LP 3, 4: Metode de decontaminare şi controlul de calitate al acestora.

Scopuri: De a defini noţiunile: steril, sterilizare, septic/aseptic, dezinfecţie, antiseptizare, prezervare. De a discuta sterilizarea prin căldură uscată, căldură umedă: principiu, indicaţii, contraindicaţii,

parametri, etape, control de calitate. De a discuta dezinfecţia prin: fierbere, metode chimice. De a discuta condiţiile corecte de preparare şi utilizare a dezinfectantelor.

Contaminare = prezenţa microorganismelor pe o suprafaţă.Colonizare = prezenţa şi multiplicarea unui microorganism pe suprafaţa gazdei, farǎ o reacţie deosebitǎ din partea acesteia. Septic = contaminat cu microbi patogeni sau infectat (în cazul plăgilor).Aseptic = lipsit de microbi patogeni.Asepsie = ansamblul metodelor prin care evităm contaminarea unui substrat sau a unor elemente de mediu, a căror condiţie microbiologicǎ trebuie respectatǎ.Antisepsie = distrugerea sau îndepărtarea formelor vegetative ale microorganismelor, dar nu în mod necesar şi a sporilor bacterieni, de pe suprafeţe vii.Antiseptic = substanţǎ antimicrobianǎ pentru aplicǎri pe suprafeţe vii (tegumente, mucoase, plăgi).Dezinfecţie = distrugerea sau îndepărtarea formelor vegetative ale microorganismelor, dar nu obligatoriu a sporilor bacterieni, de pe suprafeţe inerte.Dezinfectant = substanţǎ antimicrobianǎ pentru aplicǎri pe materiale inerte.Steril = lipsit total de microorganisme viabile.Sterilizarea = distrugerea sau îndepărtarea tuturor microorganismelor, de pe o suprafaţă sau dintr-un obiect, inclusiv a sporilor bacterieni.Prezervare = prevenirea multiplicării unor microorganisme în produse farmaceutice, alimentare.

Agenţi de decontaminare: Mecanici: spălare cu apă şi săpun Fizici: - căldura uscată/umedă;- frigul (şoc rece);- radiaţii (neionizante / ionizante);- ultrasunete;- filtrare. Chimici: substanţe antimicrobiene

Condiţii de risc d.p.d.v. al contaminǎrii cu microorganisme: Critice (cu risc înalt de contaminare) = contact direct cu ţesuturile şi cu mediul intern: exemple. Semicritice (cu risc intermediar de contaminare) = contact cu mucoasele: exemple. Necritice (cu risc minim de contaminare) = contact cu tegumentul intact: exemple.

Nivele de eficienţă a decontaminării: Înalt = sterilizare; indicat în condiţii critice Mediu = dezinfecţie eficientă; indicat în condiţii semicritice Jos = dezinfecţie, antiseptizare, decontaminare mecanică; indicat în condiţii necritice

CĂLDURA USCATĂ

a. Sterilizarea prin ardere în flacără- Încălzirea la roşu – firul drept, ansa şi spatula de însămânţare- Flambarea – gura eprubetelor şi flacoanelor, tija ansei de însămânţare- Incinerarea – materiale dispozabile contaminate, reziduuri organice

b. Sterilizarea prin aer cald (etuvă) Principiu: căldura uscată omoară microorganismele printr-un proces de oxidare Indicaţii:

- obiecte din sticlǎ (eprubete, pipete, baloane);- obiecte din porţelan (mojar);- instrumentar chirurgical metalic (pense, bisturie, foarfece);- pulberi inerte higroscopice (talc);- uleiuri minerale.

Contraindicaţii:- soluţii apoase;- obiecte din cauciuc sau cu garnituri din cauciuc;- seringi din sticlă cu metal;- ţesături şi vată din bumbac sau fibră sintetică;- materiale contaminate din laborator.

Parametri:- temperatura = 170 - 180 ° C;- timpul = 60 minute.

timpul de sterilizare = t egalizare a temperaturii + t omorâre a microbilor.

≈ natura, forma, = constantvolumul materialelor

Etape de lucru:- constituirea lotului de sterilizare- aşezarea obiectelor ambalate şi a martorilor în etuvă- programarea temperaturii de sterilizare şi conectarea la sursa de curent- sterilizarea (timpul de sterilizare se măsoară din momentul atingerii temperaturii de

sterilizare)- răcirea materialelor- controlul martorilor

Controlul de calitate/martori:- martori fizici: temperatura- martori chimici: benzi adezive a căror culoare virează corespunzător numai când sunt

respectaţi cei doi parametri ai sterilizării.- martori biologici: benzi de hârtie de filtru impregnate cu spori de Bacillus subtilis.

CĂLDURA UMEDĂ

a. Sterilizarea prin vapori de apă sub presiune (autoclav) Principiu: căldura umedă omoară microorganismele prin coagularea proteinelor.

căldura umedă este mai nocivă decât cea uscată. Indicaţii:

- soluţii (medii de cultură);- sticlărie de laborator cu destinaţii speciale (pentru culturi de celule);- bioreziduuri (culturi microbiene, produse biologice);- material chirurgical din bumbac;- obiecte şi instrumente din cauciuc;- instrumentar metalic

Parametri:- presiune 0,5 atm 1 atm 2 atm - temperatură 115ºC 121ºC 134ºC- timp (formulă de calcul)

timpul de sterilizare = t egalizare a temperaturii + t omorâre a microbilor.

≈ natura, forma, = constantvolumul materialelor

Etape de lucru:- constituirea lotului de sterilizare,- verificarea nivelului apei din interiorul autoclavului,- introducerea materialelor ambalate şi a martorilor,- închiderea autoclavului, - evacuarea aerului (controlul evacuării complete, importanţa)- ridicarea presiunii,- sterilizarea (se urmăreşte realizarea temperaturii de sterilizare şi a timpului corespunzător

de menţinere a acesteia), - coborârea presiunii,- deschiderea aparatului (imediat ce presiunea a ajuns la 0) - uscarea materialelor (importanţa), - verificarea martorilor,- marcarea şi sigilarea materialelor.

Controlul de calitate/martori:- martori fizici: temperatură, presiune- martori chimici: benzi adezive a căror culoare virează corespunzător numai când sunt

respectaţi parametrii sterilizării (temperatură şi timp).- martori biologici: spori de Bacillus geostearothermophilus în fiole cu medii de cultură.

b. Tyndallizarea (sterilizarea fracţionată) Indicaţii: substanţe termolabile (medii de cultură, alimente). Parametri: 30-60 min., 3-8 zile consecutiv, la 56-100ºC Principiu: în intervalul dintre expuneri, produsele sunt menţinute la temperatura camerei, ceea ce permite germinarea sporilor, formele vegetative care rezultă fiind distruse la al doilea sau urmatoarele tratamente termice.

c. Dezinfecţia prin fierbere

Indicaţii: instrumentar de mică chirurgie în urgenţe (în absenţa celui steril), alimente, apa de băut, lenjerie, biberoane.

Parametri: 30 min., 100ºC Instrumentele se aşează pe un grătar ce se ridică aseptic la sfârşitul fierberii; instrumentele fierbinţi

se usucă pe fierbătorul fierbinte.

AGENŢI CHIMICI

Clasificare:- Agenţi de denaturare a stării coloidale a proteinelor (acizi, alcooli)- Agenţi blocanţi ai grupărilor chimice libere a enzimelor (peroxizi, metale grele, formaldehidă, oxid

de etilen)- Agenţi care lezează membranele celulare (fenoli, detergenţi)- Agenţi care alterează acizii nucleici (derivaţi de anilină, acridină)

Există diferenţe în ce priveşte eficienţa antimicrobiană, activitatea în prezenţa substanţelor organice, toxicitate; curat/murdar; necesitatea penetrării agentului dezinfectant.

Reguli privind utilizarea corectă a dezinfectantelor:1. Nu supraîncărca, pentru a evita scurgeri contaminante la mobilizarea borcanului2. Nu introduce obiecte care plutesc decât dacă pot fi umplute şi imersate complet sau dacă

borcanul are capac şi poate fi înclinat repetat.3. Nu introduce materiale cu conţinut proteic mare, ci colectează-le separat pentru autoclavare

directă.4. Nu dilua dezinfectantul prin scurgeri de lichide. Pentru supernatantul din tuburile de centrifugă

foloseşte un container separat cu soluţie mai concentrată de dezinfectare şi prevăzut cu pâlnie pentru reţinerea aerosolilor contaminanţi.

5. Nu lăsa mai mult de 24 de ore materialele în soluţia dezinfectantă şi nu refolosi soluţia pentru că se pot selecta şi înmulţi bacterii de contaminare rezistente

6. Soluţiile dezinfectante nefolosite 24 de ore se aruncă.