Levuri selecționate și fermentarea alcoolică(1)
-
Upload
meteoryt87 -
Category
Documents
-
view
625 -
download
2
Transcript of Levuri selecționate și fermentarea alcoolică(1)
1. Principalele genuri și specii utilizabile la obținereadrojdiilor selecționate
2. Tulpini de drojdii folosite în industria vinului
3. PML
4. Levuri active uscate
1UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Drojdiile selecționate - vinuri calitativmai bune decât cele fermentate spontan
Un vin corect și sãnãtos - drojdii dingenul Saccharomyces: Saccharomycesellipsoideus, Saccharomyces oviformis.
Acum și drojdii selecționate din genulSchizosaccharomyces din speciaSchizosaccharomyces pombe
2UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Fermentația se poate regla mai ușor, deoarece este o anumitã clonã cu însușiricunoscute;
Fermentația alcoolicã nu este însoțitã de alte fermentații
introduse în must drojdiile eliptice se înmulțesc rapid și pun stãpânire pe mediu,înlãturând posibilitatea apariției altor fermentații datorate bacteriilor și în mare partedrojdiilor sãlbatice
faza prefermentativã este redusã, procesul se declanșeazã rapid, la 1-2 zile de laînsãmânțare, decurge normal, iar pericolul întreruperii este de obicei exclus.
vinul se limpezește mai ușor și într-un timp mai scurt (deoarece ele sediment granular,și nu pulverulent), creindu-se posibilitatea de a fi dat în consum mai devreme decât cea fermentat spontan
gustul de pãmânt este ceva mai atenuat
tãria alcoolicã a vinului este mai ridicatã cu câteva zecimi de grad (pânã la 0,5%vol.alcool, iar parfumul de vin tânãr este mai agreabil.
3UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
exemplu - vinurile
destinate distilãrii în
vederea preparãrii
divinului. Rezultatele
sunt cu mult mai bune
când fermentarea unor
astfel de vinuri se face
spontan.
Prezența drojdiilor
apiculate în mediul de
fermentare joacã un rol
deosebit în dezvoltarea
mirosului fructuos al
buchetului de divin.
4UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
vinuri seci din musturi bogate în zahãr - drojdiilor din specia S.
oviformis.
putere alcooligenã superioarã drojdiilor din specia S. ellipsoideus
pot fermenta zahãrul dintr-un mediu care deja este bogat în alcool
La fermentația spontanã, pânã ce gradul alcoolic n-a atins 10%
vol. alcool, datoritã competiției, este posibil ca numãrul drojdiilor de
S. oviformis sã se diminueze foarte mult, chiar dispar complet
Pentru a putea evita astfel de situații favorabile apariției diferitelor
boli bacteriene, se recomandã folosirea drojdiilor selecționate din
specia Saccharomyces oviformis
5UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Adaos înainte de pornirea în fermentație sau ulterior. În primul caz - vinuri albe,
însãmânțare masivã. Numãrul drojdiilor, la 10% vol. alcool este cu atât mai mare cu cât
numãrul inițial a fost mai mare.
Un adaos de 10 ori mai mare decât drojdii din specia ellipsoideus - la sfârșitul
fermentației zgomotoase se gãsesc suficiente S. oviformis, care prin multiplicare sã punã
stãpânire pe mediu. Când ele devin predominante, produc fermentarea.
Când adaosurile se fac în cantitãți egale, S.ellipsoideus predominã mediul, încât S.
oviformis nu mai poate supraviețui, nu va finisa fermentarea.
Un adaos masiv de maia este greu de realizat,s-a propus introducerea maialei și dupã
declanșarea fermentației la tãria alcoolicã de 10% vol. alcool. La producerea vinurilor
roșii, acest moment coincide cu termenul de tragere a vinului de pe boștinã. Un adaos
de S. Oviformis în acest moment e suficient pentru ca fermentația sã se desãvârșeascã
complet.
Altă opinie sã nu se facã dintr-odatã ci succesiv, adicã drojdii de S. ellipsoideus la
începutul fermentaþiei și drojdii de Saccharomyces oviformis spre sfîrșitul ei.6UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Degradând acidul malic dimin. aciditatea fixã fãrã formare de acizi volatili. Larecolte acide poate înlocui FML.
Drojdiile Schizasaccharomyces pot degrada cantitãți pânã la 95% din acidul malicinițial. => ideea folosirii lor la dezacidifierea recoltelor prea acide.
Produc descompunerea parțialã a acidului malic în produse neacide. Aceastãdegradarea, independentã de FML, 15-25% din cantitatea inițialã de acid malic este
transformatã în alcool etilic și dioxid de carbon
Responsabile de FA
7UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Datoritã competiției, sunt ușor eliminate de celelalte specii. Rezultat bun –cantitãți f. mari, sterilizarea completã a mediului de fermentare. Pentru asupraviețui în timpul FA ele trebuie sã reprezinte min.30% fațã de drojdiileinițiale.
Pt dezacidifiere doritã - proporția lor tre sã fie cu mult mai mare
Cantitate m. mică de Schizasaccharomyces - numai dacã recolta este înprealabil sterilizatã prin încãlzire la 75oC - consum ridicat de energie, greu deefectuat, mai ales în roșu, înseamnã cã pentru utilizarea, la scarã industrialã,trebuie de mai cercetat
ele modificã nefavorabil calitatea vinurilor. Se formeazã histaminã. Vinurilerezultate conțin frecvent hidrogen sulfurat
8UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Printre drojdiile S. cerevisiae se disting numeroasetulpini de drojdii care sunt clasificate în 2 grupe:
tulpini de drojdie defermentare superioarã
temperaturi de 25-30oC
se formeazã lanțuriramificate
sunt ridicate de dioxidul de carbon șidepozitate în spumã
Nu formează flocoane
tulpini de drojdie defermentare inferioarã
temperaturi de 15-25oC
dr fiicã se desparte de dr mamã,formând agregate dintr-un numãr mic
de drojdii
Se depun la sfârșitulfermentãrii la baza vasului
9UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Dupã modul de comportare la floculare se împart în:Dupã modul de comportare la floculare se împart în:
• celulele rãmân separate una de alta, sunt repartizate fin prin
mediul lichid și se depun la sfârșitul fermentãrii
drojdii pulverulentedrojdii pulverulente
• se adunã dupã un timp scurt și formeazã flocoane care se depun
rapid, iar capacitatea floculantã este determinatã genetic
împreunã cu toleranța la temperaturã
drojdii floculantedrojdii floculante
Abilitatea drojdiilor de a flocula are foarte mare importanțã practicã, aceste drojdiifloculante au un grad de fermentare mic, iar depozitul de drojdie este compact.Abilitatea drojdiilor de a flocula are foarte mare importanțã practicã, aceste drojdiifloculante au un grad de fermentare mic, iar depozitul de drojdie este compact.
10UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
sãfermenteze
completzahãrul din
substrat;
sã rezistela o concalcoolicãscãzutã;
sã reziste laun pHscãzut
sã aibã ocapacitateredusã despumare;
sã aibã ocapacitate
de floculareridicatã.
11UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Culturile starter se folosesc în urmãtoarele cazuri:
Fermentația decurge lent
Fementatia are loc la temperaturi scãzute
La obținerea vinurilor spumante
Fermentația la rece a vinurilor roșii
În mustul din strugurii sãnãtoși, fermentația demareazã rapidfãrã introducerea de culturi starter. În mustul provenit din
strugurii infectați - culturi starter
12UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Prin realizarea unor mutații genetice a tulpinilor de drojdiis-au obținut celule cu calitãți deosebite
Prin realizarea unor mutații genetice a tulpinilor de drojdiis-au obținut celule cu calitãți deosebite
Putere alcooligenã 18-20% vol. alcool;
Alcoolorezistențã
Osmotoleranțã – glucide 30%
Sulforezistenþã - pânã la 300mg dioxid de sulf/l
Rezistențã la tanin în cazul vinificãrii în roșu sau la tratamente cu enzime pectolitice
Formarea unei pelicule la suprafața lichidului în prezența aerului în
vinurile cu 16% vol. alcool, de tip Xeres
Proprietãți fiziologice specifice - formare de acizi organici, din alcooli
superiori, formare în cantitate micã de acizi volatili, eliberarea de substanțe
cu efect stimulator sau inhibitor asupra bacteriilor, caracterul killer, formarea spumei etc.
Capacitatea de a crește și produce fermentații la presiuni ridicate de dioxid de carbon cuformare de sedimente - vinuri spumante
13UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Killer K
• Ucigașe• Omoară levuri
din fenotipul S• Factorul K
constă dinproteine șipolizaharide(toxine)
Sensibile S
• Mor în lupta de
concurență
între K și N
Neutre N
• Nu sunt
omorîte de K
• Nu reprimă
dezvoltarea S
14UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
• produc ferment la 7-12ºC• vin alb sec sau vinuri spumante• aromã specificã strugurilor din care provin. La vinurile spumante unde s-au folosit aceste
tulpini de drojdii, fermentația decurge mai lent, este completã, se îmbunãtãțește aroma,crește gradul alcoolic și se pãstreazã activitatea sistemului enzimatic
criofile
• produc fermentarea la 30-35ºC• Sunt folosite în centrele viticole tropicale;
termofile
• proprietãți hidrofobe determinate de proteinele existente în pereții celulari care migreazãîn spumã și plutesc la suprafața lichidului în timpul FA
• La sf FA se depun ușor permițând limpezirea rapidã a vinului
spumante
• Proprietãți hidrofile, permit fermentația rapidã, nu permit o spumare abundentã, au ungrad de flotabilitate scãzut și se disperseazã uniform în must.
• Dezavantaje amintim: sedimentarea lentã.• Existã unele gene de Leuconostoc oenos care se introduc și alãturi de drojdia din vin
degradeazã fermentativ acidul malic.
nespumante
15UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Drojdiile selecționate folosite se prezintã sub formã de drojdii cremã, presate și
sub formã de drojdii liofilizate. Mai rar - cremã și cele presate.
Drojdiile sub formã de cremã se obțin în urma separãrii prin centrifugare a
drojdiilor din mediu lichid.
Cele presate se preparã dupã aceeași tehnologie, la care se aplicã în plus o filtrare
sterilã, printr-un material filtrant textil, urmatã de separarea lor de pe pânza
filtrantã, presarea și ambalarea sterilã.
Livrarea drojdiilor selecționate se face în flacoane, pungi din plastic, etc.de diferite
capacitãți care sunt cuprinse între 100-500ml. Din aceste se preparã maielele de
drojdii selecționate.
Drojdiile pãstrate în mediu lichid, solid sau sub formã liofilizatã, înainte de
întrebuințare se înmulțesc, astfel încât în must sau în mustuialã ele se
administreazã numai sub formã de maia.
Drojdiile selecționate folosite se prezintã sub formã de drojdii cremã, presate și
sub formã de drojdii liofilizate. Mai rar - cremã și cele presate.
Drojdiile sub formã de cremã se obțin în urma separãrii prin centrifugare a
drojdiilor din mediu lichid.
Cele presate se preparã dupã aceeași tehnologie, la care se aplicã în plus o filtrare
sterilã, printr-un material filtrant textil, urmatã de separarea lor de pe pânza
filtrantã, presarea și ambalarea sterilã.
Livrarea drojdiilor selecționate se face în flacoane, pungi din plastic, etc.de diferite
capacitãți care sunt cuprinse între 100-500ml. Din aceste se preparã maielele de
drojdii selecționate.
Drojdiile pãstrate în mediu lichid, solid sau sub formã liofilizatã, înainte de
întrebuințare se înmulțesc, astfel încât în must sau în mustuialã ele se
administreazã numai sub formã de maia.16UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
mustulfermenteaz
ã rapid;
are locfermentareacompletã azaharurilor;
seformeazã ocantitate dealcool, cu0,5 . 1%
vol. alcool,mai maredecât prinfermentația
naturalã;
vinulconține maipuțini acizi
volatili;
vinul selimpezește
ușor;
vinul esterezistent laalterãri în
timpulpãstrãrii.
17UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
drojdii pentru vinurile albe;
drojdii pentru vinurile roșii;
drojdii alcoolo-rezistente;
drojdii pentru obținereaspumantelor;
drojdii sulfo-rezistente.
18UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Pregãtirea culturilor starter de drojdii selecționate, sub formã de
maiele active se realizeazã în instalații pt prepararea maielelor de
drojdii selecționate.
Operația se realizeazã cu o sãptãmânã înaintea începerii campaniei
de vinificare cu posibilitatea însãmânțãrii primelor cantitãți de
must cu drojdii ționate.
Aceste operații prevãd parcurgerea a douã etape:
etapa de laborator
etapa de producție
Pregãtirea culturilor starter de drojdii selecționate, sub formã de
maiele active se realizeazã în instalații pt prepararea maielelor de
drojdii selecționate.
Operația se realizeazã cu o sãptãmânã înaintea începerii campaniei
de vinificare cu posibilitatea însãmânțãrii primelor cantitãți de
must cu drojdii ționate.
Aceste operații prevãd parcurgerea a douã etape:
etapa de laborator
etapa de producție
19UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Etapa de laborator - drojdiile sunt selecționate, conservate și multiplicate în
condiții optime.
Etapa de producție permite obținerea culturii selecționate sub formã de maia.
Levurile se înmulțesc treptat în mustul pregătit pt F.
Cu ajutorul ansei sau pipetei sterile, levurile sel. Se însămînțează aseptic în 3-
4 eprubete ce conțin 10 cm3 must pasteurizat. Eprubetele se termostatează la
25-30 0C 24 ore și cînd F este energică conținutul se trece în 3 baloane, ce
conțin 0,5-1 dm3 must pasteurizat. Se închid cu dopuri de vată.
Conținutulse transferă treptat în baloane m. mari, pînă la volum necesar.
Maiaua de drojdii activă trebuie să conținăv 100-150 mln celule în 1 dm3
must, din care 30-50 % - înmugurite, 5 % - moarte
Concentrația maielei de drojdii – must 2-3 %, boștină 3-5 %
Etapa de laborator - drojdiile sunt selecționate, conservate și multiplicate în
condiții optime.
Etapa de producție permite obținerea culturii selecționate sub formã de maia.
Levurile se înmulțesc treptat în mustul pregătit pt F.
Cu ajutorul ansei sau pipetei sterile, levurile sel. Se însămînțează aseptic în 3-
4 eprubete ce conțin 10 cm3 must pasteurizat. Eprubetele se termostatează la
25-30 0C 24 ore și cînd F este energică conținutul se trece în 3 baloane, ce
conțin 0,5-1 dm3 must pasteurizat. Se închid cu dopuri de vată.
Conținutulse transferă treptat în baloane m. mari, pînă la volum necesar.
Maiaua de drojdii activă trebuie să conținăv 100-150 mln celule în 1 dm3
must, din care 30-50 % - înmugurite, 5 % - moarte
Concentrația maielei de drojdii – must 2-3 %, boștină 3-5 %
20UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
În loc ML – drojdii uscate, mai avantajos
Sub formă de pudră sau granule
Se pot păstra timp nelimitat la 2-4 0C
După păstrare se reactivează
După reactivare – 1-2 grame la decalitru
Caracter Killer21UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Biomasa de levuri selecționate se separă de mediu de cultură lichid princentrifugare
Se usucă cu curent de aer cald la tmax = 45ºC
Umiditatea max a levurilor uscate – 7-8 %
Sub formă pudroasă, granule
Compoziția preparatului: >94,5 % subst. Uscată, din care : masa celulară 40-50 %, proteine 2-5 %, fosfor 0,5-2 %apă˂7%
Numărul levuri. uscate/ 1 gr de preparat – 15-31 ·1019
Ambalaje ermetic închise sub vid sau atmosferă gaze inerte
22UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E
Codul oenologic internațional prevede ca lev. uscate să conțină celulerevitalizate de 109/ gram,
Celule de mucegai și bacterii ≤ 103 -105 celule/gram
Rehidratare pt revitalizare
Rehidratare: must proaspăt nesulfitat (1/3 must + 2/3 apă) sau soluțieapoasă de zahăr 50g/l, folosindu-se 10 l/ 1 kg levuri uscate
Pt simplificarea rehidratării mustul se încîlzește 35-40 ºC (timp de 30min în must pasteurizat și încălzit pînă la temp. 37 0C)
10-20 g levuri uscate/ 1 hl must
23UASM, Microbiologie oenologică, 2010, Zugravîi E