cursuri biochimie

8/19/2019 cursuri biochimie

http://slidepdf.com/reader/full/cursuri-biochimie 1/7

Curs 1. Proteine

Plasma=sistem colloidal

Clase de proteine: plasmatice, albumina, globulinele

-globulinele au peste 60 de fractiuni proteice individuale cu functii diferite

-proteinemia reprezinta concentratia proteinelor totale din ser (plasma) si se datoreaza unui

echilibru dinamic intre cantitatea de proteine sintetizata de diverse organe (intestine, ficat)

si cea utilizata sau depozitata de diferite organe

Rol:

1.de transportor al diversilor produsi de metabolism, hormone, vitamine etc.

2.apararea specifica si nespecifica a organismului

3.mentinerea presiunii coloid osmotic si a echilibrului acido-bazic.

DETERMINARE

-in general se determina din ser

-prin fotometrie sau spectrofotometrie

-metoda biuretului: principiul metodei se bazeaza pe reactia proteinelor (compusilor culegaturi peptidice) de a reactiona cu Cu+ in solutie alcalina, dand saruri colorate in violet

-probele se citesc la 540 nm, intensitatea culorii este direct proportionala cu cantitatea de

proteine din ser (proteinele urinare sau proteinele din LCR)

-materiale biologice: sange, LCR, urina, lichid de punctie

-valori normale : 60-80g/l la adult ; 45-75g/l la nou nascut

-proteinuria: <150 mg/zi ; LCR: 150-450 mg/l

-se determina pe urina din 24 ore

DISPROTEINEMIA

-reprezinta modificarile calitative si/sau cantitative a continutului de proteine din plasma

-valori scazute (hipoproteinemie): insuficienta hepatica, sindrom de malabsorbtie,

malnutritie, sindrom nefrotic

-hipoproteinemie falsa: cand se recolteaza sange de pe cateter

-hiperproteinemie absoluta: hiperimunoglobulinemie cronica, gamopatii monoclonale



-hiperproteinemie realtiva: diabet insipid, diaree

ALBUMINE

-proteine cu dimensiuni si greutate molecular mica

-stabilizeaza echilibrul colloidal al plasmei

-metode de dozare: fotometrice (verde de bromcrezol)

-procentaj relativ din proteinograma

-alte lichide biologice: imunodifuzie radial, nefelometrie, imunoturbidimetrie

PROTEINURIA BENCES-JONES

-lanturi usoare k sau λ

-apar la pacienti cu plasmocitom, macroglobulinemia Waldenstrom

-metode de evidentiere: imunofixare, electroforeza urinara

ALBUMINE TOTALE

-valori medii :55-65 % din totalul proteinelor plasmatice 34-48 g/l

-in urina : sub 20 mg/l

-LCR : 110-350 mg/l

-valori scazute: insuficienta hepatica, sindrom nefrotic, inflamatii acute si cornice, tumori

maligne

ELECTROFOREZA PROTEINELOR

-metoda utilizata pentru screening-ul disproteinemiilor

-metoda analitica si preparative de separare a particulelor sau ansamblurilor de particule

incarcate electric sub actiunea unui camp electric extern

-o particular incarcata electric se va deplasa cu o viteza constanta determinate de actiunea

fortelor de atractie electroforetica si a fortei de frecare

-pentru electroforeza: gel de agaroza, tampon (barbital), colorant (amidoblack), sursa de

current, camera de mirgrare

-se aplica ser pe agaroza

-dupa 10 minute se intra in gel

-se introduce in aparatul de electroforeza



-se adauga tampon

-se realizeaza programul de migrare

-dupa migrare se coloreaza apoi se decoloreaza in 2 bai successive (acid acetic 2 %)

-interpretare

FRACTIUNI ELECTROFORETICE

-albumina (anod)

-α-1-globuline

-α-2-globuline

-β-globuline (hemopexina, factorul C3, transferina)

-γ-globuline (IgM, IgA)

-valori normale : albumina 54-65%, α1glob. 1,2-3,3%, α2glob. 8,3-15%, βglob.9-17 %, γglob

7-19%

-interpretare: regiunea α contine α1-chemotripsina care este reactant de faza acuta dar cel

mai specific marker este protein C reactiva care poate sa creasca in 24 de ore pana la 1000

de ori.

-ciroza hepatica, sindrom nefrotic, inflamatie acuta, anemie feripriva(↑ transferina),

leucemie mieloida acuta, leucemie limfatica cronica (↓ albuminemie, ↓γ-globulinemia),

mielom multiplu.

CURS 2. EXPLORAREA METABOLISMULUI LIPIDIC

-Clase de lipide: colesterol (esterificat, neesterificat), triglyceride, fosfolipide, acizi grasi

LIPIDELE SERICE

=grup heterogen de compusi chimici, solubili in solvent organic, insolubili in apa

-rol:1. Energetic (TG, AGL) ; 2. Functional (acizi biliari, hormone steroizi, leucotriene); 3.

Structural (fosfolipide)

-lipidele reprezinta aprox. 20% din greutatea unui adult normal conformat si majoritatea se

gasesc in combinatii ale acizilor grasi cu alcool si amide

-determinarea lipidelor: separarea lipoproteinelor, dozarea lipidelor totale



LIPIDELE TOTALE

-testare cu valoare orientativa

-valori normale : 400-800mg/dl

-valori crescute: dislipidemii primare, secundare (diabet zaharat), sindrom nefrotic,

pancreatita acuta, alcoholism

-valori scazute: hipertireoza, infectii acute, anemii grave

COLESTEROLUL TOTAL

-este un parametru important in etiologia ateroscleroza

-precursor pentru acizii biliari si hormone steroizi

-face parte din structura membranelor celulare si a membranelor organitelor celulare

-aproximativ 70% se gaseste sub forma esterificata

-prin alimentatie se aduce 1 g de cholesterol pe zi

-se produce 6 g/zi de cholesterol

-glanda suprarenala contine 70% cholesterol

-valorile normale se interpreteaza in functie de varsta, sex, regiuni cultural si geografice

-la adulti: risc scazut 140-200 mg/dl, limita de risc 200-240 mg/dl, risc crescut peste 240

mg/dl

-la copii: risc scazut <170 mg/dl, limita de risc 170-200 mg/dl, risc crescut peste 200 mg/dl

-valori crescute: obstructii biliare, ciroza portal, hepatite acute, sindrom nefrotic, pancreatita

cronica, DZ, hipotireoza, hipercolesterolemie familial, dislipidemii

-valori scazute: ca urmare a starii septice, hipertireoza, boala Tangier (deficit de HDL),

anemii, macroglobulinemie, stari carentiale

-metoda de determinare: fotometrica/enzimatica

-colesterolul liber (neesterificat)-valori normale <75mg/dl

-colesterolul esterificat-valori normale 60-100mg/dl

FOSFOLIPIDE

-componente structural ale membrane celulare

-valori normale 160-280 mg/dl



-valori crescute:ciroza biliara, obstructii biliare, sindrom nefrotic, DZ

TRIGLICERIDELE

-reprezinta esteri ai glicerolului cu acizi grasi

-90% provin din alimente

-peste 95 % se depoziteaza la nivelul tesutului adipos

-valori normale: risc scazut sub 150 mg/dl, risc mediu 150-200 mg/dl, risc crescut 200-500

mg/dl, risc foarte crescut peste 500 mg/dl

-valori crescute: hiperlipoproteinemie I si II, pancreatita, sindrom nefrotic, DZ decompensate

-valori scazute: stari carentiale, anemii severe, hipodistrofii

-hipertrigliceridemia de peste 500 mg/dl creste riscul de pancreatita

-valori peste 1000 mg/dl creste substantial riscul de pancreatita si lipoproteinemie de tip I

-valori peste 5000 mg/dl apar xantoame eruptive, dispersia retinalis, arc cornean

LIPOPROTEINELE

-reprezinta macromolecule complexe, solubile in apa

-forma de transport a lipidelor→apoproteina ApoP=rol in transportul moleculelor de lipidede la locul de absorbtie (intestine subtire), locul de sinteza(ficat) pana unde se utilizeaza sau

se depoziteaza, factor de reglare al metabolismului lipidic

-metode de determinare: ultracentrifugare, electroforeza

-α-lipoproteine: HDL

-pre-β-lipoproteine: VLDL

-β-lipoproteine: LDL

α-LIPOPROTEINELE (lipoproteine cu densitate mare –HDL)

-colesterol bun, antiterogen

-preia colesterolul de la periferie si il transporta la ficat pentru eliminare

-valori normale: barbate 20-25%, femei 25-30%

-patologie-valori scazute: primar (boala Tangier), secundar (fumatori, obezi, sedentari,

alcoolici, la femei in postmenopauza)

β-LIPOPROTEINELE (LDL)



-colestrol rau

-principalul transportor al colesterolului esterificat din organism

-se formeaza in circulatie si il transporta la periferie

-valori normale: la barbati si la femei <155

-valori crescute: hipercolesterolemie familial, hipotiroidism, afectiuni hepato-biliare,

tratamente hormonale

Apoproteina A1(ApoA1)

-specifica HDL

-reprezinta factor de progres pozitiv in ateroscleroza, mai important decat HDL

Apoproteina B

-componenta proteica pentru LDL, in special ApoB100

-factor de progres negativ, mai important decat LDL pentru evidentierea aterosclerozei

Lipoproteina X (LP-X)

-patologica, contine lipide biliare, cholesterol liber, diferite apoproteine

-nu se intalneste la persoanele sanatoase, se gaseste in serul persoanelor cu colestaza

Lipoproteina a

-factor de risc independent pentru boala aterosclerotica

-structura identical LDL+Apo(a)

-se aseamana structural cu plasminogenul

-factor de risc lipidic si trombotic

DISLIPIDEMII

-reprezinta modificari cantitative si/sau calitative ale lipoproteinelor

-hiperlipemii

-hipolipemii

-hiperlipoproteinemii: se caracterizeaza prin cresterea trigliceridelor si/ sau a colesterolului

peste limitele acceptate ca anormale pentru varsta, sex, starea de sanatate a persoanelor

-hipercolesterolemia izolata :↑LDL



-hipertrigliceridemia: ↑VLDL, rar↑chilomicroni

-hiperlipidemia combinata: ↑LDL, ↑VLDL, mult mai rar ↑IDL

CLASIFICAREA HLP

-tipuri 1, 2(a,b), 3,4,5

-tip 1: ↑trigliceridele peste 1000, boala aterogena, da fenomene de pancreatita acuta la

varsta tanara, nu are tratament doar dieta

-tip 2a: ↑colesterolul din LDL, la homozigoti valoarea colesterolului 600 mg/dl cu manifestari

de ateroscleroza la tineri,boala rara ; la heterozigoti 350 mg/dl-boala frecventa dupa 40 ani

-tip 3: ↑trigliceridele, colesterolul, la obezi, hiperglicemie, dupa 40 ani

-tip 2, 4, 5 ↑β-lipoproteinele, ↑VLDL si colesterolul

-tip 2b , 4, 5 valori crescute a colesterolului1000

-tipul 5 se aseamana cu tipul 1

-tipurile 2, 4, 5 dau ateroscleroza

DIANOSTIC PENTRU DLP

I. Cholesterol+TG

II.

Se determina LDL si HDL

III. -lipidograma→diagnostic diferential al dislipidemiilor mixte (tip 2b, 3,

5)→identificarea Lp(a).

cursuri biochimie

Documents

Transcript of cursuri biochimie