Azotati_neproteici

7/22/2019 Azotati_neproteici

http://slidepdf.com/reader/full/azotatineproteici 1/19

1

Curs 6 CompuCompuşşii azotaazotaţţii

î î n sângen sânge

• Compuşi azotaţi neproteici în investigareafuncţiei renale.

•

Determinarea ureei, acidului uric, creatinei,

creatininei.



2

CompuCompuşşii azotaazotaţţii

î î n sângen sânge

Neproteici

• Uree (BUN-blood urea nitrogen)

• Acid uric

• Creatină, creatinină

Proteici

• Albumine

• Globuline

•

Fibrinogen

Hemoglobină

Bilirubină

Urobilinogeni



3

Compuşi azotaţi neproteici (analizaţi pentru monitorizarea funcţiei renale)

Compus Concentraţia aproximativă în plasmă

(% din total N neproteic)

Uree 45

Aminoacizi 20

Acid uric 20

Creatinină 5

Creatină 1-2

Amoniac 0.2



4

UreeaUreea

Generare: catabolismul proteinelor şi acizilor

nucleici

în ficat

Proteine Aminoacizi Amoniac Uree

Proteoliz ă enzimatic ă Transaminare şi dezaminare

oxidativ ă

Sintez ă enzimatic ă

NH4

NCO NH3

+ H–N=C=O (H2

N)2

CO

Wöhler, 1828, sinteza in vitro a ureei



5

UreeUree--SemnificaSemnificaţţie clinicăie clinică

Interval de referinţă:

6-20 mg/dL (2.1-7.1 mmol/L)

Valorile cresc cu vârsta

Peste 60 ani:

8-23 mg/dL (2.9-8.2 mmol/L)

Valori mai ridicate la bărbaţi



6

Uree -

Metode de analiză

•

Metoda chimică: reacţia cu diacetilmonoximă

)(.,

galben diazinauree noxima diacetilmo acid m ser

⎯→

cccc



7

Uree -

Metode de analiză

• Metoda enzimatică

Hidroliza ureei:−++

+ ⎯ ⎯ → ⎯ ++ 342 22 HCO NH H O H Uree Ureaza

Detecţie

conductometrică Conversia ureei neionizate

în NH4

+

şi HCO3

-

; creşte conductivitatea

(metodă rapidă)

Reacţia Nessler

Reacţia Berthlot

R. enzimatică Temă: reacţia glutarat-glutamat

NaI KI O H I Hg NH KI HgI NH → 442 332224

O H indofenol NH OCl OH H C 24562 →



8



9

AcidulAcidul

uricuric

C5

H4

N4

O3

2,6,8 Trioxipurina

Proprietăţi:

cristale albedensitate 1.87

solubilitate

în apă: slabă



10

Acid uricAcid uric

Generare :

• La om şi primate superioare: produs final de oxidare încatabolismul purinelor

•

La multe mamifere, uricaza oxidează în continuare acidul uric

la alantoină

•

Principalul compus azotat în excrementele păsărilor şireptilelor



11

Acid uricAcid uric -- semnificasemnificaţţie clinicăie clinică

Intervale de referinţă (metoda enzimatică):

Femei: 2.6-6.0 mg/dL (0.155-0.357 mmol/L)Bărbaţi: 3.5-7.2 mg/dL (0.209-0.428 mmol/L)

Valorile cresc cu vârsta (10% pe an)

GutaGuta: depunerea uratului de sodiu (cristale) în urma

precipitării în fluidul suprasaturat.



12

PurinePurinePurina – heterociclu aromatic care constădintr-un inel

pirimidinic

şi unul

imidazolic.

Termenul

general de purine

se refer ă şi la

compuşii substituiţi precum

şi la formele

tautomere.

Purina este

heterociclul

cu azot cel

mai

r ăspândit

din natur ă.

http://en.wikipedia.org/wiki/Image:Purines.gif

http://en.wikipedia.org/wiki/Image:Purines.gif



13

Acid uricAcid uric –– Metode de analizaMetode de analiza

• R. cu acid fosfowolframic (H3

PW12

O40

)

• Metoda enzimatică (uricaza)

• Metode cromatografice HPLC



14

Metoda enzimatică cu uricaza

222

uricaza

2 OHCOalantoinaOuricacid →

rosiechinonairinaminoantip4fenolOH POD

22 ⎯→

Reactia

cromogena:



15

CreatinCreatinăă,, creatinincreatininăă

Creatina

Acid metilguanidinoacetic

C4

H9

N3

O2

- Compus azotat organic prezent în organismulvertebratelor; ajuta la alimentarea cu energie a

celulelor musculare

-

Identificata în muşchii scheletici de către Chevreul

în 1832 şi numită astfel după grecescul Kreas (carne)

Creatinină – rezultă la descompunerea creatinfosfatului

în

muşchi, cu viteză relativ constantă, funcţie demasa muscular ă (valori mai mari la bărbaţi decât

la femei).

-

Cel mai fix constituent azotat al sângelui, puţin

influenţat de alimentaţie

- Investigată alaturi

de BUN (blood

urea

nitrogen).

http://en.wikipedia.org/wiki/Image:Creatine2.png

http://en.wikipedia.org/wiki/Image:Creatinine.png



16

Michel Eugène Chevreul (1786- 1889)

•

Chimist francez, cunoscut mai ales

pentru studiul acizilor graşi şiaplicaţiilor acestora în artă şi ştiinţă.

• I se atribuie descoperirea aciduluimargaric (1813), cu rol important înobţinerea margarinei şi creareaprimului tip de săpun, realizat dingr

ăsimi animale.

• Chevreul studiază culorile şiformulează Legea contrastului

culorilor .



17

CreatininaCreatinina--sesemnificamnificaţţie clinicăie clinică

Intervale de referinţă (metoda Jaffe):

Creatinina

în sânge:

Femei: 0.6-1.1 mg/dL (53-97 mmol/L)

Bărbaţi: 0.9-1.3 mg/dL (80-115 mmol/L)

• Excreţia de creatinină este mai mare la bărbaţi decât la femei

• Excreţia de creatinină scade cu vârsta



18

CreatininaCreatinina

--

analizaanaliza

• Reacţia Jaffee (considerată m. de referinţă)

•

Enzimatic

(tinde să înlocuiască r. Jaffe)

•

HPLC (cu fază inversă sau cu schimb de cationi) –

foarte specifică;

propusă ca metodă de referinţă

rosu complex picrat creatinina OH

⎯→

creatinaO H creatinina zacreatinina→+

2

ureesarcozinaO H creatina creatinaza+→ ⎯ +

2

2222 O H glicinada formaldehiO H Osarcozina idazasarcozinox

++→++

O H oxidata formaindicator O H redusa formaindicator peroxidaza

222 2)()( +→ ⎯ +

Sarcozina- acid N-Me aminoacetic; Glicina: acid aminoacetic



19

Intrebari

•

Care sunt

principalii compuşi azotaţi neproteici

din sânge

determinaţi pentru investigarea funcţiei renale?

•

Ar ătaţi pe scurt cum este generată ureea în organism.

•

Prezentaţi o metodă de determinare a ureei din sânge.

•

Prezentaţi o metodă de determinare a acidului uric din sânge.

•

Prezentaţi metoda Jaffee

pentru determinarea creatininei din

sânge

Azotati_neproteici

Documents

Transcript of Azotati_neproteici