stagiu microbiologie

download stagiu microbiologie

of 93

  • date post

    13-Jul-2016
  • Category

    Documents

  • view

    17
  • download

    6

Embed Size (px)

description

stagiu microbiologie

Transcript of stagiu microbiologie

  • LOGICA LABORATORULUI DE MICROBIOLOGIE CLINIC

  • Microbiologia clinic: disciplin a medicinei de laborator, care trebuie s ofere ct mai rapid i precis informaiile necesare pentru decizia clinic la un pacient cu boal infecioas.

  • MICROBIOLOGIA CLINIC

    Disciplin a microbiologiei aplicate

    Ofer semne paraclinice importante pentru diagnosticul etiologic al bolilor infecioase

    intete terapia antimicrobian cnd este posibil i necesar

    Monitorizeaz eficient terapia antimicrobian INSTRUMENT DE LUCRU AL CLINICIANULUI

  • Pacientul ntreab:

    M vindec? Nu mor? Nu rmn nenorocit?

    Membrii familiei sunt la adpost de aceast boal?

    Ct m cost?

  • Organele decizionale ntreab: ct ne cost?

    Direct: diagnostic, terapie, spitalizare, combatere, profilaxie

    Indirect : zilele de munc pierdute

  • Microbiologul face observaii i msurtori expuse variaiilor i erorilor:

    Biologice Analitice Pre-analiticePost-analitice

  • Variaii, erori n microbiologia clinic Variaii biologiceVariaii interindividuale - legate de vrstvariaia titrului semnificativ al ASLO de la copilul mic la adolescent i adult;variaii ale microbiotei vaginale la diferite vrste;colonizarea cu bacili gram-negativi a oro-faringelui la vrstnici .a.Variaii intraindividuale legate de alterarea temporar sau definitiv a mecanismelor de eliminare microbian colonizri microbiene ale traheei la pacieni cu disfuncii ale filtrului aerodinamic sau/i ale transportului muco-ciliar etc.Variaii preanalitice fiziologicediureza terapia antimicrobianprelevarea probelor (alegerea produsului, momentul recoltei, modul de recoltare), etichetarea, conservarea i transportul lor la laborator, ntocmirea cererii de analiz.Variaii analitice materialul utilizat (medii de cultur, reactivi, instrumente, aparate)tehnica de lucru performanele individuale ale personalului implicatVariaii post-analitice ntre momentul obinerii rezultatului de laborator i nsuirea acestuia de ctre medicerori de transcriere a datelor.

  • Standardizarea i controlul de calitate n microbiologia clinicControlul variaiilor preanalitice norme pentru alegerea, recoltarea i transportul probelorstandarde de calitate a probelor acceptate pentru examinareatitudinea fa de probele neadecvate

    Controlul variaiilor analitice controlul de calitate al reactivilorcontrolul performanelor aparaturii de laborator

    Controlul variaiilor post-analitice sistem de nregistrare i comunicare a rezultatelor care reduce la minimum numrul transcrierilor i permite controlul lor n orice moment

  • Exist diferene ntre metodele de diagnostic al bolilor infecioase determinate de:

    Microorganisme patogene (clasice sau emergente)

    Microorganisme condiionat patogene/oportuniste

    Sindroame polietiologice

    Emergena i amplificarea rezistenei la antibiotice

  • Exigenele microbiologiei clinice (actuale/clasice)

    Metode performante: eficacitate vs. eficien, precizie

    Flux informaional controlat ntre clinic i laborator

    Norme i standarde

  • Performanele testelor de laborator Sn = RP/ RP + FN Sp = RN/ FP + RN PP = RP/ RP + FP PN = RN/ FN + RN Ef = RP + RN/ N Pr = RP + FN/ N

    Rezultatele testuluiPrezena boliiTotaluriPrezentAbsentPozitiv (anormal)Real pozitiv (RP)Fals pozitiv (FP)RP + FPNegativ (normal)Fals negativ (FN)Real negativ (RN)FN + RNTotaluriRP + FN(total cu boal)FP + RN(total fr boal)RP + FP + RN + RN= N (total observaii)

  • Examinri repetate i asocieri de teste Regula crede pozitivul suficient un singur rezultat pozitiv din serie ori din asocierecrete sensibilitatea investigaieiscade specificitatea

    Regula crede negativul necesar pozitivitatea tuturor testelor din serie sau din asocierescade sensibilitatea crete specificitatea

  • Controlul erorilor n microbiologia cliniccontrolm fluxul informaional clinic-laborator;alegem teste performante;standardizm i controlm calitatea activitii;utilizm criterii obiective pentru interpretarea rezultatelor;supervizm activitatea i pregtirea continu a personalului;asigurm comunicarea clar a rezultatelor;atragem clinicianul n programul controlului de calitate al investigaiei microbiologice.

  • Circuitul informaional ntre medic i laborator. Subcircuite feed-back asigur o operaie corect.

  • Hemocultura

  • DefiniiiHemocultura punerea n condiii de cultivare a unei probe de snge urmrete izolarea i identificarea rapid a bacteriilor sau fungilor antrenai de curentul circulator n anumite condiii patologice Bacteriemie pasaj tranzitoriu prin snge al bacteriilor, benign, fr expresie clinic sau doar cu o scurt ascensiune termic Septicemie ptrundere repetat sau continu cu multiplicarea bacteriilor n snge, acompaniat de sindrom infecios grav

  • Consideraii fiziopatologice Curentul circulator se debaraseaz rapid de microorganismele ptrunse ocazional n snge. n hemocultur pot crete:Bacteriile de contaminare prin defect de prelevareMicroorganisme surprinse ocazional n circulaie n condiii diverse: efracii cutaneo-mucoase (cateterizri, drenaje, extracii dentare, detartraj, chiuretajul pungilor parodontale), obstruciile cilor biliare sau urinare, supuraii profunde etc. n majoritatea cazurilor episoadele sunt trectoare, fr urmri. Dar la pacienii cu leziuni endocardice (valvulopatii, ancorarea electrozilor stimulatorului cardiac etc.) sunt condiii de risc pentru endocardite infecioase.Bacterii antrenate constant n snge nendocarditele infecioase, febrele enterice, infecii cu serotipul b (invaziv) de Haemophilus influenzae, bruceloz,frecvent n pneumoniile lobare acute, meningite. Pot evolua cu localizri metastatice septice

  • Microorganisme izolate de la pacieni cu bacteriemie (Diekema et al, 1999)EnterobacteriaceaeEscherichia coli..............................1751 cazuriKlebsiella spp..................765Enterobacter spp.............................399Serratia spp..136Proteus mirabilis122Salmonella, toate serotipurile..93Citrobacter spp.76complex Enterobacter agglomerans..44Morganella morganii..................26Alte microorganismeStaphylococcus aureus.2151Stafilococi coagulazo-negativi1256Enterococcus spp.794Streptococcus pneumoniae...475Pseudomonas aeruginosa451Streptococi beta-hemolitici307Acinetobacter spp.206Streptococi viridans154Stenotrophomonas maltophilia69Haemophilus spp.27Corynebacterium spp..20

  • Necesar Set de transfer steril Medii de cultur condiionate n flacoane cu presiune negativSisteme de prelucrare manual i citire vizualSisteme automatizateSisteme de centrifugare liz pentru detectarea micobacteriilor i altor bacterii intracelulare Bucat de muama 40/40 cm Soluii decontaminante: spun lichid, un antiseptic din seria etanol sau propanol de 70, iodofori sau clorhexidin. ! ALCOOL IODAT 2% !ETER (precauii) ndeprteaz iodullas epiderma uscat Tampoane sterile din tifon Garou

  • ProceduraMomentul prelevriiNeselectiv, cnd bacteriemia este continu n faza de frison sau ascensiune termic - descrcri bacteriene discontinuinaintea terapiei antimicrobieneSchimbul de informaii ntre clinician i microbiologNumrul probelorobligatoriu 2 hemoculturi, din vene periferice diferitemai mult de 3 probe sunt cheltuial inutilCantitateaLa adult - cca 10 ml snge La copilul mic - 1-2 ml snge PrelevareaUtilizeaz medii de hemocultur prenclzite la 37C.Lucreaz la adpost de cureni de aer.Plaseaz pacientul n decubitus dorsal cu bucata de muama sub cot, n zona de puncieDecontamineaz-i minile prin splare de tip medical i usuc-le cu hrtie de unic folosinAplic garoul pentru a repera vizual i prin palpare vena pentru puncieD drumul la garouAntiseptizeaz-i degetele cu alcool iodat 2% sau alt antiseptic din gama betadin ori clorhexidinDecontamineaz larg, concentric zona de puncie, nti prin splare cu ap i spun lichid, apoi prin badijonare cu unul din antisepticele precizate mai sus. Dup cca 1 minut, badijoneaz zona, tot concentric, cu tampon nmuiat n eter (precauii), pentru a lsa tegumentul uscat. O antiseptizare a tegumentului realizat superficial sau puncia prin tegument umed cresc riscul contaminrii hemoculturilor.Dezinfecteaz cu grij dopul de cauciuc al flacoanelor cu medii de cultur ce urmeaz a fi nsmnate.Puncioneaz venaAgit blnd flaconul pentru omogenizarea sngelui n masa mediului de cultur.Asigur, n cel mai scurt timp, transportul flacoanelor fiecrei hemoculturi la laborator, fr refrigerare.

  • Criterii de calitate a hemoculturilorPrelevarea naintea terapiei antimicrobiene sau, dac nu este posibil, naintea dozei subsecvente de antibiotic. Precizarea antibioticului utilizat. Puncionarea altei vene la fiecare hemocultur. Evitarea prelevrilor prin cateter intravascular. Expedierea imediat la laborator sau, dac nu este posibil, incubarea flacoanelor la 37C pn n momentul expedierii. Izolarea aceleiai bacterii n mai multe flacoane.

  • Specificaii fcute n cererea de analizdiagnosticul clinicora recoltriin caz de tratament antimicrobian, antibioticul i ora ultimei administrri nainte de prelevaredac prelevarea a fost fcut n cursul frisonului sau puseului febril

  • Interpretarea rezultatelorArgumente de competena microbiologului:Izolarea aceleiai bacterii (specie, antibiovar etc.) n mai multe hemoculturi din vene diferite, are semnificaie clinic.Izolarea de bacterii diferite din flacoanele hemoculturilor de la acelai pacient indic o contaminare.Hemocultura cantitativ argumenteaz mai convingtor semnificaia clinic a izolatelor condiionat sau accidental patogene i este indicat cnd decontaminarea tegumentului pentru puncie este dificil.Prezena unor structuri bacteriene implicate n patogenia bacteriemiilor de cateter: e.g., producerea de glicocalix (biofilm).Argumentarea bacteriemiei polimicrobiene se bazeaz pe izolarea a cel puin dou microorganisme din a