396

Pneumologie

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

Utilitatea testelor imUnologice n diagnosticUl tUbercUlozei PUlmonare active

ioana ghigolea1, marina sPnU3, adrian-bogdan ghigolea4, monica PoP2

1Spitalul Judeean de Urgen Alba-Iulia2Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu Cluj-Napoca3USAMV Cluj-Napoca 4Centrul de Dializ NDC Alba-Iulia

Rezumat

Obiective. Evaluarea capacitii diagnostice a testului de transformare blastic, testului fagocitozei (testarea imunitii celulare) i testarea eliberrii IFN- (testarea imunitii umorale) n diagnosticul tuberculozei pulmonare active, comparndu-le cu frotiul BAAR.

Materiale i metod. S-a desfurat un studiu analitic, transversal, caz-martor de evaluare a unui test diagnostic (de faza II), n care au fost inclui 50 de pacieni internai n Spitalul de Pneumoftiziologie Cluj-Napoca.

Rezultate. Activitatea fagocitar este mai intens comparativ cu lotul martor la grupele de pacieni BK pozitiv i cu suspiciune radiologic. Variaia activitii fagocitare n timp este liniar pozitiv i semnificativ statistic la toate cele trei grupe studiate n analiz univariat i cu semnificaie statistic doar pentru lotul BK n analiz multivariat. n regresie logistic nu s-a putut dovedi existena unei legturi ntre activitatea fagocitar i diagnosticul de tuberculoz (TB) pulmonar activ confirmat prin examen bacterioscopic. Testul de transformare blastic demonstreaz rspuns maxim la lotul BK pozitiv, dar diferenele dintre loturile studiate nu sunt semnificative statistic, iar n regresie logistic relaia dintre examenul sputei i indicele de stimulare blastic este fr semnificaie statisic. Testul Quantiferon TB-Gold are valoare statistic redus comparativ cu testul standard n diagnosticul TB la pacienii cu boal activ, toi indicii de performan fiind slabi, astfel nct testul are calitate diagnostic aproape absent.

Concluzii. Noile teste investigate s-au dovedit inferioare examenului bacte-rioscopic i nu pot fi recomandate uzului clinic.

Cuvinte cheie: tuberculoz pulmonar, testul de transformare blastic, activitate fagocitar, Quantiferon TB-Gold.

UtIlIty oF IMMUNologICAl teStS FoR tHe DIAgNoSIS oF ACtIVe pUlMoNARy tUbeRCUloSIS

Abstract Objectives. To evaluate the diagnostic capabilities of the blast transformation

test, phagocityc test (cellular immunity tests) and IFN- release assay (humoral immunity test) in the diagnosis of active pulmonary tuberculosis, as compared to the bacterioscopic BAAR test.

Materials and methods. 50 patients were recruited from the Cluj-Napoca Pneumophtisiology Clinic. We ran an analytical, cross-sectional, case-control, phase II study.

Results. The phagocytic activity is higher in BK-positive and RX-positive subjects, compared to controls. The time variation of the phagocytic activity in

397

Cercetare clinic

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

Articol intrat la redacie n data de: 02.04.2012Primit sub form revizuit n data de: 03.05.2012Acceptat n data de: 11.05.2012 Adresa pentru coresponden: cpop@umfcluj.ro

introdUceren faa unui pacient cu suspiciune clinic i radio-

logic de tuberculoz pulmonar, diagnosticul este susinut de examenul bacterioscopic BK al sputei (frotiu BAAR). Diagnosticul de certitudine este precizat de rezultatul cultu-rii BK, la 2 luni. n acest interval tratamentul este administrat n lipsa certitudinii diagnostice, bazat pe experiena greu cuantificabil i reproductibil a clinicianului. Dezvoltarea unor metode de diagnostic bazate pe tehnici imunologice a fost posibil ca urmare a progresului de nelegere a fiziopatogeniei infeciei tuberculoase. Macrofagul i limfo-citul T ocup n continuare rolul central n patogenia infeciei tuberculoase, dar se descrie un ntreg sistem de interaciuni celulare (LT CD4+, LT CD8+, LT ) mediate umoral (IL-10, IL-12, IL-15, IL-18, TNF-, IL-1, IL-6, TGF-) [1,2].

testul de transformare blastic in vitro. Substan-ele mitogene alctuiesc un grup diversificat sub raportul provenienei (origine bacterian, vegetal sau animal) i al structurii chimice (proteine, glicoproteine, lipozaharide etc.). Ele pot stimula nespecific att limfocitele T, ct i B. Msurarea activrii limfocitelor T i/sau B in vitro reprezint o metod de apreciere a funcionalitii acestor celule [3]. Cu toate c mediul de cultur creeaz condiii artificiale i procesele vitale sunt oarecum modificate fa de cele care au loc in vivo, se consider c rezultatele sunt extrapolabile. Testul se poate efectua folosind probe de snge integral sau celule separate prin centrifugare, n gradient de densitate. Dup suspendarea celulelor n mediul de cultur i incubare timp de 24 - 48 - 72 de ore la 37C, se observ apariia blatilor n prima etap, iar ulterior numrul mare de mitoze. Procesul este nsoit de activare metabolic i creterea sintezei proteice, reflectate prin

utilizarea accentuat a aminoacizilor i consumul glucozei din mediu. Un rspuns cuantificabil fa de mitogeni n cultura de limfocite semnific prezena celulelor imunologic competente, respectiv existena unei reacii imune mediate celular [3].

testul de fagocitoz a particulelor de carbon. Fagocitoza reprezint unul din mecanismele de protecie de prim intervenie, cu nsemntate ndeosebi n prevenia bacteriozelor i a virozelor. n aceast funcie sunt active, alturi de granulocitele polimorfonucleare, i celulele mononucleare de tipul macrofagelor, circulante sau fixate n esuturi. Testarea capacitii funcionale a neutrofilelor, corelat cu alte teste de evaluare a imunodeficienelor, poate elucida suspiciunea de imunodeficit neutrofilic primar. Fagocitoza ca test funcional poate depista, n cazul unor deficite neutrofilice secundare, perturbri intervenite n diferite etape ale fagocitozei: chemotaxia, interaciunea cu particulele opsonizate, ingestia, dezvoltarea untului respirator, distrugerea i digerarea microorganismelor. Toate funciile depind de integritatea receptorilor de membran, astfel nct identificarea lor prin aplicarea anticorpilor monoclonali poate fi extrem de util. Fagocitele din sngele integral posed capacitatea de a ingera bacterii, dar i particule inerte (carbon). Reducerea cantitii de particule de carbon ntr-un amestec de snge integral i tu de China, evaluat spectrofotometric, ofer indicii asupra capacitii funcionale a fagocitelor circulante [4].

Infecie tuberculoas latent vs. activ. Dintre cei 30% de subieci infectai cu M. tuberculosis dup primoexpunere, 90% dezvolt infecie tuberculoas latent (ITBL). Aceasta este atribuit abilitii unice a M. tuberculosis de a persista perioade lungi de timp fr s fie recunoscut de sistemul imun uman. Indivizii cu ITBL sunt asimptomatici i non-contagioi. Cercetrile din ulti-mii ani n ceea ce privete tuberculoza s-au axat mai ales pe mbuntirea metodelor de diagnostic i pe lupta antituberculoas. S-au dezvoltat metode mai rapide i mai precise, laborioase, bazate pe tehnici imunologice de

univariate analysis, is linear - positive and statistically significant. In multivariate analysis it is statistically significant only for the BK-positive subjects. Furthermore, the logistic regression analysis showed no statistical significance for the phagocytic test in the diagnosis of active pulmonary TB.

The blast transformation test demonstrated a higher response in BK positive subjects, but no statistical difference between the BK, Rx or Cx positive patients. In logistic regression analysis, the blast transformation test was not statistically significant for the diagnosis of active pulmonary TB.

The statistical measures of the performance of the QTB-G test, compared to the standard test in the diagnosis of active pulonary TB, were below the threshold of statistical significance. The diagnostic power of the QTB-G test is limited for the diagnosis of active TB disease.

Conclusions. The statistical value of the new investigated tests is inferior to the bacterioscopic BAAR test and can not be recommanded for clinical use.

Keywords: pulmonary tuberculosis, blastic transformation test, phagocytic test, Quantiferon TB-Gold test.

398

Pneumologie

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

diagnostic a infeciei tuberculoase. Dintre acestea, testarea eliberrii IFN- s-a dovedit superioar (ca sensibilitate i specificitate) testrii cutanate, pe care o nlocuiete treptat. Inconvenientul major l constituie ns lipsa capacitii de discriminare ntre ITBL i TB pulmonar activ. n ultimii 2-3 ani a fost demonstrat utilitatea diagnostic a testrii eliberrii IFN- n TB pulmonar activ.

MAteRIAl I MetoDScopul lucrrii a fost evaluarea eliberrii IFN-,

activitii fagocitare i a transformrii blastice n precizarea diagnosticului de tuberculoz pulmonar. Studiul a inclus 50 de subieci, selectai din rndul bolnavilor internai n Spitalul de Pneumoftiziologie Cluj-Napoca, n perioada noiembrie 2010-ianuarie 2011, cu acordul Comisiei de etica medical a clinicii. Tipul studiului: experimental, transversal, caz-martor, de faza II, de evaluare a calitilor intrinseci ale testelor mai sus amintite comparndu-le cu testul standard: examenul bacteriologic BAAR al sputei. Subiecii au fost mprii n dou loturi: pacieni BK pozitivi (BK+) i pacieni BK negativi (la testul standard), ultimii mprii n pacieni cu suspiciune radiologic (RX+), respectiv clinic (CX+) de TB pulmonar. La toi cei 50 de subieci s-au efectuat: radiografie toracic, hemoleucogram, VSH, biochimie uzual, examen bacterioscopic specific i nespecific al sputei. Testele de transformare blastic i activitate fagocitar s-au efectuat n laboratorul USAMV Cluj-Napoca, iar testarea eliberrii IFN- n laboratorul Clinicii Medical III Cluj-Napoca.

testul de transformare blastic: sngele integral (0,7 ml) a fost diluat cu mediu RPMI 1640 (2,8 ml), cu adaos 1:5 de ser fetal de viel 5%; ajustarea pH-ului s-a fcut cu soluie steril de NaHCO3 5%. Sngele suspendat s-a repartizat n godeuri (200 l/godeu). S-au efectuat dou variante experimentale, testate n duplicat: M = martor netratat i Tu = tuberculin uman (25 l). Culturile au fost incubate 48 ore n atmosfer de 5% CO2, apoi s-a realizat o prob medie din duplicat, din care s-au prelevat 12,5 l, trecui ulterior n 2 ml de orto-toluidin. Eprubetele se menin 8 minute pe baie de ap la 100C, apoi se rcete brusc i se spectrofotometreaz la 610 nm. Pentru fiecare serie de probe se lucreaz n paralel o prob standard de glucoz (100 mg/dl) i o prob de mediu, folosind n loc de supernatant, mediul iniial (RPMI). n funcie de valorile glucozei, indicii de stimulare s-au calculat dup relaiile:

x 100

x 100

Activitatea fagocitar: sngele heparinat (0,5 ml) se repartizeaz n tuburi sterile. Se iau 2 variante pentru fiecare prob: snge (0,5 ml) + tu (1,5 l) i snge (0,5 ml) + tu (1,5 l) + TU (25 l). Din amestecul rezultat se iau 100 l i se trec n cte 2 ml ser fiziologic (momentul 0). Tuburile se incubeaz la 37C timp de 45, respectiv 60 de minute. Aceste cantiti vor fi trecute de fiecare dat n 2 ml de ser fiziologic sau tampon fosfat salin. n final, toate tuburile coninnd ser fiziologic + snge integral + tu sau ser fiziologic + snge + tu + TU vor fi centrifugate timp de 5 minute la 1500 rpm. Supernatantul se distribuie n godeuri (200 l/godeu). Se citesc densitile optice ale supernatantelor fa de ser fiziologic sau tampon fosfat salin la o lungime de und de 535 nm.

testarea eliberrii Interferon-: din snge integral prin metoda ELISA utiliznd testul Quanti-FERON TB-Gold (Cellestis Limited; Carnegie, Australia) (QFT-G).

Analiza statistic: s-au folosit programele Epi Info 7 i Excel 2007. S-au evaluat validitatea rezultatelor i corelaiile dintre valori folosind testele 2 i testul exact al lui Fischer, testul ANOVA, regresia liniar simpl, multipl i logistic, sensibilitatea, specificitatea, acurateea, rata probabilitii pozitive i rata probabilitii negative.

rezUltateVrsta celor 50 pacieni inclui n studiu a fost

cuprins n intervalul 19-81 ani, cu o medie de 56 de ani. Majoritatea subiecilor studiai au fost brbai (86% vs. 14% femei). n lotul pacienilor cu BK pozitiv au fost inclui 17 pacieni, exclusiv brbai. Repartiia disproporionat se pstreaz i la pacienii BK negativ: 80% brbai, 20% femei.

Activitatea fagocitarActivitatea fagocitar este cuantificat numeric ca

uniti de densitate optic rezultate n urma testului de nglobare a particulelor de carbonin vitro (tabelul I).

La grupele de pacieni BK+ i cu RX+, reacia spontan la tuberculina de tip uman este mai intens

tabelul I. Valorile testului de nglobare a particulelor de carbon in vitro la pacienii studiai.

Lot Parametru/Timp (min.) Martor tuberculina Uman0 45 60 0 45 60bK+ medie 0.1051 0.1050 0.1103 0.2480 0.2290 0.2449Deviaia standard 0.0418 0.0375 0.0424 0.0796 0.0805 0.0892

bK-rx+ medie 0.0723 0.0815 0.0795 0.1520 0.1412 0.1540Deviaia standard 0.0270 0.0329 0.0328 0.0544 0.0556 0.0687cx+ medie 0.2507 0.1967 0.1995 0.2310 0.2533 0.2323Deviaia standard 0.0800 0.0827 0.0844 0.0617 0.0714 0.0633

399

Cercetare clinic

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

comparativ cu lotul martor, iar n timp scade la 45 de minute i revine la 60 de minute. Pentru lotul CX+, reacia la tuberculin pare asemntoare martorului, iar variaia n timp este invers comparativ cu celelalte loturi: cretere la 45 i revenire la 60 minute.

Variaia valorilor activitii fagocitare la timpii de lucru 0, 45 i 60 de minute pare s urmeze o tendin cresctoare la toate cele trei loturi, comparativ cu lotul martor. Distribuia norului de puncte pe graficul de tip scatter pare s se apropie de dreapta de regresie pentru toate loturile studiate. Coeficienii de regresie cei mai buni se observ ns la compararea lotului BK+ cu lotul martor (tabelul II).

tabelul II. Coeficienii de regresie ai activitii fagocitare comparativ cu martorul.

R2 / Timp/Lot bK+ rx cx0 0,7390 0,2707 0,311845 0,7777 0,2123 0,651460 0,8072 0,3412 0,6705

n cadrul fiecrui lot studiat pentru variaia valorilor activitii fagocitare, pe toate intervalele de timp: 045, 4560 i 060 minute, se observ o tendin cresctoare i o posibil legtur liniar de tip pozitiv. Distribuia norului de puncte se apropie foarte mult de dreapta de regresie la toate cele trei loturi, ceea ce ne ndreptete s considerm relaia ntre activitatea fagocitar i timp ca fiind liniar (toate valorile R2>0,93). Pentru evaluarea existenei acestei legturi s-a recurs la regresie liniar simpl i multipl. Pentru cuantificarea legturii dintre activitatea fagocitar i timp s-au calculat coeficienii de corelaie, respectiv de determinare. n regresie liniar simpl, modelul de regresie este bun pentru toate loturile studiate (p0,9, tabelul III). n regresie multipl se pstreaz semnificative statistic doar legturile ntre activitatea fagocitar la 45 minute (p=0,018) pentru pacienii BK+ i la 45 (p=0,04), respectiv 60 de minute (p=0,01) pentru lotul CX+ (tabelul III). Coeficienii de determinare sunt foarte buni pentru regresia multipl (adjusted R2>0,9) pentru toate loturile studiate.

tabelul III. Rezultatul testului ANOVA pentru activitatea fagocitar.

Parametrii statistici/Lot studiat bK+ rx cxRegresie liniar simpl (multiple r) 0.9965 0.9961 0.9975

Regresie multipl p (045) 0.0185 0.0862 0.0408p (060) 0.1706 0.2090 0.0107Coeficieni de determinare (adjusted R2) 0.9931 0.9922 0.9949

Putem concluziona c variaiile activitii fagocitare n timp sunt liniarpozitive i semnificative statistic la toate cele trei grupe studiate n analiz univariat, dar fr semnificaie statistic n analiz multivariat.

Pentru analiza performanei testului activitii fago-citare n diagnosticul TB pulmonare active s-a practicat regresia logistic. Au fost comparate rezultatele testului de nglobare a particulelor de carbonin vitro ale ntregului lot (tabelul I) cu testul standard, examenul bacterioscopic al sputei (tabelul III). Modelul regresiei logistice nu pare s aib semnificaie statistic (p>0,05), astfel nct nu se poate dovedi o legtur ntre activitatea fagocitar i diagnosticul de TB pulmonar activ (tabelul IV) la nici unul dintre timpii analizai. n aceste condiii, analiza ratei ansei a fost nerelevant.

tabelul IV. Rezultatul regresiei logistice pentru activitatea fagocitar.

Parametrii statistici/Activitate fagocitar

0 45 60

Chi squared 0.5139 0.1478 0.3449p 0.4735 0.7006 0.5570odds Ratio 6.6696 2.6342 4.0145

testul de transformare blasticRezultatele testului de transformare blastic la

loturile experimentale se gsesc n tabelul V.

tabelul V. Statistic descriptiv: testul de transformare blastic la cele trei loturi.

Parametrii statistici bK+ rx+ cx+mean 61,2081 53,0031 55,4815Standard error 3,7037 2,7178 2,6576Standard Deviation 14,3443 10,5262 10,9574

Confidence level (95,0%) 7,9436 5,8292 5,6337

Indicii de stimulare la testul de transformare blastic pentru testarea cu tuberculin uman demonstreaz un rspuns maxim la lotul BK+ (61,208), urmat de lotul CX+ (55,482) i lotul RX+ (53,003). Valorile indicilor de blastizare, comparativ cu martorul, pe cele trei loturi par s urmeze o tendin cresctoare. Distribuia norului de puncte pe graficul de tip scatter pare s se apropie de dreapta de regresie pentru toate loturile studiate, iar coeficienii de regresie sunt

400

Pneumologie

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

tabelul VI. Rezultatul testului ANOVA pentru testul de transformare blastic comparativ cu martorul. Parametrii statistici/Lot studiat

bK+ rx cxmultiple r 0.3462 0.2810 0.5304p 0.2062 0.3103 0.0285

n regresie liniar simpl modelul de regresie este bun doar pentru lotul CX+ (p0,5), gradul de corelaie i determinare neavnd semnificaie statistic n aceast caz.

Pentru compararea capacitii diagnostice a testului de transformare blastic s-a recurs la regresia logistic, testul standard fiind examenul microscopic al sputei. n regresie logistic relaia dintre examenul sputei i indicele de stimulare blastic nu are semnificaie statisic, astfel nct rata riscului este nerelevant (tabelul VIII).

tabelul VIII. Regresia logistic pentru testul de transformare blastic. Parametrii statistici bK/isChi squared 3.3930p 0.0779odds Ratio 1.0509

testul Quantiferontb-goldn cazul testului QFT-G, la compararea cu microsopia

direct (testul standard) s-au adugat i testele clasice: RX i IDR. Rezultatele testelor 2 necorectat i Fischer (necesar n compararea BKIDR datorit numrului redus de pacieni inclui) sunt semnificative statistic doar pentru aprecierea capacitii diagnostice a Rx (F = 0,00012, 2 = 0,00027), comparativ cu testul standard (tabelul IX).

tabelul IX. Calculul semnificaiei statistice a corelaiei dintre testul standard i QTB-G, Rx i IDR.

Parametrii statistici/Test studiat

bK/Qtb-g bK/idr bK/rx

F 0,58 0,25 0,0001185 uncorrected 0,93 0,24 0,000271

Testul QFT-G are valoare statistic redus comparativ cu testul standard n diagnosticul TB la pacienii cu boal activ (tabelul X). IDR are sensibilitate de 100%, dar specificitate redus pentru diagnosticul TB active.

tabel X. Valoarea indicilor de performan ai QTB-G, IDR i Rx n TB pulmonar activ confirmat prin microscopie.

Indici de performan/Test studiat Qtbg idr rxSensibilitatea 53 % 86 % 100 %Specificitatea 48 % 39 % 52 %Valoarea predictiv pozitiv 1,02 0,11 0,16Valoarea predictiv negativ 0,92 0,97 1

O oarecare sensibilitate pentru identificarea TB active o are i Rx (Se = 61%). Toi ceilali indici de performan ai testelor diagnostice sunt slabi, astfel nct testele evaluate au o calitate diagnostic aproape absent.

DISCUIIActivitatea fagocitar reprezint unul dintre mijloa-

cele de protecie celular nespecific antimicrobian. Celulele implicate intervin n epurarea virusurilor, bacte-riilor sau paraziilor. Activarea sistemului macrofagic este prima linie a aprrii imune. Finalitatea acestui proces este fagocitoza i ndeprtarea microbilor. n cazul micobacteriilor, particularitile peretelui celular cero-li-pidic inhib diapedeza i iniierea procesului de fagocitoz. Activitatea fagocitar, msurat ca reacie la tuberculina de tip uman, este diferit la cele trei loturi. Rezultatele obinute relev o reactivitate spontan maxim (timpul 0) a fagocitelor netratate cu tuberculin la pacienii care au rspuns pozitiv la testul bacterioscopic, dar care scade n timp (valori minime la 45 minute). Deoarece infecia tuberculoas reduce activitatea fagocitar, reactivitatea diferit la pacienii cu tuberculoz activ const n faptul c fagocitele sunt deja sensibilizate de M. Tuberculosis. Reacia imun fa de tuberculin nu mai este, n aceast situaie, la fel de intens. Activitatea fagocitar pare s fie un bun indicator al proceselor patogenetice din TB pulmonar, dar calitile sale diagnostice sunt inferioare examenului microscopic al sputei n cazul TB pulmonare active.

Rezultatele testului de transformare blastic a limfocitelor n vitro au demonstrat reactivitatea celular spontan crescut la pacienii BK+ fa de media loturilor CX+, respectiv RX+. Indicii de blastizare n prezena tuberculinei umane sunt mai mari la lotul pozitiv i de o amplitudine uor diminuat la loturile RX+ i CX+. Statistic nu s-a identificat existena unei relaii ntre indicii de stimulare la cele trei loturi i testul standard.

Toi indicii de performan ai testului QTF-Gn diagnosticul TB pulmonare active sunt inferiori exame-nului bacterioscopic al sputei. Deoarece vechimea diag-nosticului i tratamentului TB pulmonar activ sunt diferite la pacienii selectai, nivelul IFN- poate fi

401

Cercetare clinic

Clujul Medical 2012 Vol. 85 - nr. 3

un factor de confuzie pentru calitatea diagnosticului. Comparativ cu metodele clasice, sensibilitatea IDR i RX sunt superioare QFT-G pentru diagnosticul TB pulmonare active. Specificitatea lor este ns redus, fr semnificaie statistic. Datorit ratei ridicate a rezultatelor fals pozitive, QFT-G a nlocuit IDR n diagnosticul ITBL. Pentru loturile RX+ i CX+ procentul ITBL este 58% conform IDR i de doar 42% conform QTF-G. Diferena de 16% ar putea reprezenta cazurile fals pozitive.

conclUziiPrezena micobacteriilor n organismele cu boal

evolutiv reduce capacitatea fagocitar spontan a macrofagelor.

Testatea global a indicilor de stimulare ai limfocitelor este probabil nepotrivit unui diagnostic precis, lund n considerare complexitatea interaciunilor intercelulare i umorale ce au loc n cursul bolii.

La pacienii cu boal activ confirmat prin micro-scopie, QTBG nu poate fi folosit n locul testului standard sau a testelor clasice, IDR sau Rx. Puterea diagnostic redus a QTB-G ar trebui interpretat cu atenie n contextul asocierii unor factori perturbatori precum: stadiul bolii tuberculoase, statusul nutriional, deficite imunologice altele dect coinfecia HIV (criteriu de excludere pentru studiul de fa). Astfel n intervalul pn la confirmarea

infeciei TB prin cultur, la 2 luni, nu este indicat orientarea terapiei n funcie de rezultatul QTB-G. Examenul microscopic BAAR al sputei i radiografia to-racic rmn metodele principale de susinere a diagnos-ticului TB pulmonare active pn la confirmarea bacteriologic.

n concluzie, nici unul dinte testele studiate nu se ridic la calitile testului standard, examenul bacterioscopic al sputei, astfel nct nu pot fi recomandate pentru diagnosticul bolii TB pulmonare active.

bibliografie1. Flyn JL. Major MHC I-restricted T cells are required for resistance to M.tuberculosis infection. Proc Natl Acad Sci USA. 1992; 89:12013-12017.2. Fulton SA. Interleukin-12 production by human monocytes infected with M.tuberculosis: role of phagocytosis. Infection and Immunity, 1996; 64(7):2523-25313. Alito A, McNair J, Girvin RM, et al. Identification of Mycobacterium bovis antigens by analysis of bovine T-cell responses after infection with a virulent strain. Braz J Med Biol Res, 2003; 36(11):1523-1533.4. Fietta A, Francioli C, Gialdroni G. Mycobacterial lipoarabinomannan affects human polymorphonuclear and mononuclear phagocyte functions differently. Haematologica, 2000; 85(1):11-18.