I

Tabelul B8. Lungimea de und a culorilor din spectrul luminii albe

Lungimea de und a absorbiei maxime, nmCuloarea absorbitCuloarea observat

380-420VioletVerde-galben

420-440Violet-AlbastruGalben

440-470AlbastruPortocaliu

470-500Albastru-verdeRou

500-520VerdeRou-violet

520-550Galben-verdeViolet

550-580GalbenViolet-albastru

580-620PortocaliuAlbastru

620-680RouAlbastru-verde

680-780RouVerde

n spectrometria de absorbie molecular n ultraviolet-vizibil se folosesc cteva noiuni specifice i anume: grupare cromofor, grupare auxocrom, deplasare batocrom, deplasare hipsocrom, efect hipocromic i efect hipercromic. Semnificaia acestora este prezentat n cele ce urmeaz.

Gruparea cromofor (cromofor) este o grupare de atomi capabil s absoarb radiaii luminoase din domeniul UV i/sau vizibil, dnd natere la spectre electronice. De obicei, cromoforul este o grupare covalent nesaturat, deci un sistem care conine electroni de tip n sau SYMBOL 112 \f "Symbol" (de exemplu C=C sau C=O). Denumirea de cromofor i are originea n limba greac (chromos = culoare; phoros = purttor).

Gruparea auxocrom este o grupare de atomi saturat, care are electroni de valen de nelegtur (neparticipani) i care ataat unui cromofor, produce o deplasare a maximului su de absorbie, modificndu-i i intensitatea. De exemplu, gruprile -OH, -NH2, ca i radicalul -Cl reprezint auxocromi.Deplasarea batocrom, (numit i deplasare spre rou), reprezint deplasarea, n anumite condiii, a unui maxim de absorbie spre lungimi de und mai mari (tranziia electronic necesit energii de excitare mai mici).

Deplasarea hipsocrom (deplasare spre albastru) reprezint deplasarea unui maxim de absorbie, sub influena anumitor factori, spre lungimi de und mai mici (tranziia electronic necesit energii de excitare mai mari).

Efectul hipocromic reprezint scderea intensitii unei benzi de absorbie. Efectul hipercromic const n creterea intensitii unei benzi de absorbie. Aceste efecte, de modificare a intensitii unei benzi de absorbie precum i de deplasare a maximului de absorbie (adic a lungimii de und la care absorbana unei benzi are valoarea maxim, SYMBOL 108 \f "Symbol"max), sunt ilustrate n figura B23. Spectrul de absorbie n domeniul UV-VIS are aspectul unor benzi cu maxime largi, deoarece tranziiilor electronice li se asociaz implicit tranziii vibraionale i de rotaie, care sunt provocate de cuante de energie mai joas.Fig. B23. Deplasarea maximelor de absorbie ale benzilor spectrale

UV-VIS

Tipuri de tranziii electronice

Prin absorbia de radiaii din domeniul UV-VIS, la nivel molecular pot avea loc tranziii electronice de tip SYMBOL 115 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 115 \f "Symbol"*, n SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 115 \f "Symbol"*, n SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 112 \f "Symbol"*, SYMBOL 112 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 112 \f "Symbol"*.

Tranziiile SYMBOL 115 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 115 \f "Symbol"* sunt caracteristice substanelor care conin numai legturi simple (SYMBOL 115 \f "Symbol"), cum ar fi C-C i C-H. Datorit diferenei mari ce separ cele dou nivele energetice, tranziia SYMBOL 115 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 115 \f "Symbol"* necesit o energie considerabil pentru a avea loc, energie situat n domeniul ultraviolet de vid (SYMBOL 108 \f "Symbol" SYMBOL 60 \f "Symbol" 200 nm), domeniu greu accesibil din punct de vedere experimental.

Tranziiile nSYMBOL 174 \f "Symbol"

SYMBOL 115 \f "Symbol"* sunt caracteristice substanelor organice saturate care conin n molecul heteroatomi cu perechi de electroni neparticipani, ca O, S, N, halogeni. Energiile implicate n aceste tranziii sunt mai mici dect cele corespunztoare tranziiilor SYMBOL 115 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 115 \f "Symbol"* i n consecin, benzile de absorbie apar n spectru, la valori mai mari ale lungimilor de und.

Tranziiile SYMBOL 112 \f "Symbol" SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 112 \f "Symbol"* sunt caracteristice compuilor care conin n molecul cromofori cu legturi duble omogene (SYMBOL 62 \f "Symbol"C=CSYMBOL 60 \f "Symbol", -N=N-) sau heterogene (-N=O, SYMBOL 62 \f "Symbol"C=O) i se datoreaz trecerii unui electron SYMBOL 112 \f "Symbol" din orbitalul de legtur, ntr-un orbital SYMBOL 112 \f "Symbol"* de antilegtur, aparinnd strii excitate. Tranziia n SYMBOL 174 \f "Symbol" SYMBOL 112 \f "Symbol"* este caracteristic substanelor care conin n molecul legturi duble heterogene (C=O, C=N, C=S, N=O). Pregtirea probelor

n general, se nregistreaz spectre UV-VIS pentru probe aduse n soluie. O importan deosebit prezint concentraia analitului i natura solventului. Astfel, concentraia analitului n soluia supus determinrii spectrofotometrice trebuie astfel aleas nct absorbana s se ncadreze n intervalul 0,2-0,7. Practic, pe baza naturii cromoforului i dac se cunosc valoarea aproximativ a coeficientului molar de absorbie (() i grosimea stratului absorbant (a cuvei), se aplic legea Bouguer-Lambert-Beer care permite calcularea domeniului de concentraii pentru care absorbana este cuprins n intervalul numeric menionat. Astfel, pentru compui cu ( ( 10000 l(mol-1(cm-1, concentraia trebuie aleas n jurul valorii de 4(10-5 mol/l, iar pentru compui cu ( ( 100 l(mol-1(cm-1, concentraia trebuie s fie mai mare, n jurul valorii de 10-2 mol/l. Soluiile de prob trebuie s fie perfect limpezi iar solventul trebuie s fie transparent adic s nu absoarb n regiunea n care se nregistreaz spectrul soluiei de analit. Pentru domeniul vizibil se poate folosi orice solvent incolor. n ultraviolet, cei mai utilizai solveni sunt cei care conin legturi de tip (, ca de exemplu hidrocarburile saturate sau alcooli. Solvenii trebuie s fie de nalt puritate, pe ale cror ambalaje este scris pentru spectroscopie. Soluia supus analizei spectrale se prepar prin cntrirea la balana analitic a unei cantiti de substan ce se dizolv ntr-un anumit solvent i apoi se aduce la balon cotat de o anumit capacitate, cu acelai solvent. Pentru efectuarea determinrii spectrometrice, ntr-una din cuve se introduce soluie de prob, n cealalt, solvent. n general, coeficienii molari de absorbie corespunztori maximelor benzilor spectrale sunt mari, motiv pentru care se nregistreaz spectre pentru soluii diluate.Reprezentarea spectrelor

Spectrele de absorbie molecular n UV-VIS se reprezint n coordonate A = f((), lungimea de und fiind msurat n nanometri.

Spectrometria de absorbie molecular n UV-VIS poate fi folosit att n analiza calitativ dar mai ales n analiza cantitativ.

Analiza cantitativ

Aa cum s-a artat n capitolul B1.1.2, n spectrometria de absorbie molecular n domeniul vizibil i ultraviolet, ca i n spectrometria de absorbie atomic, analiza cantitativ se face pe baza legii Bouguer-Lambert-Beer, exprimat prin relaia:

A = lg = - lg T = SYMBOL 101 \f "Symbol"(c(l

(B7)

unde A=absorbana; Io=intensitatea radiaiei incidente; IT=intensitatea radiaiei transmise; T=transmitana; l=grosimea stratului absorbant (cm); c=concentraia soluiei absorbante (moli/l); SYMBOL 101 \f "Symbol"=coeficient molar de absorbie ori de extincie (l(mol-1(cm-1). Transmitana poate lua valori cuprinse ntre 0 i 1. Dac se exprim n procente, T% variaz ntre 0 i 100. n acest al doilea caz, A = 2 - lgT%. Conform relaiei iniiale dintre absorban i transmitan, absorbana (A) poate varia de la zero (T = 100%) la infinit (T = 0%). Relaiile ntre absorban, transmitan i concentraie, la o anumit lungime de und, sunt ilustrate n figura B26.

Fig. B26. Reprezentarea absorbanei i a transmitanei n funcie de concentraie

Analiza cantitativ printr-o metod spectrometric presupune parcurgerea urmtoarelor etape:

1. Trasarea spectrului de absorbie al substanei de determinat, pentru a stabili lungimea de und (SYMBOL 108 \f "Symbol"max) la care aceasta prezint absorbana maxim (fig. B27).

2. Prepararea unei serii de soluii etalon ce conin cantiti cunoscute din substana de determinat.

3. Msurarea absorbanei fiecrei soluii etalon, la SYMBOL 108 \f "Symbol"max.

4. Reprezentarea grafic a absorbanei ASYMBOL 108 \f "Symbol"max, a soluiilor etalon n funcie de concentraia acestora, cu obinerea dreptei de etalonare (fig. B28).

5. Msurarea absorbanei probei de analizat (Ax); pentru a-i afla concentraia (cx), se extrapoleaz valoarea absorbanei sale pe dreapta de etalonare (fig. B28).

De menionat c, n etapa a doua a determinrii cantitative, se verific i valabilitatea legii Bouguer-Lambert-Beer, adic liniaritatea dreptei obinut prin reprezentarea grafic a relaiei A = f(c), cnd dreapta trece prin origine. Prin stabilirea domeniului de liniaritate al dreptei de etalonare se stabilete n mod implicit i domeniul de concentraii optim pentru efectuarea determinrilor cantitative.

Abaterile de la aceast lege, care se manifest prin lipsa unei relaii liniare ntre absorban i concentraie, pot fi de natur chimic sau instrumental.

Abaterile de natur chimic se datoreaz transformrilor pe care le poate suferi substana de determinat n soluie, n urma unor fenomene de disociere, asociere, formare de compleci, polimerizare.

Abaterile de natur instrumental pot fi reprezentate de : variaii ale sursei de radiaii, variaii ale drumului optic (cuvele n care s-au pus proba de analizat i respectiv proba martor nu au aceeai grosime). Abateri instrumentale provin i de la faptul c nu se utilizeaz o radiaie strict monocromatic n efectuarea determinrilor, aa cum s-a avut n vedere la deducerea legii Bouguer-Lambert-Beer; aceasta se datoreaz imposibilitii de a separa o radiaie perfect mono-cromatic dintr-o surs continu de radiaii. Abaterile de la legea Bouguer-Lambert-Beer pot fi pozitive sau negative (fig. B29).

Fig. B27. Spectrul de absorbie molecular A = f(SYMBOL 108 \f "Symbol") Fig. B28. Curba de etalonare

A = f(c)Fig. B29. Abateri de la legea Bouguer-Lambert-Beer

a - abatere pozitiv;

b - abatere negativ.

S-a dedus c eroarea determinrilor spectrofotometrice este minim atunci cnd valoarea absorbanei msurate este cuprins n intervalul 0,2-0,8. n general, concentraia minim care poate fi determinat spectrofotometric este de 0,1 g analit/g de prob, respectiv, 0,1 (g/ml.

Tehnici de lucru

Sensibilitatea unei metode spectrofotometrice depinde de condiiile n care se efectueaz determinrile. Astfel, prin studii preliminare, se stabilesc parametrii analitici care s asigure obinerea unor valori optime ale absorbanei. Aceti parametri sunt: pH-ul, tria ionic, natura solventului, temperatura, ordinea de adugare a reactivilor, influena altor specii chimice existente n prob alturi de analit, stabilitatea n timp a probei pentru a alege timpul dup care s se efectueze msurarea absorbanei. n general, determinrile se efectueaz pe probe aduse n soluie. Solvenii utilizai trebuie s fie transpareni n domeniul de lucru din UV-VIS. Pentru domeniul vizibil, se poate folosi orice solvent incolor; pentru domeniul ultraviolet, se folosesc solveni care au n structura lor doar legturi de tip (, de exemplu, alcool sau hidrocarburi saturate. Prin spectrometria de absorbie molecular n UV-VIS, pot fi analizai att compui de natur organic ct i anorganic. Pentru efectuarea determinrilor cantitative, se poate alege una din urmtoarele variante de lucru:a) msurarea direct a absorbanei probei, dac aceasta are un spectru specific n UV i / sau vizibil iar valoarea absorbtivitii molare este suficient de mare;

b) efectuarea unei derivatizri, adic transformarea analitului, printr-o reacie chimic, ntr-un produs de reacie care s poat fi determinat spectrofotometric.

Exemple de tehnici de lucru

Titrarea spectrofotometric. Reacia de derivatizare poate fi folosit pentru determinri cantitative prin titrare spectrofotometric. Metoda const n urmrirea variaiei absorbanei unei soluii n funcie de volumul de titrant adugat. Titrarea se poate efectua doar dac analitul, titrantul sau produsul de reacie dintre titrant i analit prezint proprieti absorbante caracteristice. Curba de titrare se obine prin reprezentarea grafic a absorbanei n funcie de volumul de titrant adugat i const din dou segmente de dreapt; punctul lor de intersecie corespunde volumului la echivalen. Se consider o reacie general, de forma: B + C ( Dunde B = specia titrat; C = titrant; D = produs de reacie rezultat n urma titrrii. Aspectul curbelor de titrare spectrofotometric, n funcie de proprietile absorbante ale speciilor B, C i D, este prezentat n figura B30.

Fig. B30. Forma curbelor de titrare spectrofotometric

a-absoarbe doar C; b-absoarbe doar B; c-absoarbe doar D; d-absorb B i C; e-absorb C i D dar absorbtivitatea molar a lui D este mai mare dect cea a lui C; f-absorb C i D dar absorbtivitatea molar a lui C este mai mare dect cea a lui D.

Pentru a putea efectua o titrare spectrofotometric, trebuie s se traseze n prealabil spectrul speciei absorbante, pentru a se stabili lungimea de und la care aceasta prezint absorbana maxim. De asemenea, trebuie s se verifice domeniul de concentraii pentru care se respect legea Bouguer-Lambert-Beer. n acelai timp, pentru o mai mare exactitate a determinrilor, se poate face o corecie a absorbanei msurate, innd seama de diluarea soluiei de prob la adugarea fiecrei poriuni de titrant adugat.

Tehnici de lucru pentru determinarea cantitativ a unor componeni aflai n amestec

n funcie de proprietile spectrale ale componenilor din amestec, se disting urmtoarele situaii:a) Componenii din prob au spectre de absorbie distincte (care nu se suprapun). n astfel de cazuri, se alege din banda spectral a fiecrui component, lungimea de und la care absorbana acestuia este maxim; apoi, se aplic metoda dreptei de etalonare i se reprezent grafic funcia ASYMBOL 108 \f "Symbol"max = f(c).

b) Spectrele de absorbie molecular se suprapun parial. n acest caz, pentru efectuarea determinrilor cantitative, se poate folosi una din urmtoarele metode: b1) Metoda bazat pe aditivitatea absorbanei; b2) Metoda spectrometriei derivate.

b1) Metoda spectrofotometric bazat pe aditivitatea absorbaneiAbsorbana este o mrime aditiv, adic la o anumit lungime de und, absorbana unui amestec este egal cu suma absorbanelor tuturor componenilor amestecului la acea lungime de und.

De exemplu, n cazul unui amestec binar, metoda const n trasarea spectrelor de absorbie molecular a soluiilor componenilor individuali (ale cror concentraii sunt exact cunoscute) i a amestecului, preparat din volume ale celor doi componeni (1) i (2), exact msurate (fig. B31). Se aleg apoi, dou lungimi de und la care unul din componeni prezint absorbana maxim iar cellalt, absorbana minim i invers. Apoi, se aplic spectrului corespunztor amestecului, regula aditivitii absorbanelor, la fiecare din cele dou lungimi de und alese (1 i (2. Astfel, se obine un sistem de dou ecuaii cu dou necunoscute c1 i c2.

Fig. B31. Spectrele de absorbie molecular a doi compui (1) i (2) i a amestecului lor (3)

( (B10)

(B11)

i = absorbanele amestecului la (1 i respectiv (2. i = coeficienii molari de absorbie ai componenilor (1) i (2) la (1. i = coeficienii molari de absorbie ai componenilor (1) i (2) la (2. Valorile absorbtivitii molare se obin din spectrele nregistrate pentru soluiile celor doi componeni, de concentraie cunoscut, din relaia Bouguer-Lambert-Beer:

A = ((c(l ( ( = A/(c(l)

c1 i c2 = concentraiile celor doi componeni din amestec, exprimate n moli/l; l = grosimea stratului absorbant, exprimat n cm; n general, se folosesc cuve cu grosimea de 1 cm, astfel c, prin rezolvarea sistemului de ecuaii, se obin concentraiile c1 i c2, prin aplicarea formulelor B10 i B11.Spectrometria derivat. Aceast tehnic utilizeaz curbele obinute prin derivarea spectrului iniial al unui compus, prin intermediul unor procedee electronice sau matematice. Programul de calcul existent n memoria computerului la care este cuplat spectrometrul, permite transformarea direct a spectrului nregistrat n coordonate A = f((), n derivatele sale de ordinele 1, 2 ,3 sau 4 (fig. B32). Astfel, spectrele derivate corespunztoare sunt n coordonate: dA/d( = f((); d2A/d(2 = f(();d3A/d(3 = f(() i respectiv, d4A/d(4 = f(().

Spectrele derivate permit determinarea a dou sau mai multe specii care au benzi spectrale cu maxime apropiate (care practic se suprapun), dar care prin derivare duc la obinerea de maxime distincte. n figura B33a, sunt prezentate spectrele suprapuse a doi compui. Se observ c benzile lor spectrale se suprapun, mpiedicnd determinarea lor din amestec. Dac se procedeaz la transformarea spectrelor individuale n derivate de ordinul I (fig. B33b), se observ c exist cte o lungime de und ((1 i (2) la care fiecare din cei doi componeni dau semnal analitic fr ca cellalt s interfere.

Fig. B33. Spectrele de absorbie molecular (a) i spectrele derivate de ordinul I (b), pentru doi compui

Exerciii

1. S se explice i s se exemplifice tipurile de tranziii care apar n moleculele organice, n urma absorbiei de radiaii din domeniul UV-VIS.

2. S se explice urmtorii termeni utilizai n spectrometria de absorbie molecular n UV-VIS: deplasare batocrom i hipsocrom, efect hipo i hipercromic. Dai exemple care s ilustreze aceste efecte.

3. Explicai diferena dintre alura unui spectru IR i cea a unui spectru UV-VIS.

4. S se descrie efectele spectrale provocate de adugarea unui cromofor ntr-o molecul.

5. Enunai legea Bouguer-Lambert-Beer i artai care termen al acesteia d msura sensibilitii unei metode de analiz prin spectrometrie de absorbie molecular n UV-VIS.

6. De ce se folosete metoda complexrii pentru determinarea cantitativ a unor ioni metalici prin spectrometrie de absorbie molecular n UV-VIS?

7. Ce condiii trebuie s ndeplineasc o combinaie complex pentru a fi utilizat la determinarea cantitativ a unui ion metalic?

8. Cum se procedeaz n cazul unei soluii de prob a crei absorban este prea mare?

9. Ce tehnici de lucru se pot utiliza n spectrometria de absorbie molecular n UV-VIS?

10. Ce factori mresc sensibilitatea unei metode de analiz prin spectrometria UV-VIS?

Probleme

1. O prob de 1,0000 g dintr-un minereu ce conine un compus al fierului a fost dizolvat n HNO3 la fierbere i diluat la 100 ml cu ap distilat. Din aceast soluie, o cot parte de 0,1 ml s-a pipetat ntr-un balon cotat de 25 ml, la care s-au adugat 1 ml acid sulfosalicilic (ASS) 20% i 10 ml tampon acid acetic-acetat de amoniu (pH=5), dup care s-a adus la semn cu ap distilat. Utiliznd cuve de 1 cm, s-a msurat absorbana complexului Fe(III):ASS la SYMBOL 108 \f "Symbol" = 460 nm, fa de prob martor. Prin reprezentarea funciei A = f(conc.), pentru soluiile etalon, s-a obinut ecuaia dreptei de etalonare. Valoarea absorbanei pentru proba de analizat s-a introdus n ecuaia dreptei. Astfel, concentraia soluiei supus analizei s-a gsit a fi de 2 SYMBOL 109 \f "Symbol"g/ml. S se calculeze concentraia fierului din proba de minereu, exprimat n mg Fe(III)/g.

R: 50 mg Fe(III)/g.

2. O soluie 5(10-5 M a unui compus prezint absorban n ultraviolet iar A(max = 0,55. S se calculeze absorbtivitatea molar a compusului, dac grosimea stratului absorbant este de 10 mm. Din valoarea coeficientului molar de absorbie s se arate dac acest compus poate fi determinat cantitativ prin spectrometrie de absorbie molecular n UV.

R: SYMBOL 101 \f "Symbol" = 11000 l(mol-1(cm-1.

3. Care este absorbtivitatea molar a unui compus cu M = 192 dac o soluie 0,015% are transmitana 27% atunci cnd grosimea stratului absorbant este de 1 cm ? Se consider densitatea soluiei ( = 1 g/ml.

R: SYMBOL 101 \f "Symbol" = 729,6 l(mol-1(cm-1. 4. Un compus solubil MX+ disociaz conform echilibrului: MX+ SYMBOL 219 \f "Symbol" M+ + X. La 560 nm, ionul metalic M+ i ligandul X nu absorb dar complexul MX+ prezint absorban. O soluie 2,10(10-4M are A560 nm = 0,481, folosind o cuv cu l = 1 cm. S-a preparat un amestec din 10 ml de soluie M+ 1,28(10-3M i 10 ml soluie de ligand (X) 1,31(10-3M, diluat la balon cotat de 100 ml cu ap distilat.

tiind c aceast soluie are A560 nm = 0,278, s se calculeze constanta de formare a complexului.

R: K = 1,916(106.Preparatele farmaceutice conin principii active n cantiti bine determinate. Concentraii mai mare ale acestora pot fi nocive pentru organismul uman. De aceea, se impune un control riguros pentru a verifica dac, dup obinerea lor, medicamentele conin dozele de principii active declarate.

5. O soluie de clorhidrat de procain de 10 mg/l are A290 nm = 0,65. Ce concentraie (exprimat n moli/l) are soluia a crei absorban este A290 nm = 0,93. S se calculeze absorbtivitatea molar la SYMBOL 108 \f "Symbol" = 290 nm, tiind c masa molecular a clorhidratului de procain este 272,8. Pentru determinare s-au folosit cuve cu l = 1cm.

R: c = 0,515(10-4M; SYMBOL 101 \f "Symbol" = 17700 l(mol-1(cm-1.

6. Tabletele de fenilbutazon trebuie s conin 100 mg de medicament/tablet. S-au cntrit 30 de tablete (6,3030) care s-au sfrmat i mojarat. O poriune de 0,2101 g a fost extras cu alcool, filtrat iar filtratul a fost diluat cu alcool la 100 ml. Din aceast soluie s-a luat o cot parte de 0,5 ml care s-a diluat la 50 ml cu NaOH 0,1N. Absorbana acestei soluii, introdus n cuv de 1 cm a fost A = 0,622. tiind c SYMBOL 101 \f "Symbol" = 66 l/g(cm, s se calculeze cantitatea medie de fenilbutazon existent ntr-o tablet i s se precizeze dac aceast valoare se ncadreaz n valoarea prevzut.

R: 94 mg/tablet.Hiper-cromic

Hipo-

Bato-

Hipso-

A, (max.

0,4

0.2

0

Conc., moli/l

T,%

100

80

60

40

20

0

Conc., moli/l

A

Amax

(max (, nm

cx

0,4

0.2

0

Conc., moli/l

A

V

V

V

V

V

A

A

A

A

A

a b c

d e f

(, nm

d4A/d(4

d2A/d(2

d3A/d(3

(, nm

dA/d(

A

A

a

c

e

b

d

f

3

2

1

(1 (2 (, nm

A

(, nm

dA/d(

(, nm

a

b

(1

(2

Fig. B32. Forma curbelor

de absorbie

molecular derivat

(a,b)-spectre de absorbie;

spectre derivate de ordinul:

I (c); II (d); III (e); IV (f).

A

Ax

A, (max.

(, nm

A

A, (max.

Conc., moli/l

0,4

0.2

0

PAGE 8

_1404898338.unknown

_1404898718.unknown

_1404898821.unknown

_1404898822.unknown

_1404898820.unknown

_1404898443.unknown

_1404898450.unknown

_1404898349.unknown

_1404898246.unknown

_1404898267.unknown