CROMOZOMII

• Lungimea de aproximativ 2m a ADN-ului eucariotelor face necesara o supercompactare a acestei molecule care trebuie sa incapa intr-un nucleu cu dimensiuni de ordinul micronilor.

• In cromozomii eucariotelor, ADN- ul reprezinta 13- 16 %, ARN -ul 12 -13 % iar proteinele histonice si non histonice 68 -72 %.

HISTONELE

H1 - bogata in H1 - bogata in lizinalizinaH2A - bogata in H2A - bogata in leucinaleucinaH2B - bogata in H2B - bogata in serinaserinaH3 - bogata in H3 - bogata in arginina si cisteinaarginina si cisteinaH4 - bogata in H4 - bogata in argininaarginina

• Histonei H10 (numită şi H5) care lipseşte în celulele care se divid şi apare în celulele diferenţiate

• Histona H2AZ, cu rol important în reglarea transcripţiei.

• CENP-A este o proteină înrudită cu H3 care are rol major în activitate centromerilor.

NON HISTONELE

• HMG “ high mobility group”

• SARs ( scaffold associated regions).

DNA

HMG-box domain

CROMATINA

• Prezinta diferite grade de condensare si se prezinta sub doua tipuri morfofunctionale distincte : eucromatina si heterocromatina ( clasificare facuta de E.Heitz in 1928).

Heterocromatina• este de doua feluri : constitutiva si facultativa

( clasificare facuta de S.Brown in 1975).

Caracteristici EUCROMATINA HETEROCROMATINA

Condensare Fin dispersată Puternic condensată

Compoziţie chimică Predomină p.b. C - G; ADN nerepetitiv; proteine nehistonice

Predomină p.b. A - T; ADN repetitiv; proteine histonice

Colorare Slabă Intensă

Activitate genetică Activă Inactivă

Replicare în faza S Precoce Tardivă

• Heterocromatină constitutivă

Heterocromatină facultativă- ex cel mai tipic îl constituie cromatina sexuală

HeterocromatinaEucromatina

NUCLEOZOMUL

• Nucleozomul contine cantitati aproximativ egale de AND si histone. Masa moleculara a nucleosomului este de cca 262 000 de daltoni, fiind alcatuita astfel :

H1 = 24000 H2A X 2 = 28000 H2B X 2 = 28000 H3 X 2 = 30000 H4 X 2 = 22000 Deci in total histonele reprezinta 132000 de daltoni si

AND diferenta de 130000 de daltoni ( cca 200 pb).

• Prin microscopie electronică s-au identificat nucleozomii de aprox.11 nm în diametru şi 6 nm în înălţime, legati între ei prin fire subţiri de acid dezoxiribonucleic.

Etape în structurarea fibrei nucleosomice:

A. Alcatuirea miezului histonic (cate 2 molecule din H2A, H2B, H3, H4).

• B. O secventa de ADN (de 146 pb) se infasoara de in jurul miezului histonic

• C. Histona H1 leaga doi nucleozomi vecini

SOLENOIDUL

• pasul de 6 nucleozomi

• diametrul de 30nm

• compactare de 5 ori

filament de nucleozomi 10 nm

filament de solenoid 30 nm

BUCLE LATERALE

• 20-100kb • diametrul de 300nm• proteinele non

histonice Sc1 si Sc2 ( scaffold”)

• Fibra pliată în bucle laterale formează la începutul profazei, printr-o puternică spiralizare şi condensare (grad compactare 20), cromatida unui cromosom cu diametrul de 700nm

Structura cromozomilor

metafazici 2 cromatide

unite printr-un centromer

Replicarea cromozomilor umani

HIBRIDIZARE FLUORESCENTA IN SITU (FISH)

Aspect normal al nucleului interfazic(sex masculin)Aspect normal al nucleului interfazic(sex

feminin)