Metabolismul Lipidelor_Medicina 1

CATEDRA DE BIOCHIMIE ?I BIOCHIMIE CLINIC?FACULTATEA MEDICIN? I, ANUL II

RED.: 01

DATA: 24.01.13

Pag. 1 / 5

Analizat???i aprobat? la ?edin?a catedreidin 24.01.2013, proces verbal nr. 11

?eful Catedrei Biochimie ?i Biochimie Clinic?,conf. universitar, dr. hab. n medicin?

Olga Tagadiuc

____________________

Indica?ia metodic? nr. 1Tema 17: Lipidele: clasificarea, structura,

propriet??ile fizico-chimice, rolul biologic. Membranele biologice.Experien?a 1. Determinarea lipidelor totale n serul sanguin cu reactivulfosfovanilinic.

Lipidele totale includ: triacilglicerolii, acizii gra?i liberi, fosfolipidele, colesterolul,lipoproteinele.

Principiul metodei: Lipidele serului sanguin sunt hidrolizate cu ajutorul acidului sulfuricconcentrat. Produ?ii degrad?rii lipidelor interac?ioneaz? cu reactivul fosfovanilinic, constituit dinvanilin?? ?i acid fosforic, formnd un compus de culoare ro?ie. Intensitatea colora?iei este directpropor?ional? cu cantitatea lipidelor din serul sanguin.

Modul de lucru: Determinarea lipidelor se efectueaz? conform schemei:

Reactive (ml) Probade cercetat (A)

Solu?iade compara?ie

Ser sangvinAp? distilat?H2SO4 concentrat

0,02-

1,50

-0,021,50

Eprubetele se fierb 15 minute n baia de ap? n clocot(are loc hidroliza lipidelor), ulterior se r?cesc.

HidrolizatReactiv fosfovanilinic

0,11,50

0,11,50

Con?inutul eprubetelor se amestec???i peste 40-50 minute se m?soar? densitatea optic? aprobei fa?? de solu?ia de comparare (FEC, filtrul de lumin? verde, cuva de 3 mm).

Con?inutul lipidelor X (g/l) se determin? dup? formula: X= A/0,56 . 8, unde A densitatea optic? a probei de cercetat; 0,56 densitatea optic? a probei etalon; 8 concentra?ia lipidelor n etalon (g/l).

Valorile normale constituie de la 4 la 8 g/l.

Rezultatul ob?inut: _____________________________________________________________ ______________________________________________________________

Concluzie: _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________C

ated

ra B

ioch

imie

?i B

ioch

imie

Clin

ic?


RED.: 01

DATA: 24.01.13

Pag. 2 / 5

Importan?a clinic?. Con?inutul lipidelor n serul sanguin se majoreaz? (hiperlipemie) ndiabet zaharat, nefroze, ciroza biliar?, obezitate, ateroscleroz? etc. Hiperlipemie fiziologic? seconstat? peste 1 - 4 ore dup? mncare (hiperlipemie postprandial?).

ntreb?ri pentru autopreg?tire:1. Func?iile biologice ale lipidelor.2. Clasificarea lipidelor (structural?, func?ional?, dup? propriet??ile fizico-chimice).3. Acizii gra?i satura?i ?i nesatura?i. Structura, propriet??ile fizico-chimice, reprezentan?ii

principali, rolul biomedical.4. Lipidele de rezerv?. Triacilglicerolii structura, propriet??ile fizico-chimice, rolul biomedical.5. Lipidele protoplasmatice ?i membranare: (structura, propriet??ile fizico-chimice, rolul

biomedical):a) Fosfolipidele:? Glicerofosfolipidele fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina (cefalina), fosfatidilcolina

(lecitina), fosfatidilinositolii, fosfatidilglicerol (cardiolipina), plasmalogenele.? Sfingofosfolipidele sfingomielinele.b) Glicolipidele galacto- si glucocerebrozidele, sulfatidele, gangliozidele.c) Colesterolul ?i colesteridele.

6. Membranele biologice.? Rolul biologic ?i medical.? Compozi?ia chimic? lipidele, proteinele, glucidele. Rolul lor func?ional.? Organizarea structural-func?ional? modelul fluido-mozaic Singer-Nicolson.? Propriet??ile: fluiditatea, motilitatea, permeabilitatea selectiv?, asimetria, autoasamblarea ?iautorepararea.? Diversitatea ?i specificitatea structural???i func?ional?.

7. Transportul membranar:a) Transportul pasiv:? difuzia simpl?;? difuzia facilitat? transportorii glucozei (GLUT), schimb?torii de anioni;? canalele de tip alfa ?i de tip beta (particularit??i structurale).b) Transportul activ:? primar (Na+,K+-ATP-aza, Ca2+-ATP-aza, ABC-transportorii);? secundar (transportorii aminoacizilor, glucozei).c) Patologii determinate de deficien?e ale canalelor ?i transportorilor membranari.

Cat

edra

Bio

chim

ie ?

i Bio

chim

ie C

linic?


RED.: 01

DATA: 24.01.13

Pag. 3 / 5

Indica?ia metodic? nr. 2Tema 18: Digestia ?i absorbi?ia lipidelor. Lipoproteinele plasmatice.

Catabolismul tisular al lipidelorExperien?a 1. Identificarea acizilor biliari - reac?ia Petencofer.Principiul reac?iei. La interac?iunea acizilor biliari cu oximetilfurfurolul (derivat din

zaharoz? sub ac?iunea acidului sulfuric concentrat) se formeaz? un complex de culoarero?ie-violet?.

Modul de lucru. ntr-o eprubet? uscat? se introduc 2 pic?turi de bil???i 2 pic?turi de zaharoz?20%. Con?inutul eprubetei se agit?. Se adaug? 5-6 pic?turi acid sulfuric concentrat. Peste 2-3minute con?inutul eprubetei se coloreaz? n ro?u-violet.Rezultatul ob?inut: _____________________________________________________________ ______________________________________________________________

Concluzie: _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________

ntreb?ri pentru autopreg?tire:1. Importan?a lipidelor n alimenta?ie. Acizii gra?i indispensabili.2. Digestia ?i absorb?ia lipidelor alimentare:? Structura ?i rolul acizilor biliari.? Scindarea triacilglicerolilor, fosfolipidelor, colesteridelor: enzimele, produsele de hidroliz?.? Absorb?ia produselor de hidroliz? a lipidelor.? Reglarea hormonal? (ac?iunea colecistokininei, secretinei).? Deregl?rile digestiei ?i absorb?iei lipidelor. Steatoreea pancreatic?, hepatic???i intestinal?.

3. Resinteza lipidelor n enterocite. Formarea chilomicronilor.4. Transportul sangvin al lipidelor. Lipoproteinele plasmatice: structura, metodele de separare,

frac?iile (chilomicronii, VLDL, LDL ?i HDL), compozi?ia chimic? (lipidele ?i apoproteinele),metabolismul, func?iile.

5. Catabolismul triacilglicerolilor reac?iile, enzimele, reglarea hormonal? (ac?iuneacatecolaminelor, glucagonului, insulinei, glucocorticoizilor).

6. Metabolismul glicerolului:? ??ile de utilizare.? Oxidarea: reac?iile, enzimele, randamentul energetic.

7. Beta-oxidarea acizilor gra?i:? satura?i cu num?r par de atomi de carbon (sediul, etapele, reac?iile, enzimele, coenzimele,

randamentul energetic, reglarea);? nesatura?i ?i cu num?r impar de atomi de carbon (particularit??i);? n peroxizomi (particularit??ile), rolul biologic.

8. Catabolismul tisular al glicerofosfolipidelor, sfingomielinelor ?i al glicolipidelor (sediul,enzimele, produsele de hidroliz?).

9. Lipidozele tisulare ereditare (Neimann-Pick, Tay-Sachs) cauzele, modific?rile biochimice,manifest?rile clinice.

Cat

edra

Bio

chim

ie ?

i Bio

chim

ie C

linic?


RED.: 01

DATA: 24.01.13

Pag. 4 / 5

Indica?ia metodic? nr. 3Tema 19: Biosinteza lipidelor

Experien?a 1. Identificarea corpilor cetonici n urin?Principiul metodei: Corpii cetonici (acetona, acidul acetoacetic ?i acidul ?-hidroxibutiric)interac?ioneaz? n mediul bazic cu nitroprusiatul de sodiu ?i acidul acetic concentrat formnd uncompus ro?u-vi?iniu.Modul de lucru: Lu?m dou? eprubete uscate, n prima introducem 2 pic?turi de urin? normal?, iarn a doua 2 pic?turi de urin? patologic?, dup? care n ambele ad?ug?m 2 pic?turi de NaOH 10%, 2pic?turi de nitroprusiat de sodiu 10%, con?inutul eprubetelor se coloreaz? n ro?u-oranj. Apoiad?ug?m n eprubete 6 pic?turi de acid acetic glacial, urina care con?ine corpi cetonici devine ro?ie-vi?inie. Intensitatea culorii variaz? n raport direct cu concentra?ia corpilor cetonici din urin?.


Concluzie: _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________

ntreb?ri pentru autopreg?tire:1. Biosinteza acizilor gra?i localizarea, etapele, reac?iile, enzimele, coenzimele, reglarea:? satura?i cu num?r par de atomi de carbon;? nesatura?i cu num?r par de atomi de carbon (monoenici);? biosinteza acidului arahidonic (no?iuni generale).

2. Biosinteza triacilglicerolilor: localizarea, reac?iile, enzimele ?i coenzimele, reglarea.3. Biosinteza glicerofosfolipidelor: localizarea, reac?iile (sinteza de novo? ?i din produse gata),

enzimele ?i coenzimele. Substan?ele lipotrope, rolul lor.4. Biosinteza sfingofosfolipidelor ?i a glicolipidelor: precursorii, reac?iile principale, enzimele.5. Biosinteza colesterolului etapele, reac?iile primei etape (pn? la acidul mevalonic), enzimele,

coenzimele, reglarea. Catabolismul ?i excre?ia colesterolului (no?iuni generale).6. Corpii cetonici:? reprezentan?ii, structura chimic?;? biosinteza (sediul, substratul, reac?iile);? utilizarea (?esuturile, reac?iile, produsele finale, randamentul energetic);? cetonemia ?i cetonuria (cauzele, mecanismul apari?iei).

Cat

edra

Bio

chim

ie ?

i Bio

chim

ie C

linic?


RED.: 01

DATA: 24.01.13

Pag. 5 / 5

Indica?ia metodic? nr. 4Tema 20? Metabolismul eicosanoizilor ?i al vitaminelor liposolubile.

Reglarea ?i patochimia metabolismului lipidic.Experien?a 1.Determinarea con?inutului ?-lipoproteinelor n serul sanguin.Principiul metodei. ?-lipoproteinele, interac?ionnd cu heparina formeaz? un complex, ce se

precipit? sub influen?a clorurii de calciu. Cantitatea (intensitatea) precipitatului format este directpropor?ional? cu con?inutul lipoproteinelor.

Modul de lucru. n eprubet? se introduc 2 ml solu?ie de clorur? de calciu 0,27% ?i 0,2 ml sersanguin. Con?inutul eprubetei se amestec???i se m?soar? densitatea optic? a solu?iei experimentale(E1) fa?? de solu?ia de CaCl2 (cuva 5 mm, filtrul de lumin? ro?ie). Solu?ia din cuv? se toarn? din noun eprubet???i se adaug? 0,04 ml solu?ie de heparin? 1%. Con?inutul eprubetei se amestec???i exactpeste 4 minute se determin? densitatea optic? a solu?iei n condi?iile descrise anterior (E2).

Calculul: X (unit??i) = (E2 E1) ? 100, unde 100 coeficient standard empiric.Valorile normale: 35 - 55 unit??i.


Concluzie: _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________

Importan?a clinic?. Majorarea con?inutului ?-lipoproteinelor n serul sanguin se constat? nateroscleroz?, icter mecanic, afec?iuni hepatice, diabet zaharat, obezitate etc. Sc?derea con?inutuluise ntlne?te foarte rar (de exemplu, n plasmocitom?).

ntreb?ri pentru autopreg?tire:1. Eicosanoizii (prostaglandinele, leucotrienele, tromboxanii): precursorul, structura chimic?, c?ile

de sintez?, enzimele, rolul biomedical.2. Vitaminele liposolubile A, D, E, K: sursele alimentatre, necesarul diurn, structura chimic?, rolul

metabolic, hipo- ?i hipervitaminozele (cauze ?i manifest?ri metabolice).3. Reglarea neurohormonal? a metabolismului lipidic. Ac?iunea catecolaminelor, glucagonului,

insulinei, glucocorticoizilor, lipotropinelor, hormonilor tiroidieni.4. Rela?iile reciproce dintre metabolismul energetic, glucidic ?i lipidic.5. Valorile normale ale lipidelor plasmatice. Importan?a diagnostic? a determin?rii concentra?iei

plasmatice a trigliceridelor, colesterolului total, HDL- ?i LDL-colesterolului.6. Dislipidemiile cauze, modific?ri biochimice, manifest?ri clinice:? Hiperlipoproteinemiile primare (hipercolesterolemia familial?, hiperchilomicronemia

familial?).? hiperlipoproteinemiile secundare (n diabet zaharat, alcoolism).? hipolipoproteinemiile primare (no?iuni generale). Boala Tangier cauza, modific?rile

biochimice.7. Lipidozele dobndite (obezitatea, ateroscleroza, alcoolismul) cauzele, modific?rile

metabolice.

Indica?ia metodic? nr. 5Totalizare la capitolul Metabolismul lipidelorC

ated

ra B

ioch

imie

?i B

ioch

imie

Clin

ic?

Metabolismul Lipidelor_Medicina 1

Documents

Transcript of Metabolismul Lipidelor_Medicina 1