Modificari structurale ale interfeei materno-fetale i evoluia postnatal a copilului

Conductor tiinific : Prof. Univ. Dr. Anastasiu Doru Mihai

Doctorand Dr. Ilie Rodica

CUPRINS

LISTA DE ABREVIERIINTRODUCERECAPITOLUL I INTERFAA MATERNO-FETAL, DATE DIN LITERATUR

0. Implantarea interaciunea embrio-matern0. Stadiile iniiale ale dezvoltrii embrionare 0. Dialogul materno-embrionic0. Factorii necesari unei implantri corecte0. Consideraii imunologice privind interfaa materno-fetal1.2.1. Imunologia implantrii i formarea mai multor interfee materno-fetale 1.2.2. Trofoblastul fetal i expresia HLA1.2.3. Eschivarea imun a trofoblatilor1.2.4. Populaiile de celule imunologice de la nivelul IMF1.2.5. Reglarea imun specific fetal de ctre celulele T materne 1.3 Interfaa materno-fetal1.3.1. Structura interfeei materno-fetale1.3.2. Morfologia structurilor ce asigur schimburile materno-fetale0. Homeostazia interfeei materno-fetale

CAPITOLUL II HIPOXIA FETAL, AFECTAREA PLACENTAR I RCIU

1. Modificri hemodinamice n hipoxia fetal1. Hipoxia fetal cronic si stresul oxidativ1. RCIU

CAPITOLUL III STUDII PERSONALE

CAPITOLUL IV MATERIAL SI METOD

4.1 MATERIALUL DE STUDIU - SELECIA CAZURILOR

4.2. METODE DE PRELUCRARE HISTOLOGIC A PLACENTEI4.2.1. Metode de colorare convenionale4.2.2. Metode imunohistochimice

4.3 METODE DE PRELUCRARE A DATELOR

CAPITOLUL V REZULTATE

5.1. HIS5.1.1 Leziunile placentare din HIS, prin coloraii histologice uzuale5.1.2 Leziunile placentare din HIS, prin coloraia imunohistochimic 5.1.3 Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu HIS

5.2 DZG5.2.1. Leziunile placentare din DZG, prin coloraii histologice uzuale5.2.2. Leziunile placentare din DZG, prin coloraia imunohistochimic 5.2.3. Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu DZG

5.3 SCORUL GIP

CAPITOLUL VI DISCUII

6.1. LEZIUNI HISTOLOGICE PLACENTARE, PRIN COLORATII UZUALE6.1.1. Semnificaia leziunilor histologice din HIS6.1.2. Semnificaia leziunilor histologice din DZG

6.2. LEZIUNILE PLACENTARE PRIN COLORARE IMUNOHISTOCHINICA PENTRU ANTICORPI MONOCLONALI6.2.1. Leziunile placentare din HIS, prin coloraia imunohistochimic6.2.2. Leziunile placentare din DZG, prin coloraia imunohistochimic

6.3. DATELE CLINICE ALE NOU-NASCUILOR

CAPITOLUL VII CONCLUZII

7.1. CONCLUZIILE STUDIULUI HISTOLOGIC7.2. EVOLUIA POSTNATAL PRECOCE CONSECINELE AFECTRII INTERFEEI MATERNO-FETALE7.3 PROPUNERI DE INVESTIGAIE SISTEMATIC PLACENTAR, PRIN PROTOCOALE DE EXAMINARE

BIBLIOGRAFIE

LISTA DE ABREVIERI

HIS = Hipertensiunea indusa de sarcin DZG = Diabet zaharat gestaional IMF = Interfaa materno-fetalRCIU = Retardul de cretere intrauterin GIP = Gradul de Insuficien Placentar VG = Vrsta Gestaional GN = Greutatea la Natere DZ = Diabet Zaharat LS = Lot de Studiu LC = Lot de Control

INTRODUCERE Primul organ care se formeaz ntr-o sarcin, este placenta, organ temporar, de legatur ntre mam i copil. Placenta controleaz schimburile metabolice i de oxigen dintre mam i ft, produce factorii i hormonii de cretere i asigur transferul nutrienilor care susin creterea fetal.Succesul sarcinii presupune evitarea respingerii acesteia de ctre sistemul imunitar matern. Celulele fetale i materne vin n contact direct n decidua, care este o membran mucoas foarte specializat, ce joac un rol cheie n tolerana fetal, i permite dezvoltarea interfeei materno-fetale (IMF).Cheile de baz pentru o sarcin uman de succes sunt conversia fiziologic a arterelor spiralate, i consecutiv, perfuzia placentar adecvat. O placentaie defectuoas, cu invazie trofoblastic diminuat i insuficien de remodelare a arterelor spiralate determin un rezultat nefavorabil al sarcinii cu urmri ca pierderea precoce a acesteia, retardul de cretere intrauterin (RCIU) sau/i HIS. Aceste complicaii ale sarcinii constituie factorii predispozani, cu un impact major, n dezvoltarea bolilor din viaa adultului. Funcia placentar anormal constnd n creterea rezistenei vasculare, transportul impropriu de nutrieni i gene imprimate epigenetic are un impact important asupra adaptrii fetale a programrii. STUDII PERSONALE Ipoteza de lucru i obiectivele studiuluiCercetarea placentei ar trebui s reprezinte pentru ntreaga comunitate medical o problem prioritar, deoarece reprezinta un jurnal valoros al evoluiei prenatale a fiinei umane. La natere, acest organ trebuie studiat sistematic, i conservat o perioad lung de timp, pentru a extinde cercetarea sa anatomopatologic, n cazul evoluiei nevaforabile a nou-nscutului. n ara noastr cercetarea placentei este n prezent o problem aproape ignorat.Pornind de la aceste premize, cercetarea personal i propune s realizeze urmtoarele obiective:

1. Delimitarea a dou grupe majore de afeciuni materne cu impact major asupra placentaiei, dezvoltrii placentare, i implicit, a dezvoltrii fetale: HIS i DZG.

2. Realizarea pe baza unor criterii de includere i excludere, a dou loturi omogene de nou-nscui prin selectarea celor cu cel mai ridicat grad de risc, pentru ambele afeciuni.

3. Prelevarea placentelor pentru studiul morfopatologic, pentru ambele categorii patologice.

4. Realizarea a dou grupe egale de nou-nscui, reprezentnd loturile de control (modelul de studiu CAZ-CONTROL), precum si prelevarea placentelor corespunztoare, realizndu-se astfel, si cele dou loturi de studiu histologic de control;5. Identificarea i evaluarea principalelor leziuni specifice ale IMF care susin o concordan cu patologia perinatal, pentru fiecare grup n parte.

6. Validarea ipotezei prognozate, c placenta este un martor important al unor evenimente patologice ale perioadei prenatale, cci anumite modificri morfologice ale IMF, devin un marker specific al unor dereglri din perioadei sarcinii, cu consecine patologice, postnatal. Cercetarea morfologic placentar a fost focalizat pe IMF, structur de schimb deosebit de complex, care aparine att mamei, ct i ftului, structur a crei lezare i suferin are determinism n patologia perinatal, i n unele aspecte ale patologiei adultului.

7. Realizarea unui scor al gradului de insuficien placentar (GIP), prin a crui utilizare s se poat realiza la momentul nasterii, corelaii rapide (absolut necesare neonatologului in urgene) ntre complexul lezional al IMF, i manifestrile patologice postnatale.Cercetarea pleac de la dovezile a numeroase studii, care susin c hipoxia precoce determin multiple tulburri vasculare, imunologice i metabolice materno-fetale, urmate n final de modificri structurale ireversibile. Acestea, reunite ntr-un scor GIP, studiat imediat dup natere au scopul de a ncerca stabilirea retrospectiv a gradului afectrii hipoxice a nou-nscutului, cu prevenirea i/sau corecia modificrilor clinice, nainte de a fi prea trziu.

MATERIALUL DE STUDIU

Studiul s-a realizat la Clinicile de Obstetric-Ginecologie i Neonatologie ale Spitalului Clinic Judeean de Urgen Timioara, cu avizul conducerii acestora. De asemenea, a fost avizat de Comisia de etica a UMF Victor Babe din Timioara i a Spitalului Clinic Judeean de Urgen Timioara.PRELEVAREA SPECIMENELOR

Specimenele de studiu pentru HIS i DZG au provenit din fragmentele recoltate imediat dup natere de la cele 68 de placente ale pacientelor cu HIS, i respectiv, gravidele normotensive (control), iar alte 30 de placente au furnizat fragmentele recoltate de la gravidele cu DZG, i respectiv, de la gravidele cu sarcin normal (control).

Pentru fiecare placent, s-au prelevat cte 5 fragmente de seciune, din urmtoarele zone distincte, ale fiecarei placente faa fetal, seciunea median, faa matern, amnion i corion.

Eantioanele astfel prelevate, au fost fixate n formalin tamponat n concentraie de 10%, timp de 24-48 de ore, fiind utilizate apoi pentru prelucrarea lor specific corespunznd celor 3 tipuri de coloraii histologice convenionale, i respectiv, 3 tipuri de anticorpi monoclonali, prin meto-de imunohistochimice.

SELECTIA CAZURILORPentru nou-nscutii rezultai din mame cu HIS: Criteriile de includere au fost urmtoarele: Vrsta Gestaional (VG) 28 sptmni; Greutatea la Natere (GN) 1000g i