5/28/2018 Sange LP 1
1/9
Determinarea densitii sngelui i plasmei - Metoda Phillips - Van Slyke
Principiul determinrii. Determinarea densitii sngelui sau plasmei se face comparativ,fa de o serie de soluii de sulfat de cupru ale cror densiti ne sunt cunoscute. Picturade plasm sau snge se acoper cu o pelicul de proteinat de cupru care-i permiteplutirea, pentru cteva secunde, n interiorul lichidului, n momentul cnd densitile celordou lichide sunt egale.Materiale necesare.
- snge i plasm;- flacoane cu soluii de sulfat de cupru cu densiti diferite;- pipete.
Tehnica de lucru.Se iau dopurile de la flacoanele cu sulfat de cupru i se las ctva timp la temperaturacamerei. Din eprueta cu snge integral, se iau !ml cu o pipet i se las s cad nfiecare flacon cte o pictur de snge de la o nlime de ma"imum #cm de la suprafaalichidului.Pot e"ista trei situaii$
- pictura de snge se ridic la suprafaa lichidului, ceea ce nseamn c densitateapicturii e mai mic dect densitatea soluiei;- pictura de snge cooar spre partea inferioar a flaconului, fiind, deci, cu densitate
mai mare dect a soluiei din flacon;- pictura de snge plutete n interiorul soluiei timp de cteva secunde pn la
#%!min., deci densitatea sngelui este aceeai cu densitatea soluiei din flaconulrespectiv.
&a fel se procedea' i pentru determinarea densitii plasmei. Seria de soluii de sulfat decupru cu densiti cunoscute poate fi folosit la mai multe determinri (dup un timp, attpicturile de plasm ct i cele de snge integral se vor strnge n partea inferioar aflacoanelor). *n general, soluiile se vor schima cnd depo'itul de snge sau plasmdepete #%+ din volumul total al soluiei.Rezultate. Prin aceast metod, oinem dou valori$ densitatea sngelui integral (DS) idensitatea plasmei (DP)... Phillips i an Sl/0e au construit o nomogram cu a1utorul creia, cunoscnddensitatea unei proe de snge i a plasmei, se pot oine valorile hematocritului (2t) n3, a hemogloinei (2) n g3 i a proteinelor totale din plasm n g3 (ve'i nomograma,(figura#.4.). 5etoda permite determinarea proteinemiei i a 2 cu erori foarte mici.Valori de referin (kg/m3$
- Plasm$ #6!7 cu limite ntre #6!+-#686.
- Snge integral$ #644-#697 -rai; #64#-#69# -femei;Variaiile densitii plasmei
- :reteri fi'iologice$ la altitudine, prin splenocontracie, crete numrul de eritrocite; n efort, prin acelai mecanism; n deshidratri, prin transpiraie.
- :reteri patologice$ deshidratri - prin diaree, vom, arsuri - se pierde ap; poligloulii primare sau secundare; oc - n care se produce o concentrare a eritrocitelor, ca urmare a creterii
permeailitii capilare i trecerii lichidului circulant n interstiii.- Scderi fi'iologice$
la gravide, prin creterea fraciunii plasmatice, ca urmare a atragerii apei n vas,su aciunea progesteronului i a estrogenilor;
5/28/2018 Sange LP 1
2/9
ingerare masiv de lichide.- Scderi patologice$
anemii; posthemoragie, la cteva ore de la producerea acesteia, cnd lichidul interstiial
este atras n vase, pentru compensarea pierderii de volum i meninereapresiunii arteriale.
!mportana determinrii.
- determinarea densitii sngelui integral i a plasmei permit aprecierea rapid, prinnomograme, a hematocritului, a cantitii de 2 i a concentraiei proteinelorplasmatice;
- metoda an Sl/0e permite diagnosticul de oc postoperator, oc datorat arsurilorntinse i oc posthemoragic. De asemenea, a1ut la stadiali'area ocului iorientarea tratamentului n oc, anemii, deshidratri etc .
"tudiu indi#idual
#. :onsultnd un dicionar medical, definii urmtorii termeni$ hormon, anticoagulant,ser, firinogen, coagulare, hematocrit, sistem tampon.!. :onsultnd un tratat medical, determinati situaiile patologice n care presiunile
osmotic i coloid-osmotic intervin n patologia uman.8. :onsultnd un tratat medical, determinai situaiile patologice n care e"ist
modificri ale p2-ului sanguin.
5/28/2018 Sange LP 1
3/9
igura #.4.
5/28/2018 Sange LP 1
4/9
$!%& ' )*+R* ,- )0RT0R
#. >otai valorile oinute pentru densitatea plasmei i a sngelui integral.
................................................................................................................................................!. =dentificai parametrii de care depinde densitatea sngelui integral.
................................................................................................................................................8. =dentificai parametrii de care depinde densitatea plasmei.
................................................................................................................................................+. =ndicai cum poate fi densitatea sngelui la o gravid, n ultimul trimestru de sarcin.:um numii situaia respectiv i de ce apare la gravide?
................................................................................................................................................
4. :are este importana clinic a determinrii densitii sngelui i a plasmei?
................................................................................................................................................9. >otai valorile corecte pentru presiunea osmotic.
................................................................................................................................................7. >otai valorile corecte pentru presiunea oncotic.
................................................................................................................................................@. >otai valorile corecte pentru p2-ul sanguin.
................................................................................................................................................A. :alculai volumul plasmatic apro"imativ e"istent n corpul dumneavoastr.
................................................................................................................................................#6. nali'ai densitile plasmei la dou persoane care au valori diferite ale proteinemiei,de e"emplu 4 g%dl i 7,4 g%dl.
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB...............
5/28/2018 Sange LP 1
5/9
!.". D#$#%M&'(%#( )#M($*+%&$&
'efiniie. Ctimologic, hematocrit nseamn volumul hematiilor. 2ematocritul estefraciunea din volumul total al sngelui, ocupat de hematii, e"primat procentual. 5aipoate fi definit ca raportul dintre plasm i elementele figurate ale sngelui, e"primatprocentual, innd cont c, n mod normal, volumul leucocitelor i tromocitelor nudepete # 3.
5/28/2018 Sange LP 1
6/9
pstrare pn n momentul centrifugrii. Dup terminarea recoltrilor, tuurile sunt ae'ateradiar pe suportul special amena1at, fi"at pe rotorul centrifugii. Se centrifughea' timp de86 de secunde la 8666 rot%min, dup care tuurile se scot i se citesc cu a1utorul riglei censoete aparatul (figura !.@.).Juul de hematocrit se pune n ghida1ul al riglei de citire i se potrivete cu a1utorulutonului F, astfel ca limita inferioar a coloanei de hematii s coincid cu linia de 'ero ariglei, iar limita superioar a plasmei s coincid cu linia de #66.
Se citete limita superioar a coloanei de hematii, gradaia corespun'toare repre'entndvaloarea hematocritului e"primat n procente.
igura. !.@. igl pentru citirea hematocritului
+orectarea rezultatelor. :orectarea re'ultatelor este necesar deoarece$- dup centrifugare, printre hematii rmne un volum de plasm repre'entnd 43 din
volumul eritrocitar;- n ca'ul unui numr crescut de leucocite i%sau tromocite este necesar scderea
grosimii acestui strat din valoarea hematocritului;- hematiile din sngele venos au volum mai mare dect hematiile din sngele arterial;- utili'area unui alt anticoagulant (n afara heparinei i amestecului Kintroe) poate
produce ratatinarea hematiilor.Pentru calculul hematocritului sngelui total se va corecta hematocritul venos gsit,conform formulei$
Ht somatic = Ht venos x 0,96 x 0,91 x 1,09 n care$- 6,A9 E factor de corecie pentru plasma aflat printre hematii dup centrifugare;- 6,A# E factor de corecie pentru volumul hematiei din sngele arterial fa de hematia
din sngele venos;- #,6A E factor de corecie pentru anticoagulantele care ratatinea' hematiile (arevaloarea # pentru heparin i amestecul Kintroe).
- *n ca'ul tehnicii pre'entate de noi, factorul gloal de corecie este 6,@7.
100
90
80
70
60
50
40
0
20
10
0
100
80
60
40
20
0
A
B
5/28/2018 Sange LP 1
7/9
Determinarea hematocritului se poate reali0a i prin metode moderne, cu unanali0or automat. Se determin numrul de eritrocite%litru de snge prin msurareaintensitii luminii reflectate de masa de eritrocite aflate ntr-un volum de snge predefinitsi se calculea'a folosind formula hematocritului.rori de determinare a hematocritului. Determinarea hematocritului poate fi afectat de$
- e"ces de anticoagulant;- tipul de anticoagulant;- sngele arterial are un 2t cu !3 mai mic dect 2t din sngele venos;- anali'oarele automate pot da valori fals crescute;- situaii patologice care cresc (n mod fals) valoarea hematocritului$ reticulocito',
leucocito' mare, pre'ena de crioglouline, macrotromocite;- situaii patologice care scad (n mod fals) valoarea hematocritului$ hemoli' in vitro,
autoaglutinare, microcito'.Valorile normale 2i #ariaiile fiziologice ale hematocritului. ceste valori suntpre'entate n taelul !.8.
Jaelul !.8. alorile normale i variaiile fi'iologice ale hematocritului
Se" rst JeritoriulcirculatorCfortfi'ic
Cmoii,stres ltitudine Sarcin
Frai$+9 43
emei$+6 43
>ounscut$49 3
# lun$++,9 3
9 luni$89,! 3
# an$8! 3
+ ani$87 3
#! ani$+6 3
Sngearterial$+4 3
Snge venos$+7 3
Sngesplenic$
76 E @6 3
2tcrescut
2t
crescutprin
contraciasplinei
2t crescut
prinscderea
pL!n aerulinspirat
2t sc'ut prinhemodiluie
Variaii patologice ale hematocritului- Scderea hematocritului apare n anemii i n situaiile n care crete volumul
plasmatic (hemodiluie).- :reterea hematocritului apare n poligloulii i n situaiile n care scade volumul
plasmatic.
alorile e"treme ale hematocritului se asocia' cu stri patologice cu risc
vital$- 2t M !63 $ se asocia' cu hipo"ie sever care determin insuficiencardiac i deces;
5/28/2018 Sange LP 1
8/9
- 2t N 963$ se asocia' cu creterea accentuat a vsco'itii sngelui,tromo'e locale i coagularea spontan a sngelui.
!mportana clinic a determinrii hematocritului. Determinarea hematocritului serecomand n$
- Stri patologice n care se modific numrul de hematii (anemii, poligloulii).- Stri patologice n care se modific volemia.- Stri post hemoragie.- Stri de oc.
"tudiu indi#idual
#. :onsultnd un dicionar medical, cursul Oi'iologia sngelui i materialelerecomandate n iliografie, v rugm s definii urmtorii termeni$ volemie,
hipovolemie, hipervolemie, normocitemie, oligocitemie, policitemie, factor decorecie, coeficient, indice, raport, e"primare procentual.!. :e variaii fi'iologice ale hematocritului cunoatei? :um se e"plic?8. :um influenea' numrul de hematii valoarea hematocritului?
5/28/2018 Sange LP 1
9/9
$!%& ' )*+R* ,- )0RT0R
#. Pre'entai principiul metodei de determinare a hematocritului.
................................................................................................................................................
!. Pre'entai succesiunea etapelor corespun'toare modului de lucru pentru determinareahematocritului prin micrometod.
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB.BB..............8. C"plicai necesitatea corectrii hematocritului citit. :are sunt indicii de corecie utili'ai?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................+. :are sunt valorile normale ale hematocritului?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................4. :e valoare are hematocritul plasmei?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................9. :are sunt parametrii iologici de care depinde hematocritul?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................7. :e relaii e"ist ntre hematocrit i vsco'itatea sngelui?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBB.BBBBBBBBBBB...................................@. C"plicai variaiile fi'iologice ale hematocritului n funcie de vrst i se".
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................A. C"plicai variaiile hematocritului n funcie de altitudine.
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................#6. C"plicai modificrile hematocritului produse de efortul fi'ic.
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................##. *n ce situaii concrete recomandai determinarea hematocritului la un pacient?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................#!. :um e"plicai importana procedurii Qde luare de snge pacientului, aplicat foartefrecvent n trecutul medicinei?
BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................