Post on 09-Nov-2015
VIRUSURIHEPATOTROPE
AInfecioasSericHepatita viralTransmitere enteralTransmitereparenteralF, G, TTV? alteleENANBBDCHEPATITA VIRAL- istoric
Sursa de virusfecalefecaleCale de transmiterefecal-oralfecal-oralInfecie cronicnudadadanuPrevenirescreening donatorimodificareacomportamentuluila riscigienaalimentarTipuri de hepatit viralABCDEmodificareacomportamentuluila risc
Virusul hepatitei AFamilia PicornaviridaeGenul Hepatovirusform sfericdimensiuni 27 32 nmfr nveli extern
Virusul hepatitei AgenomARN mc, liniar, de sens pozitivcapsidasimetrie icosaedricconine 3 proteine structuraleVP1, VP2, VP3proteine nestructurale2A, 3A, B, C, VPg, 3Cpro, 3DPOL
asamblarereplicareasamblareprimer nsinteza ARNproteazpolimeraz ARN-ARN dependent
Virusul hepatitei Astructura antigenicun singur serotip stabil (o singur specificitate antigenic)
variabilitate genetic7 genotipuri (I-VIII)I, II, III, VII omIV, V, VI maimue n captivitate
Virusul hepatitei Arezistena la ageni fizici i chimicin fecale, la temperatura ambientului stabil peste 2 sptmnidistrus dup:3 zile la 37C10 12 ore la 60Ccteva minute la 100Cconservat la:-20C sau liofilizat timp de ani de zile
inactivat: - formol 1/4000- dup 3 ore, la 37C - clor activ 0,1 mg%- dup 30 minute
Virusul hepatitei A
replicareataarereceptorul insuficient cunoscutptrundere probabil prin endocitozbiosinteze virale n citoplasma celulei gazdasamblareieirenu distruge celula, rmnnd asociat cu aceasta
Virusul hepatitei A
cultivarecrete greu n culturi primare deficat de marmotrinichi de maimu nu produce e.c.p.caracteristicinstalarea persisteneiasocierea cu celula evideniere: RIA, hibridizareanimalecimpanzeimaimue
perioada de incubaie:n medie 30 zilelimite 15-50 zile
icter dupsub 6 ani:
umoralanticorpi neutralizaniIgM cteva spt. 12 luniIgG protecie la rembolnvireanticorpi IgA saliv, fecale nu sunt neutralizani
celularlimfocite citotoxice CD8elimin hepatocitele infectateinduc sinteza de interferon gammainduc sinteza de citokineHepatita A imunitate
sursa de virusomulinfectat inaparent
receptivitategeneral
Hepatita A sursa de virus
contact direct (fecal-oral: mini murdare, obiecte etc.)mediu familial, cre, grdini, colectivitialimente i ap contaminateconsumate crude/neprelucrate termiczarzavaturi, ngheat, molute etc.contaminate dup prelucrareexpunere la snge sau saliv (rar)donor n incubaie, seringi contaminate, pic. salivsexual (rar)contacte orale sau anale Hepatita A cale de transmitere
endemicitateincidenvrste afectatemod de transmiteremareAfrica, America CentralOrient Mijlociusczut spre mare prima copilriepersoan-persoan;rar epidemiimedieAmerica de Sud, CubaMexic, Chinamarecopii, adolesceni, adulipersoan-persoan;epidemii alimentareepidemii hidricemicAmerica De NordEuropa de NordJaponia, Australiasczuttineripersoan-persoan;epidemii alimentareepidemii hidricefoarte micNorvegia, SuediaFinlanda, Danemarcafoarte micadulicltori; rar epidemiiHepatita A rspndit universal
Hepatita ADiagnostic de laboratorinfecia acut diagnosticat prin detectarea Ac anti-VHA-IgM n ser prin EIA.infecia trecut (imunitate) determinat prin detectarea Ac anti-VHA-IgG prin EIA.cultivare pe culturi celulare dificil, necesit peste 4 spt.; nu se practic de rutinevideniere direct IME, IF, IPO, RT-PCR din fecale evideniaz infecia incipientrar efectuat serodiagnosticizolareexamen direct
Hepatita A - profilaxiemsuri generaleigiena individualmsuri de sanitaie n colectiviticontrolul surselor de apcontrolul alimentelor
pre-expunerecltorilor n zone cu endemicitate medie i mareimunoglobuline polivalente/specifice anti VHA (0,05 ml/kgcprotecie 90-100% timp de 4-6 luni
post-expunere (interval de 14 zile)de rutin contacilor din focarn situaii speciale: instituii, expunere la surs comun etc.protecie 75-80% Hepatita A profilaxie pasiv imunoglobuline
multe cazuri apar n comunitate - epidemiifr factori de risc pentru majoritatea cazurilorincidena la vrste de 5-14 ani copiii sunt rezervor de infecie
persoane cu risc crescut la infecie cltori, militari, personal medical Hepatita A profilaxie activconsideraii epidemiologice
vaccinuri inactivateHavrix (lab. Smith Kline Beecham)vaccinuri vii atenuaten curs de experimentarevaccinuri recombinantevaccinuri din peptide sintetice Hepatita A profilaxie activ
Virusul hepatitei BFamilia HepadnaviridaeGenul Orthohepadnavirus
3 tipuri de particulevirion complet - infeciosparticule sferice - neinfeciosformaiuni filamentoase - neinfecios
A photograph shows a magnified image of the hepatitis B virus. Color has been added to the photograph to make the virus easier to see. Oliver Meckes and Ottawa/Photo Researchers, Inc.
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuralesferic42 nmcentrul (nucleocapsida) 28 nmare nveli extern 7 nm
prezena n ser = multiplicare viral activvirion complet = particula Dane
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structurale20 22 nmstructuri ale nveliului viral (AgHBs)goale n interiorparticule sferice
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuralediametru 10 22 nmlungime 50 230 nmrezult din agregarea particulelor sfericeparticule filamentoase
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuralegenomul viralADN circular bicatenar, parial monocatenar
4 gene:gena S proteinele AgHBs3 regiuni: S, pre S1, pre S2gena C proteinele nucleocapsideigena P ADN-polimeraza viralgena X proteina HBx
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuralecapsidaicosaedricproteina centrului viral HBcconine ADN-polimeraza viral
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuralenveliul viralde natur glico-lipo-proteicalctuit din:dublu strat lipidic derivat din compartimentele celulare interneproteine de suprafa HBs:proteina mic S (small) - SHBsproteina mijlocie M (middle) - MHBsproteina mare L (large) - LHBs
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuraleproteine nestructuraleproteina HBerol de imunomodulator al rspunsului fa de hepatocitele infectate:proteina HBc i HBe au epitopi comuni pt.celulele Tanticorpiexcesul de HBe nltur rspunsul efector al celulelor T fa de hepatocitele infectate productiv (posesoare de HBc) stare de purttor
Virusul hepatitei Bcaractere morfo-structuraleproteine nestructuraleproteina HBxnumai la virusurile mamiferelorlocalizarea n celula infectatcontroversatexclusiv citoplasmaticnuclear i citoplasmaticperinuclearfunciiincomplet cunoscute
Virusul hepatitei Bstructura antigenicAg de suprafa HBsAg nucleocapsidic HBcAgHBe asociat nucleocapsidei
VHB - structura antigenicAg de suprafa HBsspecificitate antigenic comun de gruplocalizat pe secvena aa 124-137 i 139-147inta Ac neutralizanispecificitate de subtip2 perechi de antigene:d sau y (la aa 122)r sau w (la aa 160)subtipul w heterogen: w1, w2, w3, w4
VHB - structura antigenicAg de suprafa HBsperechile d-y i r-w se exclud reciproc
combinare 9 serotipuri majoreadw, ayw, adr, ayrmai frecvente
VHB - structura antigenicAg de suprafa HBsprezent n:esut hepaticesut limfoidmembrane sinovialetoate secreiile organismuluiserla 4-6 spt.de la infeciedispare la 3 luni de la debutprezena peste 6 luni = persistena infeciei
Virusul hepatitei Bstructura antigenicAg nucleocapsidic HBcn nucleul hepatocitelor infectate la 10 zile de la infecien nucleul i citoplasma hepatocitelor la purttori sntoi cu hepatite cronice activen ser, extrem de rar complexe imune Ag-Ac
Virusul hepatitei Bstructura antigenicAgHBe asociat nucleocapsideiprezent n sern perioada de incubaie imediat dup apariia AgHBsdispare dup 2-4 sptmni, anterior dispariiei AgHBseste indicator de replicare viral activpersistena = prognostic nefavorabil
VHB - variabilitatea geneticgenotip A: Europa, America de Nord, Africa Centralgenotip B i CAsiaOceaniagenotip DIndiaEuropa de SudMediteranagenotip EAfrica de Vestgenotip FAmerica de Sudidentificate 6 genotipuri (A-F)
VHB - variabilitatea geneticvariabilitate sczut - 5%variaii virale prinmutaiideleiivariaii virale n regiuneapreC/Cabsena expresiei AgHBeXinducere de reacii imune deficitare
VHB - Rezistena la ageni fizici, chimicirmne infectantn ser6 luni la 30C10 ore la 60Cla (-20C) 15 anidup liofilizare la 25C o sptmn
este inactivat dehipoclorit de sodiu n 10alcool isopropilic 70% i alcool etilic 80% la 11C timp 2permanganat de K 1 la pH 8,4formol 5% la pH 8,4glutaraldehida 2% la pH 8,4distrusautoclavare: 30 minute la 128Cpstrare la pH 2,4 timp 6 orevirus rezistent!!
VHB - Rezistena la ageni fizici, chimicirmne antigenic i dup 40 cicluri de nghe-dezghe dupexpunere la 98C timp de 1 minutexpunere la 60C timp de 10 oredup tratare cu eter i la pH acid 2,4 timp de 6 ore
AgHBs
VHB - Multiplicare viralintrare n celul prin endocitozintrare n nucleu, formare structur d.c., suprarsucire i transcriere a ARN pregenomicsintez de proteine virale i structurale capsidaleintrare ARN pregenomic n capsidsintez de ADN d.c.- m.c.maturare viral i nvelire cu membrane citoplasmatice interneeliberare din celul prin exocitoz
VHB - Multiplicarea viralATAAREmecanisme insuficient cunoscuteataare de celul prin structuri ale AgHBs: LHBs, MHBsreceptorii hepatocitelor nc neidentificai posibil:serum-albumina umanfibronectina sinusoidelor hepaticeendonexina 2apolipoproteina H
VHB - Multiplicarea viralPENETRARE n celulendocitoz
TRANSPORTUL n nucleul celuleila nivelul porilor nucleari
VHB - Multiplicarea viralBIOSINTEZE viralesinteza ADN prin reverstranscrierea de ARN intermediartranscriere si translaie sinteza proteinelorreplicarea genomului
ASAMBLAREAcompartiment intermediar ntre reticulul endoplasmic i aparatul Golgi
ELIBERAREA din celulexocitoz
VHB - Cultivareculturi celularenu s-a reuitanimalecimpanzeuprimate superioareraa de Pekinveveriaoareci transgenicihepatit cu severitate mediecronicizare cu: AgHBs n ser AgHBs i AgHBc n ficat (biopsie) ADN viral n extracte hepatice
VHB - Patogenez1. ptrunde n organism
soluii de continuitate ale mucoaselor/tegumentuluimanevre medicale invaziveseringi, instrumentar incorect sterilizattransfuzii cu snge contaminatcontact sexual (hetero- homo-sexual)
VHB - Patogenez2. torent sanguin ficat3. replicare primar n celula hepaticciclul de replicare: 10-12 zilepropagare viral n parenchimul hepatic:prin contiguitate de la celul la celulpe cale sanguin4. eliminare n torentul sanguin viremie masiv
VHB - Imunitateapare dup perioada de incubaie de 6 sptmni 6 luni1. aprarea nespecific prin interferonIFN inducefebrmialgiicefaleecelulele NK induc producere de IFNcitokineapar nivele crescute de IL-2, IL-12, TNFIFN + IL-2 + IL-12 + TNF inhib replicarea viral
VHB - Imunitate2. rspuns celular
limfocite T citotoxice
elimin hepatocitele infectate prin:declanarea apoptozei n urma interaciunii specifice Ag-limfocitlimfocitele Tc secret IFN apariia de focare inflamatoareIFN activeaz macrofagele intrahepatice induc rspuns de hipersensibilitate ntrziat aciune distructiv hepatic
VHB - Imunitate3. rspuns umoralAc anti-HBsac protectori de tip neutralizantconfirm vindecarea i instalarea imunitiiapar n convalescenapar la un interval de timp dup dispariia AgHBsalctuiesc complexe imune cu Ag virale eliminarea virusului
se depun n esuturiurticarie; artrit; glomerulonefrit; vasculit
VHB - ImunitateAc anti-HBc de tipIgMprimii Ac care apar n perioada prodromaltitru maxim n perioada de starediminu n convalescenscad rapid n primul an dup infeciereflect replicare activindicator cert de dg. n hepatita acut Bdg. diferenial cu hepatita acut de alt etiologie suprapus pe portajul de AgHBsIgGapar la sfritul perioadei de stareconcentraie maxim n convalescenpersist timp ndelungat (toat viaa)3. rspuns umoral
VHB - Imunitate3. rspuns umoral
Ac anti-HBe apar dup dispariia AgHBese depisteaz consecutiv apariiei Ac anti-HBc IgM
Hepatita BSpectru de evoluiehepatita acuthepatita cronicciroza hepaticcarcinom hepato-celularinfecie asimptomatic
Hepatita B - epidemiologiesursa de infecie:om bolnavpurttor asimptomatictransmiteretransfuziiinstrumentar incorect sterilizatsoluii de continuitate tegumente, mucoasecontact sexual homo/heteroperinatal
maremoderatjoas/nedetectabilsngespermurinsersecreie vaginalfecaleexsudatele plgilorsalivtranspiraielacrimilapte de mamConcentraia VHB n fluidele organismului
epidemiologiegrupe de risc:nou-nscui din mame infectatetoxicomanihomosexuali/heterosexualihemodializaipersonal medico-sanitar
Hepatita B - diagnosticbaterie de teste serologice pt diagnosticul infeciei VHB acute i croniceAgHBs marker general al infeciei Ac anti-HBs demonstreaz vindecarea/imunitatea anti-HBc IgM - marker al infeciei acute anti-HBc IgG infecie trecut sau cronicAgHBe - indic replicarea activ a virusului i infeciozitatea sngelui Anti-HBe virusul nu se mai replic. Totui pacientul poate fi AgHBs pozitiv datorit VHB integrat HBV-DNA - indic replicarea activ a virusului, mai precis dect AgHBe, n special n cazurile de infecie cu escape mutants. Folosit n special pt monitorizarea rspunsului la terapie.
Hepatita B - tratamentInterferon pt purttori AgHBs, AgHBe pozitivi cu hepatit cronic activLamivudineAdefovirEntecavir
rspunsul la tratament dispariia AgHBs, HBV-ADN, seroconversia la AgHBe
Hepatita B - prevenireVaccinare eficiente vaccinurile recombinante; pentru cei cu risc crescut: personal medical, nou-nscui
Imunoglobuline specifice anti-VHB pt a proteja persoanele expuse virusului; eficace n primele 48 ore de la expunere; la nn din mame AgHBs i AgHBe pozitive
alte msuri - screening al donatorilor, al sngelui, gravidelor
VIRUSUL HEPATITEI D (VHD)Virus defectiv nrudit cu virusuri ale plantelor (viroizi)
Satelit subviral al VHB (helper) i asigur ciclul biologic
Deltavirus
particul sferic
diametrul 35-37 nm
VIRUSUL HEPATITEI DELTAPrezint anvelop (AgHBs)
Genom ARN monocatenar
Antigenul deltaDELTAVIRUS
STRUCTURA VHDproteinele virale = Ag Delta
proteina nucleocapsidicp 27 (proteina HD mare)- 214 aa - stopeaz replicarea - intervine n formarea i secreia de virusuri
p 24 (proteina HD mic) - 195 aa - aciune citotoxic - activeaz replicarea ARN VHD
STRUCTURA VHD GENOMULARN Monocatenar, circularpolaritate negativ1678 - 1683 nucleotide
dubl origine: 1/4 structur similar cu viroizii / asigur replicarea caracteristic a VHD 3/4 zona responsabil de codificarea AgHD
STRUCTURA VHD NVELIUL EXTERNreprezentat de AgHBs cu cele 3 proteine:
mare - conine receptorul de fixare
mijlocie - indipensabil pentru infectivitatea VHD
major
DIAGNOSTICUL VHDDetectarea AgHD - n ser, ficat - tehnici ELISA, imunoblot
Detectarea anti-VHD IgM, totali - tehnici ELISA
Detectarea ARN-VHD - PCR- RT-PCR- tehnici de hibridare molecular
Coinfecie (infecie concomitent VHB i VHD)boal acut cu evoluie sever risc sczut de cronicizare
Suprainfecie (infecie VHD la purttor cronic de VHB)poate evolua ca o hepatit acut de obicei se instaleaz cronicizarea infeciei VHD risc mare de boal cronic sever Hepatita D manifestri clinice
rezervor de virusom infectatpurttor asimptomaticcu hepatit manifestcai de transmitereparenteral expunere la snge contaminatinjecii, intervenii chirurgicale, transplant, transfuzii, leziuni cutaneo-mucoase etc.perinatalmama AgHBe pozitivcontact sexual Hepatita D epidemiologie
grupe de riscdependeni de drogurihemodializaihemofilicihomosexuali
receptivitatetoi indivizii receptivi la VHBtoi purttorii de VHB
Hepatita D epidemiologie
coinfecia VHB-VHD profilaxia pre/postexpunere fa de VHB suprainfecia VHB-VHD educaie sanitar a persoanelor cu infecie cronic VHBreducerea comportamentelor cu risc Hepatita D - profilaxie
dup expunerea la VHD, purttorii de AgHBs NU pot fi protejai nici prin vaccinare anti VHBimunoglobuline specifice anti-VHB Hepatita D - profilaxie
Virusul hepatitei CFamilia Flaviviridae
Genul Hepacivirus
VHCcaractere morfo-structurale form sferic diametru: 30-60 nm capsidasimetrie icosaedric genom: ARN m.c. liniar sens pozitiv nveli extern cu proiecii fine
VHC ORGANIZAREA GENOMULUI VIRALARN monocatenar, polaritate pozitiv9400 nucleotidenu conine oncogenenu se integreaz n genomul celulei gazdprezint un singur cadru translaional de citirecodeaz poliproteina precursoare proteine virale - structurale - nestructurale
hypervariableregioncapsidenvelopeproteinprotease/helicaseRNA-dependentRNA polymerasec225coreE1E2NS2NS333cNS4c-100NS53VHC ORGANIZAREA GENOMULUI VIRAL
VHCVARIABILITATE-HETEROGENITATErat mare de replicare - ncorporare eronat a nucleotidelor n cursul replicrii - rat mare a mutaiilor (1,92 x 103 substituii de nucleotide /situs / an)
nucleocapsida bine conservat - reg.5aminoterminal/reg. C
nveliul difer - reg. E1 i E2 mare variabilitateregiune hipervariabil - 30 aa
HETEROGENITATEA VHC
CA TULPIN VIRALrezultatul mutaiilor aprute n cursul replicrii
CA POPULAIE VIRALprezent n organismul /celulele infectate
VHC - TerminologieFamilieGenSpecieGenotipSubtipCvasispecie
Noiune
Definiie
% omologie nucleotidic
Genotip
Heterogenitate ntre diferitele izolate de HCV
65.7-68.9
Subtip
Izolate cu caracteristici similare n cadrul fiecrui genotip major
76.9-80.1
Cvasispecie
Populaie viral heterogen prezent concomitent n macroorganism/celul infectat
90.8-99
IMPORTANA VARIABILITII VHCESCAPE MUTANTSGenotipul influeneaz - eficacitatea tratamentului - evoluia bolii
- genotip 1b - posttransfuzional - rspuns slab la interferon - risc de ciroz / carcinom hepatocelular- genotip 2 - forme asimptomatice de boal- genotipuri 2 i 3 - consum de droguri i.v.- rspuns favorabil la interferon
VHCrezistena la ageni fizici i chimicisensibil la solveni organici, eter, cloroform,detergeni
VHC - replicareaataare-intrarereceptor specific CD81endocitozbiosinteze virale n citoplasma celuleitranslaie sintez de proteinereplicarea genomuluiasamblarela nivelul membranelor reticulului endoplasmicaparatului GolgieliberarenmugurireJean Dubuisson
VHC - cultivareculturi de celuleNU se pot realiza
animalecimpanzeu
Perioada de incubaie:medie 6-7 sptlimite 2-26 sptManifestri clinice(icter):30-40% (20-30%)Hepatit cronic:70%Infecie persistent:85-100%Imunitate:nonprotectivproducere de AtcHepatita C manifestri clinice
imunitaterspuns imun relativ slabumoralAc a cror aciune este dificil de apreciat!! escape mutants datorit marii variabiliticelularlimfocite T citotoxice
!! autoanticorpi procese autoimune
infecia HCVEvoluiehepatit acut hepatit cronic persistent cirozcarcinom hepatocelularrata infeciilor cronice 70%rspuns imun citotoxiconcogenic
Hepatita C - epidemiologiegrupe de rischemodializaihemofilicitoxicomanipersonal medico-sanitarcopii nscui din mame cu infecie HCVparteneri sexuali multipli
rezervoromul
Hepatita C - transmiterepercutan droguri administrate i.v. transfuzii, transplant de la donor infectat terapeutic echipament contaminatinstrumentar incorect sterilizatocupationalpermucosperinatalsexual
Hepatita C - profilaxiemsuri generale
profilaxie pasivfr rezultate
profilaxie activNU este vaccin
1 sptmn - ARN VHC2 sptmni - anti VHC6-8 sptmni - cresc transaminazelepersoane expuse:
Hepatita C diagnostic de laboratoranticorpi anti HCV utilizai pt dg. infeciei cu VHC. Inutili pt dg. fazei acute apar dup 4 spt. de la infecie
HCV-ARN identificat prin PCR. Util pt dg. n faza acut a infeciei. Utilizat n monitorizarea tratamentului antiviral
Ag-HCV evideniat prin metoda EIA. Util pt dg. n faza acut a infeciei. Utilizat n monitorizarea tratamentului antiviral . Mai uor de efectuat fa de metoda anterioar
Hepatita Cteste prognostice
Genotipare infecia cu genotip 1 sau 4 prognostic grav, rspuns slab la interferonmetode de genotipare DNA sequencing, PCR-hybridization serotipare util atunci cnd pacientul nu are ARN viral detectabil
ncrctura viral mare = pronostic grav. Util pt monitorizarea tratamentului cu interferon.
Hepatita C - tratamentInterferon la pacieni cu hepatit cronic activ; rspuns la cca 50% din pacieni din care 50% vor avea recderi Ribavirin asociat cu interferon crete eficiena tratamentului
screening al donatorilor de snge, organe, esuturi modificarea comportamentelor cu riscaplicarea precauiunilor universale Hepatita C - profilaxie
Virusul hepatitei E nencadratasemntor cu Caliciviridae i Togaviridaeform sferic, 32-34 nmfr nveli externgenom ARN, mc, liniar, sens pozitivcapsida simetrie icosaedric
Virusul hepatitei E rezistena la ageni fizici i chimicivirus fragil i instabilconservat n suspensii de materii fecale 10%n azot lichidprin liofilizarea materiilor fecaleinactivat princlorinareantisepsie cu iod
perioada de incubaie:medie 40 zilelimite 15-60 zilerata fatalitii:aprox. 1%-3% gravide:15%-25%severitatea bolii:crete cu vrstacronicizare:NUHepatita E manifestri clinice
epidemii asociate cu consum de ap contaminat cu fecaleepidemii masive, explozive: India, Nepal, China, Africa de Nord, Somalia, Mexicrezervor: omultransmitere: fecal-oralap contaminatalimente contaminatecontact directreceptivitate adulii tineri
Hepatita E - epidemiologie
msuri generaleigiena individual, colectiv, alimentarclorinarea apeicontrol sanitar al apei potabileprofilaxie pasivIgG polivalente nu mpiedic infeciaprofilaxie activvaccinuri n curs de experimentare Hepatita E - profilaxie
23771111152718182935111202020212121212121252525252525**777888**151515272727292929313131