Produse normal sterileSngeUrinProduse normal contaminateExudat nazo-faringianSputSecreie uretralSecreie vaginalMaterii fecaleSecreii purulente

Materiale necesare:AceSoluie dezinfectant: alcool iodat 2%, eterPense sterileTampoane sterile de tifonGarouFlacoane sau tuburi cu medii pentru hemoculturMasc sterilSpirtier

Marcajul recipientelor de recoltare:Yellow top tube (Blood Culture)Red top tube (Glass) No additiveBlue top tube (Coagulation)Gold top tube (SST Gel Sep)Red top tube (Plastic) With clot activatorGreen top tube (Heparin)Lavender top tube (EDTA)Pink top tube (Blood bank tube)Grey top tube (Glycolytic inhibitor)

*Recipiente folosite pentru colectarea sngelui pentru hemocultur

Momentul prelevrilor:Prelevrile trebuie fcute naintea tratamentului antimicrobian. Hemoculturile trebuie recoltate conform evoluiei predictive a curbei febrile sau/i n momentul cnd bolnavul semnaleaz apariia frisoanelor.Numrul i volumul prelevrilor:Trei prelevri intermitente n 24 ore cresc sensibilitatea izolrii aproape de 100%n bolile cu descrcare bacteriemic continu (ex. endocardite subacute) sunt suficiente dou prelevri n 24 orePentru adult sunt necesari 20-30 ml snge per prelevare. La nou-nscui. sugari i copii mici, concentraia realizat de bacterii n snge fiind semnificativ mai mare, sunt suficieni 1-3 ml snge per prelevare.

*Sepsis acutMeningiteOsteomieliteArtrite i pielonefritePneumonia bacterian acut3 recoltari la interval de 5 minute din 3vene diferiteFebre de origine necunoscutAbcese oculteFebre tifoide/ paratifoideBrucelozaFungemia3 recoltri la interval de 15-20 Minute. Daca hemocultura e negativa dup primele 24h, recoltarea se repet.

Numrul de prelevri de snge pentru hemocultur n diferite afeciuni

Zone de puncie. Electiv: venele de la plic cotului sau, la nou-nscui i sugari, venele jugulare. Alternativ: venele antebraului inferior sau dorsale ale minii Puncia arterial n endocarditele cu focar septic pe valvulele mitrale sau aortice

Factori ce contribuie la alegerea zonei de puncie: Scarring - Avoid areas with extensive scarring.Bruising - Specimens collected from a hematoma area may cause erroneous results.IV Therapy - Do not collect specimen from a site above an IV site. Preferably, use opposite arm.Mastectomy - Specimens should not be taken from the side on which a mastectomy was performed.Cannulas, Fistulas, or Vascular Grafts - Use arm only after consultation with the physician.Feet - Feet should not be used unless approved by a physician. Consult with the nurse manager/supervisor before drawing a patient with a foot order.Blood cultures are not to be drawn from indwelling intravenous or intraarterial catheter unless specifically ordered by a physician.Blood cultures are not to be drawn by heelstick.

Zone pentru recoltarea sngelui n vederea efecturii hemoculturiiProcedura de recoltare a sngelui pentru hemoculturRecoltarea cu trusa dehemocultur

Antisepsia trebuie s fie riguroas.Dup localizarea venei, tegumentul se decontamineaz cu alcool 70%, cu micri circulare, apoi cu tinctur de iod.Tinctura de iod trebuie agitata 1 minut nainte de folosire.Tinctura de iod de pe piele se terge cu alcool 70%.Daca vena trebuie re-localizat, se repet procedura de dezinfecie.

Procedura de prelevare i transport

Recoltarea se realizeaz la adpost de cureni de aer.Persoana care recolteaz va purta masc dac nsmnarea impune scoaterea dopului flacoanelor cu mediu de cultur.Pacientul se aaz n decubitus dorsal.Persoana care recolteaz i va decontamina minile prin splare ngrijit cu ap i spun, urmat de uscare cu prosop curat.Se aplic garoul la cea 10 cm proximal de zona punciei i se strnge pentru a aprecia, prin palpare, dimensiunea i elasticitatea venei de puncionat.La nevoie, venele sunt evideniate mai bine dac pacientul strnge i relaxeaz de cteva ori pumnul.

Se antiseptizeaz degetele cu alcool iodat 2%.Se decontamineaz larg, concentric, zona de puncie, nti prin splare cu ap i spun lichid, apoi prin badijonare cu alcool iodat 2%. Dup cca 1 minut se badijoneaz zona, tot concentric, cu un tampon nmuiat n eter, pentru a ndeprta iodul i a lsa tegumentul ct mai uscat. Se antiseptizeaz membrana de cauciuc a flacoanelor cu mediu de cultur, eventual contaminat dup scoaterea capacului protector sau capionului de celofan ori hrtie.Se fixeaz tegumentul deasupra punctului de puncie prin tensionare pe bra cu degetele minii libere i, cu seringa poziionat n axul venei, n unghi de cea 30 cu tegumentul i acul cu bizoul n sus, se puncioneaz pielea i vena subiacent printr-o micare moderat de brusc. Uzual se resimte o cedare uoar la ptrunderea acului n ven.Se exercit o uoar presiune negativ prin retragerea pistonului. Sngele trebuie s ptrund liber n sering sau n tubul setului de transfer. Cnd scurgerea este neregulat, se rotete uor. Se d drumul la garou pentru a preveni formarea unui hematom.Dup ce s-a recoltat volumul necesar de snge, se retrage acul din ven i se preseaz imediat punctul de puncie cu tampon steril. i se continu compresia pn la hemostaza complet.Se repartizeaz imediat sngele recoltat n 2-3 flacoane cu mediu de cultur (pentru incubare aerob i anaerob).Se recomand folosirea unui set de transfer, deoarece permite nsmnarea direct n flaconul cu mediul de cultur. Se agit blnd flaconul pentru omogenizarea sngelui n masa mediului.Se va asigura transportul flacoanelor cu snge recoltat la laborator n cel mai scurt timp.Cnd hemocultura nu poate fi fcut la patul bolnavului, se folosete pentru prelevarea probei un tub cu 1 ml soluie 0,25-0,5% liquoid" ca anticoagulant i se expediaz imediat proba la laborator pentru nsmnare.

*Procedura de descarcare a sngelui din sering n flaconul pentru hemocultur

*Metoda automatizat de monitorizare a hemoculturilor

Din sngele recoltat de pe cateter se realizeaza o cultur semi-cantitativ (Tcnica de Maki 1977).nainte de recoltare se taie aseptic ultimii 5 cm din cateterObinerea a mai mult de 15 UFC (Uniti Formatoare de colonii) atest infeciaPentru cultur semi-cantitiva se recolteaz snge de pe cateterele:Cateter centralCateter venos profundCateter perifericCateter arterialCateter ombilicalCateter de nutriie parenteralCateter de inim dreapta (Swan-Ganz)

*

*

*CATETER VENOS CENTRAL

*

Recomandri:Probele biologice se obin prin puncie-aspiraie, chiuretaj sau biopsie. Recipientele folosite sunt din plastic, sterile, cu capac etan.n lipsa containerelor speciale, puroiul recoltat prin puncie cu seringa este transportat la laborator prin procedeul sering anaerob (aspirarea produsului n sering, eliminarea bulelor de aer i obturarea acului cu un dop de cauciuc), care asigur supravieuirea anaerobilor cel puin 30 de minute.Izolarea bacteriilor anaerobe de pe tampoanele uzuale este imposibil. Cu precauii speciale (e.g., utilizarea pentru transport a unui mediu stabilizator non-nutritiv, Stuart, Amies .a., a containerelor anaerobe), tampoanele pot fi utilizate numai pentru prelevarea puroiului din colecii foarte mici.Cnd este necesar, irigarea leziunilor se face cu soluii saline non-inhibitorii, cum este soluia Ringer lactozat.Leziunile cronice sunt srace n bacterii, de aceea se impun prelevate probe cu volum mai mare dect din leziunile acute.n laborator, odat examenele preliminare i nsmnrile fcute, restul probei, corect etichetat i nchis ermetic, este refrigerat pentru eventualitatea necesitii unor examene de laborator suplimentare.

Prelevarea din arsuri i plgi : O arie fr escar este splat cu soluie salin izoton steril pentru ndeprtarea exsudatului stagnant sau a eventualilor ageni topici antimicrobieni. Prelevarea se face cu perforatorul dermic de 4 mm. Prelevrile intraoperatorii se fac, dup debridarea i excizia esutului devitalizat. din esut viabil de la baza plgii.Prelevarea cantitativ cu tamponul. Se alege o arie a plgii lipsit de esut necrotic care se pregtete ca mai sus. Se umecteaz un tampon din vat hidrofil cu soluie Ringer lactozat, se nvrte vrful tamponului, timp de 5 secunde, pe o arie de 1 cm2 a plgii, suficient de ferm pentru a determina o uoar sngerare din esutul subiacent. Aceasta d garania prelevrii din esut viabil. Se imerseaz tamponul n 1 ml bulion tioglicolat.Proba se expediaz la laborator n tub nchis ermetic pentru examinare imediat.

Prelevarea din colecii purulente: Din leziuni accesibile punciei (abcese superficiale, colecii din cavitile seroase) puroiul trebuie aspirat cu un ac suficient de gros (pentru a evita puncia oarb n cazul puroiului vscos) adaptat la sering etan.n cazul interveniilor chirurgicale, trebuie recoltate fragmente din peretele abcesului (membrana piogen).Prelevarea din fistule : Se indic splarea i antiseptizarea ngrijit a tegumentului urmat de chiuretarea ct mai profund a traiectului fistulos cu expedierea imediat la laborator a produsului obinut.

Indicaii: Diagnosticul faringitelor i anginelor streptococice; Confirmarea diagnosticului de difterie; Diagnosticul altor angine bacteriene, fungice sau virale; Depistarea portajului de S. pyogenes i de C. diphtheriae Necesar: tampoane de uz general, apstor de limb, surs de lumin, Masc de protecie.

Tampon pentru exudat faringianRecoltareaexudat ului faringianReprezentare schematic

Procedura: Exudatul faringian se prelev nainte sau dup 3-4 ore de la toaleta gurii ori ingestia de alimente, naintea administrrii de antibiotice.Se aaz pacientul pe scaun, cu faa spre sursa de lumin, gtul n uoar extensie dorsal. In condiii de iluminare adecvat, se deprim baza limbii cu apstorul steril i, n timp ce pacientul pronun vocala A, se terg cu tamponul ferm, dar nu brutal, amigdalele i peretele posterior al faringelui, viznd n special orice zon inflamat, ulcerat sau cu depozite purulente. Cnd exist, falsa membran trebuie uor desprins la periferie i tamponat mucoasa subiacent. Att la introducerea, ct i la scoaterea tamponului din faringe se evit atingerea de baza limbii sau de palatul moale. Se reintroduce tamponul n tubul protector etichetat.Pentru c prelevarea faringian declaneaz reflex de tuse, operatorul trebuie protejat cu masc de tifon.Transport i conservare: Intervalul de timp n care trebuie efectuat examinarea i modalitle de conservare a probei sunt funcie de microorganismele urmrite.

Transportul i prelucrarea probelor de exudat faringian: Tamponul faringian trebuie examinat n interval de maximum 3 ore dup prelevare. Dac acest interval nu poate fi respectat, se impune fie imersia i transportul tamponului n bulion de conservare-mbogire, fie transportul probei uscate pe dreptunghi din hrtie de filtru.Mediul recomandat de conservare-mbogire este bulionul Todd-Hevvitt cu azid de sodiu (1:16 000) i cristal violet (1:500 000). La primirea n laborator. nainte de epuizarea pentru izolare, se incubeaz tamponul n acest mediu timp de 3-5 ore la 37C.Transportul probei de exudat faringian pe dreptunghi din hrtie de filtru:Se impregneaz cu soluie 3% de ovalbumin sau serumalbuinin bovin dreptunghiuri de 2/4 cm din hrtie de filtru. Fiecare dreptunghi se aplic pe o foi de aluminiu 5/7 cm care se pliaz la 1/2 cu hrtia nuntru.Se mpacheteaz mai multe dreptunghiuri astfel condiionate n hrtie pergament.Se sterilizeaz 15 minute la 121C n autoclav cu manta de abur pentru a asigura uscarea perfect a hrtiei.Se depliaz cu pensa steril un dreptunghi i descarc tamponul, imediat dup recoltare, prin rotire pe toat faa intern a dreptunghiului.Se las cteva minute pentru uscare.Se pliaz i mpacheteaz dreptunghiul n foia de aluminiu.Se expediaz proba la laborator, introdus n plic protector din polietilen. Metoda permite izolarea streptococilor -hemolitici i dup o sptmn de la prelevare.

Exudatul nazo-faringian se prelev cu tamponul, cel mai uor per-nazal. Se utilizeaz tampon confecionat pe aplicator de srm crom-nichel de 20 cm lungime i 1 mm diametru. Una din extremiti este ndoit, nmuiat n colodiu i nfurat strns cu vat hidrofil cu fibra lung pentru a forma tamponul propiu-zis. Extremitatea liber este ndoit n bucl pentru a facilita manipularea. Se sterilizeaz la auto-clav n tub 16/160 mm.Se aaz pacientul pe scaun, cu faa spre sursa de lumin i ceafa sprijinit de perete pentru imobilizarea capului. Se introduce blnd tamponul printr-o nar, n lungul planeului nazal, pn atinge peretele posterior al nazo-faringelui. Se las tamponul pe loc cteva secunde, apoi se rotete-l uor pentru a-l ncrca cu exsudat i se retrage. Cantitatea de prelevat crete dac se retrage tamponul puin i se reinser n aceeai poziie: prima tamponare stimuleaz secreia de mucus nazo-faringian.La copilul mic, la care se urmresc germeni patogeni din cile respiratorii inferioare, este precaut a stimula mai nti un acces de tuse prin prelevarea unui tampon faringian. Exsudatul proiectat din cile respiratorii inferioare va fi reinut n nazo-faringe, de unde poate fi prelevat prin tampon nazo-faringian sau aspiraie nazo-faringian.Aspiratul nazo-faringian pe cale per-nazal este indicat la sugari i se realizeaz cu o sond Nelaton introdus printr-o nar i adaptat la o sering etan de 20 ml.Tamponul nazal. Se terge, pe rnd, vestibulul foselor nazale cu tamponul de uz general umectat cu soluie salin izoton steril.

Probe de calitate corespunztoare se obin la internarea n spital, de la pacieni cooperani, prin tuse spontan, profund i supravegheat. Pacientul trebuie s neleag diferena dintre a expectora" i a scuipa". Periajul simplu al dinilor, cltirea energic a gurii i gargara cu ser fiziologic sunt de dorit naintea prelevrii. Dac proba apare constituit n principal din saliv, trebuie imediat insistat pentru prelevarea unei noi probe corespunztoare calitativ. n infeciile acute o prob mucopurulent cu volum de 1-2 ml este suficient.La tuitorii cronici, pentru diagnosticul tuberculozei sau al infeciilor fungice bronho-pulmonare, cantitatea de sput examinat trebuie s fie mai mare: toat sputa de la expectoraia matinal sau cea expectorat n interval de 1-2 ore. Nu se examineaz ns niciodat probe sumate din 24 ore pentru c multiplicarea microorganismelor de contaminare falsific rezultatele.Stimularea expectoraiei prin inhalare de aerosoli calzi cu soluie salin 10% i glicerinat 15% ofer, de multe ori, probe citologic nesatisfactoare pentru diagnosticul infeciilor bronho-pulmonare acute, dar utile pentru diagnosticul tuberculozei.

Uzual, sputa se prelev ntr-un recipient steril de ctre pacient prin expectoraie n urma unui acces de tuse.Recipientele folosite trebuie s fie sterile, preferabil din plastic, volum de cca 100 ml, cu gura larg i capac ermetic. Recipientele vor fi etichetate i expediate imediat laboratorului pentru a fi examinate n interval de cel mult o or de la prelevare.Refrigerarea la 4 C previne multiplicarea contaminanilor, conserv unii patogeni, dar scade pn la anulare izolarea altora cum sunt Haemophilus influenzae sau Neisseria meningitidis.

Flacon pentru recoltarea sputeiPrelevarea sputei n plac Petri

Splarea sputei:Probele de sput mucopurulent este indicat s fie decontaminate prin splare n 3 bi succesive de soluie salin izoton. Splarea dezagreg probele fluide, care nici nu trebuie examinate n continuare fiind de calitate necorespunztoare.Se toarn peste prob, n recipientul de prelevare, o cantitate din fluidul de splare i se agit pentru separarea exsudatului bronhopulmonar de secreiile oro-faringiene.Se plaseaz pe fond negru dou cutii Petri cu diametrul de 8 cm i se repartizeaz n fiecare cea 20 ml fluid de splare.Se rstoarn proba presplat n capacul primei cutii.Se prelev cu ansa sau, mai uor, cu dou mici baghete din lemn poriuni purulente din prob i se agit 15-20 secunde n fiecare din urmtoarele dou bi de splare. Poriunile purulente din ultima baie de splare servesc pentru microscopie i cultivare.

Fluidifierea sputei:Fluidifierea permite omogenizarea probelor i este indispensabil pentru sputo-cultura cantitativ. ntr-un tub cu perle de sticl, se amestec un volum de sput, din ultima baie de splare, cu un volum din soluia proaspt 0,5% de N-acetil-L-cistein sterilizat prin autoclavare 20 minute la 121 C i se agit uor. Fluidifierea se produce n cteva minute. Se evit agitarea excesiv care, prin aerare, oxideaz acetil-cisteina i determin repolimerizarea mucinei.

Pentru examenul citobacteriologic se recomand prelevarea unei probe de urin din jetul mijlociu. Prelevarea se face n recipiente sterile (urocultoare).Se va urmri prevenirea contaminarea probei cu microorganisme vehiculate prin fire de pr, orice fel de particule din regiunea perineal, lenjerie, sau antrenate prin jetul de urin din uretra distal, labii, pliul balano-prepuial sau de pe mini.Momentul prelevrii: prima urin matinal sau dup cel puin 3 ore de la miciunea anterioar.Volumul necesar: aproximativ 20 ml pentru depistarea cantitativ a microorganismelor condiionat patogene; cca 50 ml pentru depistarea unor patogeni specifici (bacil Koch).Dup toaleta organelor genitale cu ap i spun bolnavul urineaz jetul mijlociu de urin n recipientul steril.Metode: aspiraie prin puncie suprapubian, prelevri prin cateter vezical.Pe recipient trebuie menionat numele pacientului, ora prelevrii, diagnosticul, analiza solicitat, eventuale tratamente antibiotice n curs Probele care nu pot fi examinate imediat se refrigereaz la 4 C timp de maxim 24h probele care nu pot fi puse n lucru.

Prelevarea se realizeaz din scaunul emis spontan (n containere de plastic) sau din rect folosind sonda Nelaton sau tampoane.Din scaunul emis spontan, se prelev cu linguria coprocultorului poriunile lichide, mucoase, sanguinolente, n volum de 3-5 cm3. Produsele se supun diagnosticului bacteriologic.Pentru examene virusologice produsul se prelev n volum de 5-10 cm3 materii fecale care se refrigereaz sau se pstreaz la +4 C pn n momentul examinrii.

Sonde NelatonCoprocultor

Prelevarea rectal se recomand n infeciile cu Salmonella i Shigella folosind sonda Nelaton nr. 14-16 sau tampoane adecvate (cu tij lung si tampon bine ataat care s nu permit retenia intrarectal).Tamponul se umecteaz n prealabil cu o soluie izoton, se penetreaz n sfincterul anal prin rotire lent, introducndu-se aproximativ 15 cm. n aceli mod se va proceda cu sonda Nelaton, la care se adapteaz o sering de 10 ml cu care se fac 1-2 aspiraii. Dup prelevare att sondele ct i tampoanele se introduc n tuburi sterile cu dop sau eprubete cu mediu de conservare lichid pentru eluare. Dup recoltare n minim 2 ore se nsmneaz pe medii de izolare. Dac nu proba nu se poate nsmna imediat, se poate conserva prin refrigerare, uscare sau conservare n medii speciale: Carry-Blair, Stuart, apa peptonata alcalin (vibrioni), tampon Tris cu adaos de Ca2+ (virusuri enterice).

Prelevarea secretiei uretrale trebuie efectuat dimineaa, nainte de miciune sau la cel puin 2 ore dup. nainte de recoltare se recomand toaleta local iar persoana care recolteaz s poarte mnui sterile. Prelevarea de la nivelul meatului urinar se poate realiza cu tamponul Dac scurgerea uretral nu este spontan se poate exprima blnd prin compresia uretrei ntre degetul mare i index. Pentru prelevarea secreiei din uretr se folosete tamponul, chiureta oftalmologic tocit sau ansa bacteriologic cu bucl (depistarea Chlamydia trachomatis sau Mycoplasma). Acestea se introduc blnd intrauretral 2 cm, se rotesc i se retrag. n suspiciunea infeciei cu Trichomonas vaginalis dup prelevare tamponul se imerseaz ntr-un tub cu 1 ml soluie salin izoton nclzit la 37 C pentru examen extemporaneu. Pentru izolarea gonococilor tamponul se va descrca imediat pe plac cu mediul de cultura prenclzit la 37 C sau se folosete mediul de transport Amies sau Stuart. Pentru C. trachomatis tamponul se descarc n 2 ml mediu SPG (zaharoz-fosfat-glutamat) sau mediul 2 SP (zaharoz-tampon fosfat i ser de viel). Pentru Mycoplasma tamponul se descarc n 2 ml bulion tripticaz soia Orice temporizare a examenului pentru C. trachomatis i Mycoplasma impune congelarea probelor la -70 C.

Secreia vaginal se recolteaz n cadrul unui cabinet specializat, prevzut cu mas ginecologic, folosind valvele. Se prelev 3 tampoane pentru diagnostic microbiologic, parazitologic i micologic. Tamponul 1 se folosete pentru diagnostic bacteriologic (frotiu, izolare pe medii de cultur). Tamponul 2 folosit pentru diagnostic parazitologic (Trichomonas vaginalis), se descarc n 0,5 ml soluie ser fiziologic steril nclzit la 37 C i se efectueaz preparate microscopice native i colorate. Tamponul 3 se folosete pentru diagnostic micologic (frotiu colorat albastru metilen, nsmnare pe mediul Sabouraud).Secreia endocervical se prelev de la nivelul colului uterin. nainte de prelevare se terge suprafaa exocolului cu 2-3 comprese sterile pentru ndeprtarea secreiilor stagnante. Din endocol se prelev pe o distan de 1-2 cm 3 tampoane care sunt rotite uor pentru a permite prelevarea produsului patologic i desprinderea celulelor de pe suprafaa mucoasei. Tamponul 1 se folosete pentru efectuarea unui frotiu colorat Gram care va fi examinat microscopic. Tamponul 2 va fi folosit pentru izolarea agentilor infecioi bacterieni. Tamponul 3 se va folosi pentru efectuarea unui frotiu colorat Giemsa (n vederea depistrii infectiei cu C. trachomatis) i pentru examene virusologice (reacia de IF, izolare pe culturi de celule, ELISA).

Recoltarea apei

Recoltarea alimentelor

Implementarea standardului HACCP in firmele de curatenie Module 1 - Hygiene and Microbiology*Alimentele sunt substante organice , sursa de energie, carbonati, nitrogen, fosfor, sulf, magneziu, potasiu, sodiu, calciu si alte elemente, cu alte cuvinte substante necesare pentru cresterea microbiana.

Sunt degradate rapid de catre microorganisme daca nu sunt luate masurile necesare.

Microorganismele pot fi prezente in alimente chiar de la inceput (Lactobacillus in lape), prin contaminarea cu fecale sau prin contaminare externa (mucegaiul Penicillium). Contaminarea poate ramane nedetectata pana la degradarea alimentului.

Fermentatia (degradarea anaeroba) cauzata de unele microorganisme determinate este uneori folosita la productia alimentelor, de ex. Saccharomyces in productia berii sau Lactobacillus pentru iaurturi.

Dat fiind ca exista o multitudine de microorganisme se dezvolta pe alimente unele sunt patogene pentru om.

Microorganismele patogene pot dauna direct organismului uman prin infectare sau indirect prin producerea de toxine cauzatore de imbolnavire

Implementarea standardului HACCP in firmele de curatenie Module 1 - Hygiene and Microbiology

*Ca un specific natural al alimentului, de ex. legumelePrin contaminarea la sacrificare, de ex. contaminarea prin excrementeContaminarea prin maini, matreata, riniteDe catre personalul fabriciiDe catre personalul de curatenieDatorita conditiilor improprii de mediuMicroorganismele sunt prezente in productia alimentelor

Mai multe microorganisme sun capabile sa se dezvolte pe produsele alimentare.Acestea actioneaza fie prin alterarea alimentelor, fie ca patogeni. Cele mai multe dintre ele sunt bacterii si fungi, dar si protozoarele si virusurile pot cauza alterarea alimentelor sau infectii.

Produse alimentareGrupOrganismeFructe si legumeBacterii

FungiErwinia, Pseudomonas, Corybacterium

Aspergillus, Botrytis, Geotrichum, Rhizopus, Penicillium, Cladosporium, Alternaria, Phytophthora, Produse din carne, pasari si fructe de mareBacterii

FungiAcinetobacter, Aeromonas, Pseudomonas, Micrococcus, Achromobacter, Flavobacterium, Proteus, Salmonella, Escherichia, Campylobacter, Listeria, Clodosporium, Mucor, Rhizopus, Penicillium, Geotrichum, Sporotrichum, Candida, Torula, RhodotorulaLapteBacteriiStreptococcus, Leuconostoc, Lactococcus, Lactobacillus, Pseudomonas, Proteus

DulciuriBacterii

FungiClostridium, Bacillus, Flavobacterium

Saccharomyces, Torula, Penicillium

*Produsele alimentare contaminate cauzeaza diverse boli din cauza microorganismelor sau a toxinelor. In SUA se rapoteaza un numar de 4,2 milioane de cazuri de imbolnavire datorata deteriorarii bacteriene a alimentelor.FP= alterarea alimentelor, FI= infectii asociate alimentatiei

BacteriiBoliCazuri anualeProduse alimentareBacillus cereusFP, FI27.000orezul sau alte produse alimentare care contin indulcitori, amidon ori lapte prafCampylobacter jejuniFP1.9 Milproduse din pasare sau lactateClostridium perfringensFP, FI248.000carnea gatita si reincalzita sau produse din carneEscherichia coli O157:H7FI63.000carne, indeosebi carnea tocataE. Coli patogen, alte tipuriFI110.000carne, indeosebi carnea tocataListeria monocytogenesFI2.500carne, lactateSalmonella spp.FI1.34 Milpasare, carne, lactate, ouaStaphylococcus aureusFP 185.000carne, desertStreptococcus spp.FI50.000lactate, carneYersinia enteroliticaFI87.000carne de porc, lapteAlte bacteriiFP, FI102.000Total bacterii4.177.500

Produse din carne i pete:

carne macr refrigerat sau congelat ; carne tocat i semipreparate din carne tocat; preparate din carne srate i afumate ; mezeluri (prospturi, salamuri semiafumate); salamuri crude, uscate; produse de carne gata preparate care se consum reci (piftii, aspicuri, pateuri); mncruri gtite calde; mncruri gtite congelate; semipreparate; gelatin alimentar.Cantitile necesare pentru analiza microbiologic a produselor din carne i pete

Recoltarea probelor din produse din carne i pete:

n mod obligatoriu, probele pentru examenul microbiologic vorfi recoltate separat de oricare alte probe. Probele din carnea proaspt vor consta din esut muscular, oase lungi, organe saupri de organe suspecte sau indemne. Probele din preparate in membran se recolteaz din mijlocul batonului,iar din preparate fr membran se recolteaz att din stratul superficial,ct i din cel profund. Probele trebuie transportate la laborator in maximum 6 ore de larecoltare i la temperatura la care a fost pstrat produsul. Probele trebuie introduse imediat n lucru, cu excepia produselor congelate care se vor pstra pentru decongelare la temperatura +4-5C timp de cca 12 h.Probele de carne sau produsele se cntresc in mod steril, n cantitateasolicitat, n raport cu specia microbian ce trebuie determinat. Probele se mojareaz n mojar cu nisip steril i se dilueaz cu ser fiziologic peptonat.

Recoltarea produselor lactate:

Examenul microbiologic se adreseaz mai ales laptelui pasteurizat sau sterilizat. Pentru laptele crud, examenul microbiologic se execut mai ales pentru cercetarea unor microorganisme patogene provenite de la animale bolnave, sau se determin ncrctura iniial a laptelui supus prelucrrii. Pentru produsele n ambalaje pn la 1 kg, proba va fi constituit din ambalajul original. Din ambalajele mai mari de 1 kg se recolteaz n mod aseptic n recipiente sterile cte o prob de 250-500 ml produs. Transportul la laborator trebuie fcut n minimum de timp, 1-2 ore, sau n condiii de refrigerare. Probele trebuiesc introduse n lucru imediat i dac nu este posibil se pstreaz la 2-4C i se vor introduce n lucru astfel : n maximum 4 ore pentru produse proaspete (lapte, iaurt, smntn, kefir, sana, brnz de vaci etc.) ; n maximum 24 ore pentru celelalte produse (brnzeturi, unt, lapte praf etc).

Prelucrarea probelor de produse lactate:

Laptele i derivatele se omogenizeaz prin agitare nainte de recoltare. Smntna, mai ales dac este ngroat, se fluidizeaz n baia de ap la 47C i se omogenizeaz. Diluiile se execut cu soluie citrat de sodiu 2% steril. ngheata se topete ntr-un recipient la temperatura de 47C i se omogenizeaz, sfrmnd eventualele glazuri sau adaosuri, diluiile efectundu-se cu ser fiziologic peptonat 1%. Brnzeturile se tritureaz n mojar steril, se omogenizeaz, fie cu soluie de citrat de sodiu 2%, fie cu fosfat de potasiu bibazic 2%, nclzite la 47C, diluiile efectundu-se cu acelai diluent. Produsele lactate sub form de pulbere (lapte praf, zar i zer praf), ca i cazeina alimentar, se reconstituie cu citrat de sodiu 2%, tampon fosfat, fosfat de potasiu bibazic 2%. Reconstituirea se face n vase sterile cu perle de sticl i diluantul adecvat, la temperatura de 47C n baia de ap. Din proba de unt se iau 10 g i se adaug 20 ml ser fiziologic peptonat 1%. Eprubeta se menine la baia de ap (47C) pn la topirea complet i prin rotirea ei se obine i omogenizarea amestecului. Se menine n continuare eprubeta la baie pn la separarea complet a grsimii de plasm. Analiza se execut asupra plasmei tiind c 2 ml lichid corespunde la 1 g unt. Diluiile se fac cu ser fiziologic peptonat 1%, steril.

Conservele:

Se examineaz aspectul exterior:Pentru cutii: deformarea capacelor sau a corpului cutiei ; prezena ruginii, gradul de rspindire i ptrundere a ruginii ; bombarea capacelor sau a corpului cutiei ; ermeticitate necorespunztoare (scurgerea de coninut, existena unor eventuale perforaii) ; defecte de sudur.Pentru borcane: bombarea capacului ;ermeticitate necorespunztoare (capace care nu sunt bine fixate, scurgere de coninut). Proba termostatrii: La recipientele gsite corespunztoare n urma examenului exterior, se ndeprteaz eticheta, apoi se cur i se introduc n termostat. Incubarea se face la temperatura de 35C pentru punerea n eviden a microganismelor mezofile, timp de 7 zile, iar pentru microorganismele termofile, incubarea se face timp de 5 zile la temperatura de 45C, n cazul recipientelor de sticl i la temperatura de 55C, n cazul recipientelor de tabl. n cursul incubrii, recipientele se examineaz zilnic considerndu-se necorespunztoare i eliminandu-se cele cu bombaj biologic (persistena bombajului i la apsarea cu degetul), precum i cele la care se observ scurgerea de coninut.La sfritul termostatrii, recipientele se scot din termostat i se rcesc la temperatura camerei, dup care se supun examenului microbiologic propriu-zis.

Recoltarea probelor din conserve:

n vederea deschiderii i prelevrii probei pentru analiz, se cura si se degreseaz suprafaa exterioar a recipientelor, se agit pentru omogenizare, se dezinfecteaz capacul cu alcool i se flambeaz. Deschiderea recipientului se face prin: perforarea capacului cu perforatorul metalic (n prealabil flambat) n cazul produselor cu consisten fluid sau prin tierea unei poriuni circulare din capac cu ajutorul dispozitivului de deschis cutii de conserve n cazul produselor cu consisten solid. n tot timpul acestei operaii, se ndreapt flacra unui bec de gaz spre locul deschiderii, pentru a steriliza aerul ce poate fi absorbit n interiorul recipientului. Din recipientul deschis se recolteaz 4-5 g produs cu ajutorul unei pipete cu orificiul larg, dac produsul este fluid sau semifluid, sau cu-ajutorul unei spatule de sticl din zona central a recipientului, dac produsul este solid.

Recoltarea probelor din ouRecoltarea de pe coaja oulor: cu un tampon steril se terge foarte bine suprafaa cojii oului, dup care se introduce n 10 ml ser fiziologic steril. Recoltarea coninutului oulor: se spal bine cu peria coaja oului, dup care se introduce n spirt medicinal timp de 30 minute. Se scoate oul, se sparge n apropierea flcrii de gaz, cu un bisturiu steril i se golete de coninut ntr-un vas Erlenmayer cu perle de sticl.Dup omogenizare se fac diluii decimale, din care se fac nsmnri pentru determinarea: numrului total al germenilor (NTG) i a prezenei Salmonella.

Recoltarea probelor de fin i cerealelorSingurul indicator microbiologic este numrul de spori de Bacillus mesentericus.Se cntrete 1 g fin care se introduce ntr-o eprubet cu 2 ml ser fiziologic steril i se omogenizeaz foarte bine. Se fac apoi diluii decimale pn la 1 : 10 000.Pentru distrugerea formelor vegetative se inactiveaz diluiile prin meninerea la temperatura de 100C timp de 20 minute. Dup inactivare se fac nsmnri prin ncorporare n geloz nutritiv. Prezena a mai mult de 20 spori la 100 g fin este un indiciu asupra calitii nesatisfctoare a finii.

Recoltarea probelor de pe legume i fructeSe utilizeaz metoda splrii unei cantiti de legume sau fructe ntr-o cantitate cunoscut de ap steril. Se fac diluii decimale, dup care se fac nsmnri pentru :determinarea numrului total de germeni aerobi mezofili ;determinarea bacteriilor din grupul coliformilor ;determinarea Escherichia coli ;determinarea Salmonella la 25 g produs ;determinarea Stafilococcus aureus coagulazo-pozitiv;determinarea drojdiilor i mucegaiurilor.

Recoltarea probelor din produse conservate prin acidifiereLichidul n care stau legumele se recolteaz cu ajutorul unei pipete sterile 50-100 ml (dac recipientul cu produse este mai mic), sau cu o sond metalic special lung de 60-80 mm. Lichidul recoltat se trece ntr-un borcan steril cu dop de sticl.

Cnd legumele snt tiate se recolteaz i o cantitate de aproximativ 250 g din acestea.

Transportul i pstrarea probelor se face la temperaturi joase i ntr-un timp ct mai scurt.

Recoltarea probelor Produsele alimentare lichide se recolteaz n ambalajele originale proprii sau se toarn n borcane sterile de 200300 ml.

Produsele alimentare solide se recolteaz in cantiti de 2530 g ntr-o pung de staniol flambat cu alcool, fiecare fiind atent mpachetat.

Legumele recoltate se introduc n pungi de polietilen sau de staniol sterilizate. Pungile de polietilen se lipesc cu leucoplast. Proba recoltat n staniol se mpacheteaz cu atenie i se eticheteaz.

Prelucrarea probelor de produse alimentare lichide (lapte, derivate lactate, acidulate, sucuri)Procedeul 1 : n proba de produs de 100 ml se adaug PEG cu pondere molecular 4 000 sau 6 000 n cantiti de 5 g i NaCl n cantitate de 1,8 g; ingredientele se dizolv uor agitnd manual flaconul; dup dizolvarea ingredientelor se las proba n repaus la temperatura de + 4 C timp de 1 or, apoi se centrifugheaz la 3 000 t/min timp de 10 minute, iar lichidul supernatant se ndeprteaz; se obine un sediment n cantitate de aproximativ 25 g. n continuare se procedeaz ca pentru produsele alimentare semisolide.Procedeul 2 : proba de produs de 100 ml se adaug 0,3 g citrat de sodiu; lichidul din balon se amestec ntr-un agitator magnetic timp de 20 minute, apoi se adaug 10 ml freon 113 cu pondere molecular 1,36 i se omogenizeaz amestecul de ingrediente la 4 0005 000 t/min timp de 1-2 minute ; omogenatul se centrifugheaz la 3 000 t min timp de 30 minute; lichidul supernatant, cu un aspect uor opalescent, se trece ntr-un balon steril, se purific de flora microbiana cu freon 113 sau cu eter etilic i se conserv la -20C pn la inocularea pe gazde de laborator.

Prelucrarea probelor de produse alimentare semisolide (brnzeturi, smntn, semifabricate de carne i pete, pine)Procedeul 1 : proba de produs alimentar n cantitate de 25 g se introduce ntr-un balon steril de 250 ml se adaug 100 ml 0,1 M soluie de tampon-glicol pH 8,8. Balonul cu lichid se agit ntr-un agitator timp de 5 minute; dup depunerea sedimentului la temperatura de 4C timp de 15 minute, lichidul supernatant se filtreaz printr-o plnie cu vat de sticl aplicnd presiune pozitiv sau negativ de 0,5 atmosfere ; filtrul este folosit pentru concentrarea particulelor virale.Procedeul 2 : proba de aliment n cantitate de 25 g se introduce ntr-un pahar steril n vederea omogenizrii ; se adaug 25 ml 0,5 M tampon fosfat pH 8,2 sau 0,1 M soluia tampon glicol pH 8,8 (tamponul glicol se folosete pentru produsele mai acide : smntn, brnz de vaci, pine) ; totodat, se mai adaug n prob 25 ml freon 113 i 0,5 g clorur de magneziu uscat; proba se omogenizeaz la 4 000-3000 t min timp de 2 minute ; omogenatul este apoi centrifugat la 3 500 t/min timp de 30 minute; lichidul supernatant are un aspect transparent uor opalescent; n cazul n care este tulbure se repet tratarea cu freon 113 fr a se mai aduga tamponul i clorura de magneziu ; sedimentul este nlturat ; lichidul supernatant se transfer ntr-un flacon de 50 ml urmnd a fi folosit pentru concentrarea particulelor virale cu PEG.

Prelucrarea probelor de produse alimentare solide (crupe, carne, unele brnzeturi etc.)La o prob de produs de 50 g se adaug 100 ml 0,1 M soluie de tampon glicocol pH 8,8 sau 100 ml 0,5 M soluie tampon fosfat pH 8,2.Balonul cu lichid i produsul se agit la agitator timp de 20 min; se las proba s se sedimenteze la temperatura de +4C timp de 15 min, apoi lichidul supernatant se filtreaz prin plnia cu vat de sticl, filtratul este folosit pentru concentrare.Dezadsorbia particulelor virale de pe suprafaa legumelor in faz lichid: 4-5 rdcinoase, constituind o prob, se introduc ntr-un borcan steril cu gtul larg cu capacitate de 1 litru; se toarn 100 ml soluie tampon fosfat pH 8,2, se acoper la gur cu staniol steril i se agit manual timp de 5 min.Lichidul este separat i centrifugat la 3 000 t/min timp de 20 min; sedimentul se nltur; lichidul supernatant se debaraseaz de flora microbian cu ajutorul freonului 113 sau eterului etilic i poate fi folosit pentru inoculare pe gazde de laborator, sau concentrat cu ajutorul filtrrii sau sedimentrii cu sulfat de aluminiu.

Concentrarea particulelor virale din produse alimentare cu PEGLa extract se adaug PEG cu pondere molecular 4 000-6 000 pn la obinerea concentraiei de 10% i clorur de sodiu (NaCl) pn la obinerea soluiei de 0,5 M.Proba este agitat manual timp de 1-2 minute pn la dizolvarea complet a ingredientelor i meninut la +4C timp de 60 minute, centrifugat la 3 000 t/min timp de 15 minute ; lichidul supernatant se scurge atent i se nltur, sedimentul se resuspend n 2 ml sol Eagle pH 7,6 sau n 2 ml soluie Hanks pH 7,4.Concentrarea particulelor virale din produse alimentare cu ajutorul filtrrii Pregtirea instalaiei de filtrare : filtrul este introdus n fixatorul Seitz sau ntr-un oricare alt fixator; diametrul filtrului poate fi egal cu 3-14 cm.Filtrarea : proba lichid este trecut prin filtru cu ajutorul unei presiuni pozitive sau negative de 0,5 atmosfere; dup ce tot lichidul a trecut prin filtru, acesta este scos din fixator cu o pens steril i depus n plac Petri steril.Eluia : peste filtrul din placa Petri se toarn soluie de NaCl 1 M (eluent) calculnd cte 2 ml de lichid peste 10 cm2 de suprafa a filtrului (2 ml de eluent pentru un filtru cu diametrul de 3 cm)

Recomandri generale:

Cantitatea de apa recoltat variaz ntre 500 ml pentru analize uzuale i 10 l pentru analize speciale.

Recipientele pentru colectare trebuie cltite de 3-4 ori folosind apa din care se va recolta proba.

Se va urmri ca proba de ap s nu conin sedimente (ml, nisip etc.). n acest sens containerul va fi imersat la o adncime mic, nu pn la fundul apei.

Dup colectare, probele trebuie refrigerate sau inute ntr-un loc rcoros, la umbr, pentru a preveni multiplicarea bacteriilor.

Dac este posibil, la recoltarea probelor secundare containerul trebuie introdus n ap n poziie vertical, astfel nct s se colecteze doar apa de la suprafa.

Materiale necesare pentru colectarea probelor de ap:

Un recipient steril de 1 litru cu dop de sticl. Recipiente sterile de 250 ml pentru probele secundare.Container de transport a probelor prevzut cu refrigerare.Mnui Sterilizarea se face dup splare i uscare. Flaconul este nchis cu dop iar partea superioara se va nfura cu un capac de hrtie legat cu sfoara de gtul flaconului, dup care se aplica dopul. Sterilizarea se face folosind etuva sau autoclavul. Flaconul se va steriliza mpreun cu suportul metalic n care este montat, ambele fiind mpachetate n hrtie.

Recoltarea din instalaii centrale:

Proba de ap de suprafa sau subteran tratat sau dezinfectat:se recolteaz de la robinete montate n puncte reprezentative fiecreitrepte de tratare.Pentru recoltarea acestor probe, inclusiv a acelora din reeaua dedistribuie, se deschide robinetul i se las s curg apa 510 minute.Se nchide robinetul i se flambeaz. Se deschide din nou robinetul i seregleaz debitul n aa fel nct s se formeze o coloan de ap continu de maximum 1 cm diametru. Se scoate dopul flaconului mpreun cu capacul de hrtie. Flaconul inut cu mna de partea lui inferioar se aazdrept sub coloana de ap i se umple pn la aproximativ 1 cm sub dop.Se astup cu dopul, se pune capacul de hrtie care se leag din nou cusfoar, apoi se noteaz.Cnd nu exist posibilitatea recoltrii apei de la robinet, flaconul,mpreun cu suportul metalic, sterilizate, se scot din hrtie, se scoatedopul mpreun cu capacul de hrtie i inut de sfoar, se introduce vertical nbazin sau rezervor, unde se umple pn la 1 cm sub dop, se astup cudopul i capacul de hrtie care se leag cu sfoara, apoi se noteaz.

Recoltarea din surse locale (fntni, izvoare):

Proba de ap de fntn se recolteaz direct din apa fntnii cu flaconul sau prin turnare din gleata fntnii n flacon.Pentru izolarea i identificarea enterobacteriilor patogene se recomand recoltarea unor volume mari de ap, datorit faptului ca acestebacterii patogene pentru om i animale snt rspndite inegal sub influna micrilor apei de suprafa i snt supuse aciunii rapide a factorului de diluie.

n timpul recoltrii probelor de ap, se va evita orice posibilitatede contaminare accidental a apei.

Determinarea concentraiei germenilor coliformi din apa prin metoda filtrrii. (a) Testul pentru coliformi totali: mediul bulion MF M-Endo. Se observ coloniile purpuriu spre rou-nchis cu luciu metalic. (b) Testul pentru coliformi fecali: mediu bulion M-FC. Se observ colonii albastre. (c) Testul pentru streptococi fecali: mediul geloz KF streptococcus. Se observ colonii roz. (d) Mediul bulion HACH m-ColiBlue 24 : Suma coloniilor roii i albastre indic coliformii totali, iar cele albastre numrul de E. coli.

limite, prezenii strep-|i, sau modificarea rait la 22C n favoareale cu constituirea unui\ pentru apa din bazi-pentru not pe ruri,jerapeutice i la apelelacuri (tabelul nr. V).I ncadrare pentru apaTabel nr. Vilde ncadrare pentrufinse n tabelul nr. VI.Tabel nr. Vfrare pentru apaor agricole presupune^ calitii apei i folo-funcie de indicatoriifie se clasific n treile i plantele ; i plantele cu excep-tinaie alimentar iIgelare, murare, frile cu nivelul freaticrile ale cror produseu produsele vegetale! de ncadrare pentru2.4, ANALIZA MICROBIOLOGIC A APEI2.4.1. Recoltarea, transportul i pstrareaprobelor de apIn vederea efecturii unei analize microbiologice, probele de ap serecolteaz i se transport cu anumite precauii. Cantitatea de ap necesar variaz de la 500 cm3, pentru analizele curente, pn la 100 m3pentru analize speciale.Frecvena recoltrii probelor este condiionat de sistemul de instalaie i de mrimea colectivitii care este aprovizionat de aceast instalaie (STAS 1342/84).Sterilizarea flacoanelor se face dup ce au fost splate, limpezite i.uscate. Partea superioar a flaconului nchis cu dopul de sticl se nfoar cu un capac de hrtie care se leag cu sfoar de gtul flaconului,,dup ce ntre dop i gtul flaconului se interpune o fie ngust de hrtie.Sterilizarea se face in etuv la cldur uscat, la 180C, timp de 1 or, sau.n autoclav la 121C timp de 20 minute. n cazul recoltrii apei din bazinerezervoare i fntni, flaconul de sticl pregtit ca mai sus i legat cu osfoar se sterilizeaz mpreun cu suportul metalic n care este montat,,amndou fiind mpachetate n hrtie.RfcCOLTAREA APEI Din instalaii centraleProba de ap de suprafa sau subteran tratat sau dezinfectat:se recolteaz de la robinete montate n puncte reprezentative fiecreitrepte de tratare.Pentru recoltarea acestor probe, inclusiv a acelora clin reeaua dedistribuie, se deschide robinetul i se las s curg apa 510 minute.Se nchide robinetul i se flambeaz. Se deschide din nou robinetul i seregleaz debitul n aa fel nct s se formeze o coloan de ap continu63.

Tabel nr. Vt (STAS 12 583/87)sub 300sub 100sul) 20absente

[ snt :10 0001 000200absent

Denumirea indica/oruUdCategoria

Bacterii colifo:m.^ totale, i umr probabil /dm3may. 100peste 100 . . .100 000peslc 100 000 . . .10 000 000Bacterii colitorme fecale, numr probabil/dm3absentmax. 10 000peste 10 000 . . .1 000 000Stafiloeoci fecali, numr probabil/dn.3absentmax. 10 000peste 10 000 . . .1 000 000Bacterii din genul Salmo-nellaabsent/1 000 cm3absent/300 cm3absent/100 cm'

ele maximum 1 cm diametru. Se scoate dopul flaconului mpreun cu capacul de hrtie. Flaconul inut cu'mna de partea lui inferioar se aazdrept sub coloana de ap i se umple pn la aproximativ 1 cm sub dop.Se astup cu dopul, se pune capacul de hrtie care se leag din nou cusfoar, apoi se noteaz.Cnd nu exist posibilitatea recoltrii apei de la robinet, flaconul,mpreun cu suportul metalic, sterilizate, se scot clin hrtie, se scoatedopul mpreun cu capacul de hrtie i inut de sfoar, se introduce nbazin sau rezervor, unde se umple pn la 1 cm sub dop, se astup cudopul i capacul de hrtie care se leag cu sfoara, apoi se noteaz.n cazul cnd apa de analizat este colorat, nainte de sterilizareaflaconului pentru recoltarea probei, se introduce n flacon 1 cm3 soluie0,5Vo de tiosulfat de sodiu pentru 100 cm3 prob ele ap ce urmeaz afi recoltat.Din sursele locale (fntni, izvoare)Proba de ap de fntn se recolteaz direct clin apa fntnii cu flaconul sau prin turnare din gleata fntnii n flacon.Pentru izolarea i identificarea enterobacteriilor patogene se reco-m a rul recoltarea unor volume mari de ap, datorit faptului ca acestebacterii patogene pentru om i animale snt rspndite inegal sub influena micrilor apei de suprafa i snt supuse aciunii rapide a factorului de diluie.Pentru prelucrarea mai uoar a acestor volume mari de ap, se recomand concentrarea lor n volume mici folosindu-se n acest scop : fiefiltrarea unui volum de 100 dm3 prin perni de tifon tip Moor (recomandat de Institutul de Igien i Sntate Public Bucureti), fie filtrareaunor volume cunoscute, mai mici (l5 dm3) prin membrane filtrante, fieprin intermediul unui tampon de tifon tip Mocre care se scufund lalocul recoltei timp de 2448 ore.n timpul recoltrii probelor de ap, se va evita orice posibilitatede contaminare accidental a apei.NOTAREA PROBELORFlacoanele cu probele de ap se prevd cu etichete pe care se nscriu datele necesare identificrii probei :numrul probei sau lotului ;denumirea punctului de recoltare ;data i ora recoltrii i eventuale caracteristici ale locului de^recoltare ;TRANSPORTUL l PSTRAREA PROBELORProbele se transport la laborator, ct mai repede posibil (maximum6 ore) dup efectuarea recoltrii. Transportul se face n lzi compartimentate, refrigerate sau cu ageni frigorifici. n funcie de distan, n specialn anotimpul cald, probele se transport mai uor, n geni frigorifice,astfel ca temperatura s nu depeasc +4C. Dac probele de ap recoltate nu pot fi aduse n laborator n timp util, datorit unor distane preamari care trebuie parcurse, se pstreaz la frigider maximum 24 ore.642.4.2. De{URMetod;JNSMNAREDin prtorii ale flacsteril de 2 -cutii Petri.n cazmare de bacIO"2 etc, rn fie10^cr*zeaz conirambele sensfiilor Petriperatura deEFECTUAREAntr-osteril saumm*-i seeasi pipetplci, se tr9 cm3 soluzndu-se astfrea unor dilu1NCUBAREACutiiletermostat, dup37C, iar cealaSTABILIREA NUdSe numi n interiorpeste 300 colcia numrarea300 colonii (UI* UFC '5 Microbiologie

*******************************************************************