Grupele Sanguine Final

8/6/2019 Grupele Sanguine Final

1/8

Lucrri practice Fiziologie I

DETERMINAREA GRUPELOR SANGUINE

Eritrocitele umane au un numr mare de antigene (Ag) pe suprafaa lor. Ag sunt grupaten 30 de sisteme ce definesc grupele sanguine, dintre care cele mai importante sunt ABO i Rh (Tabelul I). Importana lor clinic e legat de capacitatea alloanticorpilor (anticorpimpotriva unor antigene pe care persoana respectiv nu le are) de a cauza distrucia hematiilortransfuzate sau de a traversa placenta i a declana hemoliza n circulaia fetal.

Tabelul I. Principalele sistemele antigenice ale grupelor sanguine.SISTEM FENOTIP FRECVEN

CAUCAZIENI (%)ABO 0 44

A 42B 11AB 4

Rh Dce 2DCcEe 13Dce 15Dce 19Dcce 35DcE 12DCE 2

1. ANTIGENELE ERITROCITARE

Antigenele eritrocitare (aglutinogene): sunt exprimate doar pe eritrocite (antigenele Rh),pe eritrocite i esuturi (antigenele ABO) sau pe alte celule sanguine i sunt carbohidrai saupeptide cu determinism genetic.

2. ANTICORPII ANTIERITROCITARI

Anticorpii ndrepta i mpotriva antigenelor eritrocitare (aglutinine): sunt anticorpi naturalii anticorpi postimunizare.

2.1. ANTICORPII NATURALIMajoritatea sunt de tip IgM. Se crede c se produc prin expunerea la substane din mediu

sau diet care au o structura asemntoare antigenelor eritrocitare. Anticorpii anti A, B iA+B sunt reactivi la 37oC. Majoritatea celorlali nu sunt activi la temperatura corpului,neavnd importan clinic.

2.2. ANTICORPII POSTIMUNIZAREMajoritatea sunt IgG i se formeaz prin expunerea la eritrocite strine, prin transfuzie sau

sarcin. Antigenul D are imunogenitate intens, dar i antigenele K i c determin reaciiimune. Capacitatea de a dezvolta o reacie imun variaz individual, de exemplu pacienii cuafeciuni autoimune au o predispoziie mai mare de a dezvolta anticorpi antieritrocitari (32%din anemiile hemolitice la cald), probabilitatea de a dezvolta anticorpi fiind foarte mic nhipogamaglobulinemie (leucemia limfatic cronic) i primele luni de via.

IgM sunt mai eficieni dect IgG n activarea complementului (o singur molecul de IgM poate activa complementul, pentru activarea complementului de IgG fiind necesare 2molecule legate n situri apropiate), determinnd hemoliza mai intens. IgG sunt reprezentai

1


2/8


de 4 fraciuni cu capacitate de a activa complementul diferit i pot traversa placenta, cuhemoliza eritrocitelor fetale.

3. SISTEMUL ABO

Sistemul ABO a fost descoperit de Landsteiner n 1901 care a constatat c eritrocitele unei

persoane amestecate cu plasma unei alte persoane pot aglutina.Hemaglutinarea reprezint adunarea eritrocitelor n grmezi vizibile cu ochiul liber pe

lam, prin formare de complexe Ag-Ac.Hemoliza reprezint reacia de distrugere a eritrocitelor i se produce extravascular ca i

consecin a formrii complexelor antigen-anticorp, sau intravascular prin formareacomplexelor antigen-anticorp si activarea complementului.

Sistemul ABO este un sistem format din dou antigene: A i B exprimate pe eritrocite,dar i pe membranele endoteliale i epiteliale i doi anticorpi: i , aflai n plasm. nsistemul ABO exist 4 grupe sanguine principale: O, A, B i AB. Se descriu mai multesubgrupe A i B, fra semnificaie clinic. Persoanele cu grupa A pot dobndi antigenul B,

asociat carcinomului de tract gastrointestinal, prin eliberarea unei enzime tumorale caremodific structura membranei eritrocitare. Transfuzia de snge grupa AB la aceti pacienidetermin hemoliza sever datorit sintetizrii anticorpilor anti B.

Fig. 1. Definirea grupelor sanguine.

Grupele sanguine ABO sunt definite de prezena antigenelor pe suprafaa eritrocitelor i a

anticorpilor n plasm (Fig. 1)

Sistemul ABO este cel mai important sistem de grupe sanguine datorit prezeneianticorpilor fixatori de complement la 37oC care pot cauza hemoliza intravascular ahematiilor transfuzate. Antigenele ABO se asociaz cu predispoziia pentru neoplasm gastric(grupa A), ulcer peptic (grupa 0).

4. SISTEMUL RHESUS (Rh)

Sistemul Rh este un sistem complex n care s-au definit 45 de antigene. Dintre acestea

antigenul RhD are imunogenitate nalt i este prezent la 85% din populaia de ras alb.Anticorpii anti-Rh nu se gsesc normal n plasm, apar la persoanele Rh(D)- dupcontactul cu antigenul D prin izoimunizare:

2


3/8


- transfuzii cu snge Rh(D)+ n 90% din cazuri se formeaz anticorpi anti D. Hemolizaeste sever dac se repet transfuzia cu snge Rh(D)+.- mame Rh(D)- cu sarcin cu ft Rh(D)+ au 1 din 6 anse de a foma anticorpi anti-D. Intimpul naterii hematiile ftului Rh(D)+ trec n circulaia matern i determin sinteza deanticorpi anti-Rh. Anticorpii anti Rh, imuni, sunt de tip IgG i pot strbate barieramaternoplacentar, determinnd hemoliza eritrocitelor fetale la urmtoarea sarcin cu ft

Rh(D)+

. La mamele Rh- este obligatorie monitorizarea titrului de anticorpi anti Rh iadministrarea de seruri speciale, dac este crescut (serurile conin anticorpi anti Rh idetermin scderea produciei de anticorpi materni).Suplimentar, nc 4 antigene C,c,D,d se asociaz cu formarea de anticorpi i reacii

posttransfuzionale, dar capacitatea lor de a determina un raspuns imun este mult mai redus.

5. METODE DE DETERMINARE A GRUPELOR SANGUINE NSISTEMUL ABO I Rh

5.1.METODA BETH-VINCENT-TZANK

PRINCIPIUSe pune n contact pe lam ser hemotest, care conine anticorpi ABO cunoscui, cu snge

de grup necunoscut. Apariia hemaglutinrii indic prezena Ag corespunztor i formareacomplexelor Ag-Ac.

MATERIALE NECESARE ser hemotest antiAB (conine Ac i ) ser hemotest antiB (conine Ac ) ser hemotest antiA (conine Ac ) lame de sticl sau plastic transparent, ac steril, vat, alcool.

1 eprubet, baghet de sticl dac determinarea se face din snge venos.

TEHNICASe pot face determinri din snge capilar, recoltat prin puncia pulpei degetului sau din

snge venos recoltat fr anticoagulant.Pe placa curat i uscat se pipeteaz n ordine o pictur ser hemotest anti-AB, o pictur

ser hemotest anti-B i o pictur ser hemotest anti-A.Se dezinfecteaz pulpa degetului cu alcool, se puncioneaz cu acul steril, sngele care

apare se recolteaz cu colul unei lame (cu un col se recolteaz snge i se omogenizeaz cuser anti-AB, cu un alt col se recolteaz i se omogenizeaz cu serul anti-B, al treilea cu seranti-A, iar al patrulea cu ser anti-Rh).

Raportul volumetric snge/ser test s fie 1/10 - 1/20, pentru a evita pseudoaglutinarea datde fibrinogen.

Lamele se nclin pentru a se amesteca serul test cu sngele, rezultatul se citete dupmaxim 3 minute pe o suprafa alb (faian).

Se observ apariia sau absena hemaglutinrii.

3


4/8


REZULTATE

Fig.2. Determinarea grupelor sangvine prin metodaBeth-Vincent-Tzank

5.2. METODA SIMONINSe bazeaz pe acelai principiu. Serul de cercetat (conine anticorpii) se pune n contact cu

hematii a cror antigen este cunoscut (hematii test O, A1, A2, B).

5.3. DETERMINAREA GRUPELOR SANGUINE N SISTEMUL Rh

PRINCIPIUSe pun n contact Ac monoclonali anti-Rh (impotriva antigenului D) sau policlonali

(anticorpi mpotriva mai multor antigene Rh) cu sngele de cercetat.

MATERIALE NECESARE ser anti-Rh (D); hematii martor Rh (D)+; hematii martor Rh (D)-; plac de sticl sau lame, pipete; material necesar pentru recoltarea sngelui prin nepare; termostat.

TEHNICASngele se obine prin puncionarea pulpei degetului sau prin puncie venoas fr

anticoagulant, caz in care, dup coagulare, cheagul se sparge i se obine o suspensie dehematii n serul propriu.

Pe placa de sticla se pun 3 picturi de ser antiRh in care se pipeteaz succesiv hematiile degrup necunoscut, hematii martor D+ i hematii martor D-.

Raportul volumetric ntre pictura de snge i pictura de ser test trebuie s fie 1/10 -1/20.

Placa se aeaz n cutie tapetat cu hrie de filtru umezit i se introduce la termostat(37oC). Rezultatul se citete dup 6 min.

REZULTATE dac hematiile sunt aglutinate, exist antigen D grupa Rh(D)+; dac hematiile n-au aglutinat, nu exist antigen D grupa Rh(D)-.Aprecierea rezultatelor se face comparativ cu lama martor.

4


5/8


FACTORI DE EROARE N DETERMINAREA GRUPELOR SANGUINE ser hemotest cu data expirat, infectat, prezena de aglutinine nespecifice larece (anticorpi inactivi la 37oC dar activi la temperatura camerei); eritrocite test hemolizate, cu antigene slabe-A2 (nu aglutineaz), infectate

(aglutinare n toate probele); snge infectat, anexine n serul de cercetat (proteine membranare care potdetermina hemoliza sau absena aglutinrii), aglutinine nespecifice, antigene slabe; temperatura i durata incubrii necorespunztoare (Rh fals negativ)

6. IMPORTANA DETERMINRII GRUPELOR SANGUINE NSISTEMUL ABO I Rh

6.1.COMPATIBILITATEA TRANSFUZIONALSngele donat se poate administra integral sau, pentru a obine beneficii maxime, se poate

fraciona iar produsele rezultate se administreaz mai multor pacieni.Principalele produse de snge sunt: concentrat eritrocitar; concentrat trombocitar ; crioprecipitat (concentrat de factori ai coagularii); plasma proaspt congelat (prin congelare se conserv factorii labili aicoagulrii V i VIII). Factorii coagulrii administrai n hemofilii pot fi sintetizai i prinrecombinare genetic, astfel evitndu-se complicaiile transfuziei de produse sanguine.

GRUPA SANGUIN ABPrezint pe suprafaa hematiilor ambele antigene A i B i serul nu conine anticorpi

mpotriva acestor antigene. Pacienii grupa AB pot primi snge de la orice grup (preferabilde la AB), dar pot dona doar la pacienii AB.

GRUPA SANGUIN APrezint antigenul A pe suprafaa eritrocitelor i serul conine IgM antiB. Pacienii grupa

A pot primi snge de la grupa A sau O (preferabil A).

GRUPA SANGUIN BAre antigenul B pe suprafaa eritrocitelor i serul conine IgM antiA. Pacienii grupa B pot

primi snge grupa B sau O (preferabil B).

GRUPA SANGUIN ONu are pe suprafaa eritrocitelor antigenele A i B dar serul conine IgM mpotriva

ambelor antigene. Pacienii grupa O pot primi snge doar de la grupa O, dar pot dona la toategrupele ABO.

SUBIEC II Rh NEGATIVPot primi doar snge Rh negativ compatibil ABO, iar subiecii Rh pozitiv pot primi snge

Rh pozitiv sau negativ (preferabil pozitiv, Rh negativ fiind prezent doar la 15% dinpopulaie).

Transfuzia se va realiza doar dup realizarea compatibilitii directe, n absena

anticorpilor nespecifici (cross-mach negativ, absena aglutinrii hematiilor donatorului cu plasma pacientului). Dac un pacient necesit snge de urgen i nu este timp pentrurealizarea compatibilitii transfuzionale se va administra snge grupa O Rh negativ.

5


6/8


Fig.3. Compatibilitatea in sistemul ABO pentrutransfuziile de snge.

6.2. COMPLICAII POSTTRANSFUZIONALE hemoliza acut apare n cazul transfuziei de hematii incompatibile ABO sau plasm cuo concentraie mare de anticorpi si este intravascular, secundar activrii complementului

prin anticorpi IgM. Clinic pacientul prezint febr, frison, hipotensiune, tahicardie,dispnee, hemoglobinurie i evoluia poate fi sever prin coagulare intravasculardiseminat si insuficien renal. hemoliza intrziat, dup 5-7 zile se datoreaz unui rspuns imun secundar reexpuneriila un antigen eritrocitar, dup o prim expunere prin sarcin sau transfuzie. Esteextravascular, far activarea complementului, prin anticorpi IgG anti Rh, Kidd, Duffysau Kell. Clinic pacientul prezint febr i scderea hemoglobinei, foarte rar cu evoluiesever. sngele perfuzat poate fi hemolizat prin contaminare bacterian, variaii brute detemperatur la rcire sau nclzire, administrare de medicamente pe acceai linie venoas,

deficit enzimatic eritrocitar. febra apare la pacieni anterior sensibilizai (prin sarcin sau transfuzii) la antigeneleucocitare sau trombocitare. edem pulmonar acut (sindromTRALI) prin eliberarea din leucocitele transfuzate areactanilor de faz acut si creterea permeabilitii capilare. urticarie i reacie anafilactic prin degranulare mastocitar infecie bacterian (Yersinia enterocolitica, Pseudomonas, Staphylococus aureus),viral (virusuri hepatitice, HIV), parazitar. purpura trombocitopenic, prin anticorpi nespecifici.Pentru prevenirea greelilor de tehnic i transmiterii unor infecii s-a legalizat urmtorul

protocol, obligatoriu nainte de orice transfuzie de snge:

- verificarea pentru fiecare flacon a grupelor ABO, Rh i Kell prin 2 metode n2 laboratoare diferite;- determinarea grupei ABO i Rh a pacientului;- verificarea bacteriologic i virusologic a sngelui;- efectuarea reaciei de compatibilitate direct prin metoda Jeanbreau prin

punerea n contact a hematiilor donatorului cu serul primitorului.

6.3. N BOALA HEMOLITIC A NOU-NSCUTULUI (vezi sistemul Rh).

6.4. N MEDICINA LEGAL pentru excluderea paternitii i a culpei cnd teste ADNnu sunt disponibile.

6.5. N TRANSPLANTUL DE ORGANE I MDUV HEMATOGEN compatibileHLA. Deoarece antigenele ABO sunt prezente i pe majoritatea epiteliilor i endoteliilor,

6


7/8


transplantul de organe solide incompatibil ABO poate evolua cu rejet acut de gref.Majoritatea transplantelor de celule STEM cu incompatibilitate major ABO vor determinahemoliz dac nu se separ hematiile.

IMPORTANT!!!Salvarea aduce victime ale unui accident rutier care necesit transfuzii de snge. Trebuie

s determini grupa sanguin a pacientului i s transfuzezi snge compatibil.Atenie! Dac transfuzezi snge incompatibil viaa pacientului este n pericol......

TESTE (CU UN SINGUR RSPUNS CORECT)

1. Eritrocitele grupului A prezint pe suprafaa lor:A. Aglutinogenul AB. Aglutinogenul BC. Antigenul D. Nici un antigen

2. Eritrocitele grupului B prezint pe suprafaa lor:A. Aglutinogenul AB. Aglutinogenul BC. Antigenele A i BD. Nici un antigen

3. Eritrocitele grupului O prezint pe suprafaa lor:A. Aglutinogenul AB. Aglutinogenul BC. Nici un antigenD. Anticorpii i

4. Plasma persoanelor de grup A conine:A. Aglutinina B. Aglutinina C. Nici un anticorpD. Antigenul A

5. Plasma persoanelor de grup B prezint:A. Aglutinina B. Aglutinina B

C. Aglutininele i D. Nici un anticorp

6. Indivizii de grup A, Rh (D)+prezint:A. Pe suprafaa eritrocitelor antigenul DB. Pe suprafaa eritrocitelor antigenul C. n plasm anticorpi anti Rh (D)D. n plasm anticorpul BE. n plasm anticorpul

7. Urmtoarele afirmaii sunt corecte:A. Antigenul D are imunogenitate crescutB. Determinarea Ac anti Rh este obligatorie la femeile nsrcinate Rh+C. Ac antiRh pot determina hemoliza dac se transfuzeaz snge Rh-

7


8/8


D. Nu se administreaz niciodat snge Rh- la un pacient Rh+

8. Urmtoarea afirmaie referitoare la grupele sanguine nu e corect:A. Este obligatorie determinarea prin 2 metodeB. Metoda Simonin se bazeaz pe aglutinarea plasmei pacientului cu hematii de grup cunoscutC. Pentru determinarea Rh este necesar incubarea la 37oC

D. Proba compatibilitii directe nu este obligatorie naintea transfuziei

9. Aglutininele postimunizare:A. Majoritatea sunt IgMB. Se pot sintetiza n sarcinC. Se sintetizeaz dup transfuzia de snge Rh-D. Apar la substane din mediu

10. Urmtoarele afirmaii referitoare la transfuzia de snge sunt corecte, cu excepia:A. Sngele grupa O Rh negativ se poate transfuza la orice pacientB. Pacienii grupa A Rh pozitiv pot primi snge A Rh negativ

C. Pacietii grupa AB Rh negativ pot primi snge grup B Rh negativD. Dac sngele este compatibil ABO si Rh nu apar efecte adverse

Rspunsuri: 1-A, 2-B, 3-C, 4-B, 5-A, 6-A, 7-A, 8-D, 9-B, 10-D

8

Grupele Sanguine Final

Documents

Transcript of Grupele Sanguine Final