2.1.1. Determinarea conținutului de tanine
Principiul metodei: totalitatea compușilor fenolici sînt oxidați de reactivul Folin-
Ciocalteu. Acesta este compus din amestecul acizilor fosfovolframic și fosfomolibdenic, care la
rîndul său se reduce pînă la amestecul de oxizi colorați în albastru. Intensitatea culorii este
proporțională conținutului de compuși fenolici. Intensitatea culorii se determină la
spetrofotometru, iar conținutul substanțelor fenolice se determină după curba de etalonare [13].
Modul de lucru: Într-un vas de 50 ml se plasează 0,5 ml extract, se adaugă cca 25 ml
apă distilată. Se amestecă, apoi se adaugă 2,5 ml de reactiv Folin-Ciocalteu și 10 ml sol. carbonat
de sodiu 20%. Se aduce pînă la cotă cu apă distilată și se agită bine, și se lasă pe 30 min. A fost
măsurată absorbanța la spectrofotometrul „HACH LANGE DR-5000" (fig. 2.2) la lungimea de
undă de
750 nm. Proba martor a fost pregătita la fel, însă fără extract [14]. Rezultatul a fost calculat după
urmatoarea formulă:
mt=C tM t10−3 50V ext 103 [ mg ] (2.3)
unde: mt - masa de taninuri în 0,5 ml extract, mg;
C t -concentrația de taninuri totale, ținînd cont de curba de etalonare, mol/l;
M t -masa molară de taninuri, g/mol;
V ext -volumul extractului, ml.
Pentru a obține cantitatea totală de taninuri din extract, valoarea obținută a fost înmulțită
cu volumul de extract obținut (ml). Pentru a determina concentrația de taninuri (mol/l) a fost
elaborată curba de etalonare.
Figura 2.2 Spectrofotometrul „HACH LANGE DR-5000".
Elaborarea curbei de etalonare
Se pregătește soluția etalon de enotanin (3 mg de tanin obținut din semințe de struguri se
dizolvă în 100ml de apă alcoolizată 10 % ). Într-o serie de baloane cotate de 50 ml se introduce
în ordine crescătoare 0,5; 1; 2,5; 5; 7,5; 10 ml de soluție etalon de tanin. Se adaugă în fiecare
balon cîte 1ml reactiv Folin-Ciocalteu, 10 ml sol. carbonat de sodiu de 20 % și se aduce la cotă
cu apă distilată. Dupa 30 min se măsoară intensitatea optică la spectrofotometru la lungimea de
undă de 750 nm în chiuveta de 10 mm [13].
Figura 2.3 Probele utilizate pentru elaborarea curbei de etalonare.
2.1.8. Metoda de detrminare a pH-ului
Modul de lucru: se alege și se conectează unitatea de schimb corespunzătoarei metodei
dorite.
Se allege și se conectează electrodul corespunzător metodei. Se conectează autotitratorul apăsînd
tasta roșie Stop. Se clătește electrodul, se șterge cu hîrtie de filtru, se introduce în paharul cu
probă, de asemenea, de asemenea, se introduce și capătul biuretei. Se apasă tasta verde Start
pentru a începe titrarea.
Figura 2.6 Aparatul pentru măsurarea pH-ului ˝Titrino plus.Metrohm.