Saliva, o noua sursa neinvaziva de determinari biochimice

SALIVA CE ESTE ? CARE ESTE COMPOZITIA ACESTEIA ? CE ROLURI ARE ? CE COMPUSI PUTEM DETERMINA ? CE SEMNIFICAIE CLINIC AU ?

Sa analizam saliva oglinda organismului fluid heterogen cu proteine, electroliti, hormoni si alti

compusi transportati din sange solutie de spalare, un lubrifiant, rezervor de ioni, sistem tampon si antioxidant remarcabil prima linie defensiva in stresul oxidativ

Cavitatea orala: mediu extrem de dinamic si unic singurul loc din organism unde tesuturile mineralizate

sunt expuse mediului exterior si care implica interactiuni complexe intre suprafete diferite, tesut gazda moale si tare/alimente/aer/microorganisme scldat permanent de saliv, care ncearc s fac fa unui mediu extrem de dinamic

AVANTAJELE SALIVEI recoltare rapida, oriunde , oricand si nestresanta stabilitate mare a probelor si posibilitate pastrarii lor indelungate tehnica neinvaziva repetarea testelor se realizeaza mai usor minimalizarea contaminarii pacientilor si a personalului medical concordanta excelenta cu nivelul sanguin pentru aproape toti compusii sensibilitate comparabila cu a sangelui si specificitate mai mare in unele cazuri

ofera posibilitatea efectuarii unor studii in dinamica permite o colaborare mai stransa si permanenta cu

pacientul nu necesita un echipament special se preteaza excelent pentru screening

Interesul pentru saliva evolutia tehnicilor de determinare cu o mare

sensibilitateconcentratia componentelor salivare este de 10-100 de ori mai mica decat in sange saliva - unanim recunoscuta ca mijloc de investigare si diagnostic in mai multe domenii medicale: endocrinologie, medicina legala, toxicologie, medicina interna, medicina dentara

Saliva nu este un lichid obinuit; aceasta este lipsit

de sinceritatea transpiraiei, dramatismul sngelui i elocvena lacrimilor a devenit o alternativ neinvaziv pentru biochimia clinic

Functiile salivei protectie mpotriva infeciilor

bacteriene, virale i fungice(imunoglbuline, lizozim etc) implicat n masticaie, deglutiie, vorbire, retenie dentar, degustare

Proveniena salivei produs de trei glande majore (2 parotide, 2

submandibulare i 2 sublinguale) i de glande minore localizate n buze, mucoasa oral i limb contribuia relativ a glandelor salivare individuale la saliva total este diferit n condiii normale i de stimulare

Saliva in repaos produs n proporie de 70% de glanda

submandibular ,5% sublingual i 20% de parotid si 5% glande accesorii prezent aproape permanent n cavitatea oral

SALIVA TOTAL secretat de glandele salivare dar include i

constitueni provenii din snge, bacterii i produi ai acestora, virui, celule epiteliale descuamate, electrolii, fluid crevicular i resturi alimentare ideal pentru identificarea unor biomarkeri ai afeciunilor orale i sistemice frecvent studiat pentru evaluarea afeciunilor sistemice

Saliva totala Constituentii serici (medicamente, hormoni) ajung in saliva pe cai diferite: transport activ, difuzie pasiva si ultrafiltrare sau ca rezultat al secretiei fluidului crevicular in functie de gradul de inflamatie al gingiei, fluidul crevicular, foarte mult studiat in ultimul timp- considerat fie un transudat seric sau, mai frecvent, un exudat inflamator ce contine constituenti serici

Recoltarea salivei Cu/fara stimulare Stimulare masticatia - guma de mestecat sau

parafina - gustativa aplicare de acid citric pe limba Afecteaza concentratia unor constituenti Saliva nestimulata- afectata de gradul de hidratare,

expunerea la lumina, pozitia corpului, momentul recoltarii

COMPOZITIA SALIVEIComponentii salivei - mirror of

the bodys health"

COMPOZIIA CHIMIC mai mult de 99.5% ap- cel mai apos produs de

secreie al organismului substana uscat ( 0,5%): substane organice (2/3) i anorganice (1/3)-foarte dependent de alimentele ingerate

Compusi anorganici si organici cele mai importante componente anorganice-Ca,

fosfat bicarbonat, Na, K, Cl, I, F, cele mai importante componente organice-proteinele identificate prin electroforez cel puin 150 Saliva total - 2,2 g/L (10-500g/mL) salivar

Componentele salivare majore Histatine : 2-4 kDa Staterina : 4-6 kDa Lizozimul : 14 kDa Cistatine : 14 kDa PRP : 10-30 kDa AC : 42-65 kDa

Amilaza : 56-60 kDa Peroxidaze : 75-78 kDa Lactoferina : 75-78 kDa Mucina 2 (MG2) : 130 kDa IgAs : 280 kDa Mucina 1 (MG 1) : >1000 kDa

Albumina 1 -10% din proteinele totale salivare i concentraia ei scade cu creterea fluxului salivar rol antioxidant + uratul i ascorbatul Valori crescute la pacienii supui chimioterapiei i la care apare stomatitamarker predictiv al complicaiior Valori scazute la pacientii diabetici, probabil datorita accentuarii stresului oxidativ la nivelul cavitatii orale, in conditiile existentei unei boli parodontale

scaderea albuminei la pacientii cu parodontopatii

indica un consum accentuat al acestei proteine , in conditiile cresterii stresului oxidativ

Saliva mai conine Factori de crestere: factorul de cretere neuronal (NGF), epitelial (EGF), insulin-like (IGF)- justific activitatea paracrin i endocrin a glandelor salivare n saliva parotidian parotina -activitate hormonal-implicat n calcifiere i meninerea homeostaziei calcemice chemokine i citokine -implicate n procese acute, inflamatorii i imunoreglatoare Chemokinele i receptorii lor - cheia nelegerii infeciilor cu HIV

Citokinele salivare grup de GP cu rol imunoreglator secretate i de keratinocitele mucoasei orale

mucoasa are, pe lng alte funcii i o foarte important funcie imunitar implicate n inflamaie, aprarea antiviral i antitumoral

Compui cu greutate molecular mic saliva total 18 aminoacizi cel mai abundent Gly- probabil datorit scindrilor hidrolitice ale proteinelor prin intermediul enzimelor bacteriene GABA i fosfatidiletanolamine tetrapeptin (Gly-Gly-Lys-Arg) - implicat n metabolismul plcii dentare

Alte proteine salivare proteina care ndeprteaz mirosul -odorant

binding protein- leag acidul 3-metil-2-hexenoic, componentul major al mirosului transpiraiei aceeai protein - implicat n respiraia patologic, cu miros neplcut (ca o surs de acizi volatili)

Sialina oligopeptid stimuleaz metabolismul bacteriilor prin creterea producerii de acid lactic din glucoz creterea pH-ului prin sinteza de compui bazici responsabil - un rest de Arg (din cei 4 AA ai peptidei) denumit i factor de cretere a pH-ului rezultatul amplificrii metabolismului ndeprtarea rapid a glucidelor important sistem tampon alternant sistemului bicarbonat

DEFENSINELE denumire sugestiv Peptide cu valene antimicrobiene i citotoxice Valori crescute n saliv au fost detectate la pacienii cu

cancere orale

Istoric Surprinzator- saliva a fost utilizata in scop diagnostic in urma cu aproape 2000 de ani In medicina traditionala chineza- saliva si sangeleare brothers Au origine comuna semnificatie diagnostica hipersalivatiaarsuri gastrice saliva dulce in afectiuni ale splinei sau intoxicatii cu metale

Afectiuni sistemice (ereditare, autoimune, cancer si boli infectioase) Afecteaza direct sau indirect glandele salivare

volumul si compozitia salivei Modificarile unor markeri specifici diagnosticul si prognosticul acestor afectiuni

BOLI EREDITARE Fibroza chistica- concentratii salivare crescute de calciu, fosfati(incidenta calculilor dentari la copii), proteine si lipide(alterarea proprietatilor fizicochimice ale salivei), uree, acid uric, prostaglandine si EGF(epidermal growth factor) cu activitate biologica scazuta 17-OHP(17-hidroxi-progesterona)- excelent test screening hiperplazia congenitala a glandelor suprarenale-corelare perfecta intre nivelul salivar si cel sanguin

Afectiuni autoimune Alterare- flux salivar, pH, capacitate

tampon, profilul citokinelordiagnosticul si monitorizarea sindromului Sjgren

CANCER Datorita localizarii sale, saliva fluid biologic ideal pentru screening-ul leziunilor orale premaligne si maligne, prognosticul malignizarii Markerii tumorali identificati in saliva utili in screening-ul afectiunilor maligne oraleanticorpii p53 si defensinele Nivelul catechinelor salivare(provenite din ceai) i activitatea catechin-esterazei salivare-rol n prevenirea cancerului oral i esofagian Prognosticul cancerului de san si ovar

Saliva-mediu ideal pentru evaluarea markerior turnoverului tesutului

osos impact deosebit in implantele dentare diagnosticarea si monitorizarea osteoporozei si parodontopatiilor fosfataza alcalina, osteocalcina, osteopontina, etc.

Afectiuni virale Saliva- o alternativa utila pentru

diagnosticul hepatitelor virale(A, B, C) sensibilitate si specificitate remarcabile

Monitorizarea medicamentelor Avantajele salivei - corelare perfecta intre nivelul salivar si cel sanguinindex al nivelului sanguin(etanol) - apar rapid in salivadetectare rapida - monitorizare rapida a nivelului unor medicamente sau depistarea consumului acestora - monitorizarea expunerii la tutun (tiocianat , cotinina, enzime) sau toxine, consumul de droguri

Toxine Saliva - mediu optim de monitorizare a unor substane chimice toxice pentru organismul uman (pesticide, tetraclorur de carbon, nitraI, etc.) reprezantnd n acelai timp i o modalitate de evaluare a concentraiei tisulare a acestor compui

Modificri ale unor componente salivare, glucagon, cortisol, adrenalin, noradrenalin, dopamin, peroxizi lipidici, antioxidani, sunt relevante n stres, aa cum au evideniat determinrile efectuate pe

Substante sau compusi care sunt corelati cu nivelul de stres

personalul medical de pe ambulane, pacienii care se prezint la cabinetele stomatologice, etc. Remarcabil este i corelarea perfect ntre parametrii salivari i cei sanguini n stresul oxidativ

Concordan excelent ntre concentraia sanguin i cea

HORMONI

salivar Reflecta concentratia hormonilor liberi Saliva- curent folosita pentru determinarea de cortisol, dehidroepiandrosterona, testosteron, estradiol, estriol si progesterona monitorizare a pubertii precoce sau ntrziate, a hiperplaziei corticosuprarenalei, bolii Addison, amenoreei,, dezvoltarea ftului n ultima perioad a sarcinii progesterona i estradiolul n saliv s-a impus ca o metod neinvaziv de investigare a funciei ovariene

Hormoni Cortisolul( C ), testosteronul( T ) i raportul T/C n saliv

variaz semnificativ n timpul competiiilor sportive i in perioada de recuperare Cortisolul salivar crete semnificativ n cursul competiiilor sportive nivelul salivar al testosteronei fiind neafectat La sfritul competiiei, cortisolul scade rapid, n aproximativ 1,5 ore, la valoarea bazal iar testosterona crete rapid, rezultnd un raport T/C foarte mare. In perioada de recuparare fizic, raportul se menine crescut , >30% fa de condiiile bazale, timp de 5 zile

Cortisolul salivar Raportul T/C sczut din timpul competiiei corespunde fazei catabolice Perioada de refacere post-competiional se caracterizeaz printr-o senzaie de oboseal, incapacitate de antrenare intensiv, recunoscut i de antrenori i, paradoxal, printr-un raport T/C mare, corespunztor aa-numitei faze anabolice cortisolului salivar faciliteaz diferenierea pacienilor cu obezitate de cei cu sindrom Cushing i poate fi un parametru util de screening pentru pacienii cu sindrom Cushing

Determinari de Ig sportivii de performan(atleti, jucatori de tenis,) stresul fizic din perioada antrenamentelor i a competiiilor induce o supresie a sistemului imunitar oral diminuare semnificativ a IgA salivar La aceleai concluzii -studiu efectuat cu cadre didactice, n timpul anului universitar i studeni, dup o sesiune de examene Persoanele cu bun dispoziie, cu mult umor, se caracterizeaz printr-o concentraie crescut de IgA salivar i deci predispoziie mai mic la afeciuni respiratorii sau oro-dentare

Extrem de utila in screening-ul infectiilor virale(virusul herpesului la om, citomegalovirus, Epstein-Barr) IgA cel mai bun marker al infectiei cu rotavirus(RV) IgAs - rol major n mecanismul de aprare local relaie invers ntre IgAs i susceptibilitatea la carii subiecii cu concentraii salivare mici de IgA i IgM -inciden mare a cariilor dentare

Alte aplicatii ale determinarilor salivare Gangliozidele din glandele salivare au probabil un rol n complicaiile din diabet. Studiile relev c polimorfismul dezoxiribonucleazei I n saliv este deosebit de util n medicina legal Factorul de activare plachetar(PAF) detectat n saliva persoanelor sntoase i nivelul su este crescut n parodontopatii Sursa celular de PAF salivar este controversat dei numeroase date sugereaz originea sa n relaie cu prezena inflamaiei

Recent diagnosticarea unor afeciuni dureroase cronice(artrita reumatoid, osteoartrita, migrenele, etc.) prin estimarea concentraiei salivare de serotonin, substan P(SP), factorul de cretere neuronal(NGF) Concentraiile salivare ale acestor parametrii sunt semnificativ crescute la pacienii cu astfel de afeciuni, comparativ cu persoanele sntoase. Concentraiile salivare ale SP i CGRP sunt de aproape 3 ori mai mari dect n plasm

Perspective elaborarea unor biomolecule n care domeniile structurale s corespund unor necesiti individuale saliv artificial care s includ oligozaharide ale PRG - facilita lubrifierea n masticaie diminund astfel abraziunile asociate xerostomiei un domeniu adeziv de la mucin sau fibronectin, prin cuplare cu un domeniu de la lactoferin sau peroxidaz tratamentul afeciunilor orale asociate plcii dentare