7/23/2019 Cho Lines Teraz A

http://slidepdf.com/reader/full/cho-lines-teraz-a 1/2

Determinarea activităţii colinesterazei

Colinesterazele reprezintă o familie de enzime care catalizează hidroliza esterilor colinei in colina şi acizi organici.

Se cunosc două tipuri de colinesteraze- acetilcolinesteraza (colinesteraza adevărată/ de tip I),  prezentă în eritrocite,

substanţa ceuşie a creierului, terminaţiile nervoase; catalizează hidroliza acetil-colinei încolină şi acid acetic; acetil-colina este eliberată la nivelul terminaţiilor nervoase şi mediazătransmiterea impulsului nervos la nivelul sinapsei neuronale. egradarea acetil-colinei estenecesară pentru a permite neuronilor colinergici să revină în starea de repaus consecutivactivării. !euronii colnergici fac parte din sistemul nervos parasimpatic şi sunt localizaţi lanivelul "oncţiunilor neuro-musculare.

- pseudo-colinesteraza (colinesteraza de tip II)  este produsă în special în ficat;hidrolizează acetil-colina şi alţi esteri ai colinei #butiril-tio-colină, benzoil-colină$. Se poategăsi în plasmă, funcţia sa biologică fiind necunoscută.

Principiul metodei

%seudocolinesteraza #butiril-colinesteraza$ catalizează hidroliza butiriltiocolinei în acid butiric şi tiocolină. &iocolina reacţionează cu &!' #(,()-dithio-bis-*-nitro-benzoic acid$, cuobţinerea unui compus colorat în galben, care prezintă absorbţie ma+imă la * nm.

Mod de lucru

n două eprubete se introduc următoarele soluţii/

Working procedure

%ipet into t0o test tubes/

!eactivi (m") Pro#a ($") Martor/ %lank ($")

Soluţie de substrat *11 *11Ser #diluţie 2$ *1 -

3ncubare 1 minute la *(ºC4eactiv de culoare *111 *111

5gitare, repaus, ma+im 1 minuteSer #dilutie 2$ - *1

Citirea imediată a absorbanţei probei faţă de martor la * nm

&alcul

5ctivitatea colinesterazei #627$ 8 5 probă + 9:9

9:9 8 factor de corecţie calculat în funcţie de cantitatea de probă luată în lucru,timpul de incubare şi coeficientul molar de e+tincţie a compusului format

'alori normale <111-9111 627

7/23/2019 Cho Lines Teraz A

http://slidepdf.com/reader/full/cho-lines-teraz-a 2/2

emniicaţie clinică

=alori scăzute ale activităţii colinesterazei pot fi înregistrate în următoarele situaţii

- 3nto+icaţii cu insecticide organo-osorice. 5cestea inactivează acetilcoliesterazele,

leg>ndu-se covalent prin intermediul unui reziduu de serină din situsul activ al enzimei; persoanele care lucrează în agricultură pot suferi astfel de into+icaţii.

- 3nto+icaţii cu substanţe to*ice de luptă #tabun, sarin$.- eoarece colinesteraza este sintetizată în ficat, activitatea sa serică este un indicator 

sensibil al capacităţii ficatului de a sintetiza proteine. n unele boli hepatice activitateacolinesterazei este scăzută/ hepatita acută #cu <1-(1?$, ciroză avansată, metastaze hepatice#cu (1-1?$. 5ceastă scădere indică insuficienţă hepatică.

- @+istă un defect genetic, determinat de mutaţii la nivelul genei codante pentru pseudocolinesterază, care se manifestă printr-o perioada prelungită de apnee la pacienţii

cărora li se administrează rela+ante musculare în timpul intervenţiilor chirurgicale #succinil-colină, care ar trebui să fie degradat de colinesteraza$. @ste indicat ca pacienţii cărora li serecomandă acest tratament să fe testaţi în prealabil pentru determinarea activităţii plasmaticea colinesterazei.