CHIMIE GENERAL I FARMACEUTICTEHNOLOGIA MEDICAMENTELOR

N MEMORIAM

CONFERENIAR UNIVERSITAR ION TRIGUBENCO - LA UN POPAS ANIVERSAR N CLTORIA ETERN (1940-2008)

i iari am vzut sub soare,

c izbnda n alergare nu este a celor iui

i biruina a celor viteji

i pinea a celor nelepi,

nici bogia a celor pricepui,

nici faima pentru cei nvati,

cci timpul i ntmplarea ntmpin pe toi.

(Ecclesiastul 9:11) Amintirea este o punte de trecere de la o generaie la alta, care este temeiul veniciei noastre. Ea poate restabili punile ntre genertaii n nesfritul maraton al vieii.

Prin contribuia pmnteanului nostru Ion Trigubenco, cobortor dintr-o familie de rani de vi, ce a fost s fie marcat de origine nobiliar a strmoilor si, problemele biofarmaciei ocup un loc de frunte n tiina universal. Descendent din spi domneasc a neamului, Ion Trigubenco a motenit, a focalizat fr ndoial cele mai alese caliti i deprinderi a strmoilor cu aur de legend.Calea fiului ntr-o lung carier didactic de excepie a fost un ir lung de alb i negru, care ncepe la 15 august 1940 n satul Dumeni r-nul Rcani n familia lui Mina Trigubenco. Primele cunotine de carte le-a cptat n coala primar din satul natal. Aici ncolete dorina s-i continue studiile, care le urmeaz la coala medie necomplet din Cuconeti, raionul Edine. n afar de capaciti n sufletul biatului mai domnea principialitatea, perseverena, exigena, paralele cu o deosebit struin. Despre acestea ne povestesc toi cei ce l cunosc din copilrie. Cluzit de aceste sentimente, n 1957 absolvete coala medie din eptebani, Rcani.

Plecase de la prini cu un bagaj mic dar valoros: cinstea i munca erau valorile, pe care nu le putea s le uite. Nu le-a uitat nici atunci cnd absolvete coala de Baz de Medicin din Chiinu, secia Farmacie, dup care activeaz pn n 1960 ca farmacist diriginte n farmacia 154. Dup aceasta devine student la Institutul de Farmacie din Zaporojie, Ukraina (1960-1965).Din relatrile sale aflm, c viaa studentilor de atunci era destul de grea din punct de vedere material, n schimb ei i-o mbogeau spiritual zi de zi, dndu-i sensuri nalte, punndu-i scopuri frumoase spre care tindeau cu perseveren. Din 1966 ndeplinete funcia de asistent, apoi (1972-1982) ca lector superior la catedra Farmacie a Institutului de Stat de Medicin din Chiinu.

Ion Trigubenco iubea viaa, era vesel i plcea s glumeasc, n jurul su ntotdeauna domnea o atmosfer plcut de prietenie i cldur sufleteasc. Zile i nopi studia cartea, fiind pentru el un izvor de lumin. Avea scopul de a studia i a cunoate n profunzime tot ce l nconjoar, i concentra atenia i struina nu numai pentru a rspunde cerinelor de la ordinea de zi,dar se afirma i cu un concept pentru viitor, ca n 1972-1975 s-i urmeze studiile n doctorantur la Institutul de Medicin Nr.1 I.M.Secenov din Moscova. Eforturile de a ptrunde n tainele cercetrilor tiinifice n cutare de cele ce se cheam biofarmacie fusese bine instruite n cadrul studiilor biodisponibilitii preperatelor medicamentoase mpreun cu profesorii Ilie Ajghihin, Serghei Gladchih (1974) la Moscova.de unde n 1977 susine teza de doctor n tiine farmaceutice cu tematica Elaborarea i cercetarea formelor farmaceutice ale salicilamidei, paracetamolului i fenacetinei- prima tez de doctor n domeniul Biofarmaciei n Moldova,iar noi i-am zis printele biofarmaciei Moldave. I-a fost scris n stele s fie farmacist, aa cum i-a fost scris s fie colaborator, s nceap cercetri n cariera didactic.

Chiar de la inceputul activitii didactice devine fondatorul laboratorului Tehnologia medicamentelor magistrale,unde include n programul de studiii i noiuni de biofarmacie. Aceti ani sunt marcai de o activitate intens plin de multe dificulti, n crearea bazei tehnico-materiale, amenajarea laboratorului de profil cu mobilier i utilaj, formarea i consolidarea corpului didactic al facultii.Dumnezeu a avut grij s presar roua inspiraiei peste minile celor trudnici cu adevrat. Laboratorul, n care D-l Ion Trigubenco a muncit din zori pn-n noapte poate fi asemuit cu un ru nvalnic cu un debit de cunotine, care potolete setea de frumos a unor fiine tinere i dornice de afirmare. Biografia lui de munc coincide cu pagina strlucit din Curriculum Vitae a oricrui savant prodigios, care a completat tezaurul tiinei farmaceutice cu 100 de lucrri tiinifice, un brevet d invenie, zece certificate de inovaie,elaborri tehnologice a circa 35 forme farmaceutice, conductor a 25 lucrri de diplom, coautor la elaborarea manualului original n limba romn pentru studeni Tehnologia Medicamentelor n farmacie,elaboreaz prima lucrare metodic, care include studiul recepturii formelor magistrale din Moldova Problemele contemporane ale tehnolojiei medicamentelor(1983).

Ion Trigubenco credea cu toat fiina lui n munc. Munca a fost raiunea existenei lui.O via de om preschimbat n munc. Pentru el munca a fost o binecuvntare,care d sens vieii, iar omului trie ,frumusee i noblee.Munca este i cea mai bun metod de lupt cu disperarea.Munca este i o art. Numai munca creatoare, acest fenomen social i moral asigur progresul, ofer omului suprem fericire prelunjindu-i existena dup moarte, pentru c o via de om nu se topete cu totul n ieri, ea trebuie s devin un simbol pentru ziua de mine.

Ion Trigubenco credea n Dumnezeu, mereu ntorcndu-se i apelnd la postulatele din Sfnta Scriptur, cartea, care l-a nvat buntatea, rbdarea i preuirea aproapelui.Profesorul nu ostenete s ne aminteasc pretutindeni unele fragmente din ea pline de nvminte precum: Iat ,voi ai uneltit asupra mea rele,dar D-zeu le-a ntors n bine sau Iubii vrjmaii votri, binecuvntai pe cei ce v blestem, facei bine celor ce v ursc i rugai-v pentru cei ce v asupresc i v prigonesc. Fr ndoial,gndul lui Ion Trigubenco este s ne fac mai buni dec suntem, mai nelegtori dect am fost.

Ion Trigubenco credea n buntatea omeneasc. I s-a ntmplat s treac prin diferite ncercri ale vieii, ncercri vitrige, atacuri agresive-morale, marginalizri, dar nu a cedat, nu a admis umilirea, a facut dovad unui caracter ndrgit.

Ion Trigubenco credea n viitor. Felul lui de a cerceta i a descopri lucrurile seamn foarte mult cu acela al profesorului Ilie Ajghihin, Serghei Gladchih, Antonina Tenova. Lucrnd alturi de ei, colabornd cu ei a adunat nvminte, experien i nelepciune, pe care le-a mprtit cu mult migal celor mai tineri acordndu-le ncredere n capacitile i posibilitile lor, adic o ans de afirmaie i furire a faptelor de mine.

Ion Trigubenco credea n trecut, n trecutul unei experiene milenare n fapta i experiena acelora, care s-au sacrificat unor idei, a unui ideal, a unei cauze, calitate mult prea rar n zilele noastre.Cunoateea trecutului aste prghia, care poate transforma binele n mai bine. Neuitarea este temeiul veniciei noastre, ea poate identifica i restabili punile dintre generaii n nesfritul maraton al vieii.n acest sens profesorul are ce spune i o spune cu mult sinceritate, har i inspiraie Dumnezeiasc cu mult buntate i neprtinire , aa cum i se cuvine unui veritabil farmacist i profesor ale timpului, pe care le-a trit cu toate fibrele fiinei lui, pe msura intensitii i dramatismului acestor timpuri.

Astzi apar mai multe cri, care cearc s surpind evoluia vieii noastre, inclusiv acelei tiinifice.Timpul le va preui pe toate innd seama de doza de adevr i sinceritate, care se conine n aceste rememorri.

Autoritatea ctigat prin munc onest i druire de sine, atitudinea civilizat corect i binevoitoare, nobleea i mrinimia sufleteasc au fcut din D-l Trigubenco ceea ce se cheam un om integru, profund marcat de modul de manifestare a valorilor umane. Pe drept cuvnt D-lui poate fi considerat un model al profesorului de facultate, dup crturria lui, dorina de comunicare i modestia, respectul pentru spiritul tnr i nelinitit. El rmine ca un generator de nelepciune i lumin sufleteasc, un fin preuitor i un singur ndrumtor de fapt bun,aa cum i st bine unui savant patriot i unui pedagog cretin.

Omul cu suflet de copil, care avea toate calitile necesare unui adevrat ndrumtor , profesor, savant, cercettor i patriot. Dorina de a ptrunde n tainele cercetrii tiinifice n cutare de ceea ce se cheam biofarmacie fusese bine intuite de responsabilii profesori de la Academia de Medicin I.M.Secenovdin Moscova: Serghei Gladchih, Ilie Ajghihin, Antonina Tenova, care ne confirm c profesorul Ion Trigubenco e printele Biofarmaciei n Moldova.

Am reuit s ne dm bine seama cine a fost profesorul Ion Trigubenco.Onest n toate i cu o memorie excelent. A fost unul din exponenii de vrf ai profesiei noastre de farmacist.

Savantul nu triete prin sine, ci prin poporul care l slvete, cci trecutul acord viitor prezentului. El a plecat dintre noi ca s se nasc n venicie.

n Nelinitea Memoriei - mai uoar dect viaa este cenua, iar deasupra ei -prezentul memoriei noastre.

Nicolae Ciobanu decan, conf. univ.

Tamara Cotelea conf. univ.

fac. Farmacie USMF Nicolae Testemianu

ELABORAREA FORMULEI UNGUENTULUI COMBINAT CU IZOHIDRAFURAL I METILURACIL I A METODEI DE EXTRACIE A PRINCIPIILOR ACTIVE DIN FORMA FARMACEUTIC

2 Nicolae Ciobanu,1 Livia Uncu, 1 Elena Bobrov, 3 Viorel Prisacari, 3 Svetlana Buraciov1Catedra Chimie Farmaceutic i Toxicologic USMF N. Testemianu2Catedra Tehnologia medicamentelor USMF N. Testemianu 3Laboratorul Infecii nosocomiale USMF Nicolae Testemianu

summaryThe elaboration of the form of combined ointment with izohidrafural and

metiluracil and the method of extraction of active principles from dosage formIt was elaborated a pharmaceutical form for external use the combined ointment with Izohidrafural and Metiluracil and also it was elaborated the method of extraction of active principles from it. The medicine combines the antibacterial action of izohidrafural and the regenerating and inflammatory action of metiluracil. rezumatA fost elaborat forma farmaceutic de uz extern - unguent combinat cu coninut de izohidrafural i metiluracil precum i metoda de extracie a principiilor activi din el. Preparatul combin aciunea antibacterian a izohidrafuralului i aciunile regenerante i antiinflamatoare ale metiluracilului.Introduceren patologia uman infeciile septico-purulente, provocate de diverse microorganisme patogene, att gram-negative, ct i gram-pozitive, ocup un loc aparte. Ele se caracterizeaz prin inciden nalt i consecine grave, care duc direct sau indirect la majorarea brusc a valorii tratamentului precum i a pagubei economice morale i sociale. Totodat, tratamentul infeciilor septico-purulente constituie o problem dificil, cauzat de achiziionarea rezistenii agenilor cauzali fa de antibiotice cu utilizare larg n practica medical i preurile nalte a remediilor antibacteriene importate.Anume din aceste considerente este foarte actual obinerea unor preparate cu aciune complex: antimicrobian, regenerant, antiinflamatoare i analgezic. Ne-am propus elaborarea unei noi forme farmaceutice de uz extern - unguent combinat cu coninut de izohidrafural i metiluracil, care combin aciunea antibacterian a izohidrafuralului i aciunile regenerante i antiinflamatoare ale metiluracilului.Materiale i metoden cercetrile efectuate s-au utilizat substanele active: Izohidrafural i Metiluracil, diferii excipieni i substane auxiliare: Polietilenglicol, Vaselina, Alcool ceto-stearic, Propilenglicol, Glicerina, Tween 80, Laurilsulfatul de sodiu. Pentru elaborarea metodei de extracie s-a utilizat spectrofotometru UV-VIS Agilent - 8453 n intervalul de und 250 450 nm, dimetilformamid, soluie hidroxid de sodiu 0.1mol/l i amestecul de soluie hidroxid de sodiu 0,1 mol/l i dimetilformamid (1:3) n calitate de extrageni.Rezultaten scopul formulrii unguentului s-au studiat concentraiile 0.1% pentru izohidrafural i 5% pentru metiluracil, care asigur exercitarea efectului farmacologic maxim. Pentru a selecta formula optimal a unguentului, substanele active au fost ncorporate n excipieni de natur diferit. Astfel s-au cercetat patru compoziii, ce conin baze de unguent de tip emulsie ulei n ap i ap n ulei. Pentru formularea compoziiei n calitate de excipieni pentru unguent s-a utilizat: Polietilenglicol, care prezint o substan onctuoas, lavabil, care nu irit pielea, posed o bun capacitate de ntindere i aderen fa de piele, este indiferent din punct de vedere fiziologic i nu este invadat de microorganisme posednd chiar aciune bactericid. Este neiritant pentru piele, are o bun capacitate de ntindere, fr a influena activitatea glandelor sudoripare i sebacee, nu obtureaz porii pielii. Vaselina, care prezint o mas alb sau alb-glbuie este omogen, onctuoas la pipit, filant, translucid. Excipientul se caracterizeaz prin stabilitate i conservabilitate indefinit, inerie chimic fa de agenii oxidani. Din punct de vedere terapeutic vaselina nu prezint afinitate fa de grsimea epidermului.

n calitate de emulgatori s-au selectat trei substane: alcool ceto-stearic, propilenglicol i glicerin. Alcool ceto-stearic este un compus organic solid de culoare alb, fr miros, insolubil n ap, solubil n alcool, care posed proprieti emoliente i datorit acestui fapt are loc potenarea aciunea substanei active. Propilenglicol prezint un lichid incolor, vscos, higroscopic, cu gust dulce, volatil i foarte stabil, miscibil cu apa, acetona. Este un bun solvent pentru substanele medicamentoase. Are o higroscopicitate superioar glicerinei, reinnd astfel apa, proprietate pe care nu i-o modific la variaii de umiditate ale mediului, protejnd astfel unguentul.

Glicerina este un lichid vscos, incolor, fr miros, solubil n ap, alcool, insolubil n grsimi, cu gust gulce, higroscopic, utilizat pe larg n formulrile farmaceutice. La adugarea glicerinei n unguent are loc mbuntira elasticitii acestuia. Tween 80 este un lichid cu nuan pal, cu diferit grad de vscozitate, bine solubili n ap. Se utilizeaz n formele medicamentoase ca emulgator, stabilizator i diluant. Laurilsulfatul de sodiu prezint o pulbere alb, fr miros specific, solubil n ap. Este o substan tensioactiv. Se utilizeaz n practica farmaceutic ca agent de umectare pentru mbuntirea calitilor tehnologice i terapeutice a diferitor preparate. Are proprieti de stabilizator, emulgator; are un rol important la difuzia membranar a pielei i mucoaselor, reduce timpul de dezagregare a componentelor unguentului.

Excipienii de tip ulei n ap sunt uor de aplicat, cedeaz rapid substana activ i n unele cazuri favorizeaz penetrarea. n plus, se ndeprteaz uor prin splare i de aceea se mai numesc baze lavabile.

Bazele emulsive de tipul ap n ulei au o consisten bun, ce asigur caliti avansate de ntindere i aderare de esuturi. Procesul tehnologic de preparare a unguentului cuprinde urmtoarele faze: Pregtirea excipientului; Amestecarea substanelor medicamentoase cu baza de unguent; Analiza i controlul calitii; Ambalarea produsului finit. Pentru a petrece analiza, izohidrafuralul i metiluracilul trebuie extrase din baza de unguent. Selectarea metodei i tehnicii de extracie este n strns corelaie cu proprietile fizico-chimice ale componentelor care se extrag, precum i ale excipienilor. A fost selectat aleator una din prescripii prescripia nr. 4 (izohidrafural, metiluracil, tween 80, vaselin alb, alcool ceto-stearinic, glicerin, ap purificat) i i-am efectuat extracia cu soluie hidroxid de sodiu 0,1 mol/l, amestec hidroxid de sodiu 0,1 mol/l i dimetilformamid (1:3), dimetilformamid. Pentru determinarea gradului de extracie, s-a efectuat dozarea izohidrafuralului i metiluracilului prin metoda spectrofotometric.

Rezultatele obinute s-au nregistrat n tabelul 1, figurile 1 i 2.

Tabelul 1

Evaluarea gradului de extracie a Izohidrafuralului i a Metiluracilului din unguentul cu prescripia nr.4 cu diferii extrageni Extragentul

Concentraia,

%Soluie hidroxid de sodiu 0,1mol/lAmestec soluie hidroxid de sodiu 0,1mol/l, dimetilformamid (1:3)Dimetilformamid

Metiluracil3,6103,6805,770

Izohidrafural0,0970,0980,136

Fig. 1. Evaluarea gradului de extracie Fig. 2. Evaluarea gradului de extracie a metiluracilului cu diferii extrageni a izohidrafuralului cu diferii extrageni Datele obinute demonstreaz, c la utilizarea dimetilformamidei s-a obinut un grad de extracie maxim, totodat este mai optimal tehnica de extracie.Tehnica de extracie:

0,5 g de unguent (mas exact), se pune n patentul de porelan, se adaug 20 ml de dimetilformamid i se nclzete pe baia de ap pn la topirea excipientului, amestecnd cu bagheta de sticl. Dup rcire se separ stratul de dimetilformamid ntr-un balon cotat de 50 ml. Extracia cu dimetilformamid se repet de 2 ori cu cte 15 ml de dimetilformamid, unind fraciunile i se aduce la cot cu dimetilformamid (soluia A).

n rezultat s-a obinut o extracie limpede i transparent, de culoare galben-oranj. Pentru determinarea gradului de extracie, s-a efectuat dozarea izohidrafuralului i metiluracilului. Extracia obinut este folosit n continuare pentru determinrile calitative i cantitaive.inndu-se cont de acest fapt, n cercetrile celorlalte trei prescripii s-a luat n calitate de extragent doar dimetilformamida. S-a folosit aceiai procedur de extracie i dozare a principiilor active ca i pentru prescripia numrul 4. Datele obinute s-au nregistrat n tabelul 2.Tabelul 2Evaluarea gradului de extracie a Izohidrafuralului i a Metiluracilului din unguente, folosind ca extragent dimetilformamidConcentraia,

%Compoziia unguentelor

1

Unguent pe baz emulsiv ulei n ap

2

Unguent pe baz emulsiv ulei n ap

3

Unguent pe baz emulsiv ap n ulei

4

Unguent pe baz emulsiv ap n ulei

Izohidrafural0,1000,0970,0870,100

Metiluracil4,9504,1603,1304,570

n final putem meniona c metoda de extracie cu dimetilformamid este cea mai exact.

Concluzii1. Ca rezultat al ncorporrii izohidrafuralului i metiluracilului n excipieni de natur diferit s-au cercetat patru compoziii, ce conin baze de unguent de tip emulsie ulei n ap i ap n ulei. Rezultatele cercetrilor au permis selectarea tehnologiei optime de fabricaie pentru prescripiile selectate;2. n urma extragerii principiilor active din unguente cu soluie hidroxid de sodiu 0,1 mol/l, amestec hidroxid de sodiu 0,1 mol/l i dimetilformamid (1:3), dimetilformamid s-a constatat un grad de extracie optimal pentru dimetilformamid, care a fost utilizat ca extragent n analizele calitative i cantitative chimice i fizico-chimice.

Bibliografie1. Lazr M., Lazr Doina. Controlul medicamentelor. Litografia. Iai. 1980;2. Leucu S.E. Tehnologia formelor farmaceutice. Ed.Dacia, Cluj-Napoca- 1995.3. Uncu L. Ciobanu N., Ciobanu C., Prisacari V., Vslouh O.. Tehnologia i determinarea disponibiliti farmaceutice pentru unguentele cu Izohidrafural. Analele tiinifice ale USMF N.Testemianu, vol. I, Probleme medico-biologice i farmaceutice. Chiinu, 2008, p. 273-279.STUDIUL COMPATIBILITII IZOHIDRAFURALULUI I METILURACILULUI N ACEEAI FORM FARMACEUTIC

1 Livia Uncu, 1 Elena Bobrov, 2 Oxana Vslouh, 1 Mihail Anton,

2 Vladimir Valica, 1 Iurie Tihon

1Catedra Chimie Farmaceutic i Toxicologic USMF N. Testemianu

2Laboratorul Analiz, standardizare i controlul medicamentelor al CDM

Summary Compatibility study of izohidrafural and metiluracil in the same dosage formIt was researched the physical, chemical compatibility of izohidrafural with metiluracil to be able to combine them in the same pharmaceutical form - ointment. It will have a complex action: antibacterial due to izohidrafural and regenerating and inflammatory due to metiluracil.RezumatS-a studiat compatibilitatea fizic, chimic a izohidrafuralului cu metiluracil n vederea utilizrii lor combinate n aceeai form farmaceutic - unguent. Acesta va avea o aciune complex: antimicrobian datorit izohidrafuralului i regenerant, antiinflamatoare datorit metiluracilului.

IntroducereTratamentul plgilor este una dintre cele mai vechi probleme ale medicinei, fiind actual i n prezent. Preparatele pentru tratamentul local al plgilor purulente trebuie s asigure o aciune complex: antimicrobian, regenerant, antiinflamatoare i analgezic.

n acest context, este foarte actual elaborarea unei noi forme farmaceutice pentru uz extern - unguent combinat cu coninut de izohidrafural i metiluracil, care ar asocia aciunea antibacterian a izohidrafuralului i aciunile regenerante i antiinflamatoare ale metiluracilului.

Materiale i metoden cercetrile efectuate s-au utilizat substanele active: izohidrafural i metiluracil, solvenii: ap purificat, soluie de hidroxid de sodiu 0,1 mol/l i dimetilformamid. Spectrofotometru UV-VIS Agilent 8453, cromatograf de lichide de nalt performan nzestrat cu detector spectrofotometric Shimadzu HIGH Performance liquid chromatograph LC-20 A.

RezultateUn rol primordial la asocierea substanelor medicamentoase n aceeai form farmaceutic l are studiul compatibilitii. Prezena diferitor grupe funcionale (nitro, ceto, metil etc.) n moleculele izohidrafuralului i metiluracilului ar putea conduce la interaciuni chimice ntre aceste substane medicamentoase, n consecin se pot modifica proprietile lor fizice i farmacologice.

n legtur cu aceasta s-a studiat compatibilitatea izohidrafuralului i metiluracilului cu scopul asocierii lor n aceeai form farmaceutic. S-a recurs la studiul proprietilor fizico-chimice i la dozarea substanelor medicamentoase individuale separat i n amestec prin metode fizico-chimice: Spectrofotometrie UV-VIS i HPLC. n scopul formulrii unguentului s-au studiat concentraiile 0.1% pentru izohidrafural i 5% pentru metiluracil, care asigur exercitarea efectului farmacologic maxim. Dup proprietile fizice, izohidrafuralul se prezint sub form de pulbere maro, amorf cu miros slab specific, fr gust. Se dizolv n ap la nclzire, este foarte puin solubil n aceton, alcool etilic i cloroform, practic insolubil n eter, puin solubil n dimetilsulfoxid i dimetilformamid. Are punctul de topire de la 246,5(C pn la 249,9(C. Metiluracilul este o pulbere alb, cristalin, fr miros, puin solubil n ap, alcool, se dizolv n ap la nclzire, insolubil n eter i cloroform. Dup solubilitate izohidrafuralul i metiluracilul se aseamn.

La studierea compatibilitii izohidrafuralului i metiluracilului prin metoda spectrofotometric UV-VIS s-au utilizat diferii solveni: ap purificat, soluie hidroxid de sodiu 0,1 mol/l i dimetilformamid.

n urma cercetrii spectrelor obinute pentru amestecul model n dimetilformamid putem meniona, c izohidrafuralul i metiluracilul i pstreaz aceleai maxime i minime de absorbie ca i n soluiile individuale, ele nu se suprapun, ceea ce ne permite s utilizm aceasta metod pentru analiza lor la aflarea concomitent n aceeai form farmaceutic (fig.1).

Fig. 1. Spectrele de absorbie n UV-VIS ale soluiei amestecului model izohidrafural 5g/ml i metiluracil 10 g/ml n dimetilformamid

Rezultatele dozrii sunt redate n tabelul 1.

Tabelul 1

Rezultatele dozrilor prin metoda spectrofotometric ale izohidrafuralului i metiluracilului n diferii solveniConcentraia, %

SolventulIzohidrafuralMetiluracil

IndividualAmestecIndividualAmestec

Ap purificat98,00 97,8097,0096,80

Hidroxid de sodiu 0,1mol/l97,0096,8096,0095,80

Dimetilformamid99,8099,78100,00100,00

La studierea compatibilitii izohidrafuralului i metiluracilului prin metoda HPLC s-a folosit cromatograful lichid de nalt performan nzestrat cu detector spectrofotometric Shimadzu HIGH Performance liquid chromatograph LC-20 A, obinnd 5 cromatograme pentru fiecare soluie n urmtoarele condiii:

- faza staionar coloana cromatografic Nucleosil 100 C18, 10m cu dimensiunile 150 x 4,0 mm;

- faza mobil amestec din alcool metilic i ap purificat (25:75);

- debutul fazei mobile 1,0 ml/min;

- detecia UV-VIS la lungimea de und 360 nm;

- temperatura coloanei 30oC.n urma cercetrii cromatogramei amestecului model putem meniona, c substanele se separ foarte bine, au timpi de retenie diferii i picurile nu interfereaz, fapt demonstrat i prin rezultatele dozrii (fig.2).

Fig.2. Cromatograma soluiilor amestecului model de izohidrafural 20 g/ml i metiluracil 20 g/ml

Rezultatele dozrii sunt redate n tabelul 2.

Tabelul 2

Rezultatele dozrilor prin metoda HPLC ale izohidrafuralului i metiluracilului Concentraia, %

IzohidrafuralMetiluracil

ProbAmestecProbAmestec

99,7099,7099,4099,30

Analiznd rezultatele obinute la dozarea prin metodele spectrofotometric i HPLC, putem meniona, c la asocierea izohidrafuralului cu metiluracil substanele nu-i modific proprietile fizice i nu au loc interaciuni chimice sau fizico-chimice, deci ele sunt compatibile.Concluzii1. S-a studiat compatibilitatea izohidrafuralului i metiluracilului cu scopul asocierii lor n aceeai form farmaceutic.

2. Studiul proprietilor fizice i chimice a izohidrafuralului cu metiluracil i dozarea substanelor medicamentoase individual i n amestec prin metode fizico-chimice - spectrofotometrie UV-VIS i HPLC, demonstreaz compatibilitatea lor i posibilitatea asocierii n aceeai form farmaceutic.

Bibliografie1. Balaescu C., Metode spectrofotometrice aplicate n controlul medicamentelor, Editura medical, Bucureti,1996;

2. Prisacari V., Buraciov S., Dizdari A., Stoleicov S., apcov V. Izonicotinoilhidrazona aldehidei 5-nitro-2-furanice compus organic nou cu activitate antibacterian. Comunicare I. Cercetri asupra aciunii antibacteriene. Anale tiinifice ale USMF N.Testemianu, Chiinu, 2002. p. 255-259.3. Uncu L. Valica V., Tihon Iu. Analiza spectral a izohidrofuralului. Materiale Congresului XIII naional de farmacie. Cluj-Napoca, 2006, p.964. Uncu L., Valica V., Soloviov L., Staver O. Cercetarea proprietilor fizico-chimice a izohidrofuralului. Materiale Congresului XIII naional de farmacie. Cluj-Napoca, 2006, p.975. Farmacopeea Romn, Ed. a X-a, Editura medical, Bucureti,2000.ELABORAREA TEHNICII SPECTROFOTOMETRICE UV-VIS DE DOZARE A AZITROMICINEI1 Livia Uncu, 1 Mihail Anton, 2 Olga Suvorchina, 1 Elena Bobrov,

2 Liviu Movil, 1 Artiom Osipov1Catedra Chimie Farmaceutic i Toxicologic USMF N. Testemianu

2Laboratorul Analiz, standardizare i controlul medicamentelor al CDM

Summary

The development of a UV-VIS Spectrophotometric Azithromycin Assay

The aims of research were to develop a new spectrophotometric Azithromycin assay in pure substance and in capsules, which would be corresponding to all requirements assigned to the instrumental methods of analysis. There were researched the factors which could influence over the assay: solubility, volume, reagent, the stability of coloring compound in time. The technique were been estimated statatistically and validated in accordance with linearity, repeatability, sensibility and accuracy. The elaborated technique could be included as alternative assay method in NAD for Azitromycin in capsules.

Rezumat

n scopul elaborrii unei noi tehnici spectrofotometrice de dozare a Azitromicinei-substan i n capsule, care ar corespunde tuturor exigenelor atribuite metodelor instrumentale de analiz, au fost studiai factorii ce pot influena determinarea: solubilitatea, volumul reagentului, stabilitatea n timp a compusului colorat. Tehnica elaborat, care poate fi inclus n calitate de metod alternativ n proiectul DAN pentru capsule operculate cu Azitromicin la capitolul Dozare, a fost evaluat statistic i validat dup criteriile de liniaritate, repetabilitate, reproductibilitate i exactitate.Actualitatea temei

Fig. 1 Formula de structur a Azitromicinei

Azitromicina este un reprezentant din grupul azalidelor, subclas a antibioticelor macrolide. Prezint un derivat al eritromicinei, de care se deosebete prin prezena n inelul lactonic a unui atom de azot metil substituit (fig. 1), fapt ce confer preparatului o rezisten sporit fa de mediul acid, facnd posibil administrarea lui peroral fr vreo msur special de protecie antiacid.

Activitatea pronunat, spectrul larg de aciune i capacitatea de a realiza concentraii sporite n esuturi au determinat indicarea Azitromicinei n diverse maladii bacteriene: infecii ale cilor respiratorii superioare i inferioare, infecii ale aparatului excretor, boli venerice, precum i n profilaxia infectrii bacteriene la nou-nscui i persoanele imun-deficitare.Aceste considerente, precum i faptul c Azitromicina posed cele mai reduse efecte adverse dintre toate macrolidele au fcut ca preparatul dat s fie unul dintre cele mai solicitate antibiotice de pe piaa farmaceutic. Popularitatea crescnd a Azitromicinei necesit implicit metode precise i accesibile de control a calitii preparatului, n special a determinrii lui cantitative n formele farmaceutice. Lund n consideraie faptul c metoda farmacopeic de dozare este metoda biologic (care necesit condiii i aparataj auxiliar i, respectiv, cheltuieli financiare impuntoare), ne-am propus iniierea cercetrilor n vederea elaborrii metodelor alternative.

Una dintre aceste metode este spectrofotometria UV-VIS. Metoda dat, inclus n proiectul DAN pentru capsule cu Azitromicin RNP la capitolul Dizolvare, s-a dovedit a fi inacceptabil pentru efectuarea determinrilor cantitative a Azitromicinei en gross i n forme farmaceutice, deoarece la elaborarea ei nu au fost cercetai toi factorii care se implic n ntreg procesul de determinare cantitativ i care influeneaz rezultatul final. De aceea, ne-am propus elaborarea unei noi tehnici spectrofotometrice de dozare a Azitromicinei, care ar fi mai accesibil dect metoda biologic i care, fiind supus validrii, ar corespunde tuturor exigenelor atribuite metodelor instrumentale de analiz.Materiale i metode

Metoda elaborat se bazeaz pe proprietatea Azitromicieni de a reaciona cu acidul sulfuric concentrat, formnd un compus colorat galben-oranj, ce absoarbe radiaia electromagnetic n domeniul ultraviolet-vizibil. Ca solveni am ales soluii tampon fosfat ajustate la diferite valori ale pH-ului; reactivul principal este acidul sulfuric concentrat chimic pur 94%, iar msurrile absorbanei au fost efectuate la spectrofotometrul UV-VIS Agilent 8453.Rezultate i discusii

A fost cercetat solubilitatea Azitromicinei. Aceasta s-a dovedit a fi practic insolubil n ap, precum i n ali solveni apoi, ns solubil n soluie de tampon fosfat. Am determinat, c odat cu creterea valorii pH-ului, solubilitatea Azitromicinei n soluia tampon fosfat scade, de aceea n calitate de solvent pentru ntreg procesul de cercetare a fost aleas soluia tampon fosfat cu valoarea pH-ului ajustat la 7,0. A fost nregistrat spectrul de absorbie al compusului complex Azitromicin-acid sulfuric concentrat n intervalul de lungimi de und de la 200 la 900 nm (fig.2).

Fig. 2. Spectrul de absorbie al compusului colorat Azitromicin acid sulfuric concentrat

n acest interval se atest 2 maxime: cel de la 235 nm, care este un domeniu UV apropiat, de aceea nu poate servi drept baz pentru cercetarea absorbiei unui compus colorat i un maxim bine conturat la 482 nm, ce aparine compusului cercetat, care i a fost selectat drept lungime de und analitic pentru toate determinrile ulterioare.A fost cercetat stabilitatea n timp a compusului colorat, n dependen de volumul reagentului i pH-ul mediului reactant. S-a determinat variaia concentraiei n funcie de timp, precum i n dependen de volumul reagentului adugat. Valori maxime au fost obinute la adugarea a 10 ml de acid sulfuric concentrat. Cantitile mai mici nu asigurau formarea compusului, iar excesul de reagent mrete timpul de interaciune. Totodat, n procesul cercetrilor s-a determinat, c odat cu mrirea volumului de acid sulfuric concentrat, pH-ul mediului reactant se deplaseaz spre cel acid: valoarea lui scade direct proporional cu volumul reagentului. Astfel, s-a determinat c valorile maxime ale concentraiei Azitromicinei n compusul complex se obin la Ph 1,0, ceea ce corespunde volumului optim stabilit de 10,0 ml de acid sulfuric concentrat. Fluctuaiile absorbanei compusului complex se micoreaz peste circa 20 min dup adugarea reagentului, iar peste 30 min se obin valori constante (fig. 3, curba 3 - linia nentrerupt).

Pentru determinarea intervalului de concentraii n domeniul cruia se respect legea absorbanei a fost construit dependena absorbanei de concentraia Azitromicinei pentru o serie de soluii standard (fig. 4).

Fig. 4 Curba de etalonare a compusului colorat Azitromicin acid sulfuric conc.

S-a stabilit, c domeniul de liniaritate este cuprins n intervalul de concentraii de la 15 g/ml pn la 50 g/ml. Pe baza curbei de etalonare a fost calculat valoarea absorbanei specifice a compusului complex .innd cont de factorii elucidai, a fost elaborat tehnica de dozare spectrofotometric n VIS a Azitromicinei: 0,03 g (mas exact) de Azitromicin se aduce ntr-un balon cotat de 100 ml, se dizolv n aproximativ 70 ml de soluie tampon fosfat cu pH-ul 7,0 i se completeaz pn la cot cu acelai solvent (soluia A). 2,5 ml din soluia A se aduc ntr-un balon cotat de 25 ml, se adaug 10 ml (volum exact) de acid sulfuric concentrat i se aduce pn la cot cu soluie tampon fosfat cu pH 7,0 (soluia B). Dup 30 minute se msoar absorbana soluiei B la spectrofotometru, la lungimea de und de 482 nm, n cuva cu grosimea de 10 mm, folosind n calitate de soluie de compensare amestecul acid sulfuric concentrat - soluie tampon fosfat pH 7,0 n raport de 1:1,5. Paralel se msoar absorbana soluiei standard de concentraia 30 g/ml, care a fost supus aceleiai reacii.Coninutul Azitromicinei n substan se calculeaz conform formulei:

n care:

Ax - absorbana soluiei prob de analizat;

Ao absorbana soluiei etalon de Azitromicin;

mo masa probei de Azitromicin utilizat la prepararea soluiei etalon, g;

mx masa probei de analizat, g;

A fost efectuat evaluarea statistic a rezultatelor dozrii Azitromicinei n substan pentru un prag de siguran de 95% (Tabelul 1), care ne-a permis determinarea erorii relative a msurrilor: .

A fost efectuat validarea tehnicii spectrofotometrice elaborate dup criteriile de repetabilitate i reproductibilitate. A fost determinat valoarea mediei globale 98,39%; abaterea tip relativ a repetabilitii 1,666%; intervalul de siguran 3,05%; abaterea relativ standard (RSD) 1,699%; abaterea tip relativ a reproductibilitii 0,745%; valoarea reproductibilitii (CVR) 0,755%. Condiia de admisibilitate prevede c o metod poate s fie considerat reproductiv dac RSD i CVR 2. Dup cum se observ, condiia este ndeplinit, deci metoda este repetabil i reproductibil.

Tabelul 1

Evaluarea statistic a rezultatelor dozrii Azitromicinei n substanSeriaX, %XmedTS2SSxx, %

0197.8698,033,182,7771,6660,9623,05963,121

99.78

96.46

0297,9598,743,180,5550,7450,4301,36781,385

98,84

99,43

Pentru exprimarea exactitii msurrilor efectuate a fost determinat oblicitatea experimental conform curbei de regresie, determinat n cadrul intervalului de liniaritate Xr/Xa*100, unde Xa reprezint cantitatea de substan luat pentru analiz, iar Xr cantitatea de substan regsit (Tabelul 2)

Tabelul 2

Evaluarea exactitii a metodei elaborate n intervalul de liniaritate

Determinareamst, gXa, %Xr, %Xd = Xr - Xa, %

1.0,03120104,099.782,14

2.0,03009100,397,860,22

3.0,0292297,496,463,54

Curba de regresie construit (fig.5) este practic perfect liniar, cu un coeficient de abatere de circa 0,9996, iar oblicitatea acestei curbe este coerent, cu o deplasare acceptabil pentru metodele spectrofotometrice de dozare. Tehnica spectrofotometric elaborat a fost adaptat pentru determinarea cantitativ a coninutului de Azitromicin n capsule operculate 0,500 g i 0,250 g: 0,04 g (mas exact) din coninutul unei capsule de 0,500 g sau 0,05 g (mas exact) din coninutul unei capsule de 0,250 g se aduce ntr-un balon cotat de 100 ml, se dizolv n aproximativ 70 ml de soluie tampon fosfat cu pH-ul 7,0 i se completeaz pn la cot cu acelai solvent. Soluia obinut se filtreaz prin filtru de hrtie band albastr, aruncnd primele 10 ml de filtrat. 2,5 ml din soluia filtrat se aduc ntr-un balon cotat de 25 ml, se adaug 10 ml (volum exact) de acid sulfuric concentrat i se aduce pn la cot cu soluie tampon fosfat cu pH 7,0.

Dup 30 minute se msoar absorbana soluiei colorate la spectrofotometru, la lungimea de und de 482 nm, n cuva cu grosimea de 10 mm, folosind n calitate de soluie de compensare amestecul acid sulfuric concentrat soluie tampon fosfat pH 7,0 n raport de 1:1,5. Paralel se msoar absorbana soluiei standard de concentraia 30 g/ml, care a fost supus aceleiai reacii.Coninutul Azitromicinei n capsule se calculeaz conform formulei:

n care:

Ax absorbana soluiei prob de analizat;

Ao absorbana soluiei standard de Azitromicin;

mo masa probei de Azitromicin utilizat la prepararea soluiei standard, g;

mx masa probei de analizat, g;P masa medie a capsulelor, g;A fost efectuat evaluarea statistic a rezultatelor dozrii Azitromicinei n capsule 0,500 pentru un prag de siguran de 95% (Tabelul 3), care ne-a permis determinarea erorii relative a msurrilor: .

Tabelul 3

Evaluarea statistic a rezultatelor dozrii Azitromicinei n capsule 0,500

SeriaX, gXmedTS2SSxx, %

010,483740,497082,781,17110-41,08210-20,54110-21,5039810-23,020

0,51008

0,49859

0,49592

Concluzii

1. Au fost studiai factorii ce pot influena dozarea spectrofotometric a Azitromicinei (solubilitatea, volumul reagentului, stabilitatea n timp, pH-ul compusului colorat);

2. A fost elaborat tehnica de dozare spectrofotometric a Azitromicinei n substan i n capsule operculate;

3. Tehnica elaborat a fost evaluat statistic i validat dup criteriile de liniaritate, repetabilitate, reproductibilitate i exactitate;

4. Tehnica elaborat poate fi inclus, n calitate de metod alternativ, n proiectul DAN pentru capsule operculate cu Azitromicin la capitolul Dozare.Bibliografie

1. Balaescu C., Metode spectrofotometrice aplicate n controlul medicamentelor, Editura medical, Bucureti, 1996;2. Farmacopeea Romn, Ed. a X-a, Editura medical, Bucureti, 2000;3. Farmacopeea European, Ed. a IV-a, 2002;4. Iurie Tihon, Livia Uncu, Vladimir Valica, Oxana Vislouh, Roman Ciobanu, Elaborarea metodei spectrofotometrice de dozare a metiferonului, Anale tiinifice a USMF Nicolae Testemianu, Chiinu, 2008;

5. Liviu Roman, Marius Bojita, Robert Sandulescu, Radu Oprean, Analiza si controlul medicamentelor (vol. 1: Bazele teoretice si practice; vol. 2: Metode instrumentale in analiza si controlul medicamentelor), Ed. Intelcredo, 2003.

PERSPECTIVE DE ELABORARE I UTILIZARE A PREPARATELOR MEDICAMENTOASE NOI. FLORALGHIN GEL I FLORALGHIN UNGUENT

Liliana Rusnac, Aureliu Postolachi, Sergiu Parii, Gheorghe Dodu, Vladimir Valica

Centrul tiinific n Domeniul Medicamentului de pe lng USMF Nicolae Testemianu, .S. S.P.B. Constructorul

Summary

Perspectives of elaboration and medical use of new drugs.Floralghin gel and Floralghin ointment

The project of innovation and technological transfer Implementation of Floralghin, ointment and dental adhesive paste in medical practice N 09.824.09.101T intends to elaborate and place into medical use two new domestic drugs. The drugs Floralghin, ointment and dental adhesive paste are made according to a innovative formula, on the base of standardized extracts from medicinal plants Arnica montana, Symphytum officinalis and Matricaria chamomilla, also Apis mellifera. The methods of extraction and processing of those new compositions and the original formula determines the optimal therapeutic effects.

Rezumat n cadrul proiectului de inovare i transfer tehnologic Implementarea n practica medical a produselor Floralghin, unguent i Floralghin, past dentar adeziv N 9.824.09.101T se preconizeaz elaborarea i implementarea terapeutic a dou produse indigene noi. Produsele Floralghin, unguent i past dentar adeziv sunt fabricate dup formule originale, avnd la baz extracte standardizate i controlate n nivelul de substane active a plantelor Arnica montana, Symphytum officinalis i Matricaria chamomilla, precum i Apis mellifera. Metodele de extracie i procesare a acestor compoziii noi, precum i formula original asigur obinerea unor efecte terapeutice scontate optime.Medicina naturist, veche de mii de ani, cunoate astzi o renatere n climatul modern de interes fr precedent fa de vindecarea natural i de insatisfacie fa de medicina convenional. Numeroase reacii adverse la medicina clasic, nregistrate anual determin pe bolnavi n primul rnd s caute o medicaie care s nu le fac ru ci numai bine. De aceea asistm n ultimul timp, la o cretere vertiginoas a utilizrii plantelor medicinale i aromatice, att ca materii prime n industria de medicamente ct i sub forme simple tradiionale chiar i n rile cu o industrie farmaceutic foarte dezvoltat [4].

Tehnicile terapiei naturale s-au mbogit simitor n toat lumea; s-au acumulat date importante de cercetare fundamental, s-au nuanat foarte mult metodele de individualizare, s-au mrit numrul de medici, laboratoare, farmacii, institute care lucreaz n acest domeniu. Astzi progresele fitoterapiei depind n mare msur de cunoaterea compoziiei chimice a produsului vegetal utilizat, de stabilirea proprietilor farmacologice ale acestuia, a complexului de principii active izolate, sau a indivizilor chimici puri izolai, de cunoaterea efectelor chimice experimentate pe forme farmaceutice cu doze bine precizate, standardizate n principii active, care permit aprecierea efectelor terapeutice n funcie de doz, cunoaterea efectelor secundare, dozele toxice i durata tratamentului [8, 9].

Fr a subestima rolul chimioterapiei, tratamentul bolilor cu ajutorul medicamentelor de sintez, izvorte din inteligena uman, care n prezent joac un rol important n special ca prim ajutor acordat bolnavului n stare grav, fitoterapia n special i medicina natural n general vin s complimenteze ansamblul de metode preventive i curative practicate n prezent. Dar nu numai s le complimenteze, deoarece numeroase substane active din plante, cele cu aciune puternic, sunt considerate tratamente de baz i nu adjuvante, n terapia modern. Astzi industria farmaceutic a inversat raportul ntre procentul medicamentelor de sintez n favoarea celor obinute din plante.

n strategiile naionale componente ale programului OMS Sntate pentru toi un loc central este rezervat mecanismelor de asigurare a utilizrii complete a resurselor floristice menionate n etnofarmacologie i n datele etnofarmacopeelor locale, pentru ocrotirea sntii. Pentru aceasta sunt elaborate strategii naionale, planuri de cercetare, sisteme educaionale i informative. Rezultatele de pn acum obinute n domeniul respectiv al OMS, relev importana resurselor floristice i etnofarmaceutice ale fiecrei ri n transpunerea n via a obiectivelor acestui program [7].n medicina popular a rii noastre sunt folosite circa 870 specii, dintre acestea aproximativ 200 sunt studiate din punct de vedere chimico-farmacodinamic, iar circa 100 de plante sunt utilizate curent n automedicaie [7]. Dei nu exist nici o strategie la nivel naional privind integrarea tradiionalului din ara noastr n fitoterapia modern i utilizarea acestuia ca un ansamblu de metode preventive i curative necesar n terapeutica modern, numeroi cercettori i desfoar activitatea pentru identificarea, izolarea i testarea substanelor active din plante, n scopul obinerii de noi medicamente naturale eficiente, n cele mai diferite afeciuni i pentru o mas ct mai mare de oameni. n acest context se nscriu i preocuprile activitii de cercetare din cadrul proiectului Implementarea n practica medical a produselor Floralghin, unguent i Floralghin, past dentar adeziv co-finanat de .S. S.P.B. Constructorul nscris n Registrul de Stat al proiectelor din sfera tiinei i inovrii cu cifrul 09.824.09.101T, conform Hotrrii Consiliului Suprem pentru tiin i Dezvoltare Tehnologic nr.121 din 30.07.2009. Aceste produse sunt fabricate dup formule originale, avnd la baz extracte standardizate i controlate n nivelul de substane active a plantelor Arnica montana, Symphytum officinalis i Matricaria chamomilla, precum i Apis mellifera. Metodele de extracie i procesare a acestor compoziii noi, precum i formula original asigur obinerea unui efect terapeutic scontat optim.

Cele mai rspndite afeciuni ale cavitii bucale, care l afecteaz aproape pe fiecare om, este caria dentar i afeciunile parodoniului - gingivitele i parodontitele [2]. Problema tratamentului i profilaxiei afeciunilor parodoniului ocup un loc de frunte n stomatologia contemporan. Importana acestei probleme este determinat de frecvena nalt a bolilor parodoniului nregistrat n toat lumea, de severitatea evoluiei lor, influena negativ asupra sntii omului, strii lui psihoemoionale. Barer G. M. et al. (1955) la cercetarea complex a persoanelor cu vrsta cuprins ntre 35 i 44 ani au stabilit, c la 95 % din cei examinai se depisteaz diverse manifestri parodontopatice - procese patologice sau modificri de diferit grad ale esuturilor parodoniului [10]. Analiza cercetrilor, efectuate la catedra Stomatologie Terapeutic a USMF Nicolae Testemianu (Gh. Nicolau, N. Carcea, 1999) denot c n Republica Moldova cazurile de mbolnvire de parodontit cu un grad uor de severitate la vrsta de pn la 29 ani constituie 37,9%; 30-39 ani 40%; 40-49 ani 22,1%. [15].

Cutarea mijloacelor i metodelor eficiente noi de tratament a gingivitei i parodontitei are o nsemntate incontestabil n stomatologia contemporan. n ultimii ani tot mai frecvent se utilizeaz preparate antihomotoxice n terapia de baz sau n complex cu metodele tradiionale de

tratament. n acest context de idei se nscrie preparatul antihomotoxic Floralghin, pasta dentar adeziv, constituit din valoroase componente de origine vegetal i Apis mellifera n cantiti homeopatice. Acest preparat medicamentos cu aciune antiinflamatoare, antiexudativ, regeneratoare, imunostimulatoare, anestezic i amelioreaz respiraia tisular precum i procesele microcirculatorii se preconizeaz de a fi utilizat sub form de pasta dentar adeziv. Mecanismul aciunii Floralghin este determinat de prezena componentelor vegetale i veninului de albini, care se caracterizeaz prin urmtoarele nsuiri:

1. aciune antiinflamatoare i antivirotic a componentelor din Chamomilla;

2. ridicarea tonusului vaselor i comprimarea vaselor sangvine (Arnica), nlturarea stazelor venoase, rezistena la formarea trombilor (Symphytum);

3. susinerea i mbuntirea respiraiei celulare i a proceselor de restabilire oxidare cu ajutorul componentelor din Chamomilla;

4. activarea cicatrizrii plgilor cu ajutorul componenilor vegetali (Arnica, Chamomilla, Symphytum);

5. aciune anestezic (Arnica, Chamomilla);

6. oprirea hemoragiilor (Arnica).n inflamare se nregistreaz o cretere a sintezei citochinelor, care particip la diverse mecanisme reglatoare [1]. De exemplu interleuchina-6 (IL-6) stimuleaz sinteza citochinelor antiinflamatoare IL-1, IL-2 i TNF. Aceste citochine sunt eliminate de limfocitele Th1 antiinflamatoare. n scop antiinflamator se utilizeaz cu succes preparatele antihomotoxice complexe ce au aciune reglatoare asupra reelei de citochine [12, 14]. n calitate de exemplu se poate numi TGF-b, care este fi sintetizat de limfocitele reglatoare (celulele Th3) sub aciunea preparatului Floralghin, care are capacitatea de a reduce nivelul citochinei antiinflamatoare de baz TNF [14]. Inflamaia esuturilor parodoniului este nsoit de intensificarea proceselor de oxidare peroxidic a lipidelor (OPL), ceea ce provoac dezechilibrul proceselor metabolice din esutul parodoniului. Intensificarea proceselor OPL n membranele celulelor, dezechilibrul sistemului de protecie antioxidant sub influena endo- i exotoxinelor microflorei patogene exercit aciune distrugtoare asupra tuturor componentelor membranelor celulare. Formarea produselor primare i secundare OPL contribue la dereglarea microcirculaiei, inflamarea i destrucia esutului parodoniului [5, 11, 13]. De menionat ipotez de lucru aprut recent despre posibilitatea pronostic i tratamentului patologiilor nsoite de inflamaie, cu ajutorul terapiei de gen, care prevede utilizarea preparatelor biologic active, inclusiv i homeopatice [3]. Neutralizarea radicalilor liberi i a produselor toxice trebuie efectuat cu ajutorul metodelor atenuante, n special, cu utilizarea preparatelor antihomotoxice. Compuii organici care se conin n aceste preparate n cantiti mici pot neutraliza cu succes radicalii i toxinele [6]. Astfel, preparatul antihomotoxic Floralghin poate fi recomandat n terapia leziunilor, proceselor inflamatorii i destructive, precum i n tratamentul complex al gingivitelor i parodontitelor, tratamentul stomatitei aftoase, gingivitei herpetice, bolilor pioinflamatoare a regiunii maxilofaciale, stomatitei i induraiilor aprute la copii dup chimioterapie, precum i la jugularea sindromului dureros dup extirparea dintelui, posednd proprieti antiinflamatorii, antioxidante, imunostimulante. Aciunea preparatului este ndreptat spre activarea respiraiei tisulare i procesele de oxido-reducere ale celulelor esuturilor parodoniului.Complexitatea aciunii preparatelor antihomotoxice permite evitarea prescrierii unui numr mare de preparate alopatice (xenobioticilor), necesare pentru obinerea unor rezultate terapeutice scandate. n afar de aceasta, preparatele antihomotoxice nu au efecte secundare, contraindicaii, este posibil utilizarea lor combinat, sunt suportate bine de pacieni [16].

n lume, dar i n Republica Moldova, bolile dermatologice cunosc astzi o rspndire din ce n ce mai mare. Acest fapt este motivat de creterea frecvenei cltoriilor, de virulena agenilor patogeni, de scderea imunitii grupurilor populaionale cu risc, de lipsa igienei i educaiei sanitare. Marea suprafa a pielii, dar i caracteristica ei special de organ, de legtur ntre organism i mediul nconjurtor o fac vulnerabil n faa factorilor de risc amintii. Pielea este astfel expus unei duble posibile agresiuni patologice, att din afar, ct i din interior. Afeciunile dermatologice rezult dintr-un cumul de factori, deoarece pielea preia prin transpiraie o disfuncionalitate a rinichilor, sau prin acumularea de toxine o disfuncionalitate la nivel digestiv (bila lene, ficat gras, colon constipaie, prezena paraziilor intestinali, alergii alimentare, disbacterioze intestinale etc.) sau pe sistem nervos se pot manifesta o serie de afeciuni cum ar fi: psoriazis, lupus eritematos, zoster, herpes; dezechilibre endocrine cum ar fi: acneea; dermatite, dermatoze de diferite etiologii; alergii; eczeme etc.

Tratamentul modern al acestor afeciuni trebuie s fie bazat astzi pe noile achiziii i cuceriri n domeniul tiinei medicale i trebuie s in cont de conceptele fundamentale ale fiziopatologiei. Biochimia i imunologia ne ajut n studiul fenomenelor alergice, alturi de industria farmaceutic, dar i de psihosomatic, ce ntregete posibilitile de tratament eficient n dermatologie. Pentru tratamentul unor afeciuni dermatologice, fitoterapia furnizeaz n prezent o gam de produse n continu diversificare, cu organotropism pentru piele i mucoase. Aceste remedii cu aciune dermoprotectoare i de reglare a funciilor pielii exercit activiti farmacodinamice complexe: antiinflamatorii, antiseptice, antibacteriene, antivirale, calmante, antialergice, etc.

Numeroasele afeciuni dermatologice care beneficiaz de unguentul Floralghin ar fi mprite n: acnee, alergie, dermatit, dermatoz, eczem, eritem, prurit, seboree, urticarie. Produsul Floralghin s-a dovedit a fi de un real folos n profilaxia i tratamentul numeroaselor afeciuni dermatologice.

Proiectul Implementarea n practica medical a produselor Floralghin, unguent i Floralghin, past dentar adeziv elaborat de comun acord cu .S. S.P.B. Constructorul i Centrul tiinific n Domeniul Medicamentului de pe lng USMF N. Testemianu i propune crearea i fabricarea unor noi fitopreparate obinute prin prelucrarea avansat a unor specii vegetale autohtone i utilizabile n contracararea anumitor maladii. ntruct administrarea medicamentului de sintez chimic s-a dovedit a fi adesea devastatoare asupra sntii populaiei umane, rentoarcerea la folosirea preparatelor naturale n profilaxia i tratamentul diverselor boli constituie o realitate de necontestat. Din acest punct de vedere, considerm c valorificarea superioar a plantelor medicinale i aromatice reprezint o preocupare creia trebuie s i se acorde o atenie din ce n ce mai mare. Investigaiile i studiile se raporteaz n special la medicina tradiional, ca un model de prevenire i tratare a maladiilor umane, bazat pe utilizarea produselor naturale. n acest context se remarc un interes deosebit pentru identificarea de surse vegetale care conin principii active care acioneaz sinergic, se adreseaz mai multor direcii de aciune (multi target) i se poteneaz reciproc.

n cadrul proiectului ne propunem valorificarea unor produse vegetale autohtone precum arnica (Arnica montana), ttneasa (Symphytum officinalis) i mueelul (Matricaria chamomilla). Originalitatea realizrii proiectului menionat consta n obinerea unor asocieri originale, complexe att prin compoziia chimic (lactone sequiterpenice, compui polifenolici, alantoin, alcaloizii pirolizidinici, cumarine i chamazulen i multe altele) ct i prin aciunea farmacologic (antiinflamatoare, cicatrizant, membranoprotectoare i antioxidant) pe baz de plante medicinale indigene. Complexitatea cercetrii deriv din aspectele multiple abordate: asocierea principiilor din clase farmacologic active ceea ce confer un efect multitarget, bine definit (antiinflamator, analgezic, cicatrizant, membranoprotector, antioxidant, .a.); prelucrarea complex a plantelor medicinale (se vor avea n vedere soluii de valorificare complex a principiilor active din produsul vegetal); elaborarea unor tehnologii de extracie moderne i selective; metodele distincte de extracie ce i propun obinerea unui fitocomplex caracterizat doar de anumite grupe de principii (rspunztoare de aciunea pe care o au n definirea preparatelor) din totalul cu potenial activ; tehnicile de condiionare protective care nu modific calitatea principiilor active din extractele selective (umiditate, temperatur, factori oxidani, .a.);

caracterizarea fizico-chimica (prin CSS, HPLC, densitometrie, spectrofotometrie UV-VIS) a extractelor selective, efectuarea de teste in vitro pentru determinarea potenialului antioxidant; fitopreparatele obinute vor fi caracterizate complex: fizico-chimic (HPLC, gaz-cromatografie, densitometrie), microbiologic i farmacologic. Astfel, putem spune c se urmrete aplicarea unor metode originale de extracie, incorporare n baza de unguent i past, precum i condiionare a principiilor active din Arnica montana, Symphytum officinalis, Matricaria chamomilla, specii autohtone puin sau incomplet valorificate n Republica Moldova. Produsele Floralghin unguent i Floralghin past dentar adeziv reprezint rezultatul final al unor tehnologii originale de obinere n condiii industriale. Conform etapelor fluxului tehnologic, vor fi utilizate mecanisme, dispozitive, utilaje, procedee de monitorizare a calitii materiei prime, a calitii i stabilitii preparatelor respective ce corespund documentaiei analitice de normare pentru preparatele cu destinaie medicinal. Pn n prezent au fost petrecute lucrri de:

Cercetare documentar privind plantele i principiile active cu aciune antiinflamatoare, analgezic, cicatrizant, membranoprotectoare, antiedemic, antimicrobian; Screening fitochimic calitativ i cantitativ al speciilor vegetale selectate (Arnica montana, Symphytum officinalis, Matricaria chamomilla) - identificarea i dozarea principalelor clase de principii active;

Experimentri de laborator n vederea stabilirii condiiilor de extracie selectiv a principalelor clase de principii active (lactone sesquiterpenice, flavonoide, uleiuri eseniale, acizi fenolcarbonici, alcaloizi pirolizidinici, alantoin, uleiuri eterice, polizaharide);

Elaborare a metodelor de obinere a fraciunilor extractive la faza de laborator; Caracterizare fizico-chimic i microbiologic a fraciunilor extractive;

Elaborare a tehnologiei de obinere a fraciunilor extractive;

Obinere a extractelor standardizate la faza pilot;

Investigare a activitii biologice a extractelor compuse (testarea aciunii antiinflamatoare, analgezice, antimicrobiene);

Elaborare a specificaiilor tehnice pentru produsele vegetale i pentru extractele obinute;

Elaborare a formulelor de asociere a extractelor selective standardizate;

Obinere a fitopreparatelor (unguent i past dentar adeziv);

Elaborare a documentaiei tehnice de realizare a fitopreparatelor.

Relevana proiectului este asigurat de:

- ntrirea capacitii de inovare a agentului economic beneficiar (cofinaatorului de proiect) i creterea gradului de nnoire a portofoliului de produse;

- obinerea de noi fitopreparate, originale, cu caracter de noutate pe plan naional, ce rspund cerinelor actuale din domeniul produselor medicamentoase vegetale de uz uman;

- introducerea noilor fitopreparate n fabricaia curent a cofinaatorului de proiect care este n acelai timp i beneficiarul rezultatelor obinute din activitatea de cercetare;

- gradul de noutate ce rezult din complexitatea metodelor de analiza fitochimic, testarea fitobiologic (citogenitate, citotoxicitate), screeningul in vitro al aciunii antioxidante i a materialului vegetal i a extractelor selective;

- obinerea noilor fitopreparate printr-o tehnologie original, modern i ecologic care permite prelucrarea superioar i valorificarea optim a potenialului produselor vegetale;

- interpretarea statistic a rezultatelor obinute;

- parteneri care dispun de specialiti i dotri necesare lucrrilor de documentare, precum i aplicare n producie a noilor tehnologii elaborate;

- materia prim propus care provine din producie indigen, aspect ce confer mai multe avantaje i anume: uniformitate n ceea ce privete coninutul n principii active, certitudinea unor plante provenite din culturi ecologice, achiziie facil, pre sczut;

- strategia general pe termen mediu a agentului economic beneficiar care are ca obiectiv distinct nnoirea continu a portofoliului de produse pe baza creterii capacitii, prin crearea de mrci proprii, elaborarea de tehnologii proprii, folosind echipamente i tehnologii performante i pregtind continuu resurse umane (atragerea de tineri cercettori cu preocupri n acest domeniu, stimularea personalului n atingerea unui nalt nivel de pregtire tiinific);

- instituiile implicate n realizarea proiectului sunt recunoscute n ar pe deoparte graie existenei ndelungate i pe de alt parte graie produselor de bun calitate elaborate nregistrnd de la an la an o cretere a indicatorilor de eficien i bonitate.

Derularea proiectului presupune desfurarea unor activiti din domenii de grani: biochimie, chimie farmaceutic, fitochimie, farmacognozie, tehnologie farmaceutic, farmacologie, medicin clinic.

Calitatea materiei prime vegetale va fi confirmat prin certificatele de calitate nsoitoare a partidei, standardele de calitate corespund Farmacopeei Romne i celei Europene. Astfel, normele UE n vigoare, relative la securitatea produselor farmaceutice pentru uz uman, au n vedere pe lng calitatea superioara a principiilor active, realizat printr-un control riguros al acesteia, standardizarea proceselor tehnologice de extracie din plantele medicinale, iar produsele farmaceutice obinute trebuie s asigure securitatea consumatorilor, pe de o parte, i msuri de securitate ale mediului nconjurtor pe de alta parte.Deoarece plantele medicinale i/sau produsele farmaceutice obinute din acestea au de obicei o ncrctur n impuriti de metale grele i pesticide, de germeni patogeni, de ciuperci, (mucegaiuri), insecte etc., n vederea utilizrii materiei prime calitative, conforme standardelor europene, ea va fi supus unui control i supraveghere minuioas, la toate etapele ncepnd cu obinerea i terminnd cu procesarea.

Tehnologiile de obinere a preparatelor Floralghin unguent i Floralghin past dentar adeziv sunt inofensive prin lipsa elementelor nocive (lipsa unor extrageni i ageni de separare i purificare interzii spre utilizare). Att calitatea fitopreparatelor elaborate, ct i procesul de obinere, condiionare i distribuire sunt reglementate conform Monografiilor Farmacopeice, nsoite de Notele explicative, Regulamentelor tehnologice de producere, diverse prescripii ca: DAN (Documente Analitice de Normare), Standarde de referin, Certificate de calitate i conformitate a produselor, GPP (Good Production Practice), GMP (Good Manufacturing Practice), GLP (Good Laboratory Practice) GDP(Good Distribution Practice). De menionat este, c ntreg ciclul de producere decurge fr deeuri de producere i prin urmare fr riscuri de poluare a mediului.

Ca poteniali beneficiari ai rezultatelor proiectului pot fi: Instituiile medicale (centre medicale specializate, clinici i spitale, centre de sntate i de reabilitare ) - vor dispune de dou remedii medicamentoase autohtone, polifuncionale i de complian terapeutic nalt, produse din materie prim vegetal autohton; Populaia, n special pturile social vulnerabile: cu venituri mici i medii, persoanele vrstnice, persoanele cu disabiliti, vor beneficia de medicamente polivalente oferite la preuri rezonabile;

ntreprinderile de producere cu profil farmaceutic - vor dispune de variantele tehnologice industriale ale ntreg ciclului i fluxului de producere n serie a produselor Floralghin unguent i past dentar adeziv (cu regulamente tehnologice de producere, monografii farmacopeice, standarde de calitate, etc.);

Industria farmaceutic (la solicitare) vor beneficia de materia prima i prescripiile de rigoare n vederea producerii medicamentelor Floralghin unguent i past dentar adeziv.Fr a subestima rolul chimioterapiei, tratamentul bolilor cu ajutorul medicamentelor de sintez, izvorte din inteligena uman, care n prezent joac un rol important n special ca prim ajutor acordat bolnavului n stare grav, fitoterapia n special i medicina natural n general vin s complimenteze ansamblul de metode preventive i curative practicate n prezent. Dar nu numai s le complimenteze, deoarece numeroase substane active din plante, cele cu aciune puternic, sunt considerate tratamente de baz i nu adjuvante, n terapia modern. ntruct administrarea medicamentului de sintez chimic s-a dovedit a fi adesea devastatoare asupra sntii populaiei umane, rentoarcerea la folosirea preparatelor naturale n profilaxia i tratamentul diverselor boli constituie o realitate de necontestat. Din acest punct de vedere, considerm c valorificarea plantelor medicinale i aromatice reprezint o preocupare creia trebuie s i se acorde o atenie din ce n ce mai mare. n acest context se remarc un interes deosebit pentru identificarea i valorificarea de surse vegetale care conin principii active ce acioneaz sinergic, se adreseaz mai multor direcii de aciune (multi target) i se poteneaz reciproc.

n medicaiile contemporane lipsesc remedii nalt eficiente prin funcionalitatea lor complex, reducerea sau lipsa efectelor adverse. Acelai rezultat se resimte i pe piaa farmaceutic a R. Moldova, unde acestea lipsesc sau sunt n cantiti insuficiente. Includerea remediilor elaborate n schemele terapeutice i de reabilitare va contribui la suplinirea acestui deficit i la rezolvarea unor probleme ce in de ameliorarea sntii umane. Unul din principalele argumente rmne a fi aciunea polivalent a acestora, confirmat prin suportul studiilor clinice ce vor veni s confirme potenialul curativ - profilactic nalt a lor.

Bibliografie

1. ABBAS, A. Cellular and Molecular Immunology. 3-rd ed. Philadelphia, London: W.B. Saunders, 2000. p. 250-277.

2. American Academy of Periodontology: epidemiology of periodontal diseases. J Periodontol, 1996, vol. 67, p. 935-945.

3. BLUM, K, MESHKIN, B, DOWNS, B.W. DNA based customized nutraceutical gene therapy utilizing a genoscore. Med Hypotheses, 2006, vol. 66, no. 5, p. 1008-1018.

4. Bojor O., Popescu O., 1993. Miracolele terapeutice ale plantelor. Mica enciclopedie de fitoterapie. Edit. Edimpex, Bucureti

5. FANG, Y.Z, YANG, S, WU, G. Free radical homeostasis. Sheng Li Ke Xue Jin Zhan, 2004, vol. 35, no. 3, p. 199-204.

6. GOODSON, J.M, TANNER, A.R, HAFFAJEE, A.D, SOCRANSKY, S.S. Evidence for episodic periodontal diseases activity. J Dent Res, 1981, vol. 60, p. 300-305.

7. Grigorescu Em., Silva F., 1997. De la etnomedicin la fitoterapie. Tezaurul verde al medicinei. Edit. Spiru Haret, Bucureti8. Percek A., 1981. Mundus medicamenti. Edit. Medical, Bucureti

9. Racz G., Laza A., Evdochia Coiciu, 1970. Plantele medicinale i aromatice. Edit. Ceres, Bucureti

10. , ., , ., , .. - . , 1995, . 74, 1, . 73-75.11. , ., , .. . , 1991, . 4, . 5-10.12. , , , . , . , 2001, 2, . 15-20.13. , ., , .. . , 2001, . 80, 1, . 5-8.14. , ., , ., , .. . , 2006, . 2, 2, . 25-28.15. , ., , . . , 2001, . 17-21.16. , ., , .. - . , 2001, 2, . 33-41.METOCLOPRAMIDA MEDICAMENT ANTIEMETIC I GASTROPROKINETIC , SUBSTRAT I INHIBITOR AL CITOCROM P450 CYP 2D6

Tatiana Cotorobai, Tamara CoteleaCatedra Chimie Farmaceutic i toxicologic a USMF N.TestemianuSummary

Metoclopramide the gastroprokinetic and antiemetic drug, substrate and inhibitor of Cytochrome P450 2D6Based on a study of selective sciens was characterized the farmacokinetics of metoclopramide monohydrochloride, the interaction between metoclopramide and Cytocrome P450, the ability of the substance to inhibit drug metabolizing P450 CYP 2D6 and CYP 3A. There were made conclusions regarding the influence of isoform specific inhibitors P450 drugs on the metabolism of metoclopramide and formation of monodeethylmetoclopramide, presumably causal factor of the toxic effects of this substances. These conclusions as a good basis for further research in vivo and for an effective pharmacotherapy to patients.Rezumat

n baza studiului literaturii tiinifice, s-a analizat caracteristica farmacocinetic a clorhidratului de metoclopramid, interaciunea dintre metoclopramid i sistemul citocromului P450, capacitatea substanei de analizat de a inhiba izoformele CYP 2D6 i CYP 3A a P450. S-au facut concluzii despre influiena unor medicamente specific-inhibitoare de izoforme P450 asupra metabolismului metoclopramidei i formrii metabolitului monodietilmetoclopramida, presupus factor cauzal al efectelor toxice ale acestei substante medicamentoase. Aceste concluzii servesc ca o bun baz pentru cercetrile ulterioare in vivo i pentru o farmacoterapie eficient a pacienilor.Actualitatea temei

Clorhidratul de metoclopramida [clorhidratul de 4-amino-5cloro-N-[(2-dietilamino)etil-2 metoxibenzamid] este substana medicamentoas ce se utilizeaz n grea i vrsturi dup operaii, iradiere, medicamente (digitalice, citostatice, antibiotice);n practica gastorenterologic i-a gsit utilizare n esofagita de reflux, dispepsie, sughi, meteorism. Metoclopramida este un antivomitiv cu aciune central, ce acioneaze prin creterea tonusului sfincterului inferior al esofagului, prin stimularea peristaltismului gastric i relaxarea sfincterului piloric, favoriznd astfel golirea stomacului.

n literatur sunt documentate cazuri de aritmie, bloc atrio-ventricular, hipertensiune, distonie i dereglri de oxidare ale hemoglobinei (methemoglobinemie, sulfhemoglobinemie). S-a presupus formarea unor metabolii toxici care duc la apariia acestor efecte adverse severe. Pentru a elucida apariia acestor efecte adverse , n cadrul catedrei de Chimie Farmaceutic i Toxicologic a USMF N.Testemianu s-a analizat izolarea i extragerea metoclopramidei din lichidele biologice in vitro, s-a studiat i literatura cu anumite cercetri farmacocinetice in vitro efectuate n SUA la catedra Farmacologie Clinic din Washington[1,3,5,7,].

Obiectivele lucrrii

De a studia literatura de specialitate si a prezenta calea de metabolizare a metoclopramidei influienat de sistemul P450.

Materiale i metode de cercetare

Substanele chimice utilizate a fost hidroclorura de metoclopramid, hidrobromura de dextrometorfan, clorzaxona, sulfatul de chinidin, dietilditiocarbamat, troleandomicina, acetatul de sodiu, EDTA, G-6-P, G-6-PDH i NADP. Ca material biologic au fost utilizate preparatele a patru ficate inutile pentru transplantare, cu prepararea ulterioara a fraciilor microsomale i resuspendarea lor n slouie tampon-fosfat. Procedura de obinere a celulelor microsomiale, precum i a citocromului P450 au fost descrise n lucrrile unui ir de cercettori, n echip cu Zeruesenay Desta, care e cercetat metabolismul hepatic al cisapridei si izoniazidei la nivel de izoformele P450. Fragmentele microsomale au fost resuspendate n soluie-tampon fosfat cu concentraia de proteine 10mgml i depozitate la -80oC pn la utilizarea ulterioar. Urmtoarea etap a fost incubarea metoclopramidei pentru analiza HPLC conform condiiilor optimale stabilite anterior. Incubarea a fost facut n prezena sistemei NADPH generatoare, celulelor microsomale la 37 oC. Metoda HPLC n UV a fost efectuat pentru a verifica prezena metoclopramidei n incubatul de celule microsomale. Faza mobil a fost compus din acetat de sodiu acetonitril trietilamin 80:20:0.05, iar pH 7,0 a fost meninut de ctre acidul acetic. Temperatura camerei a fost aleas ca fiind optimal, iar viteza de curgere 0.9 ml/ min la lungimea de unda 274 nm. Cromatograma tipic obinut n urma analizei HPLC este prezentat n figura 1[1,2,4 ].

Cu timpul de reinere a metaboliilor la 14 min, 10 min, fiind notate, respectiv: M I, M II. Pentru a identifica metabolitul M I se analizeaz incubatul de metoclopramid prin metoda spectrofotometric i se compar cu metaboliii moleculari ai metoclopramidei formai in urma metabolizarii acesteea in organismul uman i animal. Avnd ca baz analiza masei moleculare, concluzia este urmtoarea: M I corespunde metabolitului monodietilmetoclopramida, metabolit prezent n urina animalelor de laborator, dar neidentificat n organismul uman (fig.2).

Experienele ulterioare vin s determine izoforma P450 responsabil pentru formarea M I. n urma efecturii analizelor asupra monodietilrii metoclopramidei s-a constatat c metabolizarea se petrece cu ajutorul CYP2D6 n cea mai mare parte (V=4.5 0.3pmol/min/pmol) i foarte puin cu CYP1A2 (V=0.970.15 pmol/min/pmol). Rezultatul a fost prezentat schematic n diagram(fig. 3). Alte forme de citocromi, ca CYP2A6, CYP2B6, CYP 2C9, CYP 2E1, nu contribuie procesului de monodietilare.

O alt etap n cercetarea in vitro a metabolismului metoclopramidei a avut drept scop evaluarea influienei asupra gradului de metabolizare a unui ir de medicamente luate n concentraii diferite, despre care se tie c sunt inhibitori ai sistemelor de enzime P450: furfulin pentru CYP1A2, troleandomicin pentru CYP 1A2, sulfofenazol pentru CYP2C9, omeprazol pentru CYP 2C19, chinidin pentru CYP 2D6,troleandomicina pentru CYP 3A, ketoconazol pentru CYP 3A. Cercetarea a fost efectuat pentru dou ficate diferite, cu cod de identificare HL 161 i HL 09-14-99. Rezultatul obinut a fost prezentat n diagram (fig.4). Dup cum observm, chinidina cu concetraia de doar 1M inhib n primul caz metabolismul cu 78,7%, n cazul al 2-lea cu 38%, ceea ce desemneaz o dependen dintre rata inhibiiei i starea funcional a ficatelor. Troleandomicina cu concetraia 50M inhib n primul caz metabolismul cu mai puin de 4%, n cazul al 2-lea cu 22,8%. Aceast inhibiie e evident pentru chinidin i troleandomicin pentru c, cum am menionat mai sus, sunt inhibitori specfici ai CYP 2D6 i CYP 3A. Efectele inhibitoare ale chinidinei si troleandomicinei s-au studiat pe ficatul cu codul de identificare HL 09-14-99. Rezultatele sunt prezentate n graficele de mai jos. Acestea sugereaz implicarea n metabolismul metoclopramidei cu 70%, i 30% respectiv CYP 2D6 i CYP 3A.Fig.4 : Inhibiia monodietilrii metoclopramidei n dou sisteme hepatice microsomale(HL 161 i HL 09-14-99) de ctre inhibitori specifici ai izoformelor P450 n cursul cercetrilor in vitro s-a observat i fenomenul invers: efecul inhibitor al metoclopramidei asupra diferitor forme enzimatice ale P450. Pentru aceasta s-au inhibat 25M de metoclopramid cu diferite straturi izoform-specifice: phenacetin (50 M) pentru CYP1A2, flurbiprofen (5 M) pentru CYP2C9, omeprazole (50 M) pentru CYP2C19, dextromethorphan (25 M) pentru CYP2D6, chlorzoxazone (25 M) pentru CYP2E1 i midazolam (10 M) pentru CYP3A4. Metoclopramida este un puternic inhibitor al CYP 2D6 n celulele hepatice microsomale, iar inhibarea ei cu sistemul microsomal dup adiionarea anterioar a dextrometorfanului mrete inhibiia formrii dextrorfanului pn la 44% - 37% n primele 20-30 minute, ceea ce sugereaz posibilitatea inhibiiei totale (fig. 5)[2,3].

Fig.5: Inhibiia diferitor forme enzimatice ale P450. Vitezele reaciilor au fost exprimate n raport cu vitezele de control (fr adugarea inhibitorului)Concluzii

S- a efectuat un studiu de evaluare a cercetrilor in vitro n baza datelor din literatur despre interaciunea metoclopramidei cu sistemul P450 unde se explic prezena unui nou metabolit al metoclopramidei- monodietilmetoclopramida care ne demonstreaz c: CYP 2D6 este izoforma principal ce catalizeaz formarea metabolitului nou, avnd specificitate de funcionare hepatic; exist medicamente care pot deregla formarea monodietilmetoclopramidei metabolit toxic la toate tipurile de ficat; metoclopramida este nsui inhibitor al CYP 2D6.

Numrul pacienilor crora li se administreaz metoclopramida este n continu cretere, de aceea este important analiza efectelor adverse i interaciunile medicamentoase ale acestui medicament. Rezultatele acestei cercetri necesit confirmare prin teste in vivo. ns pn atunci, e necesar de a recomanda medicilor i farmacitilor-clinicieni s informeze pacienii despre apariia efectelor adverse posibile din cauza interaciunilor medicamentoase la nivel microsomal sau din cauza unor modificri ereditare la nivel de sistem enzimatic CYP 2D6.

Bibliografie

1. M. Hangan, T.Cotelea,L.Soloviov Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N.Testemianu Investigaii chimico-toxicologice asupra metoclopramidei Anale tiinifice,vol.I,Probleme medico-biologice i farmaceutice. Chiinu, 2008, pag.301-3042. Albibi R, McCallum RW(1983) Metoclopramide: pharmacology and clinical application. Ann Intern Med 98:8695.3. Baguley WA, Hay WT, Mackie KP, Cheney FW, Cullen BF(1997) Cardiac dysrhythmias associated with the intravenous administration of ondansetron and metoclopramide. Anesth Analg 84:13801381.4. Desta Z, Soukhova N, Mahal SK, Flockhart DA(2000) Interaction of cisapride with human cytochrome P450 system: metabolism and inhibition studies. Drug Metab Dispos 28:789800.5. .. 2008 -187.

6. ... .. , .. , , .. .. med-lib.ru7. 2006 STUDIUL DICLOFENACULUI N CADRUL TESTULUI DE ANALIZ CHIMICO-TOXICOLOGIC Tamara Cotelea1, Marcela Panco1, Efim Aram2 1Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N. Testemianu

2 Catedra Biofizic, Informatic i Fiziologia omului

SummaryDiclofenac study in the biological liquids

We used Diclofenac and phisico-chemical methods in the pure substance for its analysis in the blood plasma. The identification ofMarquis and Liebermann reaction. Chromatography on the thin layer in the ethylacetate-metanol-ammonia 25 % (85:10:5) Was also used. FeCl3 is used as an eluent, obtaining Rf = 0,12 cm. There was used UV spectrophotometric method in the hydroxide for identification and obtaining of maximum absorption on 275 nm.

The used methods were applied according to chemico-toxicological analysis conditions of Diclofenac in the biological liquids

Rezumat

Am aplicat metode chimice i fizico-chimice de idnetificare a diclofenacului n substa pur. Am folosit reaciile de identificare cu reactivul Marquis si Liebermann. Am aplicat cromatografia pe strat subire n sistemele de solveni etilacetat-metanol-amoniac 25% (85:10:5). Ca developant am folosit clorura de fier (III), obinnd un Rf=0,12cm. Deasemenea am aplicat metoda spectofotometric UV n acidul clorhidric i hidroxid de sodiu obinnd maxime de absorbie la lungimea de und 275nm. Metodele folosite corespund condiiilor de analiz chimico-toxicologic a diclofenacului n lichidele biologice.Actualitatea temeiDiclofenacul, acid 2-(2-(2,6-dichlorophenylamino)phenyl), fiind derivat al acidului benzen acetic cunoscut i sub alte denumiri, reduce durerea i ca atare acioneaz ca antiinflamator, analgezic i antipiretic [2]. Mecanismul exact de aciune nu este pe deplin cunoscut, dar se crede c mecanismul primar responsabil pentruaciunea sa antiinflamatorie,antipiretic,i analgezic este inhibarea sintezeide prostaglandineprin inhibareaciclooxigenazei(COX), i pare s inhibe sinteza ADN-ului[1].Inhibarea COX, de asemenea scadeprostaglandinele nepiteliuldinstomac,fcndu-l mai sensibile la coroziunea deacid gastric.Aceasta este, de asemenea, efectul principal partea lateral a diclofenauluic.Diclofenacul are o a preferin moderat sczut pentru a bloca COX2-cooenzim (aproximativ 10 ori) i se spune c, prin urmare, are o inciden ceva mai mic de plngeri gastro - intestinale mult de remarcat caindometacinaiaspirina[3].

Diclofenacul poate fi, de asemenea, un membru unic deAINS.Exist unele dovezi c diclofenacul inhib cile delipooxigenaz,reducnd astfel formarea deleucotriene( pro-inflamatorii )[4].Exist, de asemenea informaii c diclofenacul poate inhibafosfolipaza A2,ca parte a mecanismului su de aciune.Aceste aciuni suplimentare pot explica potena ridicat de diclofenac - este cel mai puternic AINS, pe o baz larg.

Exist diferene marcate ntre AINS la inhibarea lor selectiv a celor dou subtipuri de ciclooxigenaz, COX-1 i COX-2.O mare parte de proiectare farmaceutice de droguri a ncercat s se concentreze asupra COX-2 selectivi, inhibarea este ca o modalitate de a minimiza efectele secundare ale AINS gastro - intestinale cum ar fi aspirina.n practic, utilizarea unorinhibitori COX-2datoritefectelorlornegative destul de grave, dar altele n mod semnificativ de COX-AINS selective ca diclofenac au fost bine tolerat de majoritatea populaiei .Obiectivele lucrriin legtura cu creterea ntrebuinrii preparatelor medicamentoase, se marete necesitatea aplicrii metodelor mai informative n analiza acestora. Studierea legitilor repartizrii substanelor n organism deasemenea solicit metode de examinare rapide i sensibile.

Scopul lucrrii const n stabilirea metodelor de identificare i dozare a diclofenacului precum i a metodelor de izolare a acestuia din materialul biologic.Materiale i metode de cercetaren cadrul cercetrilor s-a folosit diclofenac substan pur, comprimate de 25 mg. A fost folosit plasma sanguin i urina ca lichide biologice. Au fost aplicate metode chimice de analiz. Rezultatele au fost prelucrate dup criteriul student. n investigaiile experimentale ca reageni s-au utilizat reactivul Marquis-precipitat slab brun, iar cu reactivul Liebermann precipitat rou brun, etilacetat, metanol, amoniac 25% , acidul clorhidric, hidroxid de sodiu, cloroform care au fost cu grad de puritate pur pentru analiz i chimic pur.

Pentru identificarea paracetamolului am aplicat metoda CSS folosind plci cromatografice cu coninut de silicagel G. S-a utilizat sisteme de solveni etilacetat-metanol-amoniac 25% (85:10:5), metanol:amoniac 25% (100:1,5), pentru care s-a determinat valoarea Rf = 0,12; 0,9. Ca developant am folosit clorura de fier (III).*

0,01 g de diclofenac se dizolv n 100 ml cloroform (soluia A). Din soluia A lum un ml i dizolvm n 10 ml cloroform (soluia B). Pe linia de start a plcii se aplic 2 l soluie B, placa se introduce n camera de cromatografiere i se cromatografiaz ascendent n sistemul de solveni corespunztor, cnd frontul de solveni va parcurge 2/3 din lungimea total a plcii cromatografice, placa se scoate din vas se usuc la aer i se pulverizeaz cu soluie de clorura de fier (III). Spoturile de paracetamol se coloreaz in galben-brun. Se determin valorile Rf. Sensibilitatea reciei este de 10 g/ml. Sensibilitatea metodei ne d posibilitate de a o aplica n extrasul organic din lichidul biologic cu coninut de diclofenac.

Metod de identificare i apreciere a substanelor medicamentoase bazat pe compararea cu spectrele substanelor de referin sub aspectul analizei structurale este spectroscopia de absorbie n UV. Astfel pentru identificarea Diclofenacului sau nregistrat spectrele de absorbie n intervalul lungimilor de und 250-300nm cu maxim de absorbie la 275 nm .

Fig.1 Spectru de absorbtie al diclofenacului n UVPentru determinarea identitii s-a aplicat spectrofotometria n IR, ce se reprezint ca o metod modern i se caracterizeaz printr-o informaie multilaterar despre structura chimic a substanei medicamentoase. Aceast metod ne permite identificarea analogilor aceleai clase care prin alt metod nu se poate diferenia[6].

Spectrul n IR al diclofenacului s-a nregistrat cu ajutorul aparatului Specord 75 IR n intervalul 400 - 4000 cm-1, suspensie n ulei de vaselin, (0,01 g diclofenac i 5 picturi ulei de vaselin)[4]. Discifrarea benzilor de absorbie al diclofenacului n spectru IR (fig.3.2) s-a efectuat n baza datelor din literatur[5].

Benzile de absorbie la lungimile de und, corespund vibraiilor valente asimetrice. Incepnd de la 1572 cm-1 vibraiile corespund gruprilor CH al inelului benzenic, vibraiile deformaionale neplane a grupei CH din inelul benzenic se remarc n regiunea 750 810 cm-1, iar n regiunea 1504 cm-1 se remarc vibraii valente de tipul -C=C, la gruparea C - Cl n regiunea 720 cm-1 se depisteaz vibraii valente, pe cnd vibraii intensive se nregistreaz n regiunile 1286 cm-1 ce corespund grupei OH i C - O, la lungimea de und 1308 cm-1 se reflect vibraii deformaionale a gruprii C - C - C i vibraii valente a grupei C=C n C - (CO) O.

Fig.2 Spectru diclofenacului in IR.

Izolarea i extragerea diclofenacului n lichide biologice (n vitro)S-a studiat procesul de izolare al diclofenacului n lichide biologice cu ap acidulat cu acid sulfuric 10% i acid tricloracetic 30%.

La 4 ml plasm sanguin se adaug 3 ml soluie alcoolic de diclofenac 0,1 %, se las pe 24 ore. Apoi acidulm cu soluie de acid sulfuric 10 % pn la pH 2,0-2,5 (hrtia de indicator universal). Amestecul se las pe 1-2 ore, agitndu-se periodic, apoi se adug 3 ml soluie de acid tricloracetic 30 %, se agit i se centrifugheaz timp de 10 min (5000 rot/min). Centrifugatul se separ, iar reziduul nc de 2 ori se prelucreaz cu soluie de acid sulfuric 0,02 mol/l sub controlul pH 2,0-2,5 i din nou se centrifugheaz. Centrifugatele se unesc i se filtreaz. Apoi se extrage cu cloroform de 3 ori cte 5 ml. Extraciile cloroformice se unesc i volumul se aduce pn la 20 ml.

n extractul cloroformic se determin coninutul de diclofenac prin metoda spectrofotometriei UV. Pentru aceasta extrasul cloroformic se spectrofotometreaz, citindu-se absorbana soluiei la lungimea de und 275 nm n cuva cu drumul optic de 10 mm. n calitate de soluie de referin se utilizeaz cloroformul. Paralel se anlizeaz proba cu soluie diclofenac standard.

Prepararea soluiei standard 0,05 g (masa exact) paracetamol, substan de referin, se trece cantitativ nt-un balon cotat cu capacitatea de 100 ml, se dizolv ntr-un volum de 10 ml i se aduce la cot cu acelai solvent (sol. A). 1 ml soluie A se paseaz n alt balon cotat cu capacitatea de 50 ml i volumul se completeaz pn la cot cu acelai solvent (sol. B). 1 ml soluie B conine 10 g diclofenac.

ConcluziiS-a fcut o analiz bibliografic n ceea ce privete metabolismul medicamentelor n organismul uman. S-au determinat metodele chimice de identificare a diclofenacului n substan pur i dup extracie din materialul biologic. Aplicnd metoda spectrofotometri s-a stabilit maximul de absorbie al diclofenacului n acidul clorhidric i hidroxid de sodiu obinnd maxime de absorbie la lungimea de und 275 nm respectiv. S-au stabilit condiiile de identificare prin metoda CSS . S-a determinat metoda de izolare i extragere a diclofenacului la pH 2,0-2,5.

Bibliografie1. Dutta NK, Annadurai S, Mazumdar K, Dastidar SG, Kristiansen JE, Molnar J, M Martins, Amaral L (2000)."Anti-bacterian de aciune a diclofenac demonstrat prin inhibarea sintezei ADN-ului".Int.J. Antimicrob.De ageni14(3): 249-512. Informaii pentru cadrele medicale.Medsafe - Noua Zeeland Medicamente i dispozitive medicale Safety Authority.2007-07-10.Http://www.medsafe.govt.nz/profs/datasheet/v/voltarenrapidtab.htm.Adus de 2009-03-173. Juni P.Rutjes A.Dieppe P.Are selective COX2 inhibitors superior to traditional non st 4. Missir Al., Chiri I. Chimie farmaceutic practic-analiza substanelor medicamentoase, Bucureti: Tehnoplast, 1996- 224 p5. .., .. -, 1981.280Investigaii chimico-toxicologice asupra Tiaclopridei

Iulia Cucereavaia,1 Tamara Cotelea,1 Efim Arama2, Oleg Bolotin31Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N.Testemianu2 Catedra Biofizic, informatic i Fiziologia omului N.Testemianu

3 Institutul de Geologie i Seismologie AMSummary

Chemico-toxicological investigation on the tiaclopride

Calypso 480 SC (active ingredient of tiacloprid) is the chloronicotinil insecticide. It is a product with systematic high activity in the plant, acting on the vermin insects by contact or indigestion. The tiacloprid has an effect on the level of the insects nervous system, blocking the fulfillment of the vital activity. In order to identify the Calypso, the method of UV spectrophotometry was applied. The spectrum of absorption of the Calypso solution in chloroform (0,001%) in the wavelength interval of 235-310 nm has a maximum of absorption of 290 nm. In order to determine the specific character of tiacloprid in micro-crystalloscopy and carried out the following reactions: a) the microcrystalline reactions with 10% cadmium chloride; b) microcrystalline reaction with fuchsine-sulfurous acid. The determination of tiacloprid by the HPLC method is based on the determination of the tiacloprid after the isolation of the preparation with dichlormethane from the water, with soil acetone and apples; the extracts purification by applying the immiscible systems in solvents and by the column with silicagel. The mobile phase: acetonitrile water (32.5-67.5); current rate 0.7 ml/min; =242 nm; time of retention 5.4 min.Rezumat

Calypso 480SC (ingredient activ de tiacloprid) este un insecticid de cloronicotinil. Este un produs cu activitate sistemic n plant, acionnd pe insecte vermine prin contact sau ingestie. Tiacloprida are efect asupra nivelului sistemului nervos a insectelor, blocnd satisfacia activitii vitale. n scopul identificrii Calypso, a fost aplicat metoda spectroclotometriei UV. Spectrul absorbiei soluiei Calypso n chloroform (0,001%)n intervalul de 235-310 nm are o absorbie maxim la 290 nm. n scopul determinrii caracterului specific de tiacloprid n microcristaloscopie s-au efectuat urmtoare reacii: a) reaciile microcristaline cu clorur de cadmiu de 10%; b) reacii microcristaline cu acid fucsinsulfuros. Determinarea tiaclopridei prin metoda HPLC este bazat pe izolarea preparatului cu diclormetan din ap, cu aceton din pmnt i mere; purificarea extractului prin aplicarea sistemului ioniscibil n soveni i pe coloana cu silicagel. Faza mobil: acetonitril ap (32,5:67,5); rata curentului 0,7 ml/min; = 242nm, timpul de retenie 5,4 min.Actualitatea temei

Pesticidele, substane naturale sau sintetice de cele mai multe ori, nu sunt pure, dar n diferite combinaii de diluani i tensioactivi. Cunoatem mai multe mii de ingrediente active, aplicate n practic aproximativ 500. Actualmente apare necesitatea de a crea condiii de a utiliza pesticidele cu eficien att pentru oameni ct i pentru mediul nconjurtor. Principalele caracteristici ale pesticidelor sunt: aciunea mpotriva organismelor int, aciune selectiv, de securitate pentru om i mediu. Aciunea pesticidelor depinde de capacitatea de ptrundere n organism i mutaiile la locul de aciune i de suprimare a proceselor vitale. Selectivitatea depinde de particularitile proceselor biochimice, enzime i substraturi n organisme la diverse specii, precum i a dozelor.

Ecologic sigurana pesticidelor este legat de capacitatea lor de selectivitate pentru a salva o anumit perioad de timp, mediul, fr a pierde activitatea biologic. Multe pesticide sunt toxice pentru om i animale.

Utilizarea pesticidelor n agricultur contribuie la mbuntirea productivitii i reducerea pierderilor. n cazul acumulrii pesticidelor n sol, trecerea acestora n apele subterane i apele de suprafa provoac efecte nocive asupra sntii umane i a faunei.

Obiectivele lucrrii

De a efectua studiul n vederea determinriii metodelor de izolare, extragere, identificare i dozare tiaclopridei extras din lichidul biologic.

Pentru identificarea Calypso n literatur este descris metoda spectrofotometriei n UV.

Spectrul de absorbie al soluiei