Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in...

download Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron Costin

of 20

Transcript of Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in...

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    1/20

    Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L.cultivată in vitro

    BOGDAN-DORIN ŞOLTUZU*

    * Universitatea “Alexandru Ioan Cua!" #a$ultatea de Biolo%ie" Bd-ul Carol I &'A" $od i()''+'," Iai" Ro./nia

    Introducere

    0n (ro$esul de re%enerare a (alntelor !in vitro! se o12in (roto$lone $/nd re%enerarea se

    realiea3 din (roto(lati" so.ato$lone 4re%enerare din $elule so.ati$e5 i %a.eto$ole 4re%enerarea

     (lantelor din $elule %a.eti$e56 A$este $lone re(reint3 sursa unei .ari varia1ilit32i %eneti$e"

    datorat3 $ondi2iilor de $ultivare i re%enerare i (ot 7i utiliate 8n s(orirea (rodu$2iilor $antitative i

    $alitative6

    0n $on$luie se (oate a7ir.a $3 $ele .ai i.(ortante alternative 8n re%enerarea (lantelor sunt)

    - reinstalarea (ro%ra.ului onto%eneti$ $o.(let (rin indu$erea

    e.1rio%eneei so.ati$e9

    - re$onstru$2ia (lantei 8ntre%i (rin ini2ierea or%ano%eneei

    4rio%enea i $aulo%enea5

    Re%enerarea (rin or%ano%ene3 este s(e$i7i$3 .ai ales siste.elor stati$e de $ultivare"

    res(e$tiv utiliarea su1stratului solid re(reentat de .ediul de $ultut3 a%ariat6Ast7el se (oate realia .ulti(li$area industrial3 a %enoti(urilor valoroase naturale sau

    o12inute (rin (ro$edee $lasi$e" ori .oderne" i re(reentate (rin (lante de $ultur3" (lante

    orna.entale" (o.i" ar1ori 7orestieri sau (lante $u i.(ortan23 7itotera(euti$3 aa $u. este $3tina

    4 Hippophae rhamnoides656

    Te:ni$ile ;in vitro! o7er3 (osi1ilitatea $onserv3rii i (er(etu3rii unor %enoti(uri valoroase6

    C3tina este o (lant3 uni$3 i i.(li$it valoroas3 (rin $on2inutul $o.(lex de (rin$i(ii a$tive

    4Ala. " &''< 9 C:en si $ola16" &''+9 Dris" &''+56

    0n a$est $ontext a. ur.3rit ela1orarea unui siste. de .i$ro(ro(a%are (entru $lonarea unor 

    soiuri elit3 de  Hippophae rhamnoides ssp6 carpathica.  A$easta (resu(une testarea .ediilor 

    ade$vate $ultiv3rii ex(lantelor" 8n s$o(ul “re$onstru$2iei! (lantelor 8ntre%i i (er(etu3rii a$estora

    4=ao siTi%erstedt" >??

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    2/20

    Ini2ierea $ulturilor ;in vitro! a 7ost realiat3 la dou3 soiuri de Hippophae rhamnoides ssp6

    carpathica ) Sfiştofca i Perişor.

    Cara$terul $lonal al .ulti(li$3rii ve%etative a $elor dou3 soiuri a 7ost asi%urat (rin utiliarea

    ex(lantelor .eriste.ati$e 4-& (ri.ordii 7oliare" (relevat de la (lantule i .u%uri axilari (releva2i de (e ra.urile

    unor indivii .aturi6

    Material şi metode de cercetare

    Material vegetal

    x(lantele ve%etale utiliate 8n ex(eri.entele noastre au $onstat din (lantule de

     Hippophae rhamnoides ssp. carpathica" o12inute (rin %er.inare ase(ti$3 4#oto >5 i .u%uri

    axilari (releva2i de (e ra.urile tinere 4#oto ?56 re%3tirea ex(lantelor (entru ino$ulare a $onstat din

    steriliarea $:i.i$3 a$estora" utili8ndu-se o su$$esiune de rea$tivi)

    - al$ool etili$ ' ti.( de + se$unde9

    - solu2ie de :i(o$lorit de sodiu ti.( de @->' .inute9

    - a(3 distilat3 steril3 utiliat3 (entru s(3larea re(etat3 a ex(lantelor 8n s$o(ul

    8nde(3rt3rii su1stan2elor anterior 7olosite6

    Metode de cercetare

      0ni2ierea $ulturilor in vitro a avut $a s$o(" intr-o (ri.a eta(a" evaluarea (osi1ilit32ilor de

    re%enerare dire$t3 (rin utiliarea ex(lantelor .eriste.ati$e6

    0n $onse$in23 a. lu$rat (e < variante ale .ediului 1aal Euras:i%e F Hoo%6 4ta1elul >56

    Diversi7i$area $o.(oi2iei .ediului Euras:i%e F Hoo% a avut la 1a3 utiliarea auxinelor i

    a $ito$:ininelor 8n di7erite $on$entra2ii i $o.1ina2ii" 7un$2ie de s$o(ul ur.3rit6

    Indu$2ia $aulo%en3 a 7ost realiat3 (rin testarea a dou3 $ito$:inine) 1enila.ino(urina i

    $:inetina" utili/ndu-se 8n a.1ele $auri $on$entra2ia de >.%l6 Au 7ost testate < variante ale

    .ediului E 4Ta1el &56 Jariantele > i & $on2in $a $ito$:inin3 BA iar $a auxin3 AIA6 Jariantele

    i < $on2in $a $ito$:inin3 K i $a auxin3 ANA6 Jariantele > i au o 1alan23 :or.onal3 e$:ili1rat3"

    iar & i < ex$edentar3 8n 7avoarea $ito$:ininei6 Jarianta +" li(sit3 de re%ulatori de $retere" a 7ost

    utiliat3 (entru indu$2ia rio%eneei6

    &

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    3/20

    MAC!"L"M"#"

    Ingrediente Concentra$ia %n solu$ianormală &mg'l(

     N   <  NO   D

    KNO   D

    >,+'

    >?''

    CaCl   & M &   & O

    '

    MIC!"L"M")#"

      D BO   <

    EnO   < M <   & O

    ZnO   < M   & O

     Na   & EoO   < M &

    & O

    CuO   <  M+   & O

    CoCl   &  M ,   & O

    ,"&

    &&"

    @",

    '"&+

    '"'&+

    '"'&+

    KI '"@

    I#AMI)"A$id ni$otini$iridoxin3 ClTia.in3

    '"+'"+'">

    Eeoinoitol >''+A,A!+- ' %l

    p, +"@

    #abelul . Compozi$ia c/imică a mediului Muras/ige 0 S1oog &MS 0 234(

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    4/20

    ariante egulatori de creştere5AP AIA A)A 6  

    > > .%l > .%l - -& > .%l '"> .%l - - - - > .%l > .%l< - - '"> .%l > .%l+ - - - -

    #abel 4. Medii nutritive pentru cultivarea e7plantelor meristematice de  Hippophaerhamnoides ssp. carpathica

     Index8 AIA - a$id -indolila$eti$  A)A - a$id -na7tila$eti$

      5AP - 1enila.ino(urina  6 - Hinetina

    Co.(onente .%l N

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    5/20

    - Re$oltarea ex(lantelor

    - Ini2ierea $ulturilor de $alus (rin ino$ularea a$estora (e .ediul nutritiv Euras:i%e-

    Hoo%6

    - Indu$erea re%ener3rii (e variante ale .ediilor de $ultur3" 1aate (e $on$entra2ii

    di7erite de re%ulatori de $retere6

    - Testarea $a(a$it32ii 1iosinteti$e a $alusului (rin TLC6

    ursa ex(lantelor ino$ulate ;in vitro! a $onstat 8n (lantule" o12inute (rin %er.inarea

    se.in2elor 8n $ondi2ii ase(ti$e6

    teriliarea .aterialului ve%etal a $onstat 8n trata.entul $:i.i$ $o.(let 1aat (e

    i.ersarea ex(lantelor in etanol ti.( de $/teva se$unde" ur.at3 de trata.entul $u o solu2ie de

    :i(o$lorit de sodiu ti.( de >' .inute6 Ulterior ex(lantele au 7ost s(3late re(etat $u a(3distilat3 steril36

    Du(3 steriliarea ex(lantelor" a$estea au 7ost ino$ulate 8n $ondi2ii ase(ti$e 48n 1oxa $u

    7lux la.inar5 (e .ediul 1aal 6

    Indu$erea $aluso%eneei s-a realiat utili/ndu-se $ulturile de su(ra7a23" (e .edii

    a%ariate 4#oto >,">">@5" iar .ulti(li$area $alusului (e (ar$ursul .ai .ultor eta(e de

    su1$ultivare a 7ost evaluat3 (rin $/nt3rirea (eriodi$3 a 1io.asei (roas(ete 4la interval de <

    s3(t3./ni56Eaterialul ve%etal o12inut (rin dedi7eren2ierea ex(lantelor :i(o$otilare a $onstituit

    sursa ini2ierii $ulturilor su1.erse 4#oto >?" &'" &>56

    Eediul nutritiv utiliat (entru .ulti(li$area sus(ensiilor $elulare a 7ost E "

    su(li.entat $u 7ito:or.onii" in $on$entra2iile i $o.1ina2iile $ores(un3tor ta1elului &6

    us(ensiile $elulare au 7ost (er(etuate (e (ar$ursul .ai .ultor eta(e de su1$ultivare"

     (rin 8.(ros(3tarea .ediului de $ultur3 la interval de ile

    Metoda #LC de identificare a flavonoidelor 4Pa%ner i $ola16" >?@% .aterial ve%etal- >' .l .etanol-+ .inute 8n 1aia de a(3 la ,' ' C6 #iltratul este

    7olosit (entru $ro.ato%ra7ie6 A$east3 .etod3 ra(id3 extra%e 7lavonoidele li(o7ile i :idro7ile6

    Solu$ia de developare) a$etat de etil a$id 7or.i$ a$id a$eti$ a(3- >'') >>) >>)&

    Metode de identificare8 Rea$tivul N- G

    +

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    6/20

     e (ulveriea3 di7enil1oriloxietila.ina > 4N5" ur.at3 de + solu2ie etanoli$3 de G

    '" >>" >&" >" >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    7/20

    $ultiva2i ""in vitro!" este sti.ulat3 de (reen2a 8n .ediul de $ultur3 a $ito$:i.inelor" 8n $ondi2iile

    aso$ierii $u auxinele6 ste %eneral ad.is 7a(tul $3 neo7or.area de .u%urai la nivelul $alusului se

    a7l3 su1 $ontrolul intera$2iunii $elor dou3 $ate%orii de 7ito:or.oni6 0n nu.eroase situa2ii

    a(titudinea $aulo%en3 nu (oate 7i (us3 8n valoare de$/t la ex(lante de un anu.it ti( 47ra%.ente de

    tul(ini" (e2iol" (edun$uli 7lorali" in7lores$en23 et$656 Rea$2ia varia3 7oarte .ult $u s(e$ia6 L3starii

    o12inu2i (rin sti.ularea $reterii i devolt3rii ex(lantelor .eriste.ati$e de  Hippophae

    rhamnoides au 7ost ulterior $ultiva2i (e .ediul E 73r3 re%ulatori de $retere 8n s$o(ul devolt3rii

    siste.ului radi$ular 4#oto >+56

    Rio%enea este 7eno.enul de 7or.are a r3d3$inilor" 7ie a $elor se$undare" 7ie 8n $aul

    8n.ul2irii ve%etative" neo7or.area de r3d3$ini adventive6 Rio%enea este de(endent3 de .ai .ul2i

    7a$tori6 Dintre a$etia" 8n a7ar3 de 7a$torul %eneti$" 7ito:or.onii 4.ai ales auxinele5 exer$it3 un rol

    7oarte i.(ortant6 e a$eti 7a$tori endo%eni se 1aea3 7a$torii exo%eni" iar 8.(reun3 a$eti 7a$tori$ondi2ionea3 (rodu$erea rio%eneei i a.(litudinea ei6 Din ex(erien2e de rio%ene3 e7e$tuate (e

    tul(ini de7oliate (e $ale arti7i$ial3 sau din a$elea exe$utate $u ra.uri de (e $are au 7ost 8nde(3rta2i

    .u%urii" a reieit $lar 7a(tul $3 at/t 7runele $/t i .u%urii exer$it3 8n anu.ite 7ae de devoltare a

    or%anelor" res(e$tiv a (lantelor" o a$2iune sti.ulatoare asu(ra indu$erii (ro$eselor de rio%ene36

    Bai(etal se translo$:ea3 (rin (lant3 o su1stan23" $u a$2iune 1ene7i$3 asu(ra $a(a$it32ii rio%ene a

    2esuturilor" su1stan23 (rodus3 7ie 8n 7rune 4(rin a$2iune 7otosinteti$35" 7ie 8n tinerele 7runuli2e ale

    .u%urilor a7la2i 8n $retere a$tiv3 sau 8n a(exul (lantelor6 Eu%urii (ot exer$ita o a$2iunesti.ulatoare asu(ra rio%eneei" (ri.3vara i in:i1atoare iarna 4de exe.(lu" la (lo(56 e de alt3

     (arte" 7runele senes$ente (ot in:i1a a$est (ro$es6 Uneori" s-a $onstatat o in:i1are a rio%eneei"

    atun$i $/nd .u%urele axilar s-a a7lat 8n a(ro(ierea onei 1aale a 1utaului6 Un anu.it 7ra%.ent

    ex(lantat se $o.(ort3 $a un .ini1uta6 l di7er3 de un 1uta nor.al" 8ntru$/t 1utaul $lasi$ de2ine

     1o%ate reerve endo%ene" are .u%uri i 7rune6 Eu%urii i 7runele (ot i du(3 des(rinderea

    7ra%.entului de (e (lanta F .a.3" s3 sintetie anu.i2i $o.(ui :or.onali6 x(lantul" din $aua

    di.ensiunilor sale reduse i a deta3rii sale" nu .ai 1ene7i$ia3 de "".esaQe! i ""sus2ineri! (a $are

    s3 le (ri.eas$3 de la .u%uri sau de la 7rune i r3./ne de(endent de .ediul de $ultur36 l este

    li(sit de 8ntre%ul ""$o.(lex rio$alini$! i de al2i 7a$tori $orelativi6 #a$torul %eneti$" .3ri.ea

    ex(lantului" v/rsta (lantei F .a.3" starea 7iiolo%i$3 a $elulelor (e $are le de2ine sunt 7a$tori $are

    $on$ur3 la evolu2ia ulterioar3 a ino$ulului6 Uneori ""in vitro! se (rodu$e o (ierdere a $a(a$it32ii

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    8/20

    rio%ene" .ai ales $a ur.are a (ra$ti$3rii unor re(i$3ri 4su1$ulturi5 su$$esive6 e (une (ro1le.a

     (3str3rii sau a redo1/ndirii 8n $a de (ierdere a $a(a$it32ii rio%ene" 4Ca$:i23 F Cos.a ">?@56

    a5 J/rsta exe.(larului ve%etal sau a or%anului donator de ex(lante exer$it3 un rol i.(ortant

    8n $a(a$itatea $elulelor ino$ulate de a-i ex(ri.a toti(oten2ialitatea6

    At/t la (lantele (erene" $/t i la $ele anuale" exist3 un de$lin (ro%resiv" (e .3sura avans3rii

    seoniere a $a(a$it32ii de ex(ri.are a toti(oten2ialit32ii" de$lin $are se instalea3 di7erit i tre(tat 8n

    or%ane6 e (rodu$e o redu$ere a densit32ii $entrelor (rodu$3toare de .eriste.oii" (e .3sura

    8naint3rii 8n v/rst36 Alt3 i(ote3 ar (utea 7i a$eea" 8n ti.(" se instalea3 o re(resie %radat3 a

    $o.(eten2ei re%enerative a $entrelor (rodu$3toare de .eriste.oii" existente la nivelul unui

    anu.it or%an6 Dar nu nu.ai v/rsta (lantei donatoare $ontea3" $i i 7aa de devoltare 8n $are se

    a7l3 (lanta res(e$tiv36 Eulte (lante (erene (ot r3./ne Quvenile ti.( de .ai .ul2i ani6 esuturi

     Quvenile (ot 7i %3site i la ar1orii .aturi" .ai ales la (lantele (rovenite din se.in2e i nu (e $alea8n.ul2irii ve%etative" tradi2ionale6 L3starii 4$are $res$ anual sau (rin .etode de 7or2are a 7or.3rii

    a$estora5" 8n ona 1aal3 a tul(inilor sunt adesea Quvenili6 Un rol i.(ortant 8l are i a$2iunea

     (rin$i(alilor 7a$tori de .ediu" 8n $are sunt $res$ute (lantele F .a.3" (re$u. i $ondi2iile 8n $are

    sunt in$u1ate ex(lantele sau ino$ulii 8n (re$ultur3" i anu.e) lu.ina" te.(eratura" a7e$tele $:i.i$e

    i 7ii$e" $u rol sele$tant sau de $reare a unei (redis(oi2ii re%enerative6

     15 Lu.ina F rata .axi.3 de re%enerare i de .ulti(li$are este atins3 nu.ai da$3 ex(lantele

    au 7ost re$oltate de la (lante donatoare la $are $erin2ele 47oto(erioad35 au 7ost satis73$ute6x(lantele derivate din (lante $res$ute 8n $ondi2ii de 7oto(erioad3 ne7avora1il3 (rodu$ (u2ine

     (lantule sau delo$" $:iar da$3 ""in vitro!" 7oto(erioada a 7ost satis73$ut3 $ores(un3tor6 "" In vitro!

     (reten2iile 2esuturilor i ale ino$ulilor (rivind 7oto(erioada sunt de .i$3 i.(ortan236 Du(3

    Euras:i%e 4>?@, ore ilu.inare ilni$3 $ores(unde devolt3rii o(ti.e a nenu.3rate

    ti(uri de ino$uli6 O intensitate lu.inoas3 (rea .are (oate re(resa or%ano%enea6

    $5 Te.(eratura6 La $alusul de  Arabidopsis thalliana" .en2inerea a$estuia (e o durat3

    s$urt3 de ti.(" la

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    9/20

    #eno.enul de laten23 $reea3 (ro1le.e 8n $eea $e (rivete rea$2ia ex(lantelor la

    $ultura ""in vitro! sau a (lantulelor neo7or.ate la trans7erul lor 8n $ondi2iile .ediului se(ti$"

    intr/nd 8n re(aus 7iiolo%i$6

    Eatsuo i Arisu.i 4>??5 au o1servat la Lilium longiforum $3 .axi.ul de 1ul1iori se

    di7eren2ia3 din ex(lantele (relevate din solii re$olta2i de la 1ul1i $are au 7ost sto$a2i < F +

    s3(t3./ni la >'SC9 nesu(unerea 1ul1ilor la 7ri% ridi$3 (ro1le.e 8n 8nvin%erea (ro1le.elor de

    laten236

    Cerin2ele de laten23 seonier3" (reente la nivelul or%anelor 41ul1i" .u%uri5 (ot 7i

    satis73$ute" (reala1il ex(lant3rii 2esuturilor6 Uneori a(li$area unei (erioade de 7ri% la 1ul1ilii

    neo7or.a2i ""in vitro!" (re.er%3tor trans7er3rii lor din ""in vitro!" 8n $ondi2iile naturale de via23"

     (oate 7i o .3sur3 salutar3 8n su(ri.area laten2ei9 1ul1ilii 2inu2i la 7ri% (ot r3./ne dor.ini6

    Cultivarea $elulelor ve%etale " 8n s$o(ul a$u.ul3rii de 1io.as3- sursa (rin$i(al3 deo12inere a .eta1oli2ilor se$undari" a (er.is extinderea a$estei .etode la un nu.3r .are de

    s(e$ii de i.(ortan23 e$ono.i$36 x(loatarea $:i.i$o-7ar.a$euti$3 a (lantelor" (rin a(li$area

    te:ni$ilor de $ultivare “in vitro!" asi%ur3 o12inerea unor $o.(ui utili 8n industria ali.entar3

    4$oloran2i"indul$itori5"$:i.i$3"7ar.a$euti$34al$aloii"%li$oide$ardiotoni$e6steroii5"

    $os.eti$3 4 (i%.en2i" uleiuri eteri$e56

    A$u.ularea 1io.asei ve%etale “in vitro!" (e 1aa $3reia sunt extrai .eta1oli2ii

    se$undari" este reultatul .ulti(li$3rii $elulelor9 $ineti$a .ulti(li$3rii (o(ula2iilor $elulare (resu(une derularea a$elorai 7ae $a i 8n $aul (o(ula2iilor 1a$teriene6

    Eaterialul ve%etal a 7ost analiat i din (un$t de vedere al 1iosinteei .eta1oli2ilor 

    se$undari $u rol antioxidant " i.unosti.ulator - (i%.en2ii 7lavonoidi$i" 8n s(e$ial 7lavonele i

    io7lavonele la  Hippophae rhamnoides  4Geet:a i $ola16 &''&9 Ros$:" &''

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    10/20

    industria 7ar.a$euti$36 ste $unos$ut 7a(tul $3 7lavonoidele sunt a%en2i antioxidan2i av8nd

    a$2iune antineo(lai$3 4Nis:ino" >??@5 i antiviral3 4 Gra7 i $ola16" &''+9 C:en i $ola16" &''+56

     i%.en2ii 7lavonoidi$i sunt (i%.en2i 7enoli$i 4$on2in 8n .ole$ula lor un :etero$i$lu

     (irani$ sau 7urani$ $ondensat $u un inel 1eneni$566 se %3ses$ 8n stare li1er3 sau le%at3 su1 7or.3

    de %li$oide6

    #lavonele i io7lavonele sunt (i%.en2i $are deriv3 de la & 7enil-1eno(iron3 i 7enil-

     1eno(iron36 unt su1stan2e $ristaline" solu1ile 8n a(3 i al$ool6 e %3ses$ du1 7or.3 de

    %li$oide) a(i%enina" lut$olina" uer$itina6

    Eediul E" su(li.entat $u &.%l BA i '"'& .%l ANA a sti.ulat $alusarea la

    nivelul (lantulelor" 8n s(e$ial 8n ona :i(o$otilului6 

    Jariantele II i IJ ale .ediului 1aal E au de.onstrat un (ronun2at e7e$t $aulo%en

    asu(ra ex(lantelor de ti(ul .u%urilor axilari6 Calusarea $o.(let3 a ex(lantelor Quvenile s-a (rodus (e varianta II a .ediului 1aal E $u &.%l BA i '"'& .%l ANA 4 #oto >," >5 6

     Calusul (ri.ar" o12inut (rin dedi7eren2ierea $o.(let3 a ex(lantelor" a 7ost su1$ultivat

     (eriodi$" la interval de < s3(t3./ni6

    Din (un$t de vedere .a$ros$o(i$" $alusul (ri.ar este :etero%en din (un$t de vedere al

    $ulorii i $onsisten2ei" av/nd o $uloare al1- %3l1uie sau 1run3 i o $onsisten23 7ria1il3 4#oto >@56

    us(ensiile $elulare au 7ost o12inute din $alus i au 7ost (er(etuate (e (ar$ursul .ai

    .ultor eta(e de su1$ultivare" (rin 8.(ros(3tarea .ediului de $ultur3 la interval de ile 4#oto>?" &'" &> 56

     Analia 1io$:i.i$3 a $alusului (rin .etoda $ro.ato%ra7iei 8n strat su12ire (e (l3$i de

    sili$a%el eviden2ia3 a1sen2a $o.(uilor .ai sus a.inti2i" at/t 8n $alusul (ri.ar" $/t i (e

     (ar$ursul eta(elor de su1$ultivare6

    >'

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    11/20

    #oto >- ursa de ex(lante

    #oto &- A(ex $aulinar

    #oto - tadiu in$i(ient al $aulo%eneei la Hippophae rhamnoides ssp. carpathica

    >>

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    12/20

    #oto &

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    13/20

    #oto -Caulo%ene3 avansat3

    #oto @- Caulo%ene3 avansat3

    #oto ?- Eu%uri axilari de Hippophae rhamnoides ssp. carpathica

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    14/20

    #oto >'- Ini2ierea $ulturii de .u%uri axilari

    #oto >>- Devoltarea ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    #oto >&- volu2ia ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    15/20

    #oto >- volu2ia ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    #oto >+- Rio%enea

    >+

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    16/20

    #oto >,-Ger.inarea ase(ti$3 a se.in2elor de Hippophae rhamnoides

    #oto >- Dedi7eren2ierea (lantulelor de Hippophae rhamnoides

    #oto >@- Calus de Hippophae rhamnoides

    >,

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    17/20

    #oto >?- Ini2ierea $ulturilor su1.erse

    #oto &' us(ensii $elulare de Hippophae rhamnoides

    #oto &>- us(ensii $elulare

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    18/20

    Concluzii

    •Cultivarea ex(lantelor .eriste.ati$e de Hippophae rhamnoides ssp. carpathica6 (e .ediul

    Euras:i%e F Hoo% $u >.%l BA i '"> .%l AIA 4varianta II5 a sti.ulat $aulo%enea i

    i.(li$it (osi1ilitatea $lon3rii ra(ide a soiurilor $ultivate6

    •Dintre $ito$:ininele testate" 1enila.ino(urina s-a dovedit .ult .ai e7i$ient3 $o.(arativ $u

    $:inetina 8n .i$ro(ro(a%area (rin $ulturi de .eriste.e6

    •x(lantele de ti(ul a(exului $aulinar 8nso2it de >-& (ri.ordii 7oliare $onstituie $ele .ai

    ade$vate .i$ro(ro(a%3rii $lonale6

    •Re%enerarea (lantelor 8ntre%i a 7ost o12inut3 (rin 8nr3d3$inarea l3starilor (e .ediul 1aal E"

    li(sit de 7ito:or.oni6•Ei$ro(ro(a%area dire$t3 a $elor dou3 soiuri de $3tin3 a 7ost o12inut3 8ntr-un interval de @

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    19/20

    •  Eetoda de .i$ro(ro(a%are a(li$at3 8n $aul s(e$iilor analiate 8n a$east3 lu$rare 4

     Hippophae rhamnoides65 s-a 1aat (e utiliarea ex(lantelor de ti( .u%ural6xisten2a unui

    nu.3r destul de .are de .u%uri la nivelul l3starilor deter.in3 o e7i$ien23 e$ono.i$3

    deose1it3" 8ntru$/t din 7ie$are .u%ure (oate 7i re%enerat3 o nou3 (lant36

    • Utiliarea BA 8n ex$es" 8n $o.1ina2ie $u ANA" $/t i K 8n $o.1ina2ie $u &"< D s-au

    dovedit 1ene7i$e de$lan3rii $aulo%eneei i i.(li$it .i$ro(ro(a%3rii dire$te la Hippophae

    rhamnoides6

    •  A$east3 $ale de re%enerare ;in vitro! $onstituie $el .ai e7i$ient .od de ridi$are la

    .axi.u. a randa.entului 8n .ulti(li$area (lantelor" $on$o.itent $u asi%urarea trans.iterii

    la des$enden2i a estrei ereditare a su1ie$tului su(us .ulti(li$3rii6

    5ibliografie

    >6 Ala. Ze1 4&''',

    &6 C:en" D6" Daniel" K6G6" C:en" E66 Ku:n" D66" Landis-iVoVar" K6R6" Don" W66 4&''+5-

    DietarX 7lavonoids as (roteaso.e in:i1itors and a(o(tosis indu$ers in :u.an leuHe.ia

    $ells" Bio$:e.6 :ar.a$ol6 ,?4>'5) >->??,5- Sea buckthorn  $Hippophae rhamnoides%: A

    multipurpose plant " orti$ultural Te$:nolo%X ,4

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    20/20

    @6Eont(etit" D6" Lalonde" E6 4>?@@50In vitro (ro(a%ation and su1seuent .odulation o7 t:e

    a$tinor:ial Hippophae rhamnoides L. lant Cell" Tissue Or%an Culture" >+) >@?-&''

    ?6 Nis:ino" 6 4>??@5-Can$er (revention 1X $arotenoids" Eutat6 Res6 &

    >+6 Janisree" E6" C:en =ue Lee" :u #un% Lo" NalasVode" 6E6" C:ien Zi: Lin" sin TsaX

    4&''