EXPLORAREA ERITROCITELOR - DETERMINAREA VSH (viteza de sedimentare a hematiilor) - NUMARAREA ERITROCITELOR EXPLORAREA LEUCOCITELOR NUMARAREA LEUCOCITELOR

DETERMINAREA GRUPELOR DE SANGE IN SISTEMUL 0AB SI Rh

DETERMINAREA VSH

- sangele este constituit din- faza dispersata = elementele figurate - faza dispersanta = plasma - extras din circulatie, sangele se comporta ca o suspensie instabila din care se separa componenta celulara de cea plasmatica

definitie: VSH = lungimea de cadere a hematiilor prin plasma intr-un interval de timp

factori care influenteaza VSH: - globulari- numar, forma, volum eritrocite - plasmatici- concentratia proteinelor plasmatice - valoarea colesterolemiei - proteinele patologice - concentratia plasmatica a acizilor biliari - alti factori- temperatura camerei - inclinarea tubului - anticoagulantul folosit

Metoda WESTERGREEN (de determinare a VSH)

principiu: - masurarea VSH este un indicator al vitezei de separare a eritrocitelor din suspensie, sub actiunea

acceleratiei gravitationale

materiale necesare: - vata - alcool sanitar - seringa cu ac steril - solutie de citrat de Na 3,8 % (anticoagulantul) - aparatul Westergreen- pipete Westergreen - stativ pentru pipete - eprubete

tehnica de lucru: - se aspira in seringa 0,4 ml solutie citrat de Na 3,8 % - se punctioneaza o vena de la plica cotului, respectand regulile de asepsie si asntisepsie, cu staza minima

(fara garou) - se recolteaza in aceeasi seringa sange pana la diviziunea 2, peste anticoagulantul de 0,4 ml (adica 1,6 ml

sange) - se omogenizeaza amestecul si se pune intr-o eprubeta - din eprubeta, sangele este aspirat in pipeta Westergreen (divizata milimertic de la 200 la 0 diviziuni) - dupa care se aseaza perfect in pozitie verticala in suportul pentru pipete - sub actiunea acceleratiei gravitationale, are loc separarea componentei globulare de cea plasmatica

aparatul Westergreen- stativ cu pipete de 300 mm - diametru 2,5 mm - gradate 200- 0 diviziuni (diviziunea 0 in sus) citirea rezultatelor- la 1 h si la 2 h de la fixarea in stativ

valori normale

1 ora 2 ore

Barbati 5-7 mm 10-15 mm

Femei

6-8 mm 12-16 mm

variatii fiziologice- cresteri- varstnici - sarcina - menstruatie - scaderi- la copii

NUMARAREA ERITROCITELOR

principiu- se numara la microscopul optic eritrocitele aflate intr-un volum de sange cunoscut si diluat intr-o

proportie cunoscuta.

lichidul de dilutie utilizat poate fi : - solutia HAYEM - solutia WITHBY - serul fiziologic

materiale- lichidul de dilutie - vata - alcool sanitar - ac de seringa steril - pipeta POTAIN pentru globule rosii (cu biluta rosie in interior) - hartie de filtru - camera de numarat (Thoma sau Burker-Turk) - microscopul optic - lamele de sticla

tehnica- se dezinfecteaza cu alcool pulpa degetului (mediu sau inelar) - se punctioneaza cu un ac steril, cu respectarea regulilor de asepsie si antisepsie - prima picatura de sange se sterge cu un tampon de vata curat - urmatoarea picatura de sange, fara a exercita presiune asupra degetului, se aspira in pipeta Potain pana la diviziunea 0,5 (sau 1) - peste ea se aspira in continuare, in pipeta, lichid de dilutie pana la diviziunea 101, realizandu-se o dilutie a sangelui de 1/ 200 sau 1/ 100 - se agita pipeta pentru omogenizarea continutului - se arunca din pipeta primele picaturi pentru ca contin numai lichid de dilutie - se fixeaza camera de numarat pe platina microscopului si se identifica reteaua gravata pe camera - se aseaza o lamela curata pe camera de numarat si se depune o picatura din lichidul din pipeta la marginea camerei de numarat - lichidul va patrunde prin capilaritate in camera - se asteapta cateva minute pentru sedimentarea si repartizarea eritrocitelor pe cadrilajul camerei - camera se examineaza la microscop cu obiectivul mic si cu lumina solara - se numara in zig-zag hematiile din 80 de patratele mici cu suprafata de 1/ 400 mm2, numarand elementele asezate pe doua din laturile sale si in interiorul fiecarui patrat

cauze de eroare: - diluarea sangelui prin comprimarea degetului - diluarea incorecta a sangelui - patrunderea de bule de aer in pipeta Potain sau in camera de numarat - omogenizarea insuficienta - examinarea unui numar insuficient de patratele - neatentie la numarare

NUMARAREA LEUCOCITELOR

principiu- se numara leucocitele direct la microscop, dintr-un volum de sange cunoscut, diluat intr-o proportie cunoscuta cu o solutie care produce liza hematiilor

lichidul de dilutie folosit- solutia TURK

materiale necesare: - lichidul de dilutie

- vata - alcool sanitar - ac de seringa steril - pipeta POTAIN pentru globule albe (cu biluta alba in interior) - hartie de filtru - camera de numarat (Burker-Turk) - microscopul optic - lamele de sticla

tehnica de lucru: - se dezinfecteaza cu alcool pulpa degetului (mediu sau inelar)

- se punctioneaza cu un ac steril, cu respectarea regulilor de asepsie si antisepsie - prima picatura de sange se sterge cu un tampon de vata curat - urmatoarea picatura de sange, fara a exercita presiune asupra degetului, se aspira in pipeta Potain pana la diviziunea 1 - peste ea se aspira in continuare, in pipeta, lichid de dilutie pana la diviziunea 11, realizandu-se o dilutie a sangelui de 1/ 10 - se agita pipeta pentru omogenizarea continutului - se arunca din pipeta primele picaturi pentru ca contin numai lichid de dilutie - se fixeaza camera de numarat pe platina microscopului si se identifica reteaua gravata pe camera - se aseaza o lamela curata pe camera de numarat si se depune o picatura din lichidul din pipeta la marginea camerei de numarat - lichidul va patrunde prin capilaritate in camera - se asteapta cateva minute pentru sedimentarea si repartizarea eritrocitelor pe cadrilajul camerei - camera se examineaza la microscop cu obiectivul mic si cu lumina solara - se numara in zig-zag hematiile din 50 de patratele mici cu suprafata de 1/ 16 mm2, numarand

elementele asezate pe doua din laturile sale si in interiorul fiecarui patrat

Calculul numarului de leucocite:

-

se gasesc X leucocite in 50 de patratele mici cu suprafata de 1/ 16 mm2 - numarul de leucocite totale/ mm3 = [X/ 50] x 16 x 10 x D unde X/ 50 = numarul mediu de leucocite dintr-un patratel mic 16 = corectia de suprafata (aducere la 1 mm2) 10 = corectia de adancime (aducere la 1 mm3) D = corectia dilutiei sangelui de 10

Valori normale

- adult 5000- 9000/ mm 3 - sugar 8000- 12000/ mm 3 - NN 12000- 20000/ mm 3

Variatii fiziologice:

Leucocitoza= cresterea nr de leucocite peste 10.000/ mm 3 Leucopenie= scaderea nr de leucocite sub 4000/ mm 3 Variatii fiziologice

:

Scaderi- persoanele sensibilizate fata de unele alimente Cresteri- dupa mesele copioase

- in efortul muscular intens - in sarcina - in a doua jumatate a zilei

variatii patologice: - cresteri- infectii acute sau cronice - stari septice grave si intoxicatii ale maduvei rosii - intoxicatii - scaderi- infectii virale - soc anafilactic - hipofunctie medulara