Seminar Studenti

download Seminar Studenti

of 55

  • date post

    25-Oct-2015
  • Category

    Documents

  • view

    27
  • download

    0

Embed Size (px)

description

Biocel

Transcript of Seminar Studenti

  • Compusi lipidici plasmatici

  • CLASIFICAREA LIPIDELOR

    1. Lipide nesaponifiabile: acizii grasi, colesterolul si compusi steroidici (hormoni steroizi, acizi biliari),

    2. Lipide saponifiabile: acilgliceroli, glicerofosfolipide, sfingolipide, esteri ai colesterolului

  • Digestia si transportul lipidelor ridica probleme semnificativedatorita caracterului lipofil al compusilor lipidici !!

  • Digestia si absorbtia lipidelor proces ce ridica o serie de probleme, compozitia medie a unui subiect clinic sanatos cuprinde:triacilgliceroli (~ 90%)colesterol libercolesterol esterificatalti steroli de origine vegetalafosfolipideacizi grasi liberi lipidele formeaza emulsii in mediul apos al tractului digestiv digestia lipidelor are loc predominant la nivelul duodenului~ 10 %

  • Digestia si absorbtia lipidelorSolutia !!! emulsionarea grasimilor alimentare, emulsionarea are drept scop fragmentarea picaturilor lipidice mari (diametrul de 500-1000 nm), emulsionarea este realizata de sucul biliar (acizi biliari, fosfolipide, lecitine), in intestinul subtire acizii biliari exista sub forma de saruri biliare !!! hidroliza lipidelor saponifiabile este realizata de enzime pancreatice:lipaza converteste TAG la 2-monoacil gliceroli (2-MAG),fosfolipaze hidrolizeaza fosfolipidele,colesterolesteraza hidrolizeaza esterii colesterolului, lipaza este asistata de co-lipaza co-lipaza se ataseaza de suprafata picaturii lipidice si favorizeaza legarea lipazei (lipza : co-lipaza = 1:1),

  • Structura simplificata si schematizata a unei micele rezultate prin emulsionarea picaturilor lipidice in intestin

  • Digestia si absorbtia lipidelorDigestia lipidelor comporta doua procese:

    1. mecanice peristaltismul gastric si intestinal contribuie la fragmentarea picaturilor lipidice mari in picaturi de dimensiuni mai mici,2. chimice sub actiunea combinata a enzimelor pancreatice are loc hidroliza lipidelor saponifiabile ceea ce determina de asemenea scaderea diametrului particulelor lipidice.

    Prin combinarea efectului celor doua tipuri de procese diametrul particulelor micelare scade pina ajunge la o valoare de 4-7 nm !!!

  • SARURILE BILIARE, LECITINELE, LIZOLECITINELEENZIMELE PANCREATICEPERISTALTISMUL INTESTINALEmulsionarea picaturilor lipidice si formarea micelelor cu diametredin ce in ce mai mici !!

  • Formarea unei micele la nivel intestinal

  • Digestia si absorbtia lipidelor micelele rezultate la finalul digestiei lipidelor, patrund in spatiile dintre microvilii situati la polul luminal enterocitar, lipidele nesaponifiabile rezultate sunt preluate de enterocite prin difuzie pasiva (datorita gradientului de concentratie), sarurile biliare ajung la nivelul ileonului unde sunt preluate de un transportor ABC, ajung la ficat si sunt re-excretate in bila circuitul hepato-entero-hepatic al acizilor biliari !!!

  • Digestia si absorbtia lipidelorEvolutia compusilor lipidici in enterocite:1. glicerolul capilare vena porta ficat,2. acizii grasi cu lant scurt (10 atomi de C)intra in constitutia chilomicronilor,chilifer limfatic duct toracic circulatie sistemica,3. 2-MAG refac TAG (calea monoglicerolului, DOAR IN ENETEROCITE)

  • DIFUZIE SIMPLAEXOCITOZAAcizi grasi cu lantscurt si mediu !

  • Analiza lipidelor plasmatice

  • Analiza lipidelor plasmaticeDoua abordari pentru analiza lipidelor plasmatice:

    1. Dozarea lipidelor totale si a diferitelor specii moleculare de lipide- se determina LIPEMIA,- se determina TAG, PL, C si AGL,- pentru dozarea speciilor individuale de lipide se folosesc:- reactii specifice,- extractie cu solventi urmata de analiza fiecarei fractii.

    2. Separarea fractiilor lipoproteice prin diferite metode - se realizeaza LIPIDOGRAMA

  • Parte experimentala:

    1. Dozarea lipidelor totale2. Dozarea triacilglicerolilor3. Dozarea colesterolului total

    Prin diferenta se afla concentratia fosfolipidelor totale !

    FRACTIUNEA LIPIDICA

    mg/dL

    Lipide totale

    600 700

    Trigliceride

    50 150

    Colesterol total

    150 220

    Colesterol liber

    40 50

    Fosfolipide totale

    160 260

    Acizi grasi liberi

    5 - 25

  • Analiza lipidelor plasmaticeCARACTER HIDROFOB/AMFIPAT AL LIPIDELORINSOLUBILE IN PLASMACUM SUNT TRANSPORTATE LIPIDELE IN ORGANISM ??ASAMBLARE SUB FORMA DE

    PARTICULE LIPOPROTEICE !!

  • Structura particulelor lipoproteice

  • Structura particulelor lipoproteiceParticulele lipoproteice:

    agregate de lipide si proteine, o particula prezinta:- o regiune centrala hidrofoba (TAG si colesterol esterificat),- o regiune periferica (fosfolipide, colesterol liber), prezinta doua tipuri de proteine in functie de localizarea lor:- apoproteine periferice- apoproteine integrale.

  • VLDL 0.940 < d < 1.006 Transportul lipidelor endogene

    LDL 1.006 < d < 1.063 Transportul lipidelor endogene

    HDL 1.063 < d < 1.210 Transportul invers al lipidelor

    CHILOMICRONI d < 0.940 Transportul lipidelor exogeneSepararea lipoproteinelor plasmatice (1)Separarea prin ultracentrifugare in gradient de densitate

  • Separarea lipoproteinelor plasmatice (1)

  • Separarea lipoproteinelor plasmatice (2)Separarea electroforetica a lipoproteinelor plasmatice(electroforeza in gel de agaroza sau acetat de celuloza, pH=8,2)

  • Proprietati fizico-chimice ale lipoproteinelor serice DENSITATE MOBILITATE DIAMETRUL (nm) MM (kDa) CHILOMICRONI< 0.940 origine 100 - 1000 106

    VLDL 0.940 - 1.006 pre- 30 - 80 7500IDL 1.006 - 1.019pre- lenta 25 - 35 4000LDL 1.019 - 1.063 15 - 25 2000

    HDL 1.063 - 1.210 9 - 14 400

  • Compozitia chimica a lipoproteinelorParticulele lipoproteice contin:

    1. diferite clase de lipide in proportii constante si bine determinate

    2. proteine specifice denumite APOLIPOPROTEINE (APOPROTEINE).

  • Compozitia chimica a lipoproteinelor CHILOMICRONI VLDL LDL HDL

    DENSITATEA < 0.940 0.940 - 1.006 1.006 - 1.0631.063 - 1.210

    LIPIDE (%) 98-99 % 90 % 75 % 50 %

    LIPIDE DOMINANTE TG TG CL, PL PL, CL

    PROTEINE (%) 1-2 % 10% 25% 50%

    APOPROTEINE B-48, C, E B-100, C, E B-100 A-I, A-II A-I, A-IV

  • ApolipoproteineCaracteristici: sunt descrise 5 clase de apoproteine ( A E), unele clase prezinta mai multi membri notati cu cifre romane (I, II etc), cifrele indica ordinea in care proteinele respective ies de pe o coloana cromatografica, roluri multiple:1. rol structural Apo AI este esafod pentru particulele HDL, Apo B48 este esafod pentru chilomicroni,2. cofactori/activatori ai unor enzime implicate in metabolismul particulelor lipoproteice Apo CII activeaza lipoprotein lipaza, Apo AI activeaza lecitin colesterol acil transferaza (LCAT)3. liganzi pentru receptori membranari Apo B100 si Apo E sunt recunoscuti de receptorul pentru LDL Apo A1 interactioneaza cu receptorul pentru HDL.

  • APOPROTEINE MAJORE SI ROLURILE ACESTORA

    APOPROTEINA LIPOPROTEINA ORIGINE FUNCTIE

    Apo A-I HDL FICAT, INTESTIN ROL STRUCTURAL ACTIVEAZA LCAT STIMULEAZA TRANSPORTORUL ABCA1

    Apo B-100 VLDL, LDL FICAT LIGAND PT RECEPTORUL LDL ROL STRUCTURAL

    Apo C-II HDL, VLDL FICAT ACTIVEAZA LPL*

    Apo E VLDL, IDL FICAT, INTESTIN LIGAND PT RECEPTORUL LDL LIGAND PT RECEPTORUL LRP**Apolipoproteine* LPL = lipoprotein lipaza,** LRP = LDL-related receptor protein

  • Metabolismul lipoproteinelorObservatii generale:

    metabolizarea particulelor lipoproteice are loc in circulatie,

    presupune actiunea unor enzime atasate de unele tipuri de particule, dar si actiunea unor enzime atasate de endoteliul vascular,

    prin metabolizare particulele schimba intre ele unele apoproteine precum si diferite clase de lipide.

  • Metabolismul lipoproteinelorEnzime implicate in metabolismul lipoproteinelor

    1. LIPOPROTEIN LIPAZA: ancorata la polul luminal al celulelor endoteliale din capilare, este exprimata la un nivel ridicat in tesutul adipos, muschi, miocard, pulmon, glanda mamara, nu este exprimata in ficat, actioneaza asupra TAG din chilomicroni si VLDL, este indusa de INSULINA, elibereaza glicerol si acizi gra