UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN VETERINAR

CLUJ-NAPOCA

FACULTATEA DE ZOOTEHNIE I BIOTEHNOLOGII

COALA DOCTORAL

Ing. LAVINIA IOANA BRNUIU (cs. TOMO)

EVALUAREA PROPRIETILOR BIOLOGICE ALE

MARKERILOR DE CALITATE DIN

LPTIORUL DE MATC I APILARNIL(REZUMAT AL TEZEI DE DOCTORAT)

CONDUCTOR TIINIFIC

Prof. Univ. Dr. Ing. Liviu Alexandru MRGHITA

CLUJ-NAPOCA

2013

2

CUPRINS

INTRODUCERE............................................................................................................. 3

OBIECTIVE.................................................................................................................... 5

CAPITOLUL I. LPTIORUL DE MATC I APILARNILUL GENERALITI... 6

1.1. IMPORTANA LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI ......... 6

1.1. COMPOZIIA FIZICO-CHIMIC A LPTIORULUI DE MATC I A

APILARNILULUI ....................................................................................................... 6

CAPITOLUL II. MARKERI DE CALITATE DIN LPTIORUL DE MATC I

APILARNIL.................................................................................................................... 6

CAPITOLUL III. EFECTELE TERAPEUTICE ALE LPTIORULUI DE MATC I

APILARNILULUI .......................................................................................................... 7

CAPITOLUL IV. METODE DE DETERMINARE ALE CAPACITILOR

ANTIOXIDANTE I ANTIMICROBIENE ALE LPTIORULUI DE MATC I

APILARNILULUI .......................................................................................................... 7

CAPITOLUL V. MATERIAL I METOD.................................................................. 8

5.1. MATERIALUL BIOLOGIC ................................................................................. 8

5.2. ANALIZE EFECTUATE ...................................................................................... 8

CAPITOLUL VI. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZELE ....................... 8

FIZICO-CHIMICE.......................................................................................................... 8

CAPITOLUL VII. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZELE

SPECTROFOTOMETRICE UV-VIS............................................................................ 11

CAPITOLUL VIII. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZA HPLC............. 14

CAPITOLUL IX. REZULTATE I DISCUII PRIVIND CAPACITATEA

ANTIMICROBIAN A LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI ....... 19

CAPITOLUL X. CONCLUZII GENERALE................................................................. 24

ELEMENTE DE ORIGINALITATE............................................................................. 26

RECOMANDRI I PERSPECTIVE........................................................................... 26

BIBLIOGRAFIE ........................................................................................................... 27

REZUMAT

3

INTRODUCERE

Lptiorul de matc i apilarnilul sunt produse apicole biologic active cu

proprieti biotrofice, energizante, vitalizante, tonifiante i psihotonice care ajut la

refacerea sistemului imunitar. Dei nu este un produs tradiional al stupului, ca i mierea,

polenul, propolisul i ceara, apilarnilul se distinge prin proprietile lui organoleptice

specifice, prin proprietile lui fizico-chimice i microbiologice care l recomand ca un

produs veritabil, de valoare al stupului.

Lptiorul de matc a fost acceptat i adesea folosit ca o substan care sprijin

sntatea. Cercetrile arat c proteinele din lptiorul de matc ar putea avea funcii

fiziologice immunostimulative, supresive de reacii alergice, dar i antihipertensive,

precum i de stimulare a proliferrii celulelor. Toate aceste constatri au deschis o nou

er n ceea ce privete utilizrile lptiorului de matc.

innd seama de caracteristicile organoleptice, fizico-chimice, precum i de

anumite condiii de recoltare, apilarnilul se deosebete esenial de lptiorul de matc.

Este bine ca apicultorii s in seama de aceste deosebiri n procesul i tehnologia de

recoltare ale acestor produse, respectnd ntotdeauna principiul rspunderii, corectitudinii

profesionale i al onestitii n activitatea lor de productori.

Lptiorul de matc prezint caliti biologice i fiziologice de excepie, motiv

pentru care este comercializat pe scar larg, fiind utilizat n diferite industrii, precum cea

farmaceutic, alimentar (suplimente nutritive), cosmetic. Datorit diversitii i

multitudinii de utilizri pe care le are, n rile unde producia este insuficient n raport

cu cererea, lptiorul de matc este importat n cantiti mari. De aceea, cercetarea n

acest domeniu trebuie extins i dezvoltat pentru a permite o evaluare calitativ i

cantitativ, corect, a diferitelor componente. Pe de alt parte, cercetarea permite

implementarea unor teste de evaluare a calitii produselor disponibile pe pia care

includ lptiorul de matc fie ca atare, fie ca aditiv. Cercetarea acestui domeniu are un

rol important i n optimizarea procesului de identificare a lptiorul de matc

contrafcut.

Cunoscnd faptul c n ara noastr, precum i n majoritatea rilor (exceptnd

Brazilia), nu exist un standard al calitii lptiorului de matc, realizarea unui astfel de

REZUMAT

4

standard sau cel puin implementarea unor metode sigure pentru stabilirea funcionalitii

i a calitii acestui produs, prezint interes pentru cercetare. Cercetrile vor contribui la

elaborarea tehnologiei de determinare a acidului 10-hidroxi-2-decanoic n scopul

determinrii autenticitii lptiorului de matc, precum i stabilirea unor markeri de

calitate pentru lptiorul de matc i apilarnil.

Prezenta tez de doctorat dorete s aduc o contribuie important n ceea ce

privete studiul lptiorului de matc i a apilarnilului prin analize chimice de actualitate

cu scopul de a se investiga calitatea acestora. Calitatea acestor produse este data de

componentele cu valori nutriionale (glucide, lipide si proteine), de coninutul n compui

biologic activi (10-HDA, compui polifenolici i peptide), precum i de capacitatea

antioxidant i antimicrobian a acestora.

Lucrarea de fa Evaluarea proprietilor biologice ale markerilor de calitate

din lptiorul de matc i apilarnil este structurat n doua pri. n prima parte,

intitulat Studiu de literatur (Capitolele I -IV) este prezentat stadiul actual al

cunoaterii privind obiectivele propuse, i aspecte legate de compoziia chimic,

capacitile antioxidant i antimicrobian, metodele de analiz utilizate.

n cea de a doua parte Cercetri proprii (Capitolele V - X ) sunt prezentate

materialul biologic (14 probe de lptior de matc i 14 probe de apilarnil), metodele

experimentale aplicate (fizico-chimice, spectrofotometrice, cromatografice i

microbiologice), rezultatele obinute i concluziile studiului efectuat.

REZUMAT

5

OBIECTIVE

Obiectivele urmrite n teza de doctorat sunt urmtoarele:

Cercetri privind compoziia fizico-chimic a lptiorului de matc i a

apilarnilului, prin determinarea umidittii, a cenuii, a aciditii i a lipidelor.

Cercetri privind optimizarea unei metode de determinare a proteinelor totale din

lptiorul de matc i apilarnil metoda Lowry.

Cercetri privind identificarea i cuantificarea glucidelor din lptiorul de matc i

din apilarnil prin tehnica de Cromatografie Lichid de nalt Performan cu

detecie n Indice de Refracie (HPLC-IR).

Cercetri privind identificarea i cuantificarea a acidului 10-hidroxi-2-decenoic

din lptiorul de matc prin tehnica de Cromatografie Lichid de nalt

Performan cu detecie cu ir de Fotodiode (HPLC-PDA).

Cercetri privind identificarea polifenolilor din lptiorul de matc prin tehnica de

Cromatografie Lichid de nalt Performan cu detecie cu ir de Fotodiode

(HPLC-PDA).

Cercetri privind capacitatea antioxidant a lptiorului de matc i a apilarnilului

(metoda DPPH i metoda FRAP) evaluat in vitro prin metode spectrofotometrice

clasice.

Cercetri privind capacitatea antimicrobian a lptiorului de matc i a

apilarnilului prin testarea acestora pe tulpini bacteriene de referin internaional.

REZUMAT

6

CAPITOLUL I. LPTIORUL DE MATC I APILARNILUL

GENERALITI

1.1. IMPORTANA LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI

Cunoaterea markerilor biologici ai lptiorului de matc proaspt i ai

apilarnilului responsabili de proprietile lor, este esenial pentru a putea caracteriza

compoziia i calitatea produselor care se obin ca urmare a nglobrii n structura lor a

acestor produse valoroase ale stupului.

1.1. COMPOZIIA FIZICO-CHIMIC A LPTIORULUI DE MATC I A

APILARNILULUI

Lptiorul de matc este singura surs cunoscut de acid 10-hidroxi-2-decenoic

(10-HDA), un compus cu potenial anticancerigen i antibacterien. n componena

lptiorului intr un numr nsemnat de vitamine i aminoacizi precum i compui nc

neidentificai (n proporie de 2,8%) (Boselli i colab., 2003). n literatura de specialitate

se amintete despre importantele componente ale lptiorului de matc precum sunt:

proteinele, glucidele, lipidele (Takenaka, 1984; Portallier i colab., 1990, Lerker i

colab., 2003).

La examenul microscopic al produsului triturat i centifugat s-au observant detritusuri

celulare i celule de polen. Pentru obinerea substanei active standardizate, apilarnilul

triturat i filtrat se liofilizeaz, utilizndu-se apoi ca pulbere (Ilieiu, 1991). O prim

descriere a compoziiei chimice a apilarnilului a fos