Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

download Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

of 36

Transcript of Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    1/36

    Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, CristeleleTeichmann, Spectroscopia hemoglobinei,Determinarea

    grupelor sangvine

    Med an I

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    2/36

    Protein complex, ormeaz !"#$"% dinreziduu uscatal hematiei#unc ia de

    transport al gazelor respiratorii& pumonmolecular

    'eroprotein, (M&)!*""" daltoni , tetramer

    + subunit i egale iecare tetramer -*"""daltoni

    Hem gruare prostetic, i globina din clasa

    histonelor

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    3/36

    Hemoglobina

    .ste o protein speciic pentru celuleleeritrocitare

    . o protein a crei sintez inal estehemul la care se adaug H.M#ul ceurmeaz alt cale

    Stare nativ , cu 'e// combina ie lax Stri anormale ea ormeaz cu oxigenul un

    compus stabil 0oxidare adic producerea

    unor oxizi adevra i1

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    4/36

    (lobina H23&4 lan uri ala&+ aa, 4lan uri beta&+) aa H234&4 lan uri ala i dou lan uri delta#o micapropor ie

    H2'&4 lan uri ala, 4 lan uri gamma alt secven a aa i o izoleucin 5n plus a de H23, la na tere -"#!"% din H2 e de tip etal , propor ie care scade p6n la an la sub %

    Hemoglobine embrionare 0(o7erI, Portland, (o7er II1dup spt 4#apar probabil sacului vitelin

    Hb 'etal i embrionar au alt ainitate a de 84 dec6t hemoglobina adult

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    5/36

    Condi ii patologice hemoglobine modiicatesecven a i nr aa globinei&consecin e unc ionale

    importante privind ainitatea i transprotul gazelor,orma hematiei, rezisten a ei la hemoliz Hb anormale C,., S etc* HbS&valin 5n loc de acid glutamic 5n pozi ia ) a

    lan ului beta al globinei hematii alciorme anemie hemolitic/icter

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    6/36

    Hemul component prostetic, colorat,hemul, un nucleu poririnic cu duble

    legturi con9ugate p84:Hb84 i interac iune Hem#hem 0Porutz $-"1

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    7/36

    Inluen a 4,; DP( rezultat din untul n prezen a 4,; DP( ainitatea Hb pentru84 e sczut, oxigenarea determinexpulzarea 4,; DP( ceea ce duce la

    cre terea ainit ii pentru 84

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    8/36

    Inel heterociclic organic numit proirincompus din patru grupri pirolice legate

    5ntre ele ?u toate poririnele con in 'e dar o serie

    dintre ele sunt metalproteine i con ine

    hemul cum ar i mioglobina, citocromul,catalaza i sintetaza oxidului nitricendotelial

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    9/36

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    10/36

    Pigmentul propriu#hem +% din molecula deHb iar globina $)%

    S6ngele de om aprox @ g Hb la "" ml % de 'e din Hb&",;;+%cantitate metal va

    i aproximativ @" mg la "" ml s6nge i de

    +#@ g 5n tot s6ngele din organismul uman S6ngele con ine mic propor ie de 'e 5n

    aar de cel combinat cu Hemoglobina

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    11/36

    C84 Hb depinde depC84&carbohemoglobina

    Cre terea pC84, cre terea concentra iei

    tisulare de H/, cre terea temperaturii localei a concentra iei de 4,; DP( scad ainitatea

    Hb pentru 84 grbinu#i disocierea, adic

    deplas6nd la dreapta curba de disociere

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    12/36

    met Hb, carboxi Hb0C8Hb1, sul Hb0SHHb1

    metHb&dat oxidrii hemului cu 'e///0iereric1 ixeaz stabil 8H 5n locul legrii84methemoglobinreducataza cu coactorul

    ?3DH i datorit ac iunii protectoare a glutationului i acidului ascorbic ac cametHb s se men in 5n cantit i mici % 5n

    corp 5n condi ii normale

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    13/36

    3gen i methemoglobinizan i&enacetina, antipirina, lidocaina, bismutul subnitric,

    oxideaz ierul&nu mai poate trasportaoxigenul normal

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    14/36

    Dozarea Hb 5n s6nge

    I Metoda colorimetricA Tall Buits Hemoglobinometru Dares Metoda acid hematin Hb

    hematina acid o sol brun

    hsurat colorimetric cu adaos de HC=:"? S3H=I Metoda hematinei alcaline

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    15/36

    Dozarea hemoglobinei

    II* Metoda otoelectric colorimetric * Metoda oxihemoglobinei

    Msoar hemoglobina normal tilizeaz ",""- ? ?H+8H sau ",% ?a4C8; Se cite te cu lungimea de und de @+" nm

    4* CEanmethemoglobina

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    16/36

    Determinarea hemoglobinei

    II Metoda speciic gravita ional CuS8+ (ravita ia speciic a sulatului de cupru este de

    ,"@; 5ntr#un echivalent de hemoglobin de4,@ gm%

    III Metoda gazometric&metod indirect

    Principiu g Hb&,;+ ml 84 IF Metoda chimic&metoda indirect

    Principiu g Hb&;,+- mg 'e

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    17/36

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    18/36

    Spectroscopia hemoglobinei

    httpsA::777*Eoutube*com:7atchGv&

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    19/36

    Hb+/+84&Hb+8! =a el i pentru ceilal i compu u exist

    dierite lungimi de und

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    20/36

    Decelarea s6ngelui

    Petele de s6nge 5n medicina legal Hemoglobina poate ac iona ca o peroxidaz

    5n prezen a apei oxigenate* 3stel ea dreac ii de culoare prin oxidarea benzidineisau rezinei de guaiac

    >n prezen a ?aC= i a acidului acetic , la 5nclzire , hemoglobina trece 5n clorhidratde hematin care prin rcire cristalizeaz,

    ob in6ndu#se cristalele Teichmann

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    21/36

    Cristalele Teichmann

    Solu e de oxihemoglobin Clorur de sodiu cristale 3cid acetic glacial =am =amel 2ec 2unsen microscop

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    22/36

    >ntre o lam i lamel pic s6nge diluat :@""#:""" carese acoper cu c6teva cristale de ?aCl

    =a marginea lamelei se pune o pictur de acid aceticglacial ce va ptrunde prin capilaritate 5ntre lam i lamel

    Se 5nclze te la lacr p6n apare culoare brun#violacee Se rce te Microscop obiectiv @#- pe marginile lamelei Se vor observa orma iuni romboidale alungite cu unghiuri

    ascu ite i de culoare brun izolate sau grupate 3cestea sunt cristalele de clorhirat de hematin

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    23/36

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    24/36

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    25/36

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    26/36

    2eth Fincent

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    27/36

    2eth JFincent#aglutinogenul

    Seruri hemotestA " 0anti#3, anti#21K 3 0anti#21K 20anti#31

    =am de microscop sau tub de sticl de 4 ""mm Ser iziologic Pipete Pasteur S6nge sau suspensie 4% eritrocite 5n ser iziologic centriug

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    28/36

    2eth#Fincent#aglutinogenul

    Metoda pe lamA Se pune c6te o pictur de ser hemotest 5n ordinea 8 la

    st6nga 3 mi9loc i 2 la dreapta pe lam Se adaug o mic cantitate de s6nge pe iecare pictur de

    ser, cu a9utorul col ului unei alte lame, care se 5ntoarcepentru iecare pictur de ser hemotest* Se omogenizeazprin amestecare*

    Pictura de s6nge trebuie s ie de " ori mai mic dec6tcea de ser*

    Mi carea lamei va i una lent i rotativ Citirea se ace 5n primele 4#; minute cu ochiul liber

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    29/36

    Proba Simonin aglutininele

    Se pun eritrocite test " 3 2 8 x x 8 8 x 8 x 8 8 8 8

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    30/36

    Se pune 5n contact serul de cercetat cueritrocite test cunoscute de grup 8, 3 i 2

    Se olose te drept martor negativ eritrocite8 pentru a 5nl5tura gre elile datorateaglutinrii nespeciice sau aglutininelor

    speciice iregulare*

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    31/36

    Metoda pe lam

    Pe o lam s epun ; picturi din serul de cercetat*Pe prima pictur 0st6nga1 se pun eritrocite ", pe

    pictura din mi9loc eritrocite 3 i pe pictura dindreapta eritrocite 2* 3daosul i amestecarea serealizeaz tot cu col ul unei lame, schimb6ndu#sela iecare pictur*

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    32/36

    Determinarea

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    33/36

    Material necesar

    Fat, alcool, eter,

    Ser anti#

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    34/36

    Determinarea pe lam

    S6ngele de cercetat se recolteaz din pulpadegetului* Cu o pipet Pasteur se pune 5ntr#

    un tub de hemoliz ",@#ml s6nge* Dup coagulare, se sparge cheagul cu v6rul

    pipetei Pasteur rezult6nd eritrocitele

    necesare 5n suspensie de ser propriu Identic se procedeazpentru recoltarea

    eritrocitelor cunoscute

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    35/36

    Determinarea pe lam

    Determinarea actorului

  • 7/25/2019 Studiul Hemoglobinei, Dozarea Hemoglobinei, Cristelele Teichmann

    36/36

    Determinarea pe lam

    InterpretareA Subiectul este n pictura de control, eritrocitele