EXPLORAREA ÎN LABORATOR A
HEMOSTAZEI
Lucrarea practică nr. 8.
INDICAŢIILE EXPLORĂRII
HEMOSTAZEI
Investigarea cauzei unei hemoragii/tromboze
Monitorizarea terapiilor anticoagulante ,fibrinolitice sau substituţiilor de factori de coagulare
Aprecierea pericolului de apariţie a hemoragiilor înaintea intervenţiilor chirurgicale
Screeningul diatezelor hemoragice/trombotice
Evaluarea capacităţii de sinteză a ficatului
ASPECTE PREANALITICE
Pregătirea bolnavului: evitarea efortului fizic
evitarea fumatului şi a băuturilor continând cofeină
Explorarea funcţiei plachetelor: nu se consumă medicamente care influentează
funcţia plachetară (antiagregante plachetare)
Explorarea trombofiliilor: Nu se administrează derivaţi de cumarină
(Syncumar)
RECOLTAREA SÂNGELUI
Tuburi cu citrat 3,2%
Se evită aplicarea garoului timp îndelungat
Nu se recoltează primele 5 ml de sânge pentru probe de hemostază (conţinut crescut de TF)
Nu se recoltează de pe branule spălate cu heparină
Omogenizare imediată
Testarea – în 3 ore de la recoltare
HEMOSTAZA
Primară – legarea plachetelor la colagenul
expus din subendoteliul vaselor lezate
Secundară – activarea factorilor de coagulare
generarea trombinei
HEMOSTAZA
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Trombocite (PLT)
Număr
Morfologie
Funcţie 1. Timpul de sângerare
2. Adezivitatea plachetară
3. Agregabilitatea plachetară
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Număr trombocite
- V. N.: 150.000- 400.000 ∕ mm³
- Trombocitopenii: < 100.000 ∕ mm³→ purpură ∕hemoragii
- Trombocitoze:
- fiziologice → mobilizare de la nivel splenic
- patologice → creşterea producţiei de plachete
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Morfologie
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Funcţia
1. Timpul de sângerare
- injurie capilară TS trombus plachetar
ferm
- informaţii despre mecanismul coagulării
vascular
plachetar
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Timpul de sângerare Ivy modificat
- stază venoasă la nivelul antebraţului- incizii standardizate- aprecierea duratei şi abundenţei hemoragiei
- V.N.: 2,5-9,5 min.
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Timpul de sângerare Ivy modificat
TS crescut: trombocitopenii, trombocitopatii (afecţiuni ale
agregării, adeziunii trombocitare şi ale proceselor de secreţie trombocitară), afecţiuni ale pereţilor capilari;
TS normal in coagulopatii (exc.: afibrinogenimii).
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
2. Adezivitatea plachetară
unul din st. precoce ale hemostazei
Principiu:
- măsurarea descreşterii nr. de PLT dintr-o probă
care vine în contact cu o suprafaţă străină (strat
subendotelial- in vivo, perle sau vata de sticlă in
vitro)
- timp standardizat, 37 º C
- activare plachetară (stări pretrombotice)
- trombopatii, tratament cu aspirină, b. von
Willebrand
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
3. Agregabilitatea plachetară
Principiu:
- determinarea densităţii optice a plasmei bogate în
PLT (37ºC), înainte şi după adăugarea a diferiţi
agenţi inductori ai agregării
- transmisia optică: direct proporţională cu
agregarea plachetară
- boli trombo- embolice
- trombopatii
REACTIA LA ADP Inregistrarea grafica in dinamica a curbei
modificarii transmisiei optice a unei plasme
bogate in plachete (constant agitata la 37ºC)
in prezenta unor inductori agreganti
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI
SECUNDARE
COAGULOMETRIA
Măsoară timpul scurs
de la momentul
adăugării reactivului
până la apariţia
cheagului de fibrină
(în general momentul
gelificării şi nu
cheagul de fibrină
stabilizat)
Principiu: inducţie
electromagnetică
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI
SECUNDARE
1. Timpul de protrombină (TP)
Principiu:
- explorarea factorilor căii extrinseci (VII, X, V,
II)
Tehnică:
TP: timpul scurs de la adăugarea tromboplastinei
tisulare până la formarea cheagului (sec)
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
1. Timpul de protrombină (PT) - Quick
- V.N.: 11- 16 sec.
- lipsa factorilor II, V, VII, X
- avitaminoză K
- hepatită, ciroză
- anticorpi anti factor II, V, VII, X, hipo-
sau afibrinogenemie,disproteinemie.
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
2. APTT
Principiu:
- test de coagulabilitate plasmatică globală
intrinsecă
APTT: timpul scurs de la contactul
plasmei (cu substituent
plachetar-cefalina) cu o suprafaţă
electronegativă (caolină-activator F
XII), după adaos de Ca2+, până la
apariţia cheagului de fibrină (sec.)
V.N.: 25- 40 sec
Alungirea APTT cu peste 9s se consideră valoare
patologică
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
3. Timpul de trombină (TT)
- informaţii asupra fibrinoformării
Principiu:
- în prezenţa unei cantităţi standard de trombină
o plasmă normală, cu nivel de fibrinogen normal,
coagulează într-un timp definit şi constant
TT: timpul scurs de la adăugarea trombinei până la
formarea cheagului de fibrină (sec.)
V.N.: 10- 14 sec.
INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
3. Timpul de trombină (TT)
Indicaţii:
- evidenţierea hipofibrinogenemiilor,
disfibrinogenemiilor şi afibrinogenemiilor
- monitorizarea terapiei cu heparină
- anomalii calitative şi cantitative ale
fibrinogenului
- prezenţa unei antitrombine în exces
TRATAMENTUL ANTICOAGULANT
Boala tromboembolica principală cauză de deces
Forme clinice: - izolată (tromboze venoase,arteriale)
- generalizată (sindromul CID)
Tratamente antitrombozante:
- antiagregante plachetare
- antivitamine K1 şi heparina
- trombolitice
Monitorizarea terapiilor cu heparină
nefracţionată
Complexul heparină-
ATIII inactivează
trombina şi Fxa,
FXIIa, FXIa, FIXa;
Testul recomandat:
APTT
Monitorizarea terapiilor cu heparină
fracţionată
Se obţine din heparină prin
depolimerizare controlată
Inhibă FXa, în mai mică
măsură FIIa
Monitorizare obligatorie
doar în:
Hemoragie pe parcursul
terapiei
Insuficienţă renală
Ineficienta profilaxiei
trombozelor venelor
profunde
Test de laborator: testul de
inactivare a FX
MONITORIZAREA TERAPIILOR CU
ANTICOAGULANTE ORALE (CUMARINICE)
Cumarina (antagonist al vitaminei K) inhibă sinteza factorilor dependenţi de vit. K (II, VII, IX,X, proteina C, proteina S)
Teste de laborator: Timpul de protrombină (PT)INR=PR ISI (PR=rata protrombinică)
PR=PT plasmă bolnav/PT plasmă control
PT plasmă control (MNPT- Mean Normal Protrombin Time): Media geometrică a PT determinat pe minimum 20 plasme provenite de la persoane sănătoase;
ISI: International Sensitivity Index;
Rezultate:Profilaxie secundară antitrombotica: INR 2-3;
Terapie antitrombotică (valve mecanice): INR 2,5-3,5
Terapie antitrombotică (endocardită infecţioasă, valvulopatii ): INR 2-3
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
Sindrom (40-50 de stări patologice individuale):
Embolie amniotică, sindrom dead-fetus, malignoame, traume,
muşcătură de şarpe, etc.)
starea de activare a sistemului de coagulare sub acţiunea
factorului tisular şi al diferitelor citokine, eliberate din monocite,
elemente subendoteliale;
Tromboembolism diseminat cu ocluzii arteriale şi necroză
tisulară;
Activarea continuă determină consumul factorilor de coagulare
cu apariţia hemoragiilor;
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
Explorare de laborator:
PT
APTT;
testul monomerilor de fibrină,
Evidenţierea produşilor de degradare a firinogenului/fibrinei (testul
FDP,/D-dimeri)
Numărătoarea trombocitelor;
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
Indicaţii:
Diagnosticul
coagulopatiilor prin
consum (DD.
Fibrinoloză primară şi
secundară)
Diagnosticul
tromboemboliilor
Dozare: metode imune
cantitative şi
semicantitative
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
Evidenţierea D-dimerilor: FXIIIa stabilizează monomerii de fibrină prin
legături covalente încrucişate;
Fibrinoliza secundară degradează filamentele de fibrină;
Fibrinoliza primara degradează fibrina prin mecanism asemănător, rezultând fragmente D şi E;
Dacă anterior fibrinolizei s-a format fibrină stabilizată, rezultă pe lângă monomerii de fibrină şi fragmente D-dimerice legate prin legături covalente;