Biochimie Lp Subiecte
-
Upload
nicoleta-sava -
Category
Documents
-
view
216 -
download
0
Transcript of Biochimie Lp Subiecte
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
1/12
Subiectul nr.1- recoltarea probelor biologice:
a) 1. pregatirea pacientului in functie de analizele recomandate- recoltarea probelor se face de catre medicul care recomanda analizele si in functie
de analizele recomandate
-Recoltarea se face dimineata pe nemancate in pozitie culcat- pac. Nu mananca cu 16-17 ore inainte
- pac. Nu fumeaza in acea dimineata nu consuma ceai, alcool , cafea
- pac. Sa nu fie dupa o masa copioasa- sa nu fie dupa un efort fizic intens
- si se stopeaza medicatia cu 24 ore inainte ( vitamine , analezice duc la modificarea
enzimelor!.
2. recoltarea sangelui venos
- recoltarea se face de catre personalul medical calificat dimineata pe nemancate in poz.
dd
- se recomanda repaus complet min. o ora inaintea recoltarii si mana pozitionata
orinzontal min. "# min- recoltarea sanelui venos se face prin punctie venoasa la adult din venele de plica
cotului , la copil din $uulara si fontanela- recoltarea se face cu ac si serina de unica folosinta
- se fi%eaza aroul deasupra plicii cotului se dezinfecteaza te. la locul punctiei cu
alcool sanitar- se punctioneaza vena si se recolteaza sane prin ac, fie direct din recipient in vacutainer
sau in serina si apoi olirea sa in epru&eta.
- se indeparteaza aroul si se tamponeaza locul punctiei cu un tampon de vata.
- recoltarea sanelui venos se face pt analize &ioc'imice si enzimatice (sane interal,plasma sau ser !, rec sane capilar se face ptr analizele 'ematoloice (nr elementelor
fi. , formula leucocitara, dozarea '& , frotiu sanvin!3. etichetarea si notarea probelor
-pro&ele sunt recoltate in vacutainere corespunzator alese in fct de tipul de analiza cu sau
fara anticoa
- asist medic verifica identitate pac si noteaza pe recipient urmat numele si prenumelepac, nr patului , nr salonului, data si ora recoltarii
- apoi se completeaza recomandarea pt am&ulator iar pt spital se completeaza &ilet ce
contine datele de pe recipient, nr fo , analizele ce tr& efectuate , semnat cadrului
medical .
4. obtinerea plasmei si serului
- plasma ) ser * fi&rinoen * fact .de coaulare . +&tinerea plasmei se face in conditiile
unui sane proaspat rec pe antioa prin centrifuare 1# min la "### de turatii min , lafund elemnete fiurate iar deasupra plasma
- serul ) sane rec fara anticoa lasat sa se coauleze la temp camerei timp de o ora
- dupa care la temp camerei cu o &a'eta de sticla se indeparteaza c'eaul de pe peretiiepru&
- dupa care se mai lasa "# min sa se realizeze retractia c'eaului
- dupa care se decanteaza cu ri$a intr-o epru& uscata, curata si sterila, cu mare ri$a sa nu
a$una &uc de c'ea.
1
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
2/12
- su&stant coaulante impiedica coa sanelui si tr& sa indeplineasca trei conditii
- sa nu contina su&stante de dozat
- sa nu interfere cu reactivii metodei de dozat- sa se aseasca intr-o anumita proportie .
- serul normal are culoarea al&en pai , este limpede si trasparent si se deose&este de
plasma prin faptul ca nu mai contine fi&rinoen%p . su&stante anticao. florura de sodiu se foloseste ptr licemie , este in'i&itor al
licolizei si al unor enzime
- o%alatul de potasiu , citratul de sodiu ( vs', fi&rinoen, pro&e de coa.! ,/0,'eparina nu modifica starea naturala a sanelui efect antilipemic .
b) transportul , conservarea probelor si erori produse in laborator
- 1. transportul probelor catre la& se face imediat dupa rec cu atentie sa nu cada
etic'etele si fara a fi aitate ptr a evita 'emoliza- 2 . conservarea probelor in en se rec ca analizele sa se efect in primele 4-6 ore dupa
rec
- daca nu se realizeaza in acest timp serul se pastreaza in epru& la *4 rade celsius dar nu
mai mult de 2-" zile- daca tr& pastrate timp indelunat adica cateva luni se coneleaza la -2# de rade celsius
- dupa deconelare pro&ele se omoenizeaza , se lucreaza imediat si nu se maireconeleaza
- ptr anumite analize e%p. il.t si dir. pro&ele se patreaza la intuneric
- 3. erori produse in lab- respectarea criteriilor de aleere a metodei sunt
- specificitate
- reproducti&ilitate
- e%actitate- sensi&ilitate
-alte erori tin de aleerea reactivilor care se face in concordanta cu metoda de lucru
folosita- reactivii tr& sa fie in termeni de vala&ilitate
- ptr fiecare reactiv tr& sa e%iste un ser de control
- timpul de lucru tr& respectat- pri&ele recolt tr& sa fie de caliatate
- sticlaria fol tr& sa fie curata &n spalata si clatita cu apa distilata , iar in unele cazuri de
unica fol
- aparatura de la& tr& sa fie in permanenta fol si verif- constiintiozitatea celor care lucreaza
Subiectul nr. 2 electroforeza proteinelor pe hartie de filtru
a) principiul metodei proteinele sunt componenete esentiale ale materiei vii . Su&influenta curent. electric aplicat la capetele unei &enzi im&i&ate in ser , particulele de
proteine plasmatice se deplaseaza spre anod (*! cu viteze de mirare diferite specifice
fiecarei fractiuni proteice , separandu-se .
2
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
3/12
are loc ulterior uscarea &enzii de 'artie , dupa care este introdusa intr-o &aie de colorant ,
care se fi%eaza pe proteina d.p. cu cantitatea de proteina . valuarea fractiunilor proteice
separate se face dupa intensitatea culorii o&tinute prin procedeul elutiei sau direct .
!alori normale si valori patologice val. normalaa proteinelor totale este cuprinsa
intre 6- rame 3 , p-ul este de ,6 .
- proteinele plamatice in funct. de mirarea electroforetica se impart in al&umine silo&uline
- al&umine 55 - 65 3
- lo&uline "5 - 453 , din care alfa1 (2-43 !, alfa2 ( 6-123 !, &eta -143 , ama 1"-223.
!alorile patologice scaderea al&uminelor se manifesta prin scaderea aportului de
proteine mal&sor&tie de nutritie
- prin scaderea sintezei 'ep. si apare in ciroza 'epatica- cresterea al&uminei apare foarte rar in primele faze ale inanitiei si in
8lo&ulinele zona alfa1 valori crescute in reactii inflamatorii acute
- valori scazute in emfizem pulmonar si 'epatita neonatala
- zona alfa2 val. crescute inflamatii acute , sindr. nefrotic , R00 , neoplazii , valoriscazute apar in insufic. 'epatica , S9 , pancreatite acute severe .
- zona &eta creste in anemia feripriva , ciroza &iliara , scade in &oli autoinmune,neoplazii, infectii acute si cronice
- zona ama imunolo&ulinele 0 ,8 , , , scade in amalo&ulinemii
('ipoamalo&ulinemii conenitale sau do&andite ! si creste in'iperamalonulinemii monoclonale sau policlonale.
Subiectul nr.3 proteina " reactiva
#etoda $"% late& este un procedeu de alutinare rapida prin testarea unei suspensii
de particule de polistiren late% acoperite cu proteina 0 pcr in prezenta unui ser
necunoscut ( pacient !itirea prezenta alutinarii vizi&ile macroscopic indica prezenta 0c anti pcr
0&senta alutinarii vizi&il macroscopic indica a&senta 0c anti pcr
'ubla difuzie (uchterlon:
- evidentiaza proteine patoloice
a!proteina en :ones normal a&sente
- prezente in urina pacientilor cu mielom multipu , mai rar leucemii, limfoame, &oala
od;in&!proteina reactiva (
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
4/12
#ateriale necesare lama microscop, stanta de decupat odeuri , el de aaraza ,
antiser monospecific , ser de referinta (contine pcr! , pro&a ser ( pacient!.
*ehnica de lucru 1. preatire lame cu el pe o lama de microscop se toarna ".5 mlel de aaraza 13 topit pe &aie de apa care se lasa 15-2# min. in poz. orizontala sa se
solidifice
- se introduce intr-o cutie 9 , copii su& " luni pana la 4# >9 , copii de la "
luni -1 an pana la 2 >9=alori normale /89 , copii pana 5 ani intre #,2- 1" >9
- /8+ creste in infarct miocardic , interventii c'iruricale cord, cateterism cardiac ,
'epatita , ciroza 'ep.- /8< creste in 'epatita acuta si cronica aresiva , puseu decompensare ciroza
'epatica , icter o&structiv , mononucleoza.
4
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
5/12
Subiectul nr. uree , creatinina , acid uric
0!ozarea ureei ureea rep. compusul prin care se elimina amoniacul din ors.?etoda de dozare enzimatica a ureei cu ureaza ( met. specifica!
- ureea este produsul final al eliminarii &azelor pirimidinice
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
6/12
- creatinina , in mediu puternic alcalin reduce acidul picric la acid picramic de culoare
al&en portocalie, fotometra&il
- intensitatea culorii este d.p. cu concentratia ureei
?od de lucru
- se pipeteaza in 2 epru&ete de centrifua- se omoenizeaza si se centrifu'eaza timp de 5 min. la "### turatiimin.
- se preatesc " epru&ete , se pipeteaza iarasi
- se mesteca &n , dupa 2# min. se citesc e%tinctiile p si s fata de martor la lunimeade unda de 5"# nm in cuve de 1cm
=alori normale sane #,5 -1,2 m3 la &ar&ati #,6-1,1m3, la femei #,5-#,@ m3 si
urina 1-1,5 pe 24 ore
=ariatii patoloice valori crescute in insuficienta cardiaca conestiva , des'idratarimasive , dia&et za'arat , dia&et insipid , insuficienta renala acuta sau cr., neoplasm ,
litiaza renala , adenom de prostata , iar valori scazute apar in insuficienta renala cronica.
Subiectul nr. dozarea functiilor de colesterol
'eterminarea '/ colesterol prin metoda enzimatica
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
7/12
!olumul sau direza :
- la &ar&ati 12##-15##ml 24 ore
- la femei 1###-12##ml24ore- la nou-nascut intre "#-6#ml24 ore
bateri -
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
8/12
") identificarea glucidelor urinare in mod normal urina nu contine decat cantitati
e%trem de mici de lucide
- in urinele patoloice cel mai frecvent lucid intalnit este lucoza , prezenta ei purtandnume le de lucozurie
- in afara de lucoza se mai pot asi si alte lucide ca alactoza, fructoza , lactoza ,
maltoza si diferite pentoze- in acest caz termenul corect este de meliturie , care semnifica prezenta unui za'ar
reducator in urina
1.%eactia enedict:
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
9/12
9nterpretarea rezultatului
- reactia este pozitiva cand la limita de separare a celor doua lic'ide apare un inel rosu
violet ce indica prezenta acetonei- intensitatea culorii inelului este direct proportionala cu concentratia corpilor cetonici
in urina
- daca inelul dispare dupa fie&erea urinei acesta s-a datorat acetonei- reactii fals pozitive dau aspirina , salicilatul.
6)"ercetarea pigmentilor biliari in urina :
- se cerceteaza &iliru&ina, uro&ilinoenul , uro&ilina, acizi si saruri &iliare
a) 7robilinogen - urina normala , proaspat emisa contine numai uro&ilinoen in cantitai
mici care prin o%idare la aer si lumina se transforma in uro&ilina
- de aceea in urina proaspat emisa se cauta uro&ilinoen, iar in urina pastrata mai multe orese cauta uro&ilina.
1. #etoda 6rlich :
ro&ilinoenurie crescuta- producere e%cesiva pimenti &iliari ('emoliza!
- afectiuni 'epatice 'ep. virala ac., 'ep. cr. aresiva, ciroza 'epatica
- perioada su&icterica ) importanta deose&ita ptr dianostic
>ro&ilinoenurie scazuta o&structia cailor &iliare (intra si e%tra'epatice!- reducerea florei &acteriene intestinale
- productie insuficienta de &iliru&ina (anemii areenerative!
- tul&urari de e%cretie urinara a pimentului
b)7robilina - metoda Sc'lessiner- fluorescenta verde a uro&ilinei cu sare de En in
alcool
- normal fluorescenta esre invizi&ilac!iliru&ina- este a&senta in urina normala
- urina care contine pimenti &iliari prezinta o culoare &runa
- aspect de &ere neara
@
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
10/12
1. ?etoda uol
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
11/12
!ariatii fiziologice functie de creste peste 4#-5# ani
- sarcina scade licemia cu 15-2# 3 (este utilizata de catre fat!
- efortul muscular usoara 'ipolicemie
!ariatii patologice
iperlicemie valori crescute in - dia&et za'arat
- 'ipertiroidie- acromealie
- sdr us'in
- tumori SN- accident vascular cere&ral
- feocronocitom
- infarct miocardic
- insuficienta renala- into%icatie +
- soc
- administrare diuretice , contranceptive, fenotiazine, lucocorticoizi
ipolicemie valori scazute in foame- mala&sor&tie
- efort- fe&ra
- licozurie de cauza renala
- alcoolism- insuficienta 'epatica
- licoenoze
- insuficienta 'ipofizara, coticosuprarenaliana
- 'ipotiroidie- administrare de antidia&etice, &eta&locante.
Subiectul nr. hemoglobina
- din sane capilar sau venos
- determinare fotometrica ca cian'emilo&ina (iN!- metoda standard de'emolo&inemetrie
-
8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte
12/12
- parametri o&liatori ai solutiei ra&;in p)7,"-7,5B limpede si sta&ila
2. talon de 'emolo&ina) solutie de nmet& cu concentratia de pe flacon
/e'nica - se recolteaza #,#2 ml sane cu pipeta de 'emolo&ina
- se adaua intr-un flacon (epru&eta! cu 5 ml reactiv ra&;in
- se spala de 2-" ori , cu ri$a fara &ar&otare- se lasa "# min
- se citeste la fotometru in &anda de 54#nm, in cuva de 1#mm fata de apa distilata
=alori normale- &ar&ati 1"-15-17 dl
- femei 11-1"-15 dl
- scade in anemii
- creste in polilo&ulii
12