Institutul National de Medicina Legala “Mina Minovici”

Adresa: Sos. Vitan-Birzesti 9, Sector 4, 042122 Bucuresti

Telefon: 004021. 332 12 17; Fax: 004021. 334 62 60;

E-mail: contact@legmed.ro WEB SITE: http://www.legmed.ro

Cont: RO98.TREZ.7045.009X.XX00.0183 – Trezoreria Sector 4 Bucuresti

INML este operator date cu caracter personal inregistrat

cu nr. 2200/2005 la Avocatul Poporului

LABORATOR GENETICA Tel: 021 3321217 int 202

A8/5707/2008 3.07.2008

Domnului DANIEL CISTIAN.

Stimate domnule DANIEL CISTIAN, La memoriul adresat institutiei noastre in data de 21.05.2008, inregistrat la INML cu nr. A8/5707/21.05.2008 prin care ne solicitati explicatii lamuritoare referitoare la concluziile formulate in Raportul de Expertiza Medico-Legala – Examen ADN, nr.A15/1260/2005, efectuat in cadrul Laboratorului de Genetica al INML Bucuresti, va comunicam urmatoarele: I. Expertiza medico-legala nr.A15/1260/2005 a fost solicitata de catre DIICOT- Biroul Teritorial Brasov, si a avut ca obiective sa stabileasca: • profilele genetice regasite la nivelul probelor judiciare ridicate de la locul faptei (maner usa de acces in laborator, maner usa de acces in coridorul spre laborator, cutie de bani din material plastic, suport program de functionare farmacie, fragmente de urme papilare ridicate de la fata locului) • daca profilul genetic al inculpatului DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regaseste intre profilele genetice identificate pe probele ridicate de la fata locului • daca probele judiciare au fost prelevate in mod optim, fara sa existe posibilitatea alterarii acestora datorita metodei de prelevare, a modului de transport sau de manipulare. Expertiza medico-legala a fost solicitata INML Bucuresti dupa ce in prealabil au fost efectuate in aceeasi cauza trei expertize prin examen ADN in cadrul Institutului de Criminalistica al IGPR Bucuresti (nr.108257/2004, nr.108278/2/2005 si nr.108264/2005). II. In cadrul Laboratorului de Genetica al INML, investigatiile ADN au fost efectuate pornind de la trei categorii de esantioane: (a) esantioane continand solutii cu extracte ADN obtinute in cadrul Laboratorului ADN al Institutului de Criminalistica - IGPR Bucuresti si transmise Laboratorului de Genetica al INML Bucuresti conform adresei DIICOT Brasov (b) esantioane prelevate in laboratorul INML de la nivelul corpurile delicte inaintate spre analiza (suport program de functionare farmacie, panou hol, suport maner usa de acces in laborator, maner usa de acces in laborator, maner usa de acces in coridorul spre laborator si cutie de bani din plastic) (c) un esantion de sange prelevat in laboratorul INML de la DIACONESCU EMIL ALEXANDRU III. Rezultatele preliminare ale testarilor genetice (cele vizand detectia si cuantificare ADN in probele investigate –vezi sectiunea 2 din REML) au indicat urmatoarele: - (a) pentru esantioanele continand solutii cu extracte ADN, transferate de la laboratorul IGPR - prezenta unor cantitati reduse de ADN de natura umana (valori cuprinse intre 0.0267 – 0.285 ng ADN/μl pentru programul de functionare farmacie, maner usa de acces in laborator, maner usa de acces in coridorul spre laborator si cutie de bani din plastic – zona 5) sau absenta ADN de natura umana (valori neinterpretabile - aproape de limita de 0 ng/μl - pentru cutia de bani din plastic – zona 1,2,3,4).

1

2

- (b) pentru esantioanele prelevate in laboratorul INML de la nivelul corpurile delicte - prezenta unor cantitati extrem de reduse de ADN de natura umana (valori cuprinse intre 0.0009 – 0.028 ng ADN/μl pentru programul de functionare farmacie, suport maner usa de acces in laborator, maner usa de acces in laborator si cutie de bani din plastic) sau absenta ADN de natura umana (valori de 0 ng/μl pentru panoul din hol, maner usa de acces in coridorul spre laborator si cutie de bani din plastic – zona 5)

Datele preliminare ale analizei noastre au indicat ca atat esantioanele, atat cele de la pct.(a), cat si cele de la pct.(b), contineau .ADN „de contact”, adica acel tip de material genetic provenit din depunerea prin atingere a urmelor biologice umane pe suprafata corpurilor cu care individul vine in contact. ADN de contact poate avea ca sursa: celulele descuamate de pe pielea mainilor, corpului sau scalpului, celulele din stropii minusculi de saliva degajati in timpul conversatiei, stranutului sau tusei, celulele continute in transpiratie, etc. Studiile experimentale au aratat ca simpla atingere a unui obiect, documentata sau nu prin existenta unei amprente digitale, poate avea ca rezultat transferul unei cantitati de material biologic suficiente pentru o analiza genetica in scop de identificare. O singura amprenta digitala contine in medie 0.01 ng ADN, cantitate estimata ca fiind suficienta pentru obtinerea unui profil ADN. Testarea probelor continand ADN „de contact”, tradus tehnic prin cantitati reduse si extrem de reduse de ADN (<0.250-0.01 ng/μl in proba), poate conduce la evidentierea de profile ADN complete sau incomplete, randamentul de procesarii unor astfel de probe fiind direct influentat de cantitatea de material biologic din proba. Optimizarea protocoalelor de testare ADN in laborator si folosirea unor echipamente tehnice performante poate conduce la rezultate concludente chiar in conditile in care probele contin cantintati minime de ADN. Prin urmare, probele judiciare continand „ADN de contact” sunt in mod obiectiv o buna sursa pentru obtinerea unui profil genetic in scop de identificare. Trebuie spus ca in ajutorul expertilor din genetica judiciara vin in prezent si o serie de kituri comerciale de reactivi, special concepute pentru prelucrarea probelor judiciare dificile, continand ADN „de contact”. Pentru deplina lamurire, credem ca mai trebuie mentionat faptul ca nu numai geneticienii judiciari sunt confruntati cu analize pornind de la cantitati extrem de mici de ADN. Testarile genetice pornind de la o singura celula umana (continand ~ 3-6 pg ADN/per celula) reprezinta o practica curenta a ultimilor ani in domeniul diagnosticului prenatal si preimplantator, lucru posibil datorita performantelor atinse de tehnicile de analiza moleculara.

Oricum, pentru etapele ulterioare ale investigatiei acestui caz au fost selectate doar esantioanele unde s-a pus in evidenta ADN uman in cantitati de minimum 0.001 ng/μl. (vezi sectiunea 3 –paragraful 1 din REML) - (c) pentru esantioanele cu extractele de ADN obtinute din probele biologice de referinta ale victimelor Suzan Daga si Cistian Manuela (probe de sange prelevate autopsic) - prezenta unor cantitati semnificative de ADN de natura umana (valori de 34.9 ng/μl, respectiv 37.9 ng/μl ).

Profilele genetice obtinute pornind de la probele biologice continand material biologic abundent si de buna calitate sunt de profile complete („denumite si „profile ideale”). Interpretarea acestor profile ADN nu pune nici un fel de probleme intrucat materialul genetic de la care se porneste testarea este unul corespunzator din punct de vedere calitativ si cantitativ. IV. Dupa investigarea unor baterii extinse de markeri genetici autozomali (17 markeri de tip STR fata de 15 markeri investigati anterior in cadrul laboratorului IGPR), completate cu markeri specifici cromozomului Y (categorie de markeri neinvestigata anterior in cadrul laboratorului IGPR, intrucat nu era disponibila), rezultatele finale ale testarilor genetice au indicat urmatoarele ( sectiunea REZULTATE pct. 2,3,4,5 din REML):

pentru esantioanele prelevate in laboratorul INML de la nivelul corpurile delicte: - prezenta unui profil ADN mixt la nivelul probei program de functionare farmacie - fata de

culoare rosie, margine inferioara, profil rezultat prin amestecul de materiale biologice provenite de la cel putin doua persoane, dintre care cel putin doua de sex masculin. Caracterele genetice specifice cromozomului Y apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc complet in mixtura, in timp ce caracterele sale genetice autozomale se regasesc doar partial. Totodata, profilele ADN apatinand numitilor BALAN FLORIN C, TRAMBITAS MIRCEA, ANGHEL RAZVAN, SULTAN MIHNEA sau CISTIAN DANIEL nu se regasesc in aceasta mixtura.

- prezenta unui profil ADN mixt la nivelul probei cutie de bani din plastic – zona 9, rezultat prin amestecul de materiale biologice provenite de la cel putin doua persoane, Caracterele

3

genetice autozomale apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc partial in aceasta mixtura.

NOTA: pentru aceste doua profile ADN, data fiind evidentierea incompleta a caracterelor genetice autozomale apartinand suspectului, nu s-a putut efectua analiza de probabilitate a rezultatelor genotiparii

- prezenta unor profile ADN mixte la nivelul probelor maner usa de acces in laborator si cutie de bani din plastic – zonele 4 si 6, rezultate prin amestecul de material biologic provenite de la mai multe persoane de sex feminin.

pentru esantioanele continand solutii cu extracte ADN, transferate de la laboratorul IGPR:

- prezenta unui profil ADN mixt la nivelul probei de extract ADN orar farmacie, profil rezultat prin amestecul de materiale biologice provenite de la cel putin trei persoane, dintre care cel putin doua de sex masculin. Caracterele genetice autozomale, cat si cele specifice cromozomului Y, apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc in mixtura, cu mentiunea ca la nivelul a doi markeri genetici autozomali evidentierea caracterelor genetice este partiala. Profilele ADN apatinand numitilor BALAN FLORIN C, TRAMBITAS MIRCEA, ANGHEL RAZVAN, SULTAN MIHNEA sau CISTIAN DANIEL nu se regasesc in aceasta mixtura. Din analiza probabilistica a reiesit ca ipoteza „proba extract ADN orar farmacie contine ADN de la suspectul DIACONESCU EMIL ALEXANDRU si de la minim două persoane necunoscute” este de 50.250.000 mai probabila decat ipoteza „proba extract ADN orar farmacie contine ADN de la minim trei persoane necunoscute”

- prezenta unui profil ADN mixt la nivelul probei de extract ADN maner usa laborator, profil rezultat prin amestecul de materiale biologice provenite de la cel putin doua persoane, dintre care cel putin doua de sex masculin. Caracterele genetice autozomale, cat si cele specifice cromozomului Y, apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc in totalitate in mixtura, la nivelul tuturor markerilor investigati. Profilele ADN apatinand numitilor BALAN FLORIN C, TRAMBITAS MIRCEA, ANGHEL RAZVAN, SULTAN MIHNEA sau CISTIAN DANIEL nu se regasesc in aceasta mixtura. Din analiza probabilistica a reiesit ca ipoteza „proba extract ADN maner usa laborator contine ADN de la suspectul DIACONESCU EMIL ALEXANDRU si de la minim o altă persoană necunoscută” este de 112.000 mai probabila decat ipoteza. „proba extract ADN maner usa laborator contine ADN de la minim două persoane necunoscute”.

- prezenta unui profil ADN autozomal mixt la nivelul probei de extract ADN exterior cutie zona 5, profil rezultat prin amestecul de materiale biologice provenite de la cel putin patru persoane, dintre care cel putin una de sex masculin. Caracterele genetice autozomale apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc in totalitate in mixtura, cu mentiunea ca la nivelul a doi markeri evidentierea caracterelor genetice este partiala. Cantitatea acestui extract nu a fost suficienta pentru a se realiza in continuare si testarea markerilor specifici cromozomului Y. Din analiza probabilistica a reiesit ca ipoteza „proba extract ADN exterior cutie zona 5 contine ADN de la suspectul DIACONESCU EMIL ALEXANDRU si de la minim două persoane necunoscute” este de 4.950.000.000.000 mai probabila decat ipoteza „proba extract ADN exterior cutie zona 5 contine ADN de la minim două persoane necunoscute”.

- prezenta unui profil ADN specific cromozomului Y, de tip mixt incomplet la nivelul probelor de extract ADN interior cutie zona 1-2 si 5-6, extract ADN exterior cutie zona 6, extract ADN maner usa spre laborator, profile rezultate prin amestecul de material biologic provenit de la cel putin doua-trei persoane de sex masculin. Caracterele genetice specifice cromozomului Y apartinand lui DIACONESCU EMIL ALEXANDRU se regasesc in aceste mixturi. Totodata, profilele cromozomiale Y apatinand numitilor BALAN FLORIN C, TRAMBITAS MIRCEA, ANGHEL RAZVAN, SULTAN MIHNEA sau CISTIAN DANIEL nu se regasesc in aceste mixturi.

4

V. Consideratii legate de maniera de realizare a investigatiei ADN in cadrul Laboratorului de Genetica al INML si de modul de interpretare al rezultatelor: → testarile s-au efectuat avand in vedere ca probele judiciare (corpurile delicte ridicate de la locul faptei) care contineau microurme de material biologic. Aceste microurmele biologice au fost prelevate prin stergerea cu grija a obiectelor. → s-a avut permanent in vedere faptul ca microurmele biologice rezultate prin contact direct de scurta durata, sub 30 de secunde, nu depaseste de regula 1-2 ng, asta in conditiile in care cantitatea de ADN prezenta pe mana unui individ variaza intre 2-150 ng. De exemplu, pe un stilou tinut in mana cateva minute se regasesc in medie 1,6 ng de ADN. → s-a mai avut in vedere faptul ca materialul genetic al persoanei care intra ultima in contact cu un suport material de orice tip, este pus in evidenta alaturi de cel al persoanelor care au intrat in contact cu obiectul la o data anterioara. De pe obiectele atinse de mai multi indivizi se obtin in general profile ADN mai mult sau mai putin complete, evidentiind caractere genetice ce variaza ca intensitate. Totodata, cel mai intens sau complet profil ADN (componenta majora a unei mixturi ADN), apartine de regula individului care a atins ultimul obiectul in cauza. → investigatia genetica a urmarit testarea unor seturi largi de markeri genetici, scopul fiind obtinerea unor rezultate care sa permita formularea unor concluzii cu grad ridicat de concludenta → un aspect important al strategiei noastre de investigare l-au reprezentat MARKERII SPECIFICI CROMOZOMULUI Y1 care au avantajul de a permite analistului sa se concentreze, intr-un amestec de produse biologice, asupra componentelor masculine ale mixturii, facilitand astfel interpretarea componentelor din mixtura. In cazurile in care exista mai multi faptuitori barbati, analiza profilelor cromozomiale Y permite restrangerea rapida a listei celor supectati. In evaluarea capacitatii discriminatorii a unui profil ADN-Y trebuie sa se tina cont de modul particular de transmitere al cromozomului Y, intrucat acest cromozom se trasfera integral de la tata la fiu - prin urmare, acelasi cromozom Y se regaseste in succesiunea generatiilor la toti barbatii care au o descendenta comuna pe linie paterna. Un profil ADN-Y are capacitatea de a distinge > 99,99% dintre barbatii neinruditi, respectivul profil putand fi regasit practic doar la rudele pe linie masculina ale persoanei investigate. Semnificatia statistica a unui profil cromozoial Y nu poate fi estimata probabilistic prin regula produsului ca in cazul profilelor ADN cu markeri autozomali2, ci prin raportare la o baza de date nationala sau internationala. Rezultatul operatiei de cautare pe 9 markeri Y-STR in Bazei Internationala cu Profile Cromozomiale Y nu a inregistrat nici o corespondenta pentru profilul de referinta al suspectului DIACONESCU EMIL ALEXANDRU, ceea ce semnifica faptul ca respectivul profil cromozomial Y este unic, putand fi regasit doar la rudele pe linie masculina ale persoanei investigate → pentru interpretarea rezultatelor si formularea concluziilor s-au selectat numai acele probe care au evidentiat la doua testari succesive profile ADN consistente, caracterizate prin aceeasi constelatie de caractere genetice. S-au respectat astfel recomandarile formulate de comunitatea stiintifica a expertilor in genetica judiciara, scopul fiind de a se elimina riscul raportarii unor rezultate fals prin includerea unor artefacte de reactie intre datele reale ale analizei. Rezultatele genotiparilor care nu au indeplinit criteriile sus-mentionate nu au servit la formularea de concluzii.

VI. Sintetizand rezultatele investigatiilor ADN efectuate succesiv in cele doua laboratoare, se poate spune ca:

► investigatiile genetice efectuate in cele doua laboratoare cu profil de genetica judiciara au fost concordante, completandu-se in ce priveste protocoalele de laborator si bateriile de markeri genetici analizati

► ambele laboratoare au efectuat investigatiile folosind reactivi omologati international pentru identificarea de persoane, protocoale de testare omologate si adaptate la cerintele cazului, precum si echipamente de analiza genetica performante, de ultima generatie

1 Markerii genetici pot fi localizati la nivelul perechilor de cromozomi umani 1-22, caz in care se numesc markeri autozomali, sau la nivelul cromozomilor sexuali X si Y, caz in care poarta numele de markeri specifici cromozomului X, respectiv markeri specifici cromozomuluii Y. 2 Vezi definitia din referinta 1

5

► expertizele genetice au obiectivat stiintific faptul ca pe corpurile delicte ridicate de la locul crimei s-a pus in evidenta ADN de natura umana in cantitati mici sau extrem de mici - ADN provenit prin contact

► profilul ADN apartinand numitului DIACONESCU EMIL ALEXANDRU, s-a regasit in majoritatea mixturilor de ADN identificate si analizate, caracterele genetice, atat cele autozomale, cat si cele specifice cromozomului Y, fiind evidentiate fie complet, fie partial pe corpurile delicte de la fata locului (suportul de hartie plastifiat al programului de functionare al farmaciei, cutia din plastic de depozitare a banilor proveniti din incasari si manerul usii de acces in laboratorul farmaciei)

► expertiza genetica efectuata in laboratorul INML, prin extinderea investigatiilor asupra unor categorii noi de markeri genetici, a avut drept consecinta directa cresterea gradului de concludenta al rezultatelor obtinute anterior in laboratorul IGPR

► cresterea gradului de concludenta al concluziilor REML A15/1260/2005 este evidentiata de probabilitatea extrem de mare de regasire a profilului ADN al suspectului DIACONESCU EMIL ALEXANDRU pe corpurile delicte analizate in raport de alti indivizi din populatia generala (vezi valorile probabilitatii de regasire raportate de 112.000, respectiv, 4.950.000.000.000 pentru markerii genetici de tip autozomal, precum si unicitatea profilului cromozomial Y).

► in opinia noastra, toate probele supuse investigatiei genetice au fost prelevate in mod optim si conservate corepunzator.

VII. Importanta investigatiilor ADN pe urme de contact din perspectiva rezolvarii unor cazuri criminale la nivel international. Investigatiile de genetica judiciara, conduse pe probe continand ADN de contact, au condus in in multe cazuri la rezolvarea cu succes a unor anchete judiciare, printre care se numara si asasinatul comis asupra fostui ministru de externe al Suediei, Anna Lindh. Astfel, este dovedit faptul ca rezultatele testarilor ADN sunt larg acceptate de catre instantele internationale, daca aceste expertize stiintifice respecta standardele de analiza si recomandarile forurilor stiintifice din domeniu.

Dr. Ligia Barbarii Medic primar legist

Coordonator Laborator Genetica INML