DETERMINAREA NITRATULUI DE NAFAZOLINA DIN PICATURILE NAZALE PRIN METODE CROMATOGRAFICE CU DETECTIE DENSIOMETRICA

2.2 DETERMINAREA NITRATULUI DE NAFAZOLINA DIN PICATURILE NAZALE PRIN METODE CROMATOGRAFICE CU DETECTIE DENSIOMETRICA

O metoda specifica ce da rezultate foarte bune si concrete, bazata pe cromatografie in strat subtire cu detector densiometric a fost dezvoltata pentru determnarea nitratului de nafazolina din picaturile nazale.

Cea mai buna separare a analitului a fost obtinuta folosind o faza mobila formata din acetonitril apa ( 60:40) adaugand 1.5% imidazol- lichid ionic si acoperind cu o faza stationara de tipul RP-18 ( 10 x 20 cm)

Rezultatele confirma faptul ca lichidele ionice pe baxa de imidazol tetrafluoro-borat sunt eficiente in aceste determinari .2.2.1 Introducere

Cromatografia in strat subtire este o metoda foarte populara in analiza produselor farmaceutice.din pacate, analiza cromatografica a medicamentelor de baza este de obicei complicata din cauza efectului silanilor liberi.Acest fapt se datoreaza interactiilor ionilor pozitivi cu grupari silan sau cu fazele stationare cu silicagel.

Aceasta interactie inre ioni produce o retentie foarte semnificata cantitativ de analit, ceea ce duce la o determinare nereusita si la picuri neclare

Studiile din ultimii 10 ani arata fsptul ca lichidele ionice pot fi folosite in foarte multe scopuri.Datorita proprietailor lor chimice si fizice, unice, flexibile, sunt considerati niste solventi inovatori si sunt luati in consideratie pentru a fi folostit in medicina verde

Numeroase recenzii au aratat faptul ca acestia pot fi utilizati in toate partile chimiei analitice . Lichidele ionice sunt saruri organice cu puncte de topire foarte scazute, si pot fi folositi ca si aditivi in tehnicile cromatografice.Cele mai cunoscute sunt compuse din cationi de imidazol, cunoscuti si substante solubile in solventii cromatografici obisnuiti.Pana acum ,numaroase studii descriu utilziarea IL ca faze mobile.Nitratul de nafazolina (fig A) este un aditiv care face numeroase probleme analitice in determinarea cromatografica.2.2.2. Partea experimentala:

Se folosesc:

- 1 Etil -3-metilimidazol tetrafluoroborat (fig B) si - 1 hexa-3-metilimidazol tetrafluoroborat (fig C), cumparate de la Fluka Chemika, bucks Elvetia

- Solutia standard de nitrat de nafazolina a fost obtinut de la POCh, Polonia. - Picaturi nazale Rhinazin ce contin 1mg/1ml nitrat nafazolina au fost achizitionate de la Poch de asemenea. - Apa folosita a fost purificata cu aparatul Milli-Q, din Bedford

Figura 2.2.1 A-Nitratul de nafazolina B-1 Etil -3-metilimidazol tetrafluoroborat C-1-Hexa -3-metilimidazol tetrafluoroborat2.2.3. Metoda:

HPLC a fost determinata pe sticle de ceas acoperite cu placi de silcagel (10x20cm), achizitionate de la Merck, Germania. Spottingul analitilor pe placi s-a facut cu ajutorul aplicatorului Desaga AS 30 HPLC, Germania, cu un volum de injectare de 1microlitri/spot . Spotul obtinut are dimensiunea de 4 mm si distanta dintre spoturile centrate este de 13 mm. Distanta intre capetele placii este de 1 cm.Placile au fost developate intr-o camera orizontala, Modin, Polonia, in faza mobila formata din acetonitril si apa cu si fara tetrafluoroborat. Observarea spoturile s-a realizat cu ajutorul aparatului CABUV-Vis Desaga, Germania si imprimata cu ajutorul aparaturii Canon Power Shot.

Determinarea nitratului de nafazolina s-a realizat folosind un HPLC densiometru conectat la un PC, setat la o lungime de unda de 276 nm.

Masurarea absorbantelor fazei lichide in UV s-a realizat utilizand un sistem Shimadzu Prominence, Japonia, avand un detector cu diode.2.2.4.Solutiile standard si procedura analitica pentru probele de nitrat de nafazolina

O solutie stoc de nitrat de nafazolina (1.2 mg/mL) a fost preparata in metanol.Calibrarea probelor sample s-a realizat in metanol, in concentratii de 0.23, 0.30, 0.45, 0.60,0.75, 0.90si 1.05 mg/mL. Placile uscate au fost scanate cu un densiometru la o lungime de unda de 276 nm.Picaturile nazale au fost diluate cu 250 microl de apa si metanol 2.2.5 Rezultate si discutii

S-au analizat toate probele la diferite absorbante, valorile picurilor inregistrate fiind ilustrate in imaginea de mai jos:

Fig.2.2.2 Picurile inregistrate pe placute HPLC

Se poate observa faptul ca au fost inregistrate cantitati semnificative de nitrat de nafazolina utilizat in picaturile nazale, cea mai mare cantitate fiind de 1.2 mg/mL in toate cele 3 tipuri de faza mobila utilizate

Tabel 2.2.1 Concentratia NT gasita in probele de picaturi de nas