Testul pentru determinarea anticorpilor antistreptolizina O

Reacţia ASLO

Test calitativ şi cantitativ pentru explorarea stării de imunitate antitoxică faţă de toxinele streptococului.

Testul este bazat pe reacţia de aglutinare. Testul permite stabilirea diagnosticului anginei streptococice sau de infecţii streptococice, ca şi a celui de reumatism articular acut (RAA).

Menţinerea titrului ASLO crescut chiar şi la câteva luni după puseul reumatismal permite stabilirea diagnosticului retrospectiv al bolii.

Principiul metodei

Reactivul folosit este o suspensie de particule latex de polistiren încărcate cu streptolizina O stabilizată.

Reactivul a fost astfel preparat încât, în prezenţa unui titru ASLO normal de 200 ui/ml sau mai crescut, să dea o aglutinare vizibilă a particulelor latex, fără diluarea serului.

Reactivi

1 flacon cu reactiv latex de 5 ml

1 flacon cu control pozitiv de 1 ml

1 flacon cu control negativ de 1 ml

1 plăcuţă pe care se efectuează reacţia

Material biologic

Serul de cercetat trebuie să fie clar şi proaspăt.

Plasma, serul lipemic ori contaminat poate determina erori în obţinerea rezultatelor. Dacă testul nu poate fi efectuat imediat, atunci serul se păstrează la 2-80C, maximum 72 ore. Pentru o perioadă mai îndelungată serul trebuie să fie păstrat congelat.

Modul de lucru

I. Testul ASLO calitativ

-Se aduc reactivii şi probele la temperatura camerei înaintea folosirii cu 30 min

-Se pun 2 picături (50 l) de control (+) în unul din cercurile plăcuţei de testare.

-Se pun 2 picături (50 l) de control (-) în al doilea cerc.

-Cu o pipetă se pun câte o picătură de ser (45 l) din fiecare probă în cercurile următoare.-Se agită uşor suspensia de reactiv latex şi se pune în fiecare cerc folosit câte o picătură de reactiv. Pentru omogenizare se foloseşte un beţişor pentru fiecare test în parte.

-Se roteşte plăcuţa 2 min şi se citeşte aglutinarea imediat lângă o sursă de lumină.

II. Testul ASLO cantitativ

-Se aduc reactivii şi probele la temperatura camerei, înainte de folosire cu 30 min.

-Se diluează probele 1/2; 1/4; 1/8 1/16 în soluţie salină izotonică. Se pot face diluţii şi mai mari dacă este necesar

-Se pune 1 picătură (45 l) din fiecare diluţie în succesiunea de cercuri ale plăcuţei de testare-Se agită reactivul latex şi se adaugă o picătură de reactiv în fiecare cerc de testare.

-Se omogenizează cele două picături folosind un beţişor pentru fiecare probă

-Se roteşte uşor placa 2 min. şi se citeşte rezultatul imediat în dreptul unei surse de lumină

Interpretarea testului

Reacţia ASLO negativă: obţinerea unei suspensii lăptoase, fără aglutinare, ca cea observată la controlul negativ

Reacţia ASLO pozitivă: obţinerea unei aglutinări observată în cercul probei asemănătoare cu cea observată la controlul pozitiv.

Reacţia ASLO indică starea de imunitate antitoxică faţă de streptococ.

Valori normale: între 0-200 ui

Valori crescute:

I. > 200 uiLa pacienţii care au avut în ultimele trei luni o angină streptococică sau alte infecţii

streptococice

II. > 300 ui

În infecţii streptococice: glomerulonefrită acută streptococică, scarlatină, purpură reumatoidă

III. 600-2500 ui

În reumatismul articular acut, reacţia ASLO ajută în stabilirea diagnosticului retrospectiv al bolii, deoarece titrul anticorpilor antistreptolizină O se menţine crescut timp de câteva luni după puseul reumatismal acut.

Titrul ASLO creşte odată cu evoluţia puseului reumatismal. Reacţia ASLO este pozitivă în stenoză mitrală, amigdalită acută streptococică, endocardita streptococică lentă.

Observaţii

Reactivii conţin azidă de sodiu ce se poate combina cu Cu şi Pb, putând asfel deveni explozibili.

Controlul pozitiv şi negativ a fost preparat din ser uman care a fost testat folosind metoda licenţiată FDA şi s-a demonstrat că nu reacţionează cu anticorpii pentru AgHBs şi HCV.

Toate probele umane pot fi considerate potenţial infectate.

Reactivii şi controalele sunt stabile până la data expirării, dacă sunt păstrate la temperatura de 2-80C. Reactivii nu se păstrează la congelator.