Determinarea amigdalinei din seminţele de mere

AMIGDALINA

Deşi merele conţine compuşi care pot conferi beneficii pentru sanătate la om, seminţele de mere conţine amigdalină (fig. 1), un compus potenţial toxic.

Fig.1 Structura amigdalinei

Materiale şi metode

• Reactivi şi standarde• Amigdalina, etanol, dietil eter, și metanol, HPLC de calitate care au fost

toate achiziționate de la Sigma-Aldrich (Dorset, UK).• Apa a fost preparată folosind un sistem de purificare Millipore Milli-Q.

Toți ceilalți reactivi au fost de calitate .

Metoda

• Merele se taie fiecare în părţi egale iar seminţele de mere se, separa de alte ţesuturi.

• Apoi seminţele de măr (2 g) se dezintegreaza cu un mojar cu pistil.• apoi se cântăreste 1 g într-un balon cu fund rotund (500 ml), se

adăuga etanol (50 ml), şi amestecul se fierbe sub reflux timp de 100 min, apoi se filtrează si se transferă intr-un tub din plastic (50 mL). Etanonul se evaporă cu ajutorul unui evaporator rotativ.

• Se adauga 10 mL de dietil eter peste proba uscata si se centrifughează (1min) la temperatura camerei (20°C) pentru a precipita amiglina.

• Dietil eterul a fost lăsat să se evapore peste noapte iar extractul de amiglalină se dizolvă in 5 mL de apă pentru a fi analizată in HPLC.

Prepararea extractului pentru analiza HPLC

• Determinarea amigdalinei prin HPLC• Conţinutul de amigdalină obţinut din seminţele de mere

a fost determinată prin folosind un HPLC Shimadzu.• Faza mobilă constă din metanol si apă (25:75) iar debitul

este de 1mL/min. Volumul de injecţie este de 5µL.• Amiglalina a fost detectată folosind detector sistem de

fotodiode la 214 nm.• Rezultatele au fost exprimate ca şi cantitatea de

amiglalină în mg/gram sau mg /mililitru de probe extrase.

Rezultate şi discuţii

• Analiza prin HPLC a amigdalinei• Detectarea amigdalinei a fost realizată prin detecţie UV într-o

eluare izocratică cu o liniaritate excelentă (corelaţie R2 = 0,9999) între zona de vârf şi concentraţia amigdalinei.(fig.2)

Fig.2. Curba de calibrare a amigdalinei pentru zona de vârf faţă de concentraţia .

• Limita de detecție utilizată pentru analiza HPLC este de 0,1µg/mL.Amigdalina a fost complet separată de alti componenți fară nici o pretratare.

Amygdalin content of apple seeds from different varieties of apple.Apple seeds Amygdalin content desiccated seeds (mg g-1)Bramley 1.34 ± 0.11Cox 1.59 ± 0.24Fuji 1.89 ± 0.15Jazz 2.22 ± 0.19Empire 2.34 ± 0.32Rubens 2.44 ± 0.22Pink Lady 2.57 ± 0.13Red Delicious 2.80 ± 0.50Royal Gala 2.96 ± 0.12Golden Delicious 3.91 ± 0.49

CONCLUZII• Ar putea apărea probleme grave de sănătate in urma

ingestiei intenţionate sau neintenţionate a amigdalinei din alimente sau din seminţele de mere.

• În timp ce amigdalina este toxică in concentaţie mare nici o lucrare nu a fost facută in vederea efectelor sale asupra sanataţii.

• Rezultatele prezentate în acest studiu a arătat în mod clar că conţinutul de amigdalină de-a lungul vieţii este relativ scăzut, şi este puţin probabil să ridice probleme de sanatate pentru consumatori.

• Totuşi se recomandă înlaturarea seminţelor de mere inaintea consumului sau prelucrarii merelor datorită conţinutului de amigdalină mai ridicat.

VĂ MULŢUMESC !!!

REALIZAT DE :ENE DIANA

CATB III