Disciplina Biologie celulara și moleculară -Lucrări practice

Lp 8

Tehnica efectuarii amprentei de organ

Aplicații -ficat

Prin amprentele de organ pot fi analizate fragmente de organe parenchimatoase

(rinichi, ficat, splina etc). Desi preparatele nu ofera destule detalii tisulare pe care le

putem observa pe sectiunile fine, prezinta un interes in diagnosticarea rapida a

formatiunilor tumorale (tumori renale, metastaze ganglionare) deoarece pun in evidenta

prezenta anomaliilor nucleare.

Tehnica amprentei de organ:

Organul de examinat se sectioneaza prin zona care prezinta interes diagnostic:

1. RECOLTAREA

-sectionarea se face cu un bisturiu sau cu o lama bine ascutita pentru a evita

deformarea sau strivirea tesuturilor

2. ETALAREA

-cu ajutorul unei pense se preia fragmentul de tesut si se depune pe lama port-

obiect (degresata in prelabil)

3. FIXAREA

-se face cu ajutorul unui amestec de alcool si eter in proportie de 1:1 timp de 15

minute

4. COLORAREA

-se face cu albastru de toluidina (pentru preparatele native)

-se face cu o coloratie de rutina(ex. hematoxilina-eozina) pentru preparatele

permanente

Pentru demonstrarea acestei tehnici se poate utiliza ficat.Amprentele de organ se

fixeaza conform tehnicii de mai sus si se coloreaza cu hematoxilina-eozina sau albastru

de toluidină.

5. OBSERVAȚIIIMICROSCOPICE Hepatocitele sunt dispuse in grupuri de cateva

celule,cu citoplasma roz si nuclei violet; se pot observa hepatocitele binucleate.Se

observa de asemenea, numeroase eritrocite de culoare rosie (datorita vascularizatiei

bogate a organului).

Disciplina Biologie celulara și moleculară -Lucrări practice

Figura 1. Amprenta de organ-ficat (colorație hematoxilina-eozina)

Figura 2 Amprenta de organ-ficat (degenerescanta amiloidă)

Disciplina Biologie celulara și moleculară -Lucrări practice

Figura 3. Ficat-cancer (metastaza)