Proiect ADER: 3.1.3.

Dezvoltarea și modernizarea

colecțiilor de germoplasmă viticolă

în scopul conservării pe termen lung

a materialului biologic de valoare națională

Coordonator de proiect:

INSTITUTUL NAŢIONAL DE CERCETARE–DEZVOLTARE

PENTRU BIOTEHNOLOGII ÎN HORTICULTURĂ

ŞTEFĂNEŞTI – ARGEŞ

Director de proiect: Dr. ing. Constantin Tănăsescu

Parteneri în consorţiu

P1 Institutul de Cercetare-Dezvoltare pentru Viticultură şi Vinificaţie Valea Călugărească

P2 Staţiunea de Cercetare-Dezvoltare pentru Viticultură şi Vinificaţie Blaj

P3 Staţiunea de Cercetare-Dezvoltare pentru Viticultură şi Vinificaţie Bujoru

P4 Staţiunea de Cercetare-Dezvoltare pentru Viticultură şi Vinificaţie Drăgăşani

P5 Staţiunea de Cercetare-Dezvoltare pentru Viticultură şi Vinificaţie Odobeşti

P6 Staţiunea de Cercetare-Dezvoltare pentru

Cultura Plantelor pe Nisipuri Dăbuleni

Bugetul total 712.850 lei / cofinantare -Realizat 708.066 lei / cofinantare -

Informaţii generale

• Colaborarea în reţea a unităţilor de cercetare implicate în conservarea

şi valorificarea resurselor genetice de viţă-de-vie este esenţială. Lucrul

în echipă asigură punerea în valoare a potenţilului uman, precum

şi evaluarea corectă şi valorificarea biodiversităţii viticole existente

în colecţiile de germoplasmă, în paralel cu mărirea acestei diversităţi.

• Proiectul ADER 3.1.3, a avut următoarele obiective specifice:

• I. Evaluarea situaţiei actuale a colecţiilor de germoplasmă viticolă;

• II. Caracterizarea sortimentului din colecţii, cu precădere a soiurilorvechi, considerate autohtone, aplicând metodele standardizate

şi actualizate pentru descriptorii ampelografici, în paralel

cu determinări eno-carpologice, biochimice şi moleculare;

• III. Extinderea şi modernizarea colecţiilor de germoplasmă viticolăconform standardelor OIV (Organizaţia Internaţională a Viei şi Vinului).

RezultateI. Evaluarea situaţiei actuale a colecţiilor de germoplasmă viticolă

Obiectivul Actualizarea înregistrărilor colecţiilor de germoplasmă după un sistem unic

şi conform cerinţelor internaţionale. Centralizarea informaţiilor referitoare la

sortimentul existent în colecţiile viticole deţinute de unităţile participante la proiect

Specificaţie Număr total varietăţi / varietăţi din alte ţări Nr. total /

% var. autohtone

2015 / 2018CP P1 P3 P4 P2 P5 P6

Soiuri şi clone

masă apirene

16/11

16/11

57/53

(+1) 58/53

6/3

6/3

25/22

25/22

-/- 3/1

3/1

5/2

5/2

2015= 112 / 17,8 % (20)

2018= 113 (+1) / 17,7 % (20)

Soiuri şi clone

masă pirene

68/16

(+5) 73/16

575/533

(+26)601/533

30/14

(+19) 49/14

97/71

97/71

26/7

28 (+2)/7

33/15

33/15

16/7

17/8 (+1)

2015= 845 / 21,5 % (182)

2018= 898(+53) / 26 % (234)

Soiuri şi

clone vin alb

96/4

(+2) 98/4

395/344

(+23)418/344

39/23

(+2)41/23

68/22

68/22

55/23

24(-31)/16(-

7)

63/30

64(+1)/31

12/5

12/5

2015= 728 / 38 % (277)

2018= 725(-3) / 38,6 % (280)

Soiuri şi clone

vin roşu şi

roze

59/10

(+2) 61/10

242/222

(+18)261/222

28/24

28/24

50/28

50/28

12/8

3 (-9)/1 (-7)

37/21

38 (+1)/21

14/3

15/4 (+1)

2015= 442 / 28,5 % (126)

2018= 456(+13) / 32 % (146)

Soiuri şi clone

vin aromat

13/8

(+2) 15/8

27/22

27/22

7/2

9/4 (+2)

9/5

9/5

12/6

2(-10)/2(-4)

15/10

15/10

4/2

4/2

2015= 87 / 36,8 % (32)

2018= 81 (-6) / 34,6 % (28)

Soiuri şi clone

de portaltoi

24/14

24/14

35/30

35/30

--

- -

47/41

47/41

4/2

4/2

--

- -

-/-

- -

2015= 110 / 20,9% (23)

2018= 110 / 20,9% (23)

Hibrizi

interspecifici

27/17

27/17

85/77

85/77

2/1

2/1

--

--

24/20

8(-16)/4(-16)

78/76

51 -27)/49

1/-

1/-

2015= 217 / 11,9% (26)

2018=174 (-43) / 14,9 % (26)

Specii /

populaţii

9/-

9/-

8/8

8/8

--

--

13/13

13/13

-/-

-/-

-/-

-/-

-/-

-/-

2015= 30 / 30% (9)

2018= 30 / 30% (9)

TOTAL varietăti

/varietăţi

autohtone

312 / 232

323(+11) /243

1424 / 135

1492 (+68)/203

112 / 45

(+23)135/66

309 / 107

309/ 107

133/67

69 (-64)/37

229/76

204(-25)/77

52/33

54 (+2)/33

2015= 2571 / 27 % (695)

2018=2586(+15)/29,6 % (766)

Rezultate

I. Evaluarea situaţiei actuale a colecţiilor de germoplasmă viticolă

Numărul total al varietăţilor din colecţii şi numărul varietăţilor autohtone,

comparativ 2015 şi 2018 (Total în cele 7 unităţi de cercetare)

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

Total Autohtone Total Autohtone Total Autohtone Total Autohtone Total Autohtone Total Autohtone Total Autohtone

112

20

845

182

728

277

442

126 87

32

110

23

217

26

113

20

898

234

725

280

456

146

8128

110

23

174

26

2015 2018

Masă apirene Masă pirene Pentru vin alb Pentru vin roșu,roze Pentru vin aromat Portaltoi Hibrizi interspecifici

Rezultate

I. Evaluarea situaţiei actuale a colecţiilor de germoplasmă viticolă

Evoluţia ponderii accesiunilor considerate autohtone

(% din totalul accesiunilor din acelaşi tip) în perioada 2015-2018

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Masă apirene Masă pirene Vin alb Vin negru şi roze Vin aromat Portaltoi Hibrizi Specii salbatice

17.8

21.5

38

28.5

36.8

20.9

11.9

30

17.7

26

38.6

3234.6

20.9

14.9

30

2015 2018

Au fost identificate varietăţile considerate autohtone (766), importante pentru zonele viticole

respective şi care trebuie complet caracterizate (ampelografic şi molecular)

RezultateI. Evaluarea situaţiei actuale a colecţiilor de germoplasmă viticolă

Numărul soiurilor, clonelor şi hibrizilor aparţinând genului Vitis,

existente în câte o singură colecţie de germoplasmă

Varietăţi

de viţă-de-vieCP P1 P2 P3 P4 P5 P6 Total

Soiuri şi clone -

masă apirene9 19 - - 17 - - 45

Soiuri şi clone -

masă pirene1 313 6 - 25 4 - 349

Soiuri şi clone -

vin alb1 353 12 13 4 - 383

Soiuri şi clone -

vin roşu şi roze2 104 9 7 17 5 - 144

Soiuri şi clone –

vin aromat- - 3 - 3 - - 6

Hibrizi interspecifici 1 42 12 - 1 - - 56

Total – varietăţi

existente într-o singură

colecţie

14 831 42 7 76 13 - 983

Au fost identificate varietăţile prezente ca unicat în colecţiile noastre, pentru care sunt

necesare măsuri de protecţie şi de înmulţire pentru diminuarea riscului de dispariție a lor

II. Caracterizarea sortimentului din colecţii, cu precădere a soiurilor vechi,

considerate autohtone, aplicând metodele standardizate

• În toate unităţile participante la proiect, specialiştii au aplicat aceeaşi metodologie pentru caracterizarea ampelografică la 4 soiuri de referinţă (soiuri recunoscute internaţional şi care sunt prezente în toate colecţiile) şi la un număr de varietăţi de viţă-de-vie, considerate autohtone şi reprezentative pentru zona viticolă respectivă.

• Actualizarea descrierii sortimentului selectat: 75 soiuri vechi de Vitis vinifera subsp. vinifera, considerate autohtone (24 soiuri pentru masă, 34 soiuri pentru vinuri albe, 13 soiuri pentru vinuri roşii, 4 soiuri pentru vinuri aromate) şi 8 varietăţi de Vitis vinifera subsp. sylvestris.

• Acest fond de germoplasmă oferă o gama largă de însuşiri şi caractere favorabile, exprimate prin fenotipuri valoroase din punct de vedere agro-biologic şi economic, constituind un material genetic care poate fi folosit atât ca material de înmulțire, cât și ca material genitor pentru crearea de soiuri noi sau selectionarea unor clone valoroase.

• Pentru verificarea autenticităţii materialului viticol existent în fiecare colecţie s-au efectuat aceleaşi determinări şi evaluări numerice, după acelaşi sistem recunoscut internaţional, respectiv ”Manualul OIV al descriptorilor standardizaţi pentru Vitis”, actualizat în 2009.

Pentru prima data au fost prezentate descrieri ampelografice la 8 varietăți de viță-de-vie

sălbatică provenind din 3 areale sălbatice diferite (Hrinova-Cazane, Greaca și pădurea Letea)

OIV-001 deschiderea vârfului lăstarului

Vs10 G Vs Letea 1 Vs3eb G

OIV-051 culoarea frunzei tinere

Vs3eb G Vs Letea 1 Vs9dm H

Frunza matură: mărime (065), formă

(067), numărul lobilor (068), etc.

Vs6 S Vs9 G Vs9dm H

Vs12 G Vs14 G Vs Letea 2

Vs3eb G Vs14 G

Vs10 G Vs Letea 2

Strugurele: mărimea (202), compactitatea (204),

culoare pieliţa (225), etc.

Descrieri ampelografice la soiurile selectate confirmate prin: bibliografie,

analize ampelografice şi moleculare GORDAN (ROM051-257)

Descriptori pentru autenticitate:

Trueness to type (of the variety) yes

“Remarks to the accession name” true name

“Variety number VIVC” 5544

“Confirmation by ampelography” yes

“Confirmation by SSR-markers” yes

“Confirmation by bibliography” yes

Sinonime: 60 (Gorgan, Gordan alb, Corb alb, Băldoaie, Gordan mic,Gordan mare, Gordană, Timpurie, Giordan, Iordovana, Jordan, Iordan,Jârdovâny, járdovány fehér, etc.)

Descrieri ampelografice la soiurile selectate confirmate prin: bibliografie,

analize ampelografice şi moleculare NEGRU VARTOS (ROM051-263)

Descriptori pentru autenticitate:

Trueness to type (of the variety) yes

“Remarks to the accession name” true name

“Variety number VIVC” 8466

“Confirmation by ampelography” yes

“Confirmation by SSR-markers” yes

“Confirmation by bibliography” yes

Sinonime: 20 (Corb, Negru bătut, Gordan negru, Beilar Cherasi,Negru bulgar, Negru tare, Negru tare, Negru bulgăresc, Gordan negru,Cerno tvtrdo, Garvan, etc.)

Analiza moleculară

Caracterizarea completă a accesiunilor înseamnă:

descriere cu descriptori standardizați +

analiza moleculară cu un set de cel puțin nouă markeri SSR

Au fost analizate 54 soiuri de viţă-de-vie, considerate autohtone;

extracţia ADN - Qiagen DNeasy Plant mini-kit

9 markeri SSR: VVS2, VVMD5, VVMD7, VVMD25, VVMD27, VVMD28,

VVMD32, VrZAG62, VrZAG79

Datele obţinute au fost comparate cu bazele de date existente la:

- Centre of Viticultural Research (CREA-VIT), CONEGLIANO, Italia / Manna

Crespan;

- JKI - Julius Kühn-Institut für Rebenzüchtung GEILWEILERHOF, Germania /

Erika Maul;

- INRA, Montpellier - VASSAL collection, Franţa / Thierry Lacombe şi Valerie

Laucou

Au fost certificate rezultatele analizelor moleculare care au fost

introduse în bazele de date internaţionale.

Pentru 11 soiuri au fost confirmate sinonimele menționate în documente de referinţă:

Ardeleanca cu Bakar belyi; Creață cu Creaţă de Banat și Kreaca; Bacator cu Bakator roz;

Braghină roz cu Braghină roșie rară; Cadarcă cu Kadarka Kek; Ceauș alb cu Chaouch

blanc; Majarcă albă cu Slankamenka bela; Negru vârtos cu Mavrud Varnenskii; Plăvaie

cu Plavay; Tâța caprei albă cu Tsitska kaprei.

Pentru 3 soiuri vechi nu au fost confirmate sinonimele:

- Busuioacā de Bohotin este mutantă somatică a soiului Muscat à petits grains

blancs (Grecia) pentru culoarea bobului şi nu sinonim cu 'Muscat rouge de Madere‘

(Constantinescu et al.1960);

- Galbenā uriaşā este soi diferit şi nu o selecţie de Galbenā de Odobeşti (NICOLEANU

1900 ), este sinonim cu 'Mirkovaca‘ (Croaţia);

- Tămâioasă românească este descendent din Muscat à petits grains blancs

(Franţa), nu este sinonim cu acesta.

Au fost identificate sinonime noi pentru 5 accesiuni despre care nu au deţinem

informații complete în literatura de referinţă: Braghină albă sinonim cu Dinka zoeld (Ungaria);

Galbenă măruntă sinonim cu Kakotrygis (Grecia); Ţâţa caprei neagră sinonim cu Hora

(Bulgaria); Ţâţa vacii albă sinonim cu Halholyag (Ucraina); Ţâţa vacii neagră sinonim cu

Kozi Cici cherveni (Bulgaria).

Au fost certificate rezultatele analizelor moleculare care au fost introduse în bazele de date internaţionale.

Au fost documentate sinonime noi pentru 4 dintre aceesiunile analizate: 1) Ceauș roz

cu soiul Chaouch rozovyi (Turcia); 2) Coada oilor cu soiul Juhfark (Ungaria);

3) Țâța vacii albă cu soiul Halholyag (Ucraina); 4) Cârcioasă cu soiul Balint weiss (Ungaria).

Pentru prima data în literatura noartă s-a documentat sinonimia între:

- Gordan = Iordană = Zemoasă;

- Galbena de Odobeşti = Zghihară de Huşi;

- Bătută neagră = Negru românesc

Profilele genetice obținute pentru 3 accesiuni, respectiv, Moroștină,

Negru mare și Românie au dovedit 'unicitatea' acestor soiuri de viță-de-vie

în colecțiile de germoplasmă din Europa.

15 soiuri au prezentat profile genetice identice cu cele deja înregistrate

în bazele de date europene.

Pentru 4 soiuri s-au constatat diferenţe faţă de descrierile din literatura de referinţă

şi s-au obţinut profile SSR care nu au corespuns cu nici un soi indicat ca posibil sinonim.

Descrierea morfologică cu descriptori standardizaţi (OIV) şi metodele moleculare

cu markeri SSR, utilizate împreună, s-au dovedit a fi eficiente pentru:

confirmarea autenticităţii materialului biologic, identificarea genotipurilor unicat,

a celor prezente redundant, a celor sinonime şi a celor incorect înregistrate.

Rezultate

III. Extinderea şi modernizarea colecţiilor de germoplasmă viticole

conform standardelor OIV

Adoptarea şi implementarea unui sistem unitar pentru prezentareapropriilor colecţii de germoplasmă, pentru descrierea şi caracterizareaaccesiunilor din colecţii. Standardizarea formularelor utilizate de toatecolecţiile de germoplasmă viticolă pentru:

a) înregistrarea soiurilor existente şi/sau introduse în colecţie; b) caracterizarea cât mai completă a accesiunilor din colecţiile de germoplasmă proprii ale unităţilor participante la proiect; c) documentarea varietăţilor de viţă-de-vie din colecţii în scopulvalorificării materialului viticol către diferiţi beneficiari.

În baza descrierii complete şi conforme cu cerinţele pentru colecţiile de germoplasmă europene, s-au întocmit corect fişele de descriere pentru soiurile din fiecare colecţie şi, în baza lor, se vor efectua schimburi de material genetic între colecţiile naţionale, sau între cele naţionale şi colecţiile de germoplasmă viticolă din alte ţări.

Identificarea corectă a soiurilor este importantă pentru curatori, viticultori, vinificatori și consumatori; de asemenea, reprezintă o dovadă a unui sistem de trasabilitate corect pe întreg procesul de obţinere a materialului de plantare, de producție a strugurilor, de vinificaţie şi comercializare.

Rezultate

III. Extinderea şi modernizarea colecţiilor de germoplasmă

viticole conform standardelor OIV

Colecţia de germoplasmă înfiinţată de CP- ADER 3.1.3

Categorie/tip Nr. varietăţi Plantate in

2017

Rest de

plantat

SOIURI pentru VIN ALB 59 42 17SOIURI pentru VIN AROMAT 6 5 1SOIURI pentru VIN ROSU 31 26 5Soiuri de MASA PIRENE 42 28 14Soiuri de MASA APIRENE 11 6 5Portaltoi 11 9 2V. sylvestris 11 8 3TOTAL 171 124 47

Din care:

- 65 varietăţi (soiuri vechi, considerate autohtone) au fost achiziţionate

de la Facultatea de Horticultură Bucureşti şi de la SCDVV Drăgăşani

- 9 varietăţi de la partenerii participanţi la proiectul ADER (ICDVV Valea

Călugărească - P1, SCDVV Odobeşti - P5)

REZULTATE

Diseminarea rezultatelor obţinute în cadrul proiectului

Lucrări ştiinţifice publicate în ţară 16

Lucrări ştiinţifice publicate în străinătate 2

Postere şi comunicări ştiinţifice prezentate la manifestări ştiinţifice naţionale

cu participare internaţională 12

Manifestare științifică organizată de CP şi P4 (SCDVV Drăgăşani) 2

A fost publicată cartea "Strategii şi principii pentru conservarea resurselorgenetice viticole în colecţii ex situ" Editura Universităţii din Piteşti, ISBN 978-606-560-603-6

Informare prin mass-media: P1, P3 şi P4 au participat la emisiuni TV cu profilagricol unde au prezentat o parte din rezultatele proprii, dar şi deficienţe îndesfăşurarea activităţilor de întreţinere a plantaţiilor şi recoltare a producţiei destruguri: TVR 1, Pro TV - posturi naţionale, Valcea 1 şi TVR 3 Craiova – posturi deteleviziune locale.

REZULTATE OBŢINUTE Diseminarea rezultatelor proiectului ADER 3.1.3.

INCDBH Ștefănești-Argeș - sesiunea internă de comunicări științifice cu tema:

“Resurse genetice viticole – colecţii de germoplasmă, caracterizare completă,

valorificare” - 8 iunie 2017

REZULTATE OBŢINUTE Diseminarea rezultatelor proiectului ADER 3.1.3.

Masa rotundă – ”Salvarea patrimoniului viticol national – SCDVV Dragasani”

19 aprilie 2018

REZULTATE OBŢINUTE Diseminarea rezultatelor proiectului ADER 3.1.3.

Lucrări prezentate la manifestări ştiinţifice, publicaţii

Material biologic în colecţia de germoplasmă ex situ - CP