Post on 10-Jan-2020
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Contractul nr: 334/01.10.2015 Data începerii: 01.10.2015 Data finalizării: 31.10.2018
Denumirea proiectului:
ADER 3.3.4 - ”Elaborarea tehnologiilor inovative de cultivare a două specii valoroase
de ciuperci - Pleurotus eryngii şi Lentinus edodes, pe substraturi obţinute din
deşeuri/subproduse agroforestiere regenerabile”
Obiectivul proiectului:
Diversificarea sortimentului de ciuperci cultivate prin introducerea în cultură controlată a
speciilor P.eryngii şi L.edodes, cu valorificarea ecoeficientă a unor substraturi naturale din
deşeuri/subproduse agroforestiere regenerabile
Director de proiect: Dr. biol. Zăgrean Alexandru Valentin
Tel: 0744.260.103; 0725.571.479
E-mail: valentinzagrean@yahoo.com
CONTRACTOR: INSTITUTUL DE CERCETARE - DEZVOLTARE
PENTRU LEGUMICULTURĂ ŞI FLORICULTURĂ - VIDRA
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA I/2015
PARTENERI
Institutul de Cercetare-Dezvoltare pentru Legumicultură
şi Floricultură Vidra (ICDLF Vidra)
Centrul de Biochimie Aplicată şi Biotehnologie Bucureşti
(BIOTEHNOL)
C P
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei I:
”Obţinerea materialului biologic primar – izolate/suşe de P.eryngii şi L.edodes;
stabilirea protocoalelor de lucru pentru evaluarea, caracterizarea şi multiplicarea suşelor luate
în studiu”
ACTIVITĂŢI DESFĂŞURATE
► Inventarierea surselor de germoplasmă fungică -
spori, micelii, carpofori - din speciile P.eryngii şi
L.edodes şi realizarea unei colecţii în vederea
demarării cercetărilor
► Elaborarea modelului experimental privind
caracterizarea şi multiplicarea suşelor de P.eryngii şi
L.edodes după morfologia şi creşterea coloniilor
miceliene pe medii de laborator
► Actualizare pagină web (on line)
C P ► Elaborarea modelului experimental
pentru caracterizarea genetică şi
biochimică a materialului biologic primar
►Elaborarea modelului experimental
privind evaluarea activităţii
antimicrobiene a extractelor obţinute din
micelii/carpofori de P.eryngii şi L.edodes
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA I/2015
REZULTATE OBŢINUTE
CP Realizarea unei colecţii de germoplasmă fungică alcătuită din 8 suşe/izolate, 4 de
P.eryngii şi 4 de L.edodes, material biologic experimental;
Model experimental pentru caracterizarea miceliilor de P.eryngii şi L.edodes după
particularităţile de creştere pe medii de laborator: aspectul şi tipul coloniei, rata de
creştere hifală, cerinţe faţă de natura şi pH-ul mediului nutritiv şi temperatură
Realizarea obiectivelor de dotare cu echipamente, aparatură: centrala termică și
instalație încălzire pe lemne/brichete; hotă cu flux laminar; frigider; multifuncțional
printer/copiator/scanner; pHmetru; cântar; multitester Temp/CO2/UR; aragaz.
P1 Metode şi tehnici folosite pentru caracterizarea genetică (izolare şi analiză ADN,
RAPD) şi biochimică (activitate enzimatică, capacitate antioxidantă, conţinut în
fenoli totali) a materialului biologic – miceliu/ carpofori de P.eryngii şi L.edodes
Protocol pentru testarea activităţii antimicrobiene (drojdii şi bacterii patogene) a
extractelor din micelii şi ciuperci P.eryngii şi L.edodes
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA II/2016
PARTENERI
Institutul de Cercetare-Dezvoltare pentru Legumicultură şi
Floricultură Vidra (ICDLF Vidra)
Centrul de Biochimie Aplicată şi Biotehnologie Bucureşti
(BIOTEHNOL)
C P
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei II:
”Caracterizarea in vitro a miceliilor experimentale de P.eryngii şi L.edodes şi selectarea
suporturilor nutritive adecvate pentru propagarea şi multiplicarea lor”
ACTIVITĂŢI DESFĂŞURATE
Evaluarea caracteristicilor de creştere in vitro a
miceliilor experimentale de P.eryngii şi L.edodes pe
medii de laborator: medii agarizate, suport granulat
(boabe de cereale), suport lemnos (baghete, lemn
măcinat);
Diseminarea rezultatelor: elaborarea unei lucrări
ştiinţifice; actualizare pagina web
C P Caracterizarea genetică şi biochimică a
materialului biologic - miceliu şi carpofori
de P.eryngii şi L.edodes;
Testarea activităţii antimicrobiene a
miceliilor luate în studiu;
Diseminarea rezultatelor : participarea la
manifestări ştiinţifice din domeniile
specifice proiectului; elaborarea,
publicarea unei lucrări ştiinţifice
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA II/2016
REZULTATE OBŢINUTE
CP Miceliul suşelor de P. eryngii: tip predominant pufos, alb-lăptos, densitate medie-mare, dezvoltare
aeriană, compactizat ulterior; tendința de a forma striuri de creștere și picături de exudat celular;
decoloreaza mediul; dicariotic fertil cu anse în cârlig ; creștere rapidă
Miceliul suşelor de L.edodes: tip pâslos-rizomorf cu rețea fină, densitate medie-mică, dezvoltare
aeriană medie; striuri mai estompate, picături de exudat prezente, tendința de a forma timpuriu
primordii; dicariotic fertil cu anse „în cârlig”; creștere mai lentă decât tulpinile de P.eryngii
P.eryngii : tulpinile Pery-G și Pery-K pe mediu MEA cu pH 6,5 la 28-30°C - creșterea cea mai
rapidă de 4,83 mm/zi și, respectiv 4,15 mm/zi;
L.edodes: tulpinile Led-S și LeM-51 pe mediu MEA cu pH 6,0 la 28-30°C - creșterea cea mai
rapidă de 3,35 mm/zi și, respectiv 3,05 mm/zi;
P1 Caracterizarea genetică: izolare şi analiză ADN, RAPD - analizele moleculare bazate pe
amplificarea TBP-PCR, cu 2 perechi de primeri, au evidențiat similaritate ridicată între tulpinile
verificate, ceea ce denotă că ele aparțin aceleeași specii, Pleurotus eryngii;
Caracterizare biochimică: activitate enzimatică - lacaza; conținut de carbohidrați; capacitate
antioxidantă corelată cu conținutul de fenoli totali în extractele hidroalcoolice din biomasa de
miceliu/carpofori de P.eryngii şi L.edodes;
Testarea activităţii antimicrobiene (drojdii şi bacterii patogene) a extractelor din micelii şi
ciuperci P.eryngii şi L.edodes a relevat o activitate inhibitoare în special asupra bacteriilor Bacillus
subtilis subsp. Spizizinii, Escherichia coli și Staphylococcus aureus;
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA III/2016
PARTENERI
Institutul de Cercetare-Dezvoltare pentru Legumicultură şi
Floricultură Vidra (ICDLF Vidra)
Centrul de Biochimie Aplicată şi Biotehnologie Bucureşti
(BIOTEHNOL)
C P
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei III:
“Obţinerea inoculului şi a miceliului pentru însămânţare şi selectarea celor mai potrivite
variante de substrat lignocelulozic pentru cultivarea suşelor experimentale”
ACTIVITĂŢI DESFĂŞURATE
Pregătirea inoculului și a miceliului utilizat la însamantarea suşelor
experimentale în substratul de cultură: inocul și miceliu pe suport granulat
(cariopse de cereale), lemnos (baghete, rumegus) şi mixturi lignocelulozice;
Elaborarea modelului experimental privind stabilirea celor mai bune
variante de substrat obținut din materiale lignocelulozice regenerabile
pentru cultivarea ciupercilor P.eryngii și L.edodes;
Verificarea creşterii suşelor de P.eryngii si L.edodes pe substraturi din
materiale lignocelulozice regenerabile şi stabilirea celor mai bune variante
experimentale;
Diseminarea rezultatelor. participare la manifestări ştiinţifice; elaborare -
publicare 1 lucrare ştiinţifica; actualizare pagina web de proiect.
C P Activitatea 3.4.
Diseminarea
rezultatelor.
participare la
manifestări
ştiinţifice;
elaborare,
publicare 1 lucrare
ştiinţifică.
P 1
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA III/2016
REZULTATE OBŢINUTE
CP • Tulpinile selectate în vederea testării lor pe substraturi de cultură
lignocelulozice: Pleurotus eryngii Pery-G, Pery-K și Pery-26;
Lentinula edodes Led-S, LeM-51şi Led-C;
• Variante de substrat verificate:
V1: paie (grâu, orz) 95% + supliment nutritiv 5% [P 95% + SN 5%];
V2: paie 75% + (rumeg.+ talaș plop și fag 1/1) 20% + supl. nutr. 5% [P 75% +
RT 20% + SN5%];
V3: paie 50% + (rumeg.+ talaș) 30% + ciocălăi porumb 15% + supl.nutr. 5% [P
50% + RT 30% + CP 15 + SN 5%];
V4: paie 30% + (rumeg. + talaş) 50% + ciocălăi porumb 15% + supl. Nutr. 5%
[P 30% + RT 50% + CP 15% + SN 5%];
• Tulpinile de P.eryngii - mai rapide decât cele de L.edodes pe toate cele 4
variante de substrat ; cele mai rapide Pery-G (6,46 mm/zi pe V1 și 6,21 mm/zi
pe V2) și Led-S (4,57 mmm/zi pe V1 și 4,46 mm/zi pe V2);
• Variantele de substrat cu conținut mai mic de reziduuri lemnoase – creșteri
mai viguroase ale miceliilor testate;
• Diseminare: 1 lucrare științifică - Simpozion USAMV Cluj
P1 • Diseminare: 1 lucrare științifică - Simpozion USAMV Cluj Creşterea miceliului de P.eryngii şi
L.edodes pe substrat lignocelulozic
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA IV/2017
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei IV:
“Elaborarea modelelor experimentale privind tehnologia cultivării ciupercilor P.eryngii şi
L.edodes şi verificarea lor în modul pilot în ciupercărie”
ACTIVITĂŢI DESFĂŞURATE
Activitatea 4.1. Elaborarea modelului experimental privind tehnologia de cultivare a ciupercilor P.eryngii:
alegerea materialului biologic (2-3 suşe) şi a variantelor de substrat conform tehnicilor experimentale;
elaborarea schemei de cultură cu secvențe tehnologice specifice pentru etapa pilot.
Activitatea 4.2. Elaborarea modelului experimental privind tehnologia de cultivare a ciupercilor L.edodes:
alegerea materialului biologic (2 suşe) şi a variantelor de substrat; elaborarea schemei de cultură cu secvențe
tehnologice specifice pentru etapa pilot.
Activitatea 4.3. Verificarea modelului tehnologic de cultivare a ciupercilor P.eryngii în experiment-pilot în
ciupercărie: pregătirea miceliului pt. însămânţare; însămânţarea şi incubarea; controlul parametrilor de
microclimat; observaţii privind derularea fenofazelor de vegetaţie; lucrări culturale, recoltare ciuperci;
determinări privind morfologia carpoforilor, elemente de calitate şi de productivitate.
Activitatea 4.4. Verificarea modelului tehnologic de cultivare a ciupercilor L.edodes în experiment-pilot în
ciupercărie: pregătirea miceliului pt. însămânţare; însămânţarea şi incubarea; controlul parametrilor de
microclimat; observaţii privind derularea fenofazelor de vegetaţie; lucrări culturale, recoltare ciuperci;
determinări privind morfologia carpoforilor, elemente de calitate şi de productivitate.
Activitatea 4.5. Diseminarea rezultatelor; participare la manifestări ştiinţifice; actualizare pag. web
CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA IV/2017
REZULTATE OBŢINUTE
Modelul experimental privind tehnologia de cultivare a
ciupercilor P.eryngii
Incubare: 22-24°C ; UR 70-80%; CO2 > 5000 ppm; fără lumină;
durata 15-30 zile (funcţie de tulpină, substrat, microclimat
asigurat);
Inducţia fructificării: deschiderea sacilor ; şoc termic 10-15°C;
UR 90-95%; CO2 500-1000 ppm; necesar lumină 500-1000
lucşi; durata 4-5 zile
Fructificarea : 16-22°C; UR 85-90%; CO2 700 - 1500 ppm;
necesar lumină 500-1000 lucși; durata recoltării/val 4-7 zile;
Randamentul (%): kg ciuperci recoltate (s.p.)/ 100 kg substrat
(s.p.)
Eficienţa biologică (EB %): kg ciuperci (s.p.)/ 100 kg substrat
(s.u.)
Durata ciclului de cultură (2-3 valuri recoltare): 45-60 zile
CP- ICDLF
Vidra
Materii prime: Subproduse/deşeuri lignocelulozice agroforestiere :
paie de cereale, ciocălăi de porumb, rumeguş/talaş de foioase,s.a.
Prepararea substratului – FAZA I
Dezinfectarea termică a substratului – FAZA II
Insămânţarea şi incubarea – FAZA III
Substrat uzat - diverse utilizări -
Miceliu
Inducţia fructificării
şi apariţia primordiilor
Creşterea ciupercilor
şi recoltarea
Sortarea-ambalarea şi valorificarea ciupercilor
Apă
Fig.1. Principalele etape/secvenţe tehnologice în cultura ciupercilor
Pleurotus eryngii
Materiale auxiliare - SN (colţi de malţ, boabe/tărâţe cereale, soia)
- vrejuri mazăre, fasole s.a
Amendamente:
ipsos/cretă
Flacoane/saci/containere din
PP, PVC, PE
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA IV/2017
REZULTATE OBŢINUTE
Modelul experimental privind tehnologia de cultivare a
ciupercilor L.edodes
Incubarea: 22-27°C; UR 75-85%; CO2 > 5000 ppm; fără lumină;
durata 20-25zile;
Formarea stromei: 7-8 zile;
Apariţia îngroşărilor în stromă : 7-8 zile;
Brunificarea şi îngroşarea stromei :18-20°C; UR 80-85%; CO2
2200-3000 ppm; 3-4 săptămâni;
Inducţia fructificării: brichetele scufundate în apă rece (4-8 ore);
şoc termic 12-15°C; UR 90-95%; CO2 700-1000 ppm ; necesar
lumină 500-2000 lucși; durata – 5-7 zile (condiţii optime);
Fructificarea : 16-18°C /21-27°C (funcție de tulpină); UR 80-
90%; CO2 700 - 1000 ppm; necesar lumină 500-1500 lucsi; durata
perioadei de producție 50 - 80 zile cu 2-3 valuri de recoltă;
Eficienţa biologică (EB) : 75 - 125 %;
Durata ciclului de cultură (2-3 valuri recoltare): 3-4 luni
CP- ICDLF
Vidra
PROIECT ADER 3.3.4. – FAZA V/2017
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei V:
”Verificarea modelului tehnologic de cultivare a ciupercilor P.eryngii şi L.edodes în ciclul 2 pilot,
organizat în ciupercărie în vederea optimizării”
ACTIVITĂŢI DESFĂŞURATE
Activitatea 5.1.
Pregătirea miceliului de însămanţare şi a substratului lignocelulozic pentru ciclul 2 de cultură al ciupercilor
P.eryngii şi L.edodes: material biologic - 3 tulpini de P.eryngii şi 2 tulpini de L.edodes ; 3 variante îmbunătăţite de
substrat lignocelulozic (reţetă, tratament termic);
Activitatea 5.2.
Organizarea ciclului 2 de cultură al ciupercilor P.eryngii în modul pilot.
- optimizarea parametrilor de microclimat pentru fiecare secvenţă tehnologică
- evaluare pentru: timpurietate, morfologie carpofori, capacitatea de producţie, calitatea ciupercilor,
eficienta biologică;
Activitatea 5.3.
Organizarea ciclului 2 de cultură al ciupercilor L.edodes în modul pilot.
- optimizarea parametrilor de microclimat pentru fiecare secvenţă tehnologică
- evaluare pentru: timpurietate, morfologie carpofori, capacitatea de producţie, calitatea ciupercilor,
eficienta biologică.
- amenajare spaţiu cu dotări conform codului de bune practici în ciupercărie pentru testarea şi cultivarea
ciupercilor P.eryngii şi L.edodes
Activitatea 5.4.
Diseminarea rezultatelor: participare la Simpozion USAMV Cluj – 1 lucrare științifică; actualizare pag. web
CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ADER 2020
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
5.1. Pregătirea miceliului de însămanţare şi a substratului lignocelulozic pentru ciclul 2 de cultură
al ciupercilor P.eryngii şi L.edodes:
- material biologic - 3 tulpini de P.eryngii şi 2 tulpini de L.edodes
- 3 variante îmbunătăţite de substrat lignocelulozic (reţetă, tratament termic)
REZULTATE OBŢINUTE – Faza V/2017CP- ICDLF
Vidra
Tulpini – culturi pure pe
medii agarizate (MEA/PDA):
Pery-G, Pery-26, Pery-K
Led-S, LeM-51
(colecţia ICDLF)
Substrat de cultură – repartizat în saci PP autoclavabili , capacitate 2 kg
V1 [PG 95% + SN 5%]
V2 [PG 75% + RT20% + SN 5%]
V3 [PG 50% + RT 30% + CP 15% + SN 5%]
*PG - paie de grâu; RT - rumeguş + talaş (fag + plop 1/1); CP - ciocălăi
de porumb;SN - supliment nutritiv (tărâţe de grâu + făină de mălai 1/1)
Miceliu pe suport granulat (grâu)
PLAN SECTORIAL ADER 2020
Numărul/codul proiectului : 334/ADER3.3.4.
5.2 și 5.3: Organizarea ciclului 2 de cultură al ciupercilor P.eryngii și L.edodes în modul pilot.
- optimizarea parametrilor de microclimat pentru fiecare secvenţă tehnologică
- evaluare pentru: timpurietate, morfologie carpofori, capacitatea de producţie, calitatea ciupercilor,
eficiența biologică.
REZULTATE OBŢINUTE – Faza V/2017 CP- ICDLF
Vidra
S-a stabilit un profil al parametrilor de microclimat apropiat de cel
optim, raportat la tulpinile verificate și la condițiile efective de lucru
A fost monitorizata derularea fenofazelor de vegetatie și s-au
obținut date privind morfologia carpoforilor, elemente de calitate și
productivitate la ciupercile P.eryngii.
Producțiile cele mai mari au fost înregistrate la tulpinile:
Pery-26 (27,40%/V2)
Pery-G (26,70%/V1 si 24,60%/V2);
Variantele de substrat V2 si V1 au favorizat productii superioare;
Valul I de recolta (cca.70%) a fost net superior cantitativ
valului II (cca.30% din total), la toate cele 3 tulpini.
P.eryngii - Capacitatea de fructificare pe
trei variante de substrat lignocelulozic
P.eryngii - Repartizarea productiei pe valuri (I + II)
Substrat lignocelulozic varianta V1L.edodes– Formarea nodulilor
in stroma (“etapa popcorn”) L.edodes. Etapa de pigmentare
(brunificare) a brichetelor
L.edodes. Brichete cu
carpofori Led-S
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
Experimentarea tehnologiei optimizate de cultivare a ciupercilor P.eryngii în CCO organizată în
producție: pregătirea miceliului pt. însămânțare; însămânțarea și incubarea; controlul parametrilor
de microclimat; lucrări culturale, recoltare ciuperci; capacitatea de producţie, eficienta biologică
CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei VI/2018:
”Verificarea tehnologiei optimizate pentru cultivarea ciupercilor P.eryngii în condiţii de producţie (CCO)”
S-au asigurat parametrii de microclimat la valori cat mai
apropiate de optim, raportat la tulpinile verificate :
Pery-G, Pery-26 și Pery-K:
Incubarea : 24-25°C, 70-80 % UR, intuneric, CO2 ˃3000
ppm
Inductia fructificarii si aparitia primordiilor :
1) 12-14°C , 2-3 zile, UR= 85-90% ; CO2 < 800-900 ppm ;
lumina 8-10 ore/zi ;
2) în următoarele 3-4 zile se taie folia; 15-16°C, UR 80-
85%, CO2 < 800-900 ppm
Apariția primelor fructificații (primordii) : 7-12 zile de la
inducerea socului termic negativ, funcție de tulpina si, mai
putin de substrat.
Fructificarea - perioada de producție: 16-20°C, UR 80-
85%, CO2 700-1500 ppm; lumina 500-1000 lucși 10 ore/zi;
Valul I de productie, la Pery-G și Pery-26 : după 37-42
zile de la însămanțare;
durata – 1 săptămană.
Valul II : după o pauză de 15-16 zile ; durata 10-12 zile.
Ciclul de cultură: la tulpinile Pery-G și Pery-26 cultivate
pe substraturile V1 și V2 a durat 72-74 zile, respectiv 10,5
săptămâni (cca. 2,5 luni).
P.eryngii : Capacitatea de productie pe trei
variante de substrat lignocelulozic
Pery-G, tulpina cea mai productiva: pe V2 - 538 g ciuperci/sac 2 kg (26,91%)
si 508 g/sac (25,41%) pe V1;
Pery-26 : pe V2 - 510 g/sac (25,50%); pe V1 - 488 g/sac (24,40%)
Pery-K, rezultate mai slabe : pozitia a treia la toate variantele de substrat
Eficienta biologica :
Pery-G , cea mai mare valoare pe V2 - 48,06% si 46,20% pe V1;
Pery-26 pe V2 - 45,54% si 44,36% pe V1
Pery-K si Pery-26 : cele mai mici valori ale eficienței biologice pe substratul
V3: 32,89% și 38,07%.
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
variantele de substrat lignocelulozic V2 (75% paie de grâu/orz + 20% rumeguș și talaș + 5% supliment nutritiv) și V1 (95% paie + 5% supliment nutritiv), în
această ordine, au favorizat recolte superioare, ceea ce le recomandă pentru producție;
tulpinile Pery-G și Pery-26 s-au evidențiat prin producții mari, apropiate și constante, la fel ca în verificările preliminare; aceasta le recomandă pentru a fi
introduse în verificări pentru omologare în producție și pentru a face obiectul unui program viitor de selecție-ameliorare;
suplimentarea substratului de cultură cu surse de azot organic este esențială, fiind recomandat un conținut de 1,4-1,5% NT, rezultate foarte bune obținându-
se prin adăugarea de 10-20% tărâțe de grâu/orez, făină de soia și făină de porumb (mălai), singure sau în amestec;
în cazul biotehnologiei de cultivare în saci/flacoane autoclavabile din polipropilena (PP), cantitatea de substrat recomandată este 1,0-1,5 kg, cel mult 2,0 kg;
o cantitate mai mare determină o compactare accentuata și un timp mai îndelungat necesar colonizarii substratului;
este recomandabil ca norma de însămânțare folosită în experimentele noastre (3%) să fie majorată la 5-6%, pentru scurtarea perioadei de
incubare/colonizare a substratului și prevenirea dezvoltării microorganismelor competitoare/parazite;
acoperirea cu turbă (amestec de acoperire) a suprafeței superioare a brichetelor incubate de P.eryngii aduce un spor însemnat de producție, asigurând
prelungirea ciclului de cultură prin posibilitatea recoltării a 3 valuri și diminuind riscurile de deshidratare și contaminare
CONCLUZII ȘI RECOMANDĂRI – Faza VI/2018CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Nr. crt.Tulpina de
P.eryngii
Substratul Productia Diferenta (±d)Semnificatia
(g) (%) (g)
1
Pery-G
V1 [P95% + SN5% ] 508,25 135,5 133,25 ***
2 V2 [P75% + RT20% +SN5%] 538,25 143,5 163,25 ***
3 V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 446,00 118,9 71,00 ***
4
Pery-26
V1 [P95% + SN5% ] 488,00 130,1 113,00 ***
5 V2 [P75% + RT20% +SN5%] 510,00 136,0 135,00 ***
6 V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 434,00 115,7 59,00 **
7
Pery-K
V1 [P95% + SN5% ] 422,00 115,5 47,00 **
8 V2 [P75% + RT20% +SN5%] 445,00 118,7 70,00 ***
9 V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 375,00 100,00 0 -
DL 5 % = 36,23 DL 1 % = 49,25 DL 0,1% = 65,96
Influenta combinata a tulpinii si a substratului asupra productiei de ciuperci P.eryngii
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
Experimentarea tehnologiei optimizate de cultivare a ciupercilor L.edodes în CCO organizată în
producție: pregătirea miceliului pt. însămânțare; însămânțarea și incubarea; controlul parametrilor
de microclimat; lucrări culturale, recoltare ciuperci; capacitatea de producţie, eficienta biologică
CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
Obiectivul Fazei VII/2018:
”Verificarea tehnologiei optimizate pentru cultivarea ciupercilor L.edodes în condiţii de producţie (CCO)”
S-au asigurat parametrii de microclimat la valori cât mai apropiate
de optim, raportat la tulpinile verificate : Led-S, LeM-51 și Led-S:
Incubarea : 22-24°C, 70-80 % UR, CO2 ˃ 3000 ppm, întuneric; 30-32
zile;
Incubarea II – formarea stromei și a nodulilor (‟popcorn
formation”): 20-22°C aer, 14-16 zile;
Pigmentarea/brunificarea brichetelor și îngroșarea stromei: cu
brichetele în sacii nedesfăcuți, 25-28 zile;
20-22°C aer, 80-85% UR, CO2 2000-3000 ppm, lumină
albă 500-800 lucși 4-6 ore/zi;
Inducția fructificării : brichetele scoase din saci se imersează în apă
rece (10-12°C), 6-8 ore; se așează pentru fructificare:14-16°C, 85-
90% UR, 700-1000 ppm CO2 , 4-8 schimburi aer/oră, lumina 500-1500
lucși 8-10 ore/zi;
Apariția primordiilor și perioada fructificării : 8-9 zile de la șocul
termic, funcție de tulpină și, mai puțin de substrat; se mențin 16-18°C,
UR 80-85%, CO2 700-1500 ppm, lumina 500-1500 lucși 8-10 ore/zi;.
Producția - la tulpina cu cel mai bun rezultat, Led-S, pe substratul
V2: 452 g ciuperci/2 kg substrat (22,60%);
Valul I de productie: la tulpina Led-S, după 82-84 zile (12 săpt./2,8
luni) de la însămânțare; durata 8-10 zile;
Valul II : dupa o pauză de 2-3 săptămâni; durata 10-12 zile; cca 30 %
din recoltă;
Ciclul de cultură (2 valuri): la tulpinile Led-S, LeM-51și Led-S
durează 120-122 zile (17,5 săpt./4 luni)
L.edodes: Capacitatea de productie pe trei
variante de substrat lignocelulozic
Led-S, tulpina cea mai productiva: 452 g ciuperci/sac 2 kg substrat
V2 (22,60%), 362 g/sac (18,10%) pe V1 ;
LeM-51 : pe V2 - 406 g/sac (20,30%); pe V1 - 334 g/sac (16,70%);
Led-C, rezultate mai slabe : poziția a treia pe toate variantele de
substrat
Eficienta biologică :
Led-S , cea mai mare valoare pe V2 – 56,50% și 45,75% pe V1;
LeM-51, pe V2 – 50,75% și 41,75% pe V1;
Led-C: cele mai mici valori pe toate cele 3 substraturi: V1- 38,25%,
V3 - 38,50, V2 – 40,50%.
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
Varianta de substrat de cultură V2 [P75% + RT20% +SN5%], realizată din paie de cereale (grâu, orz) 75% + (rumeguș + talaș) 20% + supliment nutritiv 5%,
a favorizat recolte superioare celorlalte două variante V1 și V3, ceea ce o recomandă pentru a fi promovată în cultura comercială;
Se recomandă ca substratul de cultură pregătit pentru ciupercile shiitake să prezinte 55-60% umiditate;
Tulpina Led-S a colonizat substratul înaintea celorlalte tulpini testate, dovedind o vigoare deosebită; la fructificare a fost cea mai precoce, primordiile
apărând la 82-84 zile de la însămânțarea; a obținut cele mai bune rezultate de producție pe toate cele trei variante de substrat și cea mai mare recoltă din
cadrul experimentului - recoltă medie de 452 g ciuperci/sac cu 2kg substrat V2 (22,60%); se recomandă introducerea în verificări suplimentare în producție
și pentru a face obiectul unui program viitor de selecție și ameliorare;
Prezența rumegușului de lemn, ca ingredient tradițional în formulele substraturilor de creștere pentru ciupercile shiitake, este utilă dar în proporții echilibrate
cu celelalte componente; în experimentul nostru cantitatea optimă de rumeguș + talaș (1/1) a fost de 20% din totalul amestecului lignocelulozic
Suplimentarea substratului cu surse de azot organic stimulează creșterea miceliului, reducând timpul necesar pentru colonizarea substratului și, ca urmare,
micșorând riscul contaminării; se realizează un spor de recoltă și o calitate superioară a ciupercilor; deși am folosit în experimentele noastre 5% amestec
tărâțe + mălai (1/1), recomandăm, pentru producții mai mari, creșterea cantității acestui supliment nutritiv la 10-15% în cazul substraturilor sterilizate;
În cazul biotehnologiei de cultivare în saci/flacoane autoclavabile din polipropilena (PP), cantitatea de substrat recomandată este 1,5 -2,0 kg; cantități mai
mari determină o compactare accentuată și o incubare mai lungă, ceea ce duce la creșterea duratei ciclului de cultură;
Se recomandă ca norma de însămânțare folosită în experimentele noastre (3%) să fie majorată la 5-10%
CONCLUZII ȘI RECOMANDĂRI – Faza VII/2018CP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”
DL 5 % = 19,26 DL 1 % = 26,18 DL 0,1% = 35,06
Influenta combinată a tulpinii și a substratului asupra producției de ciuperci L.edodes
Nr. crt.Tulpina de
L.edodesSubstratul
Productia Diferenta (±d)Semnificatia
(g) (%) (g)
1
LeM-51
V1 [P95% + SN5% ] 334 108,44 +26 *
V2 [P75% + RT20% +SN5%] 406 131,82 +98 ***2
V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 330 107,14 +22 *3
4
Led-S
V1 [P95% + SN5% ] 362 117,53 +54 ***
5 V2 [P75% + RT20% +SN5%] 452 146,75 +144 ***
6 V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 336 109,09 +28 **
7
Led-C
V1 [P95% + SN5% ] 306 99,35 -2 -
V2 [P75% + RT20% +SN5%] 324 105,19 +16 -8
9 V3 [P50% + RT30% + CP15% + SN5%] 308 100,00 0 -
Numărul/codul proiectului : 334/ADER 3.3.4.
Realizarea unei colecţii de germoplasmă fungică – culturi pure de miceliu din speciile Pleurotus eryngii (4 tulpini) şi Lentinus (Lentinula) edodes (4 tulpini) cu
provenienţe diferite
Caracterizarea tulpinilor după morfologia şi tipul de creştere al coloniilor in vitro pe medii de laborator agarizate (MEA, PDA,WEA); stabilirea valorile optime
de temperatură și ale indicelui pH pentru creșterea tulpinilor cercetate de P.eryngii/28-30°C, pH 6-6,5 și L.edodes/24-28°C, pH 5,5-6,0;
Au fost evaluate miceliile experimentale de P.eryngii și L.edodes sub aspect genetic (analiză RAPD) şi biochimic (activitate enzimatică - lacaza, conținut de
carbohidrați, capacitate antioxidantă corelată cu conținutul de fenoli totali în extractele hidroalcoolice) precum şi după activitatea antimicrobiană a extractelor
obţinute din ele (partener BIOTEHNOL București); tulpinile de ciuperci luate în studiu au avut o activitate inhibitoare în special asupra bacteriilor Bacillus
subtilis subsp. Spizizinii, Escherichia coli și Staphylococcus aureus.
A fost stabilit suportul nutritiv favorabil pentru producerea miceliului de însămânţare al fiecăreia dintre cele două specii;
S-a realizat o formulă de substrat adecvat cultivării celor două specii, prin valorificarea unor materiale naturale regenerabile reprezentate de
subproduse/deşeuri lignocelulozice agroforestiere – paie de grâu/orz , rumeguș și talaș de fag în amestec 1/1 cu plop, ciocălăi de porumb, suplimentate cu
amestec 1/1 din tărâțe de grâu și mălai. Varianta de substrat V2 [P75% + RT20% +SN5%], realizată din paie 75% + (rumegus + talaş) 20% + supliment
nutritiv 5%, a favorizat recolte superioare atât pentru tulpinile de P.eryngii cât și pentru cele de L.edodes;
S-a realizat optimizarea parametrilor de microclimat pe parcursul întregului ciclul de cultură, pentru fiecare secvență tehnologică;
Au fost determinate principalele caracteristici la fructificare ale tulpinilor experimentale, în culturi comparative realizate în ciupercărie: timpurietate,
morfologie carpofori, capacitatea de producţie, calitatea ciupercilor, eficiența biologică.
- Durata ciclului de cultură cu două valuri de producție a fost de 72-74 zile (10,5 săptămâni/2,5 luni) la tulpinile Pery-G si Pery-26 (P.eryngii) și, respectiv
120-122 zile (17,5 săptămâni/4 luni) la tulpinile Led-S, LeM-51 și Led-C (L.edodes);
- Apariția ciupercilor Valului I: la 37-42 zile de la însămânțarea substratului la tulpinile de P.eryngii, Pery-G si Pery-26 și, respectiv 82-84 zile la tulpina cea
mai precoce de L.edodes, Led-S;
- Valul I de recoltă a depășit cantitativ și calitativ Valul II, la ambele specii studiate;
- Tulpinile de P.eryngii cu cele mai bune rezultate privind producția de ciuperci (2 valuri) au fost Pery-G cu o recolta medie de 538 g ciuperci/sac 2 kg
substrat V2 (26,91%) și Pery-26,cu 510 g ciuperci/sac 2 kg substrat V2 (25,50%);la L.edodes, s-a evidențiat tulpina Led-S,cu o producție medie de 452
g ciuperci/sac 2 Kg substrat V2 (22,60%);
- Eficiența biologică (BE), calculată dupa formula producția de ciuperci x 100/greutatea substratului uscat (s.u.): cele mai bune rezultate au fost realizate la
P.eryngii de tulpina Pery-G pe substrat V2 (48,06%), urmată de Pery-26 pe V2 (45,54%), iar la L.edodes, de tulpina Led-S pe substrat V2 (56,50%),
urmată de LeM-51 pe V2 (50,75%);
Elaborarea a două biotehnologii inovative de cultivare, pentru speciile P.eryngii şi L.edodes, cu rezultat direct în diversificarea sortimentului cultivat în
Romania;
Dezvoltarea capacității instituționale a ICDLF Vidra prin modernizarea Laboratorului de cercetare ciuperci de la Mogoșoaia: 2 spatii ciupercărie-pilot dotate
cu echipamente de ventilație climatizare automatizate, instalație încălzire cu centrală pe lemne/brichete, aparatură de laborator (hota flux laminar, pHmetru
digital, moară pt materiale lignocelulozice, termostat, cantar electronic, frigider, multitester electronic) și prin creșterea expertizei în domeniu a personalului
specializat care a realizat proiectul.
CONCLUZII ȘI RECOMANDĂRICP- ICDLF
Vidra
PLAN SECTORIAL ”AGRICULTURĂ ŞI DEZVOLTARE RURALĂ – ADER 2020”