN VIVO : Cresteri : administrare de bicarbonat de sodiu (urina alcalina) care creste clearance-ul

urobilinogenului. False cresteri : in porfirie acuta (porfobilinogenul da reactii fals pozitive), urina care nu este

proaspata. Observatie: exista o variatie diurna a urobilinogenului urinar, cu un maxim intre orele 14-16 Scaderi : - urina tinuta la temperatura camerei si la lumina. - antibiotice care suprima flora intestinala - medicamente care contin coloranti derivati azo. PENTRU BILIRUBINA False cresteri : - contaminarea urinii cu materii fecale Cresteri : clorpromazina, fenotiazine (doze mari), metaboliti ai fenazopiridinei (Pyridium),

etoxazen (Serenium), etodolac (Lodine), urobilina (concentratii mari), indican, metaboliti ai medicamentelor antiinflamatoare, acid mefenamic, acid flufenamic, salicilati (produc o culoare rosie-portocalie a urinii), metaboliti ai unor anestezice locale, in general orice medicamente care coloreaza urina in rosu sau care vireaza la rosu, in mediu acid.

NOTA : Limita de sensibilitate a strip-ului este 0.5 mg/100 ml; in anumite conditii, chiar

0.2-0.4 mg/100 ml pot da o citire pozitiva (falsa). False scaderi : expunere lunga a urinii la temperatura camerei si la lumina. Scaderi : acid ascorbic (doze mari), nitriti (infectii urinare). SEDIMENT URINA INTERFERENTE: PENTRU CELULE: INTERFERENTE IN VIVO : PENTRU CELULE EPITELIALE TUBULARE: Cresteri : acetaminofen, saruri de bismut, cofeina, calcitonina, cortizon, fenacetina,

salicilati, thalium, ulei de ricin. PENTRU CELULE EPITELIALE SCUAMOASE: Cresteri : contaminarea urinii cu fluide vaginale PENTRU ERITROCITE:

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 41 din 43

F04-PG-17

Cresteri : allopurinol, amfotericin, anticoagulante, aspirina, colchicina, ciclofosfamida, aur, indometacin, levodopa, metenamina, oxifenbutazona, peniciline, fenoli, fenilbutazona, substante radiologice de contrast, sulfonamide, turpentina.

PENTRU LEUCOCITE: Cresteri : allopurinol, ampicilina, aspirina, capreomicin, heroina, iopodat, saruri de fier,

kanamicina, levodopa, meticilina. PENTRU CILINDRI HIALINI : Cresteri : amfotericina, cefaloridina, acid etacrinic, furosemid. PENTRU CILINDRI GRANULARI: Cresteri : amfotericina, saruri de bismut, calcitonina, cefaloridina, indometacin,

kanamicina. PENTRU CRISTALE: Unele medicamente pot forma cristale in urina, mai ales, la valori extreme de pH; ex:

substante radiologice de contrast, ampicilina, sulfonamide, 6 mercaptopurina, primidona. Dieta poate determina aparitia unor anumite cristale in urina; de ex: - dieta foarte bogata in fructe: fosfat triplu. - dieta bogata in varza, asparagus, rabarbar: oxalat de calciu. Unele toxice pot determina aparitia de cristale in urina; de ex: etilenglicol, metoxifluran:

provoaca aparitia de oxalat de calciu in sedimentul urinar. 10. RECOLTARE ESANTIOANE PENTRU EXAMINARI BACTERIOLOGICE 10.1. Urocultura Pregatire pacient:

• Pacientul trebuie sa efectueze toaletarea zonei genitale si perineale prin spalare cu apa si sapun, fara stergere.

Prelevare proba: • Se recolteaza urina matinala (in care incarcatura microbiana este mai mare) sau la

cel putin 3 ore de la ultima mictiune. • Se recolteaza 20-30 ml urina din jetul mijlociu fara a se atinge marginea superioara

a flaconului. • Urina se colecteaza intr-un recipient steril, cu grija pentru a se evita contaminarea

secundara (nu se atinge interiorul capacului). • Flaconul se inchide si eticheteaza cu datele corespunzatoare de identificare

Pentru pacientii sondati recoltarea se face astfel: • Prin punctionarea sondei in locul special punctionarii dupa o dezinfectie

riguroasa: • Cel mai corect prin punctie subpubiana.

Pentru nou-nascuti recoltarea se face astfel: • Se va utiliza un dispozitiv specific care poate fi lasat 20-30 min. Daca in acest

interval nou-nascutul nu urinat dipozitivul va fi inlocuit cu unul nou. • La pacientii cu ureostomie, fara sonda se face o toaletare riguroasa a stomei dupa

care vom plasa la acest nivel un colector steril. Pregatire proba:

• Urina se insamanteaza la maxim doua ore de la recoltare, timp in care numarul de germeni nu variaza semnificativ.

Conservare proba:

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 42 din 43

F04-PG-17

• In cazuri exceptionale urina se pastreaza maxim 6 ore la o temperatura cuprinsa intre +2 si +8 grade Celsius.

Respingere proba : • se va respinge proba in caz ca nu este recoltata corespunzator exm. recipient steril.

Nota : • Analiza se efectueaza in scopul diagnosticarii unei bacteriurii semnificative si a

depistarii germenilor patogeni • Cresterea in culturi a mai mult de 100 000 de UFC/ml indica o bacteriurie

semnificativa, intre 10 000 si 100 000 UFC/ml – o bacteriurie posibila, iar mai putin de 1000 de UFC/ml – posibila contaminare.

• Nu se executa antibiograma pentru probele care sunt considerate contaminate sau avand sub 100 000 UFC/ml.

10.2. Coprocultura Pregatire pacient : pacientul trebuie sa efectueze toaletarea zonei genitale si perineale prin

spalare cu apa si sapun. Se semnaleaza daca este vorba de boala diareica acuta sau control periodic.

Prelevare proba: produsul care permite cele mai multe izolari este scaunul proaspat emis spontan.

La bolnavi in perioada de stare din scaunul spontan obtinut, cu sau fara administrare de purgativ se preleva cu ajutorul linguritei coprocultorului portiuni din scaunul cu mucus si eventual urme de sange, iar cand lipsesc se recolteaza boluri fecale din 2-3 locuri diferite. Prelevarea se face intr-un recipient de plastic, steril, cantitatea fiind de minim 5 grame (cam cat permite lingurita coprorecoltorului), iar daca scaunul este lichid recoltorul trebuie umplut in proportie de ½.

La bolnavii cronici purtatori, persoane nespitalizate, scaunul va fi provocat cu purgativ salin( doza pentru adult : amestec de sulfat de Na si Mg 15 grame dizolvate in 250 ml apa).

Pentru controlul purtatorilor de bacili typhi prelevarea se face timp de 3 zile consecutiv dupa administrarea unica de purgativ.

Pregatire proba: proba se insamanteaza imediat. Conservare proba: nu se conserva la frigider, si isi mentine stabilitatea timp de 2 ore la

temperatura camerei. . Daca insamantarea nu se poate face in 2 ore se foloseste mediul de transport , Cary Blair(in 10 ml de mediu lichid se suspenda 1-3 grame de scaun). Conservarea prin refrigerare este limitata pentru etiologii bacteriene la cel mult 24 de ore la 4 grade Celsius.

Respingere proba : se va respinge proba in caz ca nu este recoltata corespunzator exm. recipient steril.

Nota : analiza se efectueaza in scopul depistarii germenilor patogeni in proba de testat. 10.3. Cultura secretie vaginala Pregatire pacient :

• In ziua precedenta recoltarii pacienta nu are contact sexual, nu face irigatii vaginale si nu urmeaza nici un fel de tratatament.

Prelevare proba: • Se recolteaza cu tampon steril din fundul de sac vaginal.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 43 din 43

F04-PG-17

• In vulvo-vaginite vom sterge cu 2 tampoane sterile orificiul vaginal si fundul de sac vaginal posterior. Cand la inspectia mucoasei se observa leziuni (eroziuni, ulceratii, zone hemoragice ) prelevarea se face din zonele de afectare maxima.

• In bartolinite , se aspira cu seringa sau se recolteaza cu tamponul de la nivelul orificiului ductului. Cind glanda este sediul unui abces, se preleva o proba de puroi prin punctie.

• In cazul unei cervicite , se preleva doua tampoane.Se indeparteaza secretiile restante de la nivelul exocolului iar apoi se tamponul de vata este rotit de citeva ori in orificiu colului .Tamponul se retrage cu grija pentru a evita contaminarea cu flora vaginala.tamponul din endocolul uterin este prelevatul de electie pentru depistarea portajului de de gonococ si Chlamydia.

Pregatire proba: • tampoanele cu secretie vaginala, se insamanteaza imediat dupa recoltare.

Nota : • Culturile endocervicale sunt sterile, intrucat endocolul este lipsit de

germeni. • Microorganisme intotdeauna patogene: Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia

trachomatis, Trichomonas vaginalis , herpes virus . • Microorganisme comensale si eventual patogene: Streptococcus sp.,

Peptostreptococcus sp., Stafilococcus aureus, Clostridium , Bacteroides, Candida, Gardnerella vaginalis, Mycoplasma, Ureaplasma, Enterobacterii, papilomavirus.

• Microorganisme fara patogenitate : Lactobacillus sp., Corynebacterium, Neisseria sp (altele decat gonorrhoeae), Stafilococcus sp. (altii decat aureus).

Conservare proba: • proba este stabila 2 ore la temperatura camerei si nu se conserva intre +2 si +8

grade Celsius • daca insamantarea nu se poate face imediat se utilizeaza mediul de transport

Amies, Stuart sau mediul specific microrganismului de depistat (mediu pentru Mycoplasma, Ureaplasma,Chlamydia etc)

10.4. Cultura secretie uretrala Pregatire pacient :

• in ziua precedenta recoltarii pacientul nu are contact sexual si nu urmeaza nici un fel de tratatament.

Prelevare proba: • se recolteaza cu tampon ( se vor recolta doua tampoane ) steril din uretra distala, la

cel putin doua ore dupa mictiune. Pregatire proba:

• tampoanele cu secretie uretrala, se insamanteaza imediat dupa recoltare. Nota :

• Microoorganisme specifice florei uretrale: Stafilococ coagulazo-negativ, Streptococcus sp., Peptostreptococcus sp., Micobacterium sp., bacilli difteromorfi.

• Microorganisme patogene: Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia tarchomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma sp, specii de Pseudomonade, Enterobacteriacee, Staphylococcus saprophyticus

Respingere proba :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 44 din 43

F04-PG-17

• se va respinge proba in caz ca nu este recoltata corespunzator exm. contaminare, nerespectarea conditiilor necesare prelevarii.

Conservare proba: • proba este stabila 2 ore la temperatura camerei si nu se conserva intre +2 si +8

grade Celsius • daca insamantarea nu se poate face imediat se utilizeaza mediul de transport

Amies, Stuart sau mediul potrivit microrganismului de depistat (mediu pentru Mycoplasma, Chlamydia etc)

10.5. Cultura secretie nazala Pregatire pacient :

• pacientul nu efectueaza nici o toaletare a regiunii nazale si nu inlatura secretia nazala.

Prelevare proba: • pacientul se aseaza cu fata spre sursa de lumina, ceafa sprijinita, se introduce

tamponul steril print-o nara in lungul planseului nazal pana se atinge peretele posterior al nazo-faringelui.;dupa cateva secunde tamponul se roteste usor pentru a-l incarca cu exsudat si apoi se retrage.

Pregatire proba: • se insamanteaza imediat.

Nota : • Microorganisme specifice: stafilococi coagulazo- negativi, Streptococcus viridans • Microorganisme patogene: streptococ beta hemolitic din grupa A, Stafilococcus

aureus coagulazo-pozitiv. • Nu se efectueaza antibiograma pentru Streptococul beta hemolitic de grup A.

Conservare proba: • Proba nu se conserva intre +2 si +8 grade Celsius . • Daca insamantarea nu se poate face imediat, si se depasesc 2 ore de la recoltare

se foloseste mediul de conservare si transport Amies 10.6. Cultura exsudat faringian Pregatire pacient :

• pacientul nu se spala pe dinti, nu maninca, nu bea apa si inafara oricarui gargarism cu antiseptice sau la cel putin 2 ore dupa mancare

Prelevare proba: • se recolteaza dimineata dupa un post minim de 4 ore inainte de administrarea

oricarui tratament antibiotic local sau general. • Se recolteaza cu tampon steril la nivelul amigdalelor sau in absenta acestora

pilierii, valul palatin si peretele posterior al faringelui. Pacientul emite sunetul “aaaa” pentru a diminua reflexul de voma.

Particularitati: • In prezenta unei ulceratii sau exsudat se va recolta la nivelul acestora. • In cazul unei suspicicuni de difterie recoltarea se va face la periferia falselor

membrane. • Pentru Candida prelevarea se va face la nivelul limbii palatului si pe fata interna a

obrajilor.

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 45 din 43

F04-PG-17

Pregatire proba: • se insamanteaza imediat.

Nota : • Microoorganisme specifice: Streptococcus viridans, stafilococi coagulazo-negativi. • Microorganisme patogene: streptococ beta hemolitic din grupa A, Stafilococcus

aureus coagulazo-pozitiv. • Nu se efectueaza antibiograma pentru Streptococul beta hemolitic de grup A.

Conservare proba: • Proba nu se conserva intre +2 si +8 grade Celsius . • Daca insamantarea nu se poate face imediat se foloseste mediul de conservare si

transport Amies 10.7. Cultura secretie plaga, fistula, abces Pregatire pacient :

• tegumentul din jurul regiunii lezate se curata de tesutul necrozat si se dezinfecteaza .

Prelevare proba: • se recolteaza cu un tampon steril.

Pregatire proba: • tampoanele cu secretie, se insamanteaza imediat dupa recoltare.

Nota : • Microoorganisme specifice: stafilococi coagulazo-negativi - Stafilococcus

epidermidis, Corynebacterium • Microorganisme patogene: Stafilococcus aureus coagulazo-pozitiv, Escherichia

coli, Peudomonas ,Candida, Proteus, Klebsiella Conservare proba:

• proba nu se conserva intre +2 si +8 grade Celsius, stabilitatea fiind de cel mult o jumatate de ora.

10.8. Cultura sputa- secretii bronho-pulmonare Pregatire pacient:

• pacientul trebuie sa inteleaga diferenta dintre “a expectora” si “a scuipa”. • Pacientul trebuie sa efectueze periajul dintilor, clatirea energica a gurii si gargara

cu apa. Prelevare proba:

• pacientul va expectora dimineata, la trezire, dupa efectuarea toaletei cavitatii bucale, in urma unui efort de tuse .

• Prelevarea se va efectua in absenta oricarui tratament antibiotic. • S e preleveaza in recipient steril. • In infectiile acute se recolteaza o proba mucopurulenta cu volum de1-2 ml.

Pregatire proba: • proba se insamanteaza in cel mult o ora de la recoltare. • Probele de sputa se decontamineaza prin 3 spalari succesive cu solutie

salina izotona Respingere proba :

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 46 din 43

F04-PG-17

• Vor fi respinse acele prelevate al caror examen microscopic va evidentia contaminare salivara ( prezenta celulelor epiteliale de origine bucala, absenta macrofagelor alveolare si / sau de celule bronsice)

• Se va analiza din punct de vedere cantitativ si calitativ flora bacteriana. Conservare proba:

• proba nu se conserva • nu se utilizeaza nici un mediu de transport, proba va trebui adusa in cel mai scurt

timp la laborator • nu se lucreaza probe sumate din 24 de ore, pentru a nu avea rezultate fals pozitive.

10.9. Cultura secretie auriculara Pregatire pacient :

• se curata tegumentul periauricular. Prelevare proba : -

• in cazul otitei cronice se va recolta cu ajutorul a doua tampoane sterile .unul va servi examenului direct iar cel de-al doilea pt cultura.

• in cazul otitei externe: se vor elimina crustele prezente in conductul auditiv extern cu ajutorul unui prim tampon umidificat , apoi se vor recolta doua tampoane sterile, unul va fi folosit pentru examenul direct iar cel de-al doilea petru insamintarea pe medii de cultura.

Pregatire proba: • se insamanteaza imediat.

Conservare proba: • daca proba nu va putea fi insamintata imediat, se va folosi mediu de transport

Amies. 10.10. Cultura secretie conjunctivala Pregatire pacient :

• pacientul se va prezenta la recoltare fara urme de machiaj, si fara a-si fi efectuat toaleta faciala.

Prelevare proba: • prelevarea se face fie pentru un examen preoperator,in acest caz recoltarea se va

face imediat inaintea interventiei chirugicale, sau pt diagnosticul unei conjunctivite. In acest caz prelevarea se va face inaintea oricarei toalete faciale, la nivelul unghiului intern al ochiului, cu ajutorul unui tampon steril.

Mai rar prelevatul va fi cerut in cazul : • unei blefarite : vom recolta crusta palpebrala si una sau doua gene. • unui orgelet : care va fi escchis cu ajutorul nui vaccinostyl steril apoi se va

recolta cu ajutorul unui tampon. • unei dacriocistite : in acest caz se va recolta puroi la nivelul punctelor lacrimale,

dupa exercitarea unei presiuni asupra sacului lacrimal. Pregatire proba:

• tampoanele cu prelevate conjunctivale, se insamanteaza imediat dupa recoltare. Nota : Respingere proba : Conservare proba:

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 47 din 43

F04-PG-17

• proba nu se pastreaza mai mult de doua ore la temperatura camerei. 10.11. Culturi din lichide patologice Pregatire pacient :

• Dezinfectia tegumentului trebuie sa se faca succesiv cu alcool 70% si apoi un produs iodat; pentru obtinerea efectului antiseptic maximal este de dorit un contact antiseptic – tegument de 1-2 minute.

• Dupa punctionare produsul iodat, potential iritant, este sters cu alcool 70% Prelevare proba:

• Se recolteaza prin punctie si aspiratie cu ac si seringa sterile lichidul patologic ( pleural, pericardic, sinovial, articular etc.) in eprubeta sterila

Pregatire proba: • Se insamanteaza imediat ( in cel mult 30 de minute de la recoltare)

Conservare proba: • Proba nu se conserva intre 2-8 grade Celsius

11. EXAMEN COPROPARAZITOLOGIC PREGATIRE PACIENT Pacientul : - nu va face examen radiologic gastrointestinal baritat inainte de recoltare - nu va lua laxative, inainte de recoltare - in saptamina premergatoare recoltarii, nu va lua anumite medicamente : bismut,

Metamucil, uleiuri minerale, tetraciclina, antiamoebiene, antidiareice, antiacide. Se recomanda 3 examene succesive, la interval de 7 zile. SPECIMEN RECOLTAT - fecale proaspete Se transporta la laborator in maxim 1 ora. Cauze de respingere : - specimen obtinut cu uleiuri minerale, bismut, compusi de magneziu - specimen care nu a fost adus la laborator in maxim 1 ora - recipient murdar pe exterior - specimen contaminat cu urina RECIPIENT DE RECOLTA Recipient de unica folosinta pentru fecale, bine inchis cu capac. CANTITATE RECOLTATA - cate o cantitate de marimea unei alune, recoltata din 3 portiuni ale bolului fecal. PRELUCRARE DUPA RECOLTARE se examineaza in maxim 1 ora STABILITATE PROBA maxim 1 ora la temperatura camerei NOTA : nu se pastreaza la +2°C-+8°C INTERFERENTE - un singur examen negativ nu exclude posibilitatea infestarii parazitare

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 48 din 43

F04-PG-17

- examenul pentru Giardia poate fi negativ in stadiile precoce ale infestarii, in infestari cronice, la pacienti care elimina ciclic parazitul

- rezultate fals negative pot sa apara daca in saptamina care precede testul, s-a administrat : bariu, bismut, Metamucil, uleiuri minerale, tetraciclina, medicamente antiamoebiene, antidiareice, antiacide.

In toate aceste cazuri se recomanda determinarea de antigen Giardia in fecale Capitolul IV. RESPONSABILITĂłI 4.1 Directorul de laborator - Instruieşte personalul laboratorului privind prelevarea, recepŃia, depozitarea, manipularea

corectă si eliminarea probelor pentru analiză; - Răspunde pentru asigurarea condiŃiilor de recepŃie, depozitare, circulaŃie, eliminare a

probelor şi de respectarea circuitelor probelor si infectelor; - Răspunde pentru respectarea normelor de protecŃie a mediului şi a personalului din

laborator; - Verifică calitatea execuŃiei analizelor; - Aprobă şi contrasemnează buletinele de analiză; - Păstrează înregistrările privind asigurarea calităŃii rezultatelor; - Execută analize care solicită o pregatire si o experienŃă deosebită. 4.2. Responsabilii de analize - Preiau probele de analiză de la punctul de recepŃie; - Gestionează probele de analizat; - Răspund pentru respectarea circuitului de lucru; - Execută şi înregistrează analizele în caietul de lucru conform procedurii specifice; - Întocmeşte buletinul de analiză; - Efectuează analiza conform procedurii specifice de analiză şi raspund de exactitatea şi

promptitudinea efectuării lor; - Înregistrează rezultatele măsurarilor în caietele de lucru şi în registrul de evidenŃă a

analizelor; - Înregistrează parametrii condiŃiilor de mediu monitorizaŃi; - Răspund de buna funcŃionare a echipamentelor de măsurare/încercare; - Efectuează activităŃi de întreŃinere curentă a echipamentelor de măsurare/încercare cu

care lucrează; - Supraveghează eliminarea infectelor conform circuitelor stabilite, decontaminare, spălare,

sterilizarea sticlariei si ustensilelor de lucru; - Informează şeful de laborator de orice abatere constatată în legatura cu probele; - Depozitează probele care nu sunt luate în lucru conform condiŃiilor prescrise în procedura

specifică de încercare. 4.3. Personalul de la punctul de recepŃie - Preia probele pentru analize; - Verifică concordanŃa dintre datele trecute in documentul de prelevare si etichetele care

însotesc probele; - Verifică ambalarea şi modul de prezentare a probei; - Verifică dacă proba corespunde cantitativ/calitativ;

SPITALUL MILITAR DE

URGENTA SIBIU

„Dr. Alexandru Augustin

LABORATORUL DE ANALIZE

MEDICALE

MANUAL DE RECOLTARE

ESANTIOANE PRIMARE

F04-PG-17

Editie 03

Revizie 00

Data 15.05.2018

Pagina 49 din 43

F04-PG-17

- Admite sau respinge proba; - Înregistrează probele în registrul de recepŃie probe-eliberare buletine rezultate; - Identifică prin etichetare sau inscripŃionare toate probele recepŃionate pentru încercări; - Păstrează probele in condiŃiile specificate pâna în momentul predării; - Predă probele responsabilului de analiză.