Virusurile gripale

Caractere generalevirusuri pleomorfe, cu genom ARN m.c. cu polaritate negativ, segmentat, capsida cu simetrie helical, iar la exterior o anvelop cu 2 glicoproteine sub form de spiculi: hemaglutinina (H) i neuraminidaza (N);replicarea genomului are loc n nucleul celulei gazd, asamblarea nucleocapsidei fiind realizat n citoplasm, cu eliberarea virionilor prin nmugurire;

Genomul, cu dimensiuni apropiate pentru cele trei virusuri (variind ntre 12900 nt. pentru tipul C i 14600 nt, pentru tipul B), are asociat o transcriptaz; intern fa de membrana lipidic se afl, cantitativ cel mai important, proteina matricei (M matrix); ambele sunt strbtute de canale ce permit schimburi de ioni.

Genomul viral este format din 8 segmente monocatenare ARN, care codific 10 proteine virale:2 proteine glicozilate, dispuse la suprafaa particulei virale: hemaglutinina (HA) i neuraminidaza (NA) faciliteaz ataarea i eliberarea virusurilor de pe celula gazd determin modul de codificare pentru tulpinile virale A (H1N1)2 proteine non-structurale (NS1, NS2)3 proteine implicate n replicarea viral (PB1, PB2, PA)1 nucleoprotein (NP), cu rol n replicare i transcripie2 proteine membranare (M1, M2)

Caractere generaleproteinele nucleocapsidei au specificitate de gen iar glicoproteinele anvelopei au specificitate de subtip (16 subtipuri de H i 9 subtipuri de N) i tulpin;trei genuri de interes medical:Influenzavirus A, Influenzavirus B, Influenzavirus C, Sunt agenii etiologici ai infeciei gripale.

Rezistena la ageni fizico-chimiciVG sunt inactivate de cldur, radiaii UV sau gamma: infectivitatea dispare dup 20-30 min la 56C. Fiind virusuri nvelite, pot fi distruse i prin solveni organici, formol si beta propiolacton.Infectivitatea este pstrat pentru cteva zile la + 4C i pentru ani de zile la - 70C sau prin liofilizare.

Nomenclatur:exist o convenie internaional (OMS, 1980) care impune s se noteze: tipul virusului (A, B sau C);gazda (atunci cnd este alta dect omul);locul izolrii (ora, regiune, etc.);numrul tulpinii;anul izolrii;descrierea antigenic a H i N este indicat n paranteze.Ex: virus gripal A, Iai, 1, 69 (H3N2)

Influenzavirus A i B

Variaii antigenicevariaia antigenic minor rezult din mutaii punctiforme la nivelul genelor care codific cele dou glicoproteine (H i N), cu apariia unei noi tulpini capabil s determine epidemii;variaia antigenic major (numai la v. gripal A) este consecina unor reasortri genomice consecutiv coinfeciei unei celule cu dou tulpini diferite, uman i animal, noua tulpin fiind responsabil de apariia pandemiilor de grip;

Virusurile gripale A prezint o variabilitate genetic remarcabil, aceast proprietate datorndu-se mutaiilor frecvente aprute n genomul viral. Mutaiile genetice reprezint erori de transcriere ale ARN-polimerazei, care dispune de mecanisme de corectare (proof-reading) ineficiente, ceea ce permite reasortarea frecvent a materialului genetic.

Practic, polimeraza realizeaz o eroare de transcriere la aproximativ zece mii de nucleotide, ceea ce reprezint aproximativ lungimea lanului de ARN. Astfel majoritatea noilor particule virale formate sunt mutante. Acest fenomen poart numele de variaie antigenic minor, sau antigenic drift i, produce n timp, modificarea lent a suprafeei virale.

Structura genomului viral, format din 8 segmente monocatenare, permite reasortarea ntr-un nou genom atunci cnd o celul gazd este infectat cu mai mult de un tip de virus (de la specii diferite). Aceast schimbare are loc rapid. Fenomenul poart numele de variaie antigenic major, sau antigenic shift i are ca rezultat modificarea complet a antigenelor virale.Aceast reasortare se produce de obicei ntr-o gazd intermediar, cel mai frecvent reprezentat de porc i st la baza declanrii pandemiilor de grip.

Influenzavirus A i BInfecia gripalvirusul ptrunde pe cale respiratorie i determin infecia i necroza celulelor mucoasei tractusului respirator;manifestri clinice: rinoree, disfagie, disfonie, tuse uscat, febr;afectarea transportului muco-ciliar face posibil infecia secundar cu bacterii oportuniste (S. pneumoniae, H. influenzae, S. aureus), n special la vrstele extreme;

Distruciile celulare s-ar putea datora mcar parial inteveniei limfocitelor T citotoxice fa de antigenele virale exprimate la nivelul celulei gazd.La indivizii normoreactivi evoluia bolii este autolimitat. Cnd virusul capt acces la nivelul TRI, poate determina descuamarea important a epidetiliului bronhiolar sau alveolar. Pe aceast cale VG permite aderarea bacteriilor la nivelul celulelor epiteliale.

Complicaii: TRS: sinuzite bacteriene, otite medii;TRI: exacerbarea unor boli pulmonare cronice obstructive, insuficien cardiac congestiv, crup, bronite, pneumonii. Pneumonia rar este determinat per primam de VG; mai frecvent const n suprainfecii bacteriene deci, de instalarea unei pneumonii lobare acute.Aparat circulator: rar implicat. Posibile miocardite, pericardite i tromboflebite

sindromul Reye (encefalomielit asociat cu insuficiena hepatic acut) reprezint o posibil complicaie extrarespiratorie n infecia cu v. gripal B la copii care au primit aspirin;consecutiv infeciei, apare un rspuns imun umoral i celular, Ac anti-H avnd cel mai important protector.

Rspunsul imun Este de durat, fiind specific pentru fiecare subtip.Caracteristic este imunitatea de tipul pcatului antigenic originar: reinfecia cu subtipuri nrudite antigenic determin un rspuns anamnestic secundar fa de epitopii virusului iniial dar i un rspuns de tip primar fa de noua tulpin infectant. Eficiena acestui fenomen este de 4-7 ani.

Rspunsul umoralDei apar Ac fa de toate proteinele virale, singurii protectori fa de o nou reinfecie sunt Ac anti H din ser, de clas IgG dar i de la nivelul mucoaselor, de clas IgA.Efectele prezenei lor: neutralizarea infectivitii virale, agregarea virionilor i liza celulelor infectate viral, mediat de C. Ac anti-N, prezeni n ser i secreii contribuie la diminuarea severitii bolii i a cantitii de virus eliberat de la nivelul celulei infectate. Ac antiproteina M i NP nu au rol protector.

Diagnosticul etiologic al gripei

diagnostic direct (secreii nazale, faringiene)aspiratul naso-fariangian, la copil, poate fi util att pentru izolarea de virus ct i pentru diagnosticul rapid, direct, prin evidenierea de antigene n prob.metode rapide: IF, ELISA, metode moleculare (RT-PCR);izolarea virusului pe ou embrionate sau culturi de celule, urmat de caracterizarea/ identificarea Ag;diagnostic indirect: seroconversia sau dinamica ascendent/semnificativ a Ac specifici prin RFC, RIH, ELISA.

Teste imunenzimatice de tip directigen: principal asemntaore cu ELISA, este o reacie de culoare, care apare n cteva minute. Dei nu are sensibilitatea i specificitatea ELISA sau IF, poate fi utilizat ca test de tip screening de ctre medicii de familie.

Culturi de celule: cel mai frecvent MDK (culturi de rinichi de cine), incubate la 34C, iar efectul citopatic, nespecific, apare la aproximativ 4 zile.Cnd acesta lipsete se recurge la identificri, prin R de hemadsobie sau evidenierea virusului prin RH si identificarea prin RIH. La 10-14 zile se fac pasaje oarbe n cazul culturilor negative. Izolarea pe CC, urmat de IF, la 2-3 zile, grbete diagnosticul.

Inocularea pe OE (de 10-11 zile pentru virusurile A i B sau de 7-8 zile, pentru C).

Se inoclueaz ambele caviti (amniotic pentru adaptare i ulterior alantoidian), cu incubare la 33 34C. Dup 1-2 pasaje, se verific prezena virusului prin RH. Identificarea antigenelor izolate pe gazde vii se face prin RFC pentru identificarea antigenelor specifice de grup sau a celor de tip prin RIH, R de hemadsorbie, IF sau EIA.

Identificarea rapid a antigenelor direct n produsul patologic, n celulele exfoliate sau n culturi de celule: dup o scurt perioad incubare, anterior apariiei efectului citopatic se folosesc Ac monoclonali, n IF, EIA.Necesitatea unui diagnostic rapid a impus la punerea la punct a metodelor PCR, utile datorit rapiditii lor dar i pentru eficien. ME poate fi util pentru diagnosticul rapid pe probe de spltur nazal sau nazo-faringian sau, pe tamponul faringian prezervat n mediu de transport. Costul ridicat si sensibilitatea redus, comparativ cu izolarea nu au impus acest diagnostic.

Diagnosticul serologic presupune recoltarea a 2 probe de ser la 10 14 zile interval i are doar finaliti epidemiologice. RFC permite evidenierea Ac anti NP, deci ai celor specifici de tip, detectabili pe seruri perechi. RIH i RN rmn cele mai utile n practic deoarece difereniaz ntre subtipurile circulante. Specificitatea ELISA poate fi mbuntit prin alegerea adecvat a antigenelor i utilizarea unui conjugat de calitate.

Tratament etiotropinfecia cu v. gripal A beneficiaz de tratament cu amantadin, rimantadin ca si de preparate tip tamiflu (oseltamivir) sau relenza (zanamivir).Profilaxie specificvaccin inactivat care include noile tulpini epidemice circulante (v. gripal A, subtipuri H1N1 i H3N2 + v.gripal B);vaccinuri purificate;n studiu, mutante reci (care cultiv la 250C);chimioprofilaxie cu amantadin sau rimantadin n cursul unei epidemii cu v. gripal A la cei cu risc major.

EpidemiologieVariabilitatea antigenic face ca permanent un numr mare de persoane s fie receptive la boal; desigur copii sunt mai frecvent afectai. In zonele temperate, epidemiile sunt practic anuale, dureaz 4-6 sptmni i desigur sunt caracteristice sezonului rece. Variaiile antigenice minore determin izbucniri epidemice iar cele majore, pandemii. OMS a recomanadat ca n fiecare ar s existe Centre Naionale de Referin pentru supravegherea sero-epidemioligc a gripei cu scopul surprinderii noii variante antigenice ct mai precoce i, implicit, a producerii de vaccin.

Imunizarea: singura capabil s previn infecia.Scopul imunizrii: producerea de Ac neutralizani anti-H i anti-N. Protecia este strict fa de tulpinile nrudite celor din compoziia vaccinului: H3N2, H1N1 i B. Tipuri de vaccin: vaccin integral inactivat prin formol sau beta-propiolacton. Vaccinul cultivat pe embrion de gin are drept contraindicaie major alergia la proteinele din ou.

Alte tipuri: viu atenuat i corpuscular (conine numai H i N).Vaccinul cu administrare local are avantajul sintezei de IgA dar nu este acceptat de populaie.

Virusul nou

Formarea virusului gripal de origine porcin

Cel mai probabil, virusul gripal de origine porcin a rezultat prin reasortarea genomului noilor tulpini virale de origine porcin H3N2 i H1N2 din America de Nord, cu tulpina de origine porcin euroasiatic. Tulpinile H3N2 i H1N2 provin la rndul lor din reasortarea genomului viral provenit de la 3 specii: aviar/uman/porcin.

Ca rezultat, noile virusuri posed:gene PB2 i PA de origine aviar (America de Nord),gena PB1 de origine uman (provenit de la virusul gripal H3N2),genele HA, NP i NS de origine porcin (virusul porcin clasic), respectiv genele NA i M de origine porcin (provenite de la virusul porcin, aviar-like, euroasiatic).

Un alt aspect important se refer la faptul c formarea noului virus nu este un proces static i c fiecare generaie de virus gripal A (H1N1) va suferi noi alterri ale compoziiei genetice

Subtipuri circulante pentru porc: H1N1, H3N2 si H1N2

Simptomatologie - nespecificaBecause these symptoms are not specific to swine flu, a differential diagnosis of probable swine flu requires not only symptoms but also a high likelihood of swine flu due to the persons recent history. For example, during the 2009 swine flu outbreak in the United States, CDC advised physicians to consider swine influenza infection in the differential diagnosis of patients with acute febrile respiratory illness who have either been in contact with persons with confirmed swine flu, or who were in one of the five U.S. states that have reported swine flu cases or in Mexico during the 7 days preceding their illness onset. A diagnosis of confirmed swine flu requires laboratory testing of a respiratory sample (a simple nose and throat swab).

DiagnosticRt-PCR

TratamentThe CDC recommends the use of Tamiflu (oseltamivir) or Relenza (zanamivir) for the treatment and/or prevention of infection with swine influenza viruses. The virus isolates that have been tested from the US and Mexico are however resistant to amantadine and rimantadine. If a person gets sick, antiviral drugs can make the illness milder and make the patient feel better faster. They may also prevent serious flu complications. For treatment, antiviral drugs work best if started soon after getting sick (within 2 days of symptoms).

Este mai uor s previi dect s tratezi