Vaccinuri Constituite Din Toxine Detoxifiate

7/25/2019 Vaccinuri Constituite Din Toxine Detoxifiate

1/25

VACCINURI CONSTITUITE DIN

TOXINE DETOXIFIATE


2/25

VACCINURI CONSTITUITE DIN TOXINE DETOXIFIATE

Se mai numesc si anatoxine sau toxoizi

In 1888 Roux si Yersin au efectuat primelecercetari asupra toxinelor bacteriene,

evidentiind toxina difterica

1850-1895 Babes si Bering, KitasatosiRoux, efectueaza primele experimente cu

antitoxina difterica si tetanica, deschizand

calea prepararii anatoxinelor respective.


3/25

VACCINURI CONSTITUITE DIN TOXINEDETOXIFIATE

In 1923 Ramon obtine anatoxina tetanica prininactivarea toxinei tetanice, prin tratare cu formol

5 si incalzire la 40C, timp de 30 de zile.

Tasman si Ramshart 1952 introduc metodaadsorbtiei toxinei tetanice inactivate pe suport

mineral (fosfat sau hidroxid de aluminiu). Ca

urmare a absorbtiei lente a anatoxinei, acest

procedeu determina cresterea potentialuluiimunogen al acesteia.


4/25


Toate aceste date au demonstrat ca filtratele deculturi bacteriene ce contin exotoxine, tratate cu

formol si caldura, duc la obtinerea de produse

atoxice (vaccinuri) cu o inalta valoareimunizanta.

Produsele obtinute se pot folosi ca atare sauadjuvantate cu gel de hidroxid de aluminiu (cu

actiune adsorbanta) sau fosfat de aluminiu (cuactiune precipitanta), aceste substante sporindu-

le mult efectul imunizant.


5/25

Anatoxine

Pentru prepararea fiecrui vaccin se selecioneaz tulpina careproduce titrul cel mai ridicat de toxin. Originea acestei tulpininu are importan. Astfel o tulpin de Clostr id ium perfr ingensDizolat de la o bovin din Noua Zeeland este un la fel de buncandidat ca o tulpin izolat n Frana. Nu a fost observat oderiv antigenic printre toxinele de Clostridium (Popoff 1989).

Bacteriile sunt cultivate n cantitate mare n rezervoare defermentaie n condiii care permit cele mai bune randamente deproducie de toxin. Dup tratamentul cu formaldehid,microorganismele sunt centrifugate. Toxina este recuperat nsupernatant. Acesta se numete un toxoid. Vaccinulcomercializat de laboratoarele Schering-Plough, CovexinR 8este un exemplu de vaccin fabricat plecnd de la toxoid.


6/25

Anatoxine

Cantitatea de toxin produs n faza de cretere estemsurat printr-un test de activitate enzimatic(lecitinaz, hemoliz...) sau printr-un test in vivo ca testulSN (seroneutralizare). Valoarea este exprimat n dozaminimal hemolitic, n termen de doz letal (DL50

pentru oarece), sau n echivalent standard n antitoxin.

n msura n care eliminarea celulelor de Cl. perfr ingensinduce o pierdere considerabil de eficacitate vaccinal,unii fabricani au luat hotrrea de a lsaaceste celule n

preparat pentru a crea o dubl imunitate. Aceasttehnic a permis obinerea de rezultate bune n specialcu vaccinul XentoR podus de Schering-Plough.


7/25

Anatoxine

Antigenul este apoi asociat cu un adjuvant. n acest stadiu,fiecare lot de vaccin este supus la o serie de controale: chimice, de sterilitate, de inocuitate i de eficacitate.

Eficacitatea vaccinului este verificat pe animalele de laborator.

Conform unui protocol standard, se determin titrul n anticorpineutralizani indui de vaccinare. Rezultatele sunt exprimate nuniti internaionale (U.I.).

Pentru fiecare valen, vaccinurile trebuie s induc oconcentraie minim de anticorpi neutralizani, potrivitstandardelor definite ca furniznd o protecie suficient

mpotriva enterotoxiemiilor aprute n mod spontan.

Vaccinurile cu Cl. so rdeli isunt testate dup proba virulenei:animalele trebuie s fie protejate mpotriva unei injeciistandardizate de Clostr id iumtoxinogen (Popoff 1989).


8/25

Anatoxine

Multe vaccinuri anti-clostridiene sunt multivalente.Valenele se limiteaz adesea la clostridii, dar unelesunt cuplate cu antigenele altor boli ca HeptavacR,care lupt conjunctural mpotriva afeciunilorrespiratorii cu o valen anti-pasteurela (Walker

1992). Punerea la punct a vaccinurilor multivalente este

costisitoare i delicat. Ar fi mai nelept s seadapteze formulele de vaccinuri la condiiileepidemiologice. Un numr ridicat de valene ar putea

pune n pericol eficacitatea lor. Prescrierea de vaccincorespunztor permite obinerea unor rezultate maibune ca n cazul unui vaccin cu spectru larg (Popoff1989).


9/25


Anatoxinele se folosesc ca vaccinuri inbolile in care mecanismul patogenetic se

datoreste exclusiv toxinelor (ex.: tetanos,

botulism, difterie la om). In medicinaveterinara prezinta importanta anatoxina

tetanica folosita preventiv in vaccinarea

cailor, specie foarte sensibila la aceastatoxina.


10/25

Vaccinul anticrbunos concentrat

n Romnia, pentru prepararea vaccinului anticrbunosconcentrat, care este un vaccin viu atenuat se folosete otulpin de Baci l lus anthracis, acapsulogen, apatogen,sporogen i edematogen, creat de Stamatin n 1936 ( tulpina1190 R ). Celelalte ri ale lumii folosesc o variant R a uneitulpini virulente de B. anth racisnumit 34 F2, stabilizat de

Sterne n 1937, incapabil de-a sintetiza capsul, recunoscutulterior ca lipsit de plasmida pXO2responsabil de sintezacapsulei.

Suspensia de spori din tulpina vaccinal de lucru este cultivatn recipieni care conin o formul de mediu de cultur solid, acrui compoziie favorizeaz sporularea. Pentru aceasta se

utilizeaz flacoane Roux n care se repartizeaz cte 120 mlmediu/flacon.


11/25


Se sterilizeaz , se solidific n poziie orizontal, sendeprteaz n condiii sterile excesul de lichid dinflacoane, se usuc prin meninerea lor la termostatla 37 C timp de 48 de ore, ocazie cu care se

controleaz practic sterilitatea acestora. n continuare, fiecare flacon este nsmnat cu cte2 ml de suspensie de spori din tulpina vaccinal delucru, bouch au coton, apoi se incubeaz la 37 Ctimp de mai multe zile, pn cnd un control

bacterioscopic efectuat la ntmplare, arat/revldup colorarea sporilor c cel puin 90% din celulesporuleaz.


12/25


Dac procesul de sporulare este corespunztor cultura se mai lascteva zile la temperatura laboratorului pentru liza celulelor vegetativei eliberarea sporilor.

Cultura este recoltat apoi n condiii stricte de sterilitate prin 2-3splri succesive cu ap deionizat sau ap distilat steril, nflacoane Erlenmeyer individuale dup care se controleaz sterilitatea.

Acest control const n inocularea a 0,1 ml suspensie de spori dinfiecare balon Erlenmeyer n cte 100 ml de bulion nutritiv i incubareala termostat la 37 C, timp de 20 ore, urmat de un repicaj pe geloznutritiv pentru testul de mobilitate.

Un flacon Roux permite prepararea n medie a 2000 de doze vaccin. Baloanele cu culturi corespunztoare n urma controlului sterilitii se

comaseaz ntr-un singur balon steril apoi se determin numrul total

de spori vii dup o tehnic asemntoare cu determinarea numruluitotal de germeni (NTG).


13/25


Un flacon Roux permite prepararea n medie a 2000 de dozevaccin.

Baloanele cu culturi corespunztoare n urma controluluisterilitii se comaseaz ntr-un singur balon steril apoi sedetermin numrul total de spori vii dup o tehnicasemntoare cu determinarea numrului total de germeni(NTG).

Acest control const n inocularea a 0,1 ml suspensie de sporidin fiecare balon Erlenmeyer n cte 100 ml de bulion nutritiv iincubarea la termostat la 37 C, timp de 20 ore, urmat de unrepicaj pe geloz nutritiv pentru testul de mobilitate.

Un flacon Roux permite prepararea n medie a 2000 de dozevaccin.


14/25


Baloanele cu culturi corespunztoare n urmacontrolului sterilitii se comaseaz ntr-un singurbalon steril apoi se determin numrul total de sporivii dup o tehnic asemntoare cu determinarea

numrului total de germeni (NTG). Tratamentele la care se supune cultura n continuaresunt diferite n funcie de modul de condiionare avaccinului.

n cazul vaccinului condiionat n form lichid,

concentratul de spori va fi diluat ntr-un excipientsteril cu pH 7,0 alctuit din glicerin 50%, saponin1% i geloz 2% n aa fel nct s se obin oconcentraie de 60 de milioane spori/ml.


15/25


Se repartizeaz n flacoane sterile care se nchid cu dopuri decauciuc i capse de aluminiu.

Se eticheteaz, ambaleaz i pstreaz la 4 C interval n careprodusul finit se supune controalelor de calitate intern iextern.

La vaccinul anticrbunos condiionat prin liofilizare, dupdiluarea culturii vaccinale la concentraia final la suspensia despori se adaug un stabilizant steril de liofilizare.

Dup liofilizare vaccinul urmeaz aceleai etape ca produsulcondiionat n form lichid.

Dac vaccinul se dovedete corespunztor n urma controluluiextern de calitate acesta va putea fi livrat la utilizatori.


16/25


Vaccinul anticrbunos fabricat i utilizat n Romnia poatedetermina uneori apariia unor reacii postvaccinale ca uoareedeme la locul inoculrii sau scderi ale produciei de lapte labovine, ovine i caprine care revin de regul la normal dup 2-3zile.

Cnd edemele depesc 20 cm n diametru i au tendina de

extindere, se injecteaz ser anticrbunos n doz de 50 pn la300 ml subcutan i intravenos de asemenea se aplic compresereci, se administreaz clorur de calciu, tonice cardiace ipenicilin.

Unele accidente postvaccinale pot fi cauzate de acutizarea unorinfecii latente cu pasteurele, Cl.chauvei, streptococi, germeni

ai gangrenelor gazoase, stafilococi. n aceste cazuri se aplicun tratament antiinfecios adecvat.


17/25

VACCINURI ANTIADEZINE (ANTIFIMBRII)

Primul vaccin de acest tip a fost obtinut de Brinton si col.1982.

Acest tip de vaccin se prepara din celule bacterienefimbriate sau fimbrii purificate.

Prin administrarea acestor vaccinuri se urmaresteimpiedicarea adeziunii bacteriilor la suprafatamucoaselor si stimularea fagocitozei, inainte decolonizarea acestora.

Astfel de vaccinuri s-au experimentat pentru prevenireacolibacilozei la purcei si vitei cu tulpini de E. coliposesoare de fimbrii de tip F4 (K88) si F5(K99). La om s-au experimentat vaccinuri pentru imunoprofilaxiainfectiilor urinare cu E. coli posesoare de fimbrii de tip Psi S si a infectiilor cu Neisseria gonorrhoea.


18/25


Tulpinile enterotoxinogene de Escherichia coli (ETEC) pot danastere la o diaree apoasa.

Acesta poate fi la originea unei mortalitatii semnificative la purceiinou-nascuti.

Aceasta forma denumita enterotoxinogena de colibaciloza seintalneste de asemenea la purcei mai varstnici, care sunt intarcatisau nu.

Tulpinile ETEC de posed doi factori importanti de virulenta. Fimbriile le permit s se ataeze la bordura in perie a enterocitelor

din intestinul subire.

Principalii factori de adeziune ai tulpinilor ETEC care dau natere lanou-nscui la diaree sunt fimbriile F4 (K88), F5 (K99), F6 (987P) iF41.


19/25


Tulpinile ETEC F4+, poate de asemenea juca un rol nproducerea diareei la purcei la o varsta mai avansata.

In producerea diareei dup nrcare,tulpinile ETEC F4+i F18+ sunt celmai frecvent implicate.

Tulpinile ETEC produc de asemenea o serie deenterotoxine care sunt la originea diareei, unatermolabila (LT) i altele termostabile (,STa, STb i deEAST1).

Enterotoxina termolabila LT este o proteina cu masmolecular ridicat, foarte antigenica.

Enterotoxinele termostabile sunt peptide cu masmolecular mic, slab immunogene, cu excepia cazului

n care sunt combinate cu enterotoxina termolabila LT deexemplu.


20/25


Vom administra vaccinuri inactivate care contin factori deadeziune purificati sau un numr redus de serotipurideE. coli cu factori de adeziune i eventual enterotoxinaLT.

Vaccinarea scroafelor gestante se poate dovedi eficientan lupta mpotriva diareei la nou-nscui cu E. coli. O vaccinare primar cu astfel de vaccinuri se face in

general dupa urmatoarea schema: dou injecii la 3-6sptmni interval, a doua doza este administrata cu 2pana la 6 sptmni nainte de fatare.

Aceste vaccinuri au n principal ca rezultat, o cretere aconinutului de IgG n colostru.


21/25


n combinaie cu alte masuri care urmaresc reducereariscului de infecie i cresterea starii de imunitateigenerala, acestea se dovedesc n cele mai multe cazurifructuoase n tratamentul diareei neonatale.

Cu toate acestea, ele sunt mult mai puin eficientempotriva diaree la purcei mai mari i la cei nenrcati inu ofer protecie mpotriva diareei dup nrcare.

Dezavantaje: Obtinerea unui vaccin antiadezine cuspectru larg, reprezinta o problema de nedepasit in

stadiul actual, din cauza variatiei antigenice mari afimbriilor (polimorfism), si a titrului redus de anticorpi lanivelul mucoaselor.


22/25


COLIPROTEC F4 (Prevtec Microbia) - Notice via EMA - Escherichia coli O8:K87 att: 1,3 10exp8-9,0 10exp8CFU/dose lyophilisat pour vaccin po Posologie: Su (ge > 18 j): 1 dose/animal

OOI: 7 j aprs vac, OOI: 21 j aprs vac Temps d'attente: 0 j flacon 4 x 50 doses


23/25


NEOCOLIPOR (Merial) - Notice via EMA - E. Coli inact: adhsine F4 (F4ab, F4 ac, F4ad): min 2,1 U.SA adhsine F5: min 1,7 U.SA adhsine F6: min 1,4 U.SA adhsine F41: min 1,7 U.SA

adjuv: AL3+, thiomersal vaccin injectable im Posologie: Primovac: Su: 2 x 1 dose (2 ml) , 1e vac 5-7 sem avant la mise bas, 2e vac 2 sem avant la

mise bas

Revac:

1 dose 2 sem avant chaque mise bas OOI-DOI: pas d'info Temps d'attente: 0 j flacon 25 doses (50 ml)


24/25


PORCILIS PORCOLI DF (Intervet Int.) - Notice via EMA - adhsines d'E. coli: F4ab (K88ab): min 9,0 log2 titre Ac F4ac (K88ac): min 5,4 log2 titre Ac F5 (K99): min 6,8 log2 titre Ac F6 (987 P): min 7,1 log2 titre Ac anatoxine LT: min 6,8 log2 titre Ac

adjuv: actate de dl-alpha-tocophrol vaccin injectable im Posologie: Primovac: truie, cochette: 2 x 1 dose (2 ml), 6 8 sem avant la mise bas, suivi

d'une 2e vac 4 sem plus tard

Revac: 1 dose durant la 2e moiti de chaque gestation, 2-4 sem avant la mise bas OOI: pas d'info

DOI: 1ers j de vie Temps d'attente: 0 j flacon 25, 50 doses (50, 100 ml)


25/25

Vaccinuri Constituite Din Toxine Detoxifiate

Documents

Transcript of Vaccinuri Constituite Din Toxine Detoxifiate