Biochimie Lp Subiecte

download Biochimie Lp Subiecte

of 12

Transcript of Biochimie Lp Subiecte

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    1/12

    Subiectul nr.1- recoltarea probelor biologice:

    a) 1. pregatirea pacientului in functie de analizele recomandate- recoltarea probelor se face de catre medicul care recomanda analizele si in functie

    de analizele recomandate

    -Recoltarea se face dimineata pe nemancate in pozitie culcat- pac. Nu mananca cu 16-17 ore inainte

    - pac. Nu fumeaza in acea dimineata nu consuma ceai, alcool , cafea

    - pac. Sa nu fie dupa o masa copioasa- sa nu fie dupa un efort fizic intens

    - si se stopeaza medicatia cu 24 ore inainte ( vitamine , analezice duc la modificarea

    enzimelor!.

    2. recoltarea sangelui venos

    - recoltarea se face de catre personalul medical calificat dimineata pe nemancate in poz.

    dd

    - se recomanda repaus complet min. o ora inaintea recoltarii si mana pozitionata

    orinzontal min. "# min- recoltarea sanelui venos se face prin punctie venoasa la adult din venele de plica

    cotului , la copil din $uulara si fontanela- recoltarea se face cu ac si serina de unica folosinta

    - se fi%eaza aroul deasupra plicii cotului se dezinfecteaza te. la locul punctiei cu

    alcool sanitar- se punctioneaza vena si se recolteaza sane prin ac, fie direct din recipient in vacutainer

    sau in serina si apoi olirea sa in epru&eta.

    - se indeparteaza aroul si se tamponeaza locul punctiei cu un tampon de vata.

    - recoltarea sanelui venos se face pt analize &ioc'imice si enzimatice (sane interal,plasma sau ser !, rec sane capilar se face ptr analizele 'ematoloice (nr elementelor

    fi. , formula leucocitara, dozarea '& , frotiu sanvin!3. etichetarea si notarea probelor

    -pro&ele sunt recoltate in vacutainere corespunzator alese in fct de tipul de analiza cu sau

    fara anticoa

    - asist medic verifica identitate pac si noteaza pe recipient urmat numele si prenumelepac, nr patului , nr salonului, data si ora recoltarii

    - apoi se completeaza recomandarea pt am&ulator iar pt spital se completeaza &ilet ce

    contine datele de pe recipient, nr fo , analizele ce tr& efectuate , semnat cadrului

    medical .

    4. obtinerea plasmei si serului

    - plasma ) ser * fi&rinoen * fact .de coaulare . +&tinerea plasmei se face in conditiile

    unui sane proaspat rec pe antioa prin centrifuare 1# min la "### de turatii min , lafund elemnete fiurate iar deasupra plasma

    - serul ) sane rec fara anticoa lasat sa se coauleze la temp camerei timp de o ora

    - dupa care la temp camerei cu o &a'eta de sticla se indeparteaza c'eaul de pe peretiiepru&

    - dupa care se mai lasa "# min sa se realizeze retractia c'eaului

    - dupa care se decanteaza cu ri$a intr-o epru& uscata, curata si sterila, cu mare ri$a sa nu

    a$una &uc de c'ea.

    1

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    2/12

    - su&stant coaulante impiedica coa sanelui si tr& sa indeplineasca trei conditii

    - sa nu contina su&stante de dozat

    - sa nu interfere cu reactivii metodei de dozat- sa se aseasca intr-o anumita proportie .

    - serul normal are culoarea al&en pai , este limpede si trasparent si se deose&este de

    plasma prin faptul ca nu mai contine fi&rinoen%p . su&stante anticao. florura de sodiu se foloseste ptr licemie , este in'i&itor al

    licolizei si al unor enzime

    - o%alatul de potasiu , citratul de sodiu ( vs', fi&rinoen, pro&e de coa.! ,/0,'eparina nu modifica starea naturala a sanelui efect antilipemic .

    b) transportul , conservarea probelor si erori produse in laborator

    - 1. transportul probelor catre la& se face imediat dupa rec cu atentie sa nu cada

    etic'etele si fara a fi aitate ptr a evita 'emoliza- 2 . conservarea probelor in en se rec ca analizele sa se efect in primele 4-6 ore dupa

    rec

    - daca nu se realizeaza in acest timp serul se pastreaza in epru& la *4 rade celsius dar nu

    mai mult de 2-" zile- daca tr& pastrate timp indelunat adica cateva luni se coneleaza la -2# de rade celsius

    - dupa deconelare pro&ele se omoenizeaza , se lucreaza imediat si nu se maireconeleaza

    - ptr anumite analize e%p. il.t si dir. pro&ele se patreaza la intuneric

    - 3. erori produse in lab- respectarea criteriilor de aleere a metodei sunt

    - specificitate

    - reproducti&ilitate

    - e%actitate- sensi&ilitate

    -alte erori tin de aleerea reactivilor care se face in concordanta cu metoda de lucru

    folosita- reactivii tr& sa fie in termeni de vala&ilitate

    - ptr fiecare reactiv tr& sa e%iste un ser de control

    - timpul de lucru tr& respectat- pri&ele recolt tr& sa fie de caliatate

    - sticlaria fol tr& sa fie curata &n spalata si clatita cu apa distilata , iar in unele cazuri de

    unica fol

    - aparatura de la& tr& sa fie in permanenta fol si verif- constiintiozitatea celor care lucreaza

    Subiectul nr. 2 electroforeza proteinelor pe hartie de filtru

    a) principiul metodei proteinele sunt componenete esentiale ale materiei vii . Su&influenta curent. electric aplicat la capetele unei &enzi im&i&ate in ser , particulele de

    proteine plasmatice se deplaseaza spre anod (*! cu viteze de mirare diferite specifice

    fiecarei fractiuni proteice , separandu-se .

    2

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    3/12

    are loc ulterior uscarea &enzii de 'artie , dupa care este introdusa intr-o &aie de colorant ,

    care se fi%eaza pe proteina d.p. cu cantitatea de proteina . valuarea fractiunilor proteice

    separate se face dupa intensitatea culorii o&tinute prin procedeul elutiei sau direct .

    !alori normale si valori patologice val. normalaa proteinelor totale este cuprinsa

    intre 6- rame 3 , p-ul este de ,6 .

    - proteinele plamatice in funct. de mirarea electroforetica se impart in al&umine silo&uline

    - al&umine 55 - 65 3

    - lo&uline "5 - 453 , din care alfa1 (2-43 !, alfa2 ( 6-123 !, &eta -143 , ama 1"-223.

    !alorile patologice scaderea al&uminelor se manifesta prin scaderea aportului de

    proteine mal&sor&tie de nutritie

    - prin scaderea sintezei 'ep. si apare in ciroza 'epatica- cresterea al&uminei apare foarte rar in primele faze ale inanitiei si in

    8lo&ulinele zona alfa1 valori crescute in reactii inflamatorii acute

    - valori scazute in emfizem pulmonar si 'epatita neonatala

    - zona alfa2 val. crescute inflamatii acute , sindr. nefrotic , R00 , neoplazii , valoriscazute apar in insufic. 'epatica , S9 , pancreatite acute severe .

    - zona &eta creste in anemia feripriva , ciroza &iliara , scade in &oli autoinmune,neoplazii, infectii acute si cronice

    - zona ama imunolo&ulinele 0 ,8 , , , scade in amalo&ulinemii

    ('ipoamalo&ulinemii conenitale sau do&andite ! si creste in'iperamalonulinemii monoclonale sau policlonale.

    Subiectul nr.3 proteina " reactiva

    #etoda $"% late& este un procedeu de alutinare rapida prin testarea unei suspensii

    de particule de polistiren late% acoperite cu proteina 0 pcr in prezenta unui ser

    necunoscut ( pacient !itirea prezenta alutinarii vizi&ile macroscopic indica prezenta 0c anti pcr

    0&senta alutinarii vizi&il macroscopic indica a&senta 0c anti pcr

    'ubla difuzie (uchterlon:

    - evidentiaza proteine patoloice

    a!proteina en :ones normal a&sente

    - prezente in urina pacientilor cu mielom multipu , mai rar leucemii, limfoame, &oala

    od;in&!proteina reactiva (

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    4/12

    #ateriale necesare lama microscop, stanta de decupat odeuri , el de aaraza ,

    antiser monospecific , ser de referinta (contine pcr! , pro&a ser ( pacient!.

    *ehnica de lucru 1. preatire lame cu el pe o lama de microscop se toarna ".5 mlel de aaraza 13 topit pe &aie de apa care se lasa 15-2# min. in poz. orizontala sa se

    solidifice

    - se introduce intr-o cutie 9 , copii su& " luni pana la 4# >9 , copii de la "

    luni -1 an pana la 2 >9=alori normale /89 , copii pana 5 ani intre #,2- 1" >9

    - /8+ creste in infarct miocardic , interventii c'iruricale cord, cateterism cardiac ,

    'epatita , ciroza 'ep.- /8< creste in 'epatita acuta si cronica aresiva , puseu decompensare ciroza

    'epatica , icter o&structiv , mononucleoza.

    4

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    5/12

    Subiectul nr. uree , creatinina , acid uric

    0!ozarea ureei ureea rep. compusul prin care se elimina amoniacul din ors.?etoda de dozare enzimatica a ureei cu ureaza ( met. specifica!

    - ureea este produsul final al eliminarii &azelor pirimidinice

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    6/12

    - creatinina , in mediu puternic alcalin reduce acidul picric la acid picramic de culoare

    al&en portocalie, fotometra&il

    - intensitatea culorii este d.p. cu concentratia ureei

    ?od de lucru

    - se pipeteaza in 2 epru&ete de centrifua- se omoenizeaza si se centrifu'eaza timp de 5 min. la "### turatiimin.

    - se preatesc " epru&ete , se pipeteaza iarasi

    - se mesteca &n , dupa 2# min. se citesc e%tinctiile p si s fata de martor la lunimeade unda de 5"# nm in cuve de 1cm

    =alori normale sane #,5 -1,2 m3 la &ar&ati #,6-1,1m3, la femei #,5-#,@ m3 si

    urina 1-1,5 pe 24 ore

    =ariatii patoloice valori crescute in insuficienta cardiaca conestiva , des'idratarimasive , dia&et za'arat , dia&et insipid , insuficienta renala acuta sau cr., neoplasm ,

    litiaza renala , adenom de prostata , iar valori scazute apar in insuficienta renala cronica.

    Subiectul nr. dozarea functiilor de colesterol

    'eterminarea '/ colesterol prin metoda enzimatica

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    7/12

    !olumul sau direza :

    - la &ar&ati 12##-15##ml 24 ore

    - la femei 1###-12##ml24ore- la nou-nascut intre "#-6#ml24 ore

    bateri -

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    8/12

    ") identificarea glucidelor urinare in mod normal urina nu contine decat cantitati

    e%trem de mici de lucide

    - in urinele patoloice cel mai frecvent lucid intalnit este lucoza , prezenta ei purtandnume le de lucozurie

    - in afara de lucoza se mai pot asi si alte lucide ca alactoza, fructoza , lactoza ,

    maltoza si diferite pentoze- in acest caz termenul corect este de meliturie , care semnifica prezenta unui za'ar

    reducator in urina

    1.%eactia enedict:

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    9/12

    9nterpretarea rezultatului

    - reactia este pozitiva cand la limita de separare a celor doua lic'ide apare un inel rosu

    violet ce indica prezenta acetonei- intensitatea culorii inelului este direct proportionala cu concentratia corpilor cetonici

    in urina

    - daca inelul dispare dupa fie&erea urinei acesta s-a datorat acetonei- reactii fals pozitive dau aspirina , salicilatul.

    6)"ercetarea pigmentilor biliari in urina :

    - se cerceteaza &iliru&ina, uro&ilinoenul , uro&ilina, acizi si saruri &iliare

    a) 7robilinogen - urina normala , proaspat emisa contine numai uro&ilinoen in cantitai

    mici care prin o%idare la aer si lumina se transforma in uro&ilina

    - de aceea in urina proaspat emisa se cauta uro&ilinoen, iar in urina pastrata mai multe orese cauta uro&ilina.

    1. #etoda 6rlich :

    ro&ilinoenurie crescuta- producere e%cesiva pimenti &iliari ('emoliza!

    - afectiuni 'epatice 'ep. virala ac., 'ep. cr. aresiva, ciroza 'epatica

    - perioada su&icterica ) importanta deose&ita ptr dianostic

    >ro&ilinoenurie scazuta o&structia cailor &iliare (intra si e%tra'epatice!- reducerea florei &acteriene intestinale

    - productie insuficienta de &iliru&ina (anemii areenerative!

    - tul&urari de e%cretie urinara a pimentului

    b)7robilina - metoda Sc'lessiner- fluorescenta verde a uro&ilinei cu sare de En in

    alcool

    - normal fluorescenta esre invizi&ilac!iliru&ina- este a&senta in urina normala

    - urina care contine pimenti &iliari prezinta o culoare &runa

    - aspect de &ere neara

    @

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    10/12

    1. ?etoda uol

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    11/12

    !ariatii fiziologice functie de creste peste 4#-5# ani

    - sarcina scade licemia cu 15-2# 3 (este utilizata de catre fat!

    - efortul muscular usoara 'ipolicemie

    !ariatii patologice

    iperlicemie valori crescute in - dia&et za'arat

    - 'ipertiroidie- acromealie

    - sdr us'in

    - tumori SN- accident vascular cere&ral

    - feocronocitom

    - infarct miocardic

    - insuficienta renala- into%icatie +

    - soc

    - administrare diuretice , contranceptive, fenotiazine, lucocorticoizi

    ipolicemie valori scazute in foame- mala&sor&tie

    - efort- fe&ra

    - licozurie de cauza renala

    - alcoolism- insuficienta 'epatica

    - licoenoze

    - insuficienta 'ipofizara, coticosuprarenaliana

    - 'ipotiroidie- administrare de antidia&etice, &eta&locante.

    Subiectul nr. hemoglobina

    - din sane capilar sau venos

    - determinare fotometrica ca cian'emilo&ina (iN!- metoda standard de'emolo&inemetrie

  • 8/13/2019 Biochimie Lp Subiecte

    12/12

    - parametri o&liatori ai solutiei ra&;in p)7,"-7,5B limpede si sta&ila

    2. talon de 'emolo&ina) solutie de nmet& cu concentratia de pe flacon

    /e'nica - se recolteaza #,#2 ml sane cu pipeta de 'emolo&ina

    - se adaua intr-un flacon (epru&eta! cu 5 ml reactiv ra&;in

    - se spala de 2-" ori , cu ri$a fara &ar&otare- se lasa "# min

    - se citeste la fotometru in &anda de 54#nm, in cuva de 1#mm fata de apa distilata

    =alori normale- &ar&ati 1"-15-17 dl

    - femei 11-1"-15 dl

    - scade in anemii

    - creste in polilo&ulii

    12